حصہ 1 الزائمر کی بیماری کے ان ویٹرو ماڈل میں فینیلیتھانوئیڈ گلیکوسائڈز کے نیورو پروٹیکٹو اثرات

کیا سیستانچے کا نیورو پروٹیکٹو اثر حقیقی ہے؟

جیانہوا یانگ1*، بووی جے یو 1,2*، یاو یان1، ہوان ہوان شو1،

شنشان وو1، ڈنڈن زو1، ڈنڈن سی اے او 1، اور جمپنگ ایچ یو 2

1 شعبہ فارمیسی، پہلا ملحقہ اسپتال؛ 2 قدرتی ادویات کا شعبہ،

کالج آف فارمیسی، سنکیانگ میڈیکل یونیورسٹی، ارومچی، سنکیانگ 830011، پی آر چین

موصولہ جنوری 8, 2016؛ قبول شدہ جنوری 6, 2017

اخذ کرنا.

موجودہ مطالعے کا مقصد نیورو پروٹیکٹو اثرات کی تحقیقات کرنا ہےفینیلیتھانوئیڈ گلیکوسائڈز(پی ایچ جی) ایچ 2 او 2 پر اور β ایمیلوئیڈ پیپٹائیڈ (Aβ)1-42 الزائمر کی بیماری (اے ڈی) کے ان ویٹرو ماڈل کے طور پر پی سی 12 خلیوں کی متاثرہ چوٹ. مختلف انکیوبیشن اوقات اور ارتکاز کی اسکریننگ کے ذریعے بہترین انڈکشن حالات قائم کیے گئے تھے۔ پی سی 12 خلیوں کا علاج 24 گھنٹہ کے لئے پی ایچ جی کی موجودگی میں 0.5 μM Aβ1-42 اور ایچ 2 او 2 کے ساتھ کیا گیا اور اس کے بعد ایک ایم ٹی ٹی پرکھ کے ذریعہ سیل کی قابلیت کا جائزہ لیا گیا؛ لیکٹیٹ ڈی ہائیڈروجناس (ایل ڈی ایچ) کی رہائی اور مالوندیالڈیہائیڈ (ایم ڈی اے) مواد کی پیمائش بھی کی گئی۔ اے ڈی ماڈل کے قیام کے لئے بہترین شرائط پی سی 12 خلیوں کا علاج تھا جس میں 0.5 μM Aβ1-42 48 ایچ کے لئے تھا، یا 25 μM ایچ 2 او 2 کے ساتھ پی بی ایس کے ساتھ ڈی ایم ای ایم میں تحلیل کیا گیا تھا۔ 5، 25 اور 50 μg/ملی لیٹر کے ارتکاز پر پی ایچ جی نے قابل عمل ہونے میں اضافہ کیا اور Aβ1-42 یا ایچ 2 او 2 سے زخمی ہونے والے پی سی 12 خلیوں کی جانب سے ایل ڈی ایچ اور ایم ڈی اے کی رہائی میں کمی کی۔ آخر میں، Aβ1-42- اور ایچ 2 او 2 سے متاثرہ پی سی 12 سیل انجری کا ماڈل کامیابی سے قائم کیا گیا۔ پی ایچ جی ز کو Aβ1-42 یا ایچ 2 او 2 سے متاثرہ سیل انجری کے خلاف ایک اہم نیورو پروٹیکٹو اثر دکھایا گیا۔

مزید معلومات کے لیے براہ کرم رابطہ کریں:joanna.jia@wecistanche.com

سیستانچے ڈیزیٹریکولا کے بہت سے اثرات ہیں، مزید جاننے کے لیے یہاں کلک کریں

تعارف

الزائمر کی بیماری (اے ڈی) جو ترقی پسند یادداشت کی کمی اور ادراک فنکشن کی کمزوری (1) کی طبی خصوصیات کے ساتھ ایک نیوروڈیجنریٹیو ڈس آرڈر ہے، دنیا بھر میں ڈیمینشیا کی سب سے عام وجہ ہے (2)۔ مالی اخراجات اے ڈی (3) کے پھیلاؤ کی وجہ سے بے پناہ ہیں۔ لہذا، اے ڈی کے انتظام اور روک تھام کے لئے مناسب ذرائع تیار کرنا فوری ہے۔

اے ڈی کے پیتھوجینسیس کا قریبی تعلق متاثرہ دماغی علاقوں (4,5) میں نیوروفیبریلیری ٹینگلز اور سینائل پلاک (ایس پیز) کے جمع ہونے سے ہے۔ ایس پیز کے اہم جزو β ایمیلوئیڈ پیپٹائیڈ (Aβ) کے بارے میں بتایا گیا ہے کہ اس کا اے ڈی کی پیش رفت میں ایک علت کا کردار ہے کیونکہ نیورونل خلیوں پر زہریلا اثر پڑتا ہے (6)۔ Aβ ٹکڑے بشمول Aβ1-40، Aβ25-35 اور Aβ1-42، ایمیلوئیڈ پیش رو پروٹین (7) کی تقسیم کے ذریعے پیدا ہوئے ہیں۔ Aβ1-42 کی نیوروٹوکسٹی Aβ25-35 اور Aβ1-40 کے مقابلے میں نمایاں طور پر زیادہ پائی گئی اور Aβ1-42 ایک اے ڈی ماڈل (1,8-10) کو متاثر کرنے کے قابل ہے۔ آکسیڈیٹیو تناؤ اے ڈی کے پیتھوجینیسس میں شامل ہوسکتا ہے اور یہ Aβ سے متاثرہ نیوروٹوکسٹی (11-13) کا بنیادی بڑا طریقہ کار ہے۔ متعدد مطالعات سے پتہ چلا ہے کہ Aβ1-42 کی وجہ سے رد عمل آکسیجن کی اقسام (آر او ایس) کے انٹرا سیلولر جمع ہو جاتے ہیں، جس کی وجہ سے لپیڈ اور پروٹین تکسیدی، ڈی این اے نقصان، اور سیل سائیکل چیک پوائنٹ سگنلنگ (1,14,15) کی فعالیت ہوتی ہے۔ ایچ 2 او 2 کی ضرورت سے زیادہ مقدار تکسیدی نقصان کا باعث بن سکتی ہے اور پی سی 12 خلیوں (16) کی اپوپٹوسس کو متاثر کر سکتی ہے۔ لہذا، تکسیدی دباؤ کو نشانہ بنانا اے ڈی میں Aβ سے متاثرہ نیوروٹوکسکٹی کو روکنے کے لئے علاج کی حکمت عملی کی ترقی کے لئے ایک امید افزا نقطہ نظر ہوسکتا ہے۔ ہربا (ایچ)سیستانچےایک چینی جڑی بوٹیوں کی دوا جو عام طور پر مین لینڈ چین میں گردوں کی پرورش اور جوہر اور خون کی بھرپائی کے لئے استعمال کی جاتی ہے، یادداشت کی کمی اور بوسیدہ قبض کے علاج کے لئے استعمال کی گئی ہے (17)۔فینیلیتھانوئیڈ گلیکوسائڈ(پی ایچ جی)، ایچ کے اہم حلقوں میں سے ایک ہے۔سیستانچے، اپنے اینٹی آکسیڈینٹ اثرات (18,19) کے ذریعے Aβ25-35 کی وجہ سے نیورونل اپوپٹوسس کی کمزوری کو بہتر بناتا ہے۔ ایک سابقہ مطالعے میں کل پی ایچ جی سے پانچ بڑے اجزاء کی نشاندہی کی گئی تھی، یعنیایکٹیوسائیڈ, 2'-ایسیٹائلیکیٹیوسائیڈ، اچینکوسائیڈ، سیستانوسائیڈز، اوراسوکیٹیوسائیڈ(20).ان اجزاء میں سے،ایکٹیوسائیڈاوراچینکوسائیڈبتایا گیا ہے کہ Aβ25-35 یا ایچ 2 او 2 سے متاثرہ نیوروٹوکسکٹی (21-23) پر نیورو پروٹیکٹو اثرات مرتب ہوتے ہیں۔ مثال کے طور پر، وو ایٹ ال (24) نے تجویز کیا کہایکٹیوسائیڈاوراچینکوسائیڈAβ1-42 کی وجہ سے ادراک کی خرابی کو بہتر بنایا گیا ہے۔ موجودہ مطالعے کا مقصد اے ڈی کے ان ویٹرو چوہے سیل ماڈل میں پی ایچ جی کے حفاظتی اثرات کی تحقیقات کرنا تھا۔

مواد اور طریقے

تیاریکاپی ایچ جی. کل پی ایچ جی ز سے نکالے گئےH.سیستانچےجیسا کہ پہلے بیان کیا گیا ہے (25). ہوا میں خشک تناH.سیستانچے پاؤڈر کیا گیا تھا اور 80٪ ایٹوایچ کے ساتھ پرکولیشن کے ذریعے نکالا گیا تھا. پرکولیٹ کو کم کر دیا گیا تھا

دباؤ، اس کے بعد ایچ کی مناسب رقم میں دوبارہ معطلی₂O₂(100 μmol/ل) . یہ مرکب ایس پی-825 میکروہورسیلر رال کالم (مٹسوبیشی کیمیکل، ٹوکیو، جاپان) پر الگ تھلگ تھا اور پانی میں 0، 30، 50، 70 اور 90 فیصد ایٹی او ایچ کے ساتھ تھا۔ پی ایچ جی سے بھرپور کسر حاصل کرنے کے لئے 30-50 فیصد ایٹی او ایچ ایلونٹس کو کم دباؤ میں مرکوز اور خشک کیا گیا۔ کل پی ایچ جی ز کا تعین کرنے کے لئے الٹراوائلٹ (یو وی) اسپیکٹروفوٹومیٹری کی گئی۔ مواد کااچینکوسائیڈاورایکٹیوسائیڈکا تعین گزشتہ پروٹوکول (26) کے مطابق ہائی پریشر مائع کروماٹوگرافی سے کیا گیا تھا۔ ایک ہائپرسل او ڈی ایس-2 کالم (4.6ایکس 250 ملی میٹر، 5 μm؛ ڈالیان ایلیٹ اینالیٹکل انسٹرومنٹس، کمپنی، لمیٹڈ، ڈالیان، چین) کو کمرے کے درجہ حرارت پر استعمال کیا گیا اور برقرار رکھا گیا۔ موبائل مراحل میتھائل سائنائیڈ اور پانی تھے جن میں 0.4 فیصد فاسفورسک ایسڈ (وی/وی) تھا۔ سگما الڈرچ؛ مرک کے جی اے اے، ڈارم سٹڈٹ، جرمنی). بہاؤ کی شرح 0.75 ملی لیٹر/منٹ تھی اور طول موج 333 این ایم مقرر کی گئی تھی۔

سیل ثقافتاورمنشیات کا علاج.پی سی 12 چوہے فیوچروموسائٹوما سیل لائن ڈاکٹر ہی چونہوئی، میڈیکل اسکول، سنکیانگ میڈیکل یونیورسٹی (ارومچی، چین) نے فراہم کی تھی۔ خلیوں کو ہائی گلوکوز ڈلبیکو کے ترمیم شدہ ایگل ز میڈیم (ڈی ایم ای ایم؛ تھرمو فشر سائنٹفک، انک، والتھم، ایم اے، امریکہ) جس میں 10 فیصد فیٹل بووائن سیرم (سانگون بایوٹیک کمپنی لمیٹڈ، شنگھائی، چین)، 100 یو/ایم ایل پینسلین، اور 100 یو/ایم ایل اسٹریپٹومائیسن 37°سی پر ایک انکیوبیٹر میں شامل ہیں جس میں 5 فیصد سی او₂اور 95٪ ہوا. 80 فیصد سنگم تک پہنچنے پر خلیوں کا علاج 0.25 فیصد ٹرپسن سے کیا گیا اور ان کو پاس کیا گیا۔

پی سی 12 خلیوں کی نشوونما پر خود دوا کی مداخلت کو ختم کرنے کے لئے زہریلے پن کا تجربہ کیا گیا۔ مختصر اختصار میں، پی سی 12 خلیات (3ایکس 10⁴خلیات/ملی لیٹر) کو 96 کنویں والی پلیٹوں میں 100 μl/کنویں پر بیج دیا گیا تھا اور راتوں رات 37° سی پر انکیوبیٹ کیا گیا تھا۔ سپرناٹنٹ کو مسترد کرنے کے بعد خالی گروپ میں 200 μl مکمل ڈی ایم ای ایم شامل کیا گیا جبکہ مداخلت گروپوں میں خلیوں کا علاج پی ایچ جیز نے مختلف خوراکوں (5، 25، 50، 75، 100، 125، 150، 175 اور 200 μg/ملی لیٹر) پر کیا۔ 48 گھنٹہ کے لئے 37° سی پر خلیوں کی انکیوبیشن کے بعد، 20 μl ایم ٹی ٹی حل (سگما الڈرچ؛ مرک کے جی اے اے) کو ہر کنویں میں شامل کیا گیا تھا۔ 4 گھنٹہ کے لئے انکیوبیشن کے بعد، سپرناٹنٹ کو مسترد کر دیا گیا اور فی کنویں 150 μl ڈائی میتھائلسلفآکسائڈ شامل کیا گیا، جس کے بعد 10 منٹ تک احتجاج کیا گیا۔ 490 این ایم پر آپٹیکل کثافت (او ڈی) کی قدروں کا پتہ ایلیسا پلیٹ ریڈر کا استعمال کرتے ہوئے لگایا گیا۔

ایکβ1‑42مبہمپی سی 12خلیات کی چوٹ.بائیوس بایوٹیک (بیجنگ، چین) سے خریدے گئے Aβ1-42 پیپٹائڈ کو پانی میں تحلیل کر دیا گیا (100 μg/ملی لیٹر)۔ اس کے بعد، مرکب کو 4 دن کے لئے 37° سی پر انکوبیٹ کیا گیا اور استعمال سے پہلے 4° سی پر ذخیرہ کیا گیا۔

پی سی 12 خلیات کو 96 کنویں کی پلیٹوں (3ایکس ایل 0) میں بیج دیا گیا تھا⁴100 μl فی کنویں میں خلیات). 24 ایچ کی پاسداری کے لئے ثقافت کے بعد، مختلف حتمی ارتکاز (0, 0.25, 0.5, 1, 1.5 یا 2 μM) پر 50 μl Aβ1-42 سیرم فری ڈی ایم ای ایم میں تحلیل کیا گیا، اس کے بعد 24, 48, 72 یا 96 گھنٹہ کے لئے انکیوبیشن کا اضافہ کیا گیا۔ سیل کی قابلیت کا جائزہ ایم ٹی ٹی کے ایک پرکھ نے لیا تھا۔ بہترین Aβ1-42 ارتکاز 0.5 μM پی سی 12 خلیات (3ایکس ایل 0) ہونے کا عزم تھا⁴خلیات فی کنویں) کا علاج پی ایچ جی کی مختلف خوراکوں (0, 0.5, 5, 25, یا 50 μg/ملی لیٹر) کے ساتھ 24 گھنٹہ کے لئے 0.5 μM Aβ1-42 کی موجودگی میں کیا گیا تھا۔ سیل کی قابلیت کا جائزہ ایم ٹی ٹی کے ایک پرکھ نے لیا تھا۔

H₂O₂مبہمپی سی 12خلیات کی چوٹ. پی سی 12 خلیات کو 96 کنویں کی پلیٹوں (3ایکس ایل 0) میں بیج دیا گیا تھا⁴100 μl فی کنویں میں خلیات). تشکیل کے بعد

24 گھنٹہ کے لئے پاسداری کے لئے، 100 μl ایچ₂O₂مختلف حتمی ارتکاز (0, 25, 50, 100, 200, 300, 400 اور 500 μM) پر پی بی ایس کے ساتھ یا اس کے بغیر ڈی ایم ای ایم میں تحلیل (0.01 مول/ایل) شامل کیا گیا تھا، اس کے بعد 24 گھنٹہ کے لئے انکیوبیشن. سیل کی قابلیت کا جائزہ ایم ٹی ٹی کے ایک پرکھ نے لیا تھا۔ بہترین ایچ₂O₂ارتکاز اور سالوینٹ قائم کرنے کے لئے پرعزم تھےان ویٹروماڈل آف اے ڈی.

پی سی 12 سیل (3ایکس ایل 0⁴خلیات فی کنویں) کا علاج پی ایچ جی (0، 0.5، 5، 25 اور 50 μM) کی مختلف خوراکوں سے کیا گیا۔ 24 ایچ کی پاسداری کے لئے کلرنگ کے بعد، پی سی 12 سیلوں کا علاج 100 μl ایچ کے ساتھ کیا گیا₂O₂24 گھنٹہ کے لئے پی ایچ جی کی موجودگی میں پی بی ایس کے ساتھ ڈی ایم ای ایم میں تحلیل. سیل کی قابلیت کا جائزہ ایم ٹی ٹی کے ایک پرکھ نے لیا تھا۔

لاکٹٹڈی ہائیڈروجنز (ایل ڈی ایچ)رہائی پرکھ. سیل کی چوٹ کا اندازہ مینوفیکچرر کے پروٹوکول (بلی نمبر 20150604) کے مطابق ایل ڈی ایچ کٹ کا استعمال کرتے ہوئے پی سی 12 سیلز کے سپرناٹنٹ میں ایل ڈی ایچ سرگرمی کی پیمائش کے ذریعے کیا گیا تھا؛ نانجنگ جیانچینگ بائیو انجینئرنگ انسٹی ٹیوٹ، نانجنگ، چین) . مختصر اختصار میں، ڈبل ڈسٹلڈ ایچ₂او، 0.2 μmol/ملی لیٹر پائروویک ایسڈ، میٹرکس بفر، اور کواینزائم آئی بفر کو منشیات کے علاج کے بعد 48 گھنٹہ کی رفتار سے ترتیب میں شامل کیا گیا تھا۔ 37 ° سی پر 15 منٹ میں انکیوبیشن کے بعد 2,4-ڈینائٹرو-فینائلہیڈرازین شامل کیا گیا۔ اس کے بعد ہر کنویں میں 0.4 ایم این اے او ایچ حل کی 250 μl شامل کی گئیں۔ سپرناٹنٹ کو کمرے کے درجہ حرارت پر ٣٠ منٹ تک انکیوبیشن کے بعد جمع کیا گیا تھا۔ اس کے بعد ٤٥٠ این ایم پر جذب کرنے کی پیمائش مائیکرو پلیٹ ریڈر سے کی گئی۔

پیمائشکامالونڈیاڈیالڈیہائیڈ(ایم ڈی اے) . ایم ڈی اے کی پیمائش پی سی 12 سیلز کے سپرناٹنٹ میں کمرشل کٹ (بلی نمبر 20150604) کا استعمال کرتے ہوئے کی گئی تھی۔ نانجنگ جیانچینگ بائیو انجینئرنگ انسٹی ٹیوٹ) مینوفیکچرر کے پروٹوکول کے مطابق مختصر اختصار کے ساتھ پانی کی کمی والی الکحل اور دیگر ری ایجنٹس کو ترتیب میں شامل کیا گیا جس کے بعد پانی کے غسل میں 40 منٹ کے عوض 95°سی پر انکیوبیشن کیا گیا۔ یہ مرکب 1,006 ایکس پر سنٹرفیوز کیا گیا تھاgاور ٹھنڈا ہونے کے بعد 10 منٹ کے لئے 25° سی. اس کے بعد ایم ڈی اے مواد کا تعین کرنے کے لئے سپرناٹنٹ کا استعمال کیا گیا۔ اس کے بعد جذب کرنے کی پیمائش ٥٣٢ این ایم پر مائیکرو پلیٹ ریڈر کے ساتھ کی گئی۔

تشخیص کا حفاظتی اثرات کا اچینکوسائیڈ اور خلاف عمل اشتہار اندر ویٹرو. پی سی 12 خلیات کو 3ایکس ایل 0 کی کثافت پر بیج دیا گیا⁴96 اچھی پلیٹوں میں خلیات / اچھی طرح سے (100 μl / اچھی طرح). خلیوں کو منشیات کے ساتھ انکوبیٹ کیا گیا تھا جن میں ایچینکوسائڈ (بلی نمبر 111670-200503) شامل ہیں؛ نیشنل انسٹی ٹیوٹ فار فوڈ اینڈ ڈرگ کنٹرول، بیجنگ، چین) اور ایکٹیوسائڈ (بلی نمبر 111530-200505؛ نیشنل انسٹی ٹیوٹ فار فوڈ اینڈ ڈرگ کنٹرول) مختلف ارتکاز (0.5، 25 اور 50 μg/ملی لیٹر) پر۔ اس کے بعد خلیوں کا علاج Aβ1-42 یا ایچ سے کیا گیا۔₂O₂24 گھنٹہ کے لئے اور خلیہ کی قابلیت کی پیمائش ایک ایم ٹی ٹی پرکھ کے ذریعہ کی گئی تھی۔

شماریاتی تحلیل. اقدار کو معیاری انحراف ± مطلب کے طور پر ظاہر کیا جاتا ہے۔ طالب علم کا ٹی ٹیسٹ بین الگروپ موازنے کے لیے استعمال کیا گیا تھا۔ شماریاتی تجزیے ایس پی ایس ایس 18.0 (ایس پی ایس ایس، انک، شکاگو، آئی ایل، امریکہ) کا استعمال کرتے ہوئے کیے گئے۔ P<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistically="" significant="">

نتائج

ایچ سیسٹانٹس سے پی ایچ جی کی مقدار سازی۔پی ایچ جی کے یو وی سپیکٹرا کے ساتھ ساتھ معیاری حل بھی نکالے گئےاچینکوسائیڈاور ایکٹیوسائڈ ریکارڈ کیا گیا، اور نتائج سے پتہ چلا کہ یو وی سپیکٹرا مستقل تھا (انجیر 1)۔ یو وی طیف تصویری

ظاہر کیا کہ پی ایچ جی مواد 87.6 فیصد تھا۔ ایچ پی ایل سی کے نتائج سے پتہ چلا کہ ایچینکوسائڈ اور ایکٹیوسائیڈ کے مندرجات تھے

37.7 اور 17.8 فیصد، بالترتیب (انجیر 2).

عزمکامثالیپی ایچ جیحراستی. خالی گروپ کے مقابلے میں 75، 100، 125، 150، 175 اور 200 μg پر پی ایچ جی کا پی سی 12 خلیوں (پی) پر نمایاں انہیبیٹری اثر پڑا<0.05), while="" phg="" at="" 5,="" 25="" and="" 50="" µg/ml="" showed="" low="" toxicity="" on="" pc12="" cells,="" and="" the="" cell="" viability="" was="">80 فیصد (انجیر 3) . اس طرح 5، 25 اور 50 μg/ملی لیٹر کے ارتکاز پر پی ایچ جی ز کو بعد کے تجربات میں پی سی 12 خلیوں کے علاج کے لئے استعمال کیا گیا جس کی وجہ سیل کی قابلیت کو متاثر نہ کرنا تھا۔

ایکβ1‑42مبہمپی سی 12خلیات کی چوٹ.کنٹرول گروپ میں اس کے مقابلے میں 0.5 μM Aβ1-42 انجری گروپ میں سیل کی قابلیت 63 فیصد (پی) تھی۔<0.05). the="" cell="" viability="" was="" decreased="" by="" aβ1-42="" in="" a="" concentration-dependent="" manner,="" and="" the="" viability="" was=""><50% in="" the="" 1,="" 1.5,="" and="" 2="" µm="" aβ1-42="" injury="" groups="" (fig.="" 4).="" thus,="" treatment="" with="" 0.5="" µm="" aβ1-42="" for="" 48="" h="" was="" determined="" to="" be="" the="" optimal="" condition="" for="" establishing="" the="">ان ویٹرواے ڈی ماڈل.

پی ایچ جی (5، 25 اور 50 μg/ملی لیٹر) کی محفوظ خوراک کی موجودگی میں 0.5 μM Aβ1-42 کے ساتھ علاج کیے گئے پی سی 12 خلیوں کی سرگرمی کا بھی تعین کیا گیا۔ ماڈل گروپ کے مقابلے میں (پی<0.01), phgs="" showed="" a="" significant="" neuroprotective="" effect="" on="" pc12="" cells.="" the="" cell="" viability="" was="" rescued="" by="" phgs="" in="" a="" dose-dependent="" manner="" (fig.="">

H₂O₂مبہمپی سی 12خلیات کی چوٹ. 25 μM ایچ کے ساتھ علاج پی سی 12 خلیوں کی قابلیت₂O₂پی بی ایس کے ساتھ ڈی ایم ای ایم میں تحلیل 56.43 فیصد رہا۔ 200 μM ایچ کے ساتھ علاج پی سی 12 خلیوں کی قابلیت₂O₂پی بی ایس کے بغیر ڈی ایم ای ایم میں تحلیل 71.64 فیصد (ٹیبل 1) تھا۔ اس طرح پی سی 12 سیلوں کا علاج 25 μM ایچ سے کیا گیا₂O₂پی بی ایس کے ساتھ ڈی ایم ای ایم میں تحلیل شدہ کو اے ڈی ماڈل کے قیام کے لئے بہترین حالت کے طور پر منتخب کیا گیا تھا۔

کنٹرول گروپ کے مقابلے میں ماڈل گروپ میں سیل کی قابلیت 48.8 فیصد (پی) تھی۔<0.05). compared="" with="" the="" model="" group,="" phgs="" had="" a="" significant="" neuroprotective="" effect="" on="" pc12="" cells.="" the="" cell="" viability="" was="" dose-dependently="" increased="">

پی ایچ جی اور پی سی 12 سیلز کی قابلیت کا علاج پی ایچ جی کے ساتھ 5، 25 اور 50 μg/ملی لیٹر کے ارتکاز پر بالترتیب 54، 57 اور 64 فیصد (ٹیبل دوم) تھا۔

پی ایچ جی ز پی سی 12 سیلز کی جانب سے چوٹ سے متاثرہ ایل ڈی ایچ کی رہائی کو روکتے ہیں۔ کنٹرول گروپ کے مقابلے میں زخمی پی سی 12 سیلز کے سپرناٹنٹ کے ایل ڈی ایچ مواد میں اضافہ کیا گیا جسے پی ایچ جیز نے ارتکاز پر منحصر انداز میں روک دیا۔ اس نتیجے نے اشارہ کیا کہ پی ایچ جی پی سی 12 خلیوں (انجیر 6) پر ایک اہم نیورو پروٹیکٹو اثر رکھتے ہیں۔

پی ایچ جی کے ذریعہ ارتکاز پر منحصر انداز میں روک دیا جاتا ہے۔ اس نتیجے نے اشارہ کیا کہ پی ایچ جی پی سی 12 خلیوں (انجیر 7) پر ایک اہم نیورو پروٹیکٹو اثر ڈالتا ہے۔ پی ایچ جی اور اس کے اجزاء ایچینکوسائڈ اور ایکٹیوسائڈ زخمی پی سی ١٢ خلیوں کی قابلیت کو بچاتے ہیں۔ ماڈل گروپ کے مقابلے میں ایکٹیوسائڈ کے ساتھ علاج نے خوراک پر منحصر انداز میں Aβ1-42 زخمی پی سی 12 خلیوں کی قابلیت میں نمایاں اضافہ کیا۔ پی ایچ جی ز اور ایچینکوسائڈ نے بھی آزمائشی تمام ارتکاز (انجیر 8 اے) پر Aβ1-42 زخمی پی سی 12 خلیوں کی قابلیت میں نمایاں اضافہ کیا۔

ماڈل گروپ کے مقابلے میں ایکٹیوسائڈ نے ایچ کے ساتھ علاج کیے جانے والے پی سی 12 سیلز کی قابلیت میں نمایاں اضافہ کیا₂O₂. پی ایچ جیز نے ایچ کے ساتھ زیر علاج پی سی 12 سیلز کی قابلیت میں بھی اضافہ کردیا₂O₂جبکہ اس کا اثر 5 اور 25 μg/ملی لیٹر (انجیر 8 بی) کے ارتکاز پر نمایاں نہیں تھا۔ اس کے علاوہ ایچینکوسائڈ نے سیل کی قابلیت میں 25 μg/ملی لیٹر کا اضافہ کیا۔

آخر میں، ایکٹیوسائڈ، پی ایچ جی ز اور ایچینکوسائڈ نے Aβ1-42 یا ایچ کے ساتھ چوٹ کا شکار پی سی 12 خلیوں پر نمایاں نیورو پروٹیکٹو اثرات مرتب کیے۔₂O₂.