ذیابیطس نیفروپیتھی کے لئے نئی علاج کی حکمت عملی: CCR2 مخالف

رابطہ:joanna.jia@wecistanche.com/ واٹس ایپ: 008618081934791

حصہ Ⅱ:ذیابیطس نیفروپیتھی کے ماؤس ماڈل میں میکروفیجز اور ٹول نما رسیپٹر 9 اظہار پر CCR2 مخالف کے اثرات

Seigo Ito, Hiroyuki Nakashima, Takuya Ishikiriyama, Masahiro Nakashima, Akira Yamagata, & et al.

خلاصہ

کے روگجننذیابیطس نیفروپتی(DN) کا تعلق گردوں میں میکروفیج (Mo) کی بھرتی، ٹیومر نیکروسس فیکٹر- u (TNF-o) کی پیداوار، اور آکسیڈیٹیو تناؤ سے ہے۔ ٹول نما رسیپٹر 9 (TLR9) ایکٹیویشن مبینہ طور پر نظامی سوزش میں ملوث ہے، اور یہ میٹابولک سنڈروم میں اس حالت کو بڑھاتا ہے۔ لہذا، ہم نے قیاس کیا کہ TLR9 DN کے روگجنن میں ایک کردار ادا کرتا ہے۔ذیابیطس نیفروپتی)۔ DN میں گردے Mos کے دو ذیلی سیٹذیابیطس نیفروپتیماڈل (db/db) چوہوں کا ان کی تقسیم اور TLR9 اظہار اور فنکشن کا جائزہ لینے کے لیے فلو سائٹوومیٹری کا استعمال کرتے ہوئے تجزیہ کیا گیا۔ چوہوں کا انتظام کیا گیا۔CCR28 ہفتے کے لیے مخالف INCB3344؛ Mo کی تقسیم اور فنکشن میں تبدیلیاں اور DN پر اس کے علاج کے اثراتذیابیطس نیفروپتیپیتھالوجی کی جانچ کی گئی۔ بون میرو سے ماخوذ CD11bhigh (BM-Mo) اور ٹشو میں رہنے والے CD11blow Mos (Res-Mo) کی شناخت ماؤس کے گردوں میں ہوئی۔ بطور ڈی اینذیابیطس نیفروپتیترقی ہوئی، BM-Mφ نمبر، TLR9 اظہار، اور TNF- پیداوار میں نمایاں اضافہ ہوا۔ Res-Mos میں، رد عمل آکسیجن پرجاتیوں (ROS) کی پیداوار اور phagocytic سرگرمی کو بڑھایا گیا۔ INCB3344 میں البومینوریا، سیرم کریٹینائن کی سطح، BM-Mφ کثرت، TLR9 اظہار، اور BM-Mφs کے ذریعے TNF-a کی پیداوار اور Res-Mos کے ذریعے ROS کی پیداوار میں کمی واقع ہوئی۔ TLR9 اور TNF- پروڈکشن کے ذریعے BM-Mo کی بڑھتی ہوئی ایکٹیویشن اور Res-Mos کے ذریعے ROS کی بڑھتی ہوئی پیداوار دونوں DN میں شامل تھے۔(ذیابیطس نیفروپتی)ترقی اس طرح، Mos اور ان کے TLR9 اظہار کو INCB3344 کے ذریعے غیر فعال کرنا DN کے لیے ایک ممکنہ علاج کی حکمت عملی ہے۔ذیابیطس نیفروپتی).

نیا اور قابل ذکر ہم نے گردے کے میکروفیجز (Mos) کو بون میرو سے حاصل کردہ Mos (BM-Mos) میں درجہ بندی کیا جو اعلی CD1lb کا اظہار کرتے ہیں اور ٹشو سے متعلق مخصوص رہائشی Mo(Res-Mos) کم CD11b کا اظہار کرتے ہیں۔ میںذیابیطس نیفروپتی(DN) ماڈل چوہوں۔ ٹول نما رسیپٹر 9 (TLR9) اظہار اور BM-Mos میں TLR9 ایکٹیویشن کے ذریعے TNF- پروڈکشن اور Res-Mos میں ROS پروڈکشن کو بڑھایا گیا، مزید برآں،CCR2مخالف نے BM-Mos کے گردے کی دراندازی اور ان کے فنکشن اور ROS کی پیداوار کو Res-Mos کے ساتھ ساتھ TLR9 دبانے سے دبا دیا۔ ہمارا مطالعہ ڈی این کے لیے ایک نئی علاج کی حکمت عملی پیش کرتا ہے۔ذیابیطس نیفروپتی).

cistanche فارما خصوصیکے لیےگردہ

حصہ Ⅰ کے لیے یہاں کلک کریں۔

بحث

ہم نے اس مطالعے میں تین نئے نتائج پیش کیے ہیں۔ سب سے پہلے، ذیابیطس DB/DB چوہوں میں، BM-Mos نے TLR9 کا اظہار کیا اور TNF- جاری کیا۔ غیر ذیابیطس مسٹی چوہوں کے مقابلے میں زیادہ کثرت سے، جبکہ Res-Mos نے زیادہ ROS پیدا کیا اور phagocytic فنکشن دکھایا۔ دوسرا، INCB3344، aCCR2مخالف، دونوں قسم کے MPS سے TLR9 اظہار اور TNF کی رہائی اور Res-Mos کے ذریعہ ROS کی پیداوار میں کمی۔ آخر میں، یہ میکانزم ذیابیطس DB/DB چوہوں میں البومینوریا اور سیرم Cr کی سطح میں کمی کے ساتھ ساتھ میسنجیئل پھیلاؤ اور پوڈوسیٹ اظہار میں بہتری کا سبب بن سکتے ہیں۔

ہمارے نتائج کی بنیاد پر، گردے Mos کو دو آبادیوں میں تقسیم کیا گیا تھا، یعنی، BM-Mos بون میرو سے ماخوذ مارکر کا بہت زیادہ اظہار کرتا ہے اور Res-Mos مشکل سے اس کا اظہار کرتا ہے۔ چونکہ وہ ذیابیطس کی موجودگی پر منحصر نہیں تھے، ان کو دو قسم کے گردے Mos کی منفرد خصوصیات کے طور پر سمجھا جاتا تھا۔ اس کے برعکس، ذیابیطس کے چوہوں میں ان کے مختلف افعال کو بڑھایا گیا۔ مزید برآں، TNF-، ایک سوزش والی سائٹوکائن جو بنیادی طور پر Mos کے ذریعہ تیار کی جاتی ہے، اور IL-10، ایک سوزش والی سائٹوکائن کی پیداوار میں بھی اضافہ کیا گیا تھا۔ اس سے ظاہر ہوتا ہے کہ گردے کا Mos بیک وقت نہ صرف شامل کرنے میں بلکہ دائمی سوزش والی حالتوں جیسے DN(ذیابیطس نیفروپیتھی)۔ گردے کے میکروفیجز کی دو اقسام کے کردار

چونکہ پیشاب میں البومین کا اخراج، جو کہ نیفروپیتھی کی شدت کو ظاہر کرتا ہے، DB/DB چوہوں میں BM-Mos کے فیصد کے ساتھ بڑھتا ہے، ہم تجویز کرتے ہیں کہ BM-Mos DN میں اہم کردار ادا کرتا ہے۔ذیابیطس نیفروپیتھی) ترقی مزید یہ کہ ، ہم نے پایا کہ BM-Mos میں TLR9 اظہار اور TNF- پروڈکشن کو بڑھایا گیا تھا ، جبکہ ROS کی پیداوار اور phagocytic سرگرمی کو Res-Mos میں DN کے ساتھ بڑھایا گیا تھا۔(ذیابیطس نیفروپتی)ترقی چونکہ یہ مشاہدات چھوٹے اور بڑے دھندلے چوہوں میں نہیں کیے گئے تھے (ڈیٹا نہیں دکھایا گیا)، ہم سمجھتے ہیں کہ وہ ڈی این سے وابستہ ہیں۔(ذیابیطس نیفروپتی)ترقی اور عمر پر منحصر تبدیلیوں کی وجہ سے نہیں ہے۔ TLRs پیتھوجین سے وابستہ مالیکیولر پیٹرن کو پہچانتے ہیں، جیسے لیپوپولیساکرائڈز، بیکٹیریل ڈی این اے، اور اینڈوجینس خطرے سے وابستہ مالیکیولر پیٹرن، جن کی سطح ذیابیطس میں بڑھ جاتی ہے (33,34)۔ خاص طور پر، TLR2 اور TLR4 مبینہ طور پر DN کی سوزش کو برقرار رکھنے میں ملوث ہیں۔(ذیابیطس نیفروپتی)ممکنہ طور پر Mos (35-38) کے ذریعے۔ TLR9 خراب/مردہ خلیات یا اڈیپوسائٹس اور عام بیکٹیریل DNA شکل CpG-ODN کے ذریعہ گردش میں جاری ہونے والے مائٹوکونڈریل اور سیل فری ڈی این اے کو تسلیم کرتا ہے، اس طرح فطری قوت مدافعت کو چالو کرتا ہے اور گردے کی چوٹ میں اس کے ملوث ہونے کا مشورہ دیتا ہے (11,14)۔

ROS کی پیداوار اور Res-Mos کے ذریعے phagocytosis میں DN کے ساتھ اضافہ کیا گیا۔ذیابیطس نیفروپیتھی) ترقی کڈنی موس مبینہ طور پر ڈی این میں ملوث رہا ہے۔(ذیابیطس نیفروپتی)نیکوٹینامائڈ اڈینائن ڈینیوکلیوٹائڈ فاسفیٹ (این اے ڈی پی ایچ) آکسیڈیز سرگرمی (39,40) کے ذریعے آر اوز کو جاری کرکے پیشرفت، اور ہمارے پچھلے مطالعے سے پتہ چلتا ہے کہ ریس-موس سے اخذ کردہ آر او ایس ہیپاٹک ٹشو کی چوٹ (20) میں ملوث ہیں۔ لہذا، گردے میں، Res-Mos ROS کی حوصلہ افزائی ٹشو کی چوٹ میں بھی ملوث ہو سکتا ہے۔ مزید برآں، Res-Mos میں TLR9 اظہار کو ذیابیطس کی حالت (تصویر 1E) میں بڑھایا گیا تھا۔ چونکہ Res-Mos کے ذریعہ تیار کردہ ROS TLR9 ایکٹیویشن اور مقامی TNF-a کی سطح (20,41, 42) سے متاثر ہوتا ہے، DN کے ساتھ Res-Mos کے ذریعہ ROS کی پیداوار میں اضافہذیابیطس نیفروپیتھی) ترقی ان کے TLR9 اظہار میں اضافے کی وجہ سے تھی یا BM-Mos کے بہتر TNF- پروڈیکشن سے متاثر تھی۔ لہذا، ہم قیاس کرتے ہیں کہ BM-Mos کے ذریعہ TNF-a کی پیداوار اور Res-Mgps کے ذریعہ ROS کی پیداوار میں اضافے نے DN کو بڑھا دیا۔(ذیابیطس نیفروپتی).

اگرچہ Res-Mos بہتر ROS کی پیداوار کے ذریعے نقصان دہ کردار ادا کر سکتا ہے، لیکن ان کی مضبوط فگوسائٹوسس کی صلاحیت DN پر حفاظتی اثر ڈال سکتی ہے۔ذیابیطس نیفروپیتھی) چوہوں. Res-Mos بیماری کے بڑھنے کے دوران گردے کے خراب خلیوں کو فاگوسیٹوز کر سکتا ہے اور گردے کے ٹشو کی مرمت میں حصہ لے سکتا ہے۔ مزید برآں، Res-Mos کے ذریعے ROS کی پیداوار میں اضافہ فاگوسیٹوزڈ خراب ٹشو کے ہاضمے کی وجہ سے ہو سکتا ہے۔ جیسا کہ ہم نے ایک غیر محرک ماحول میں گردے کے Mos کے ذریعہ تیار کردہ ROS کا جائزہ لیا، ROS اس مرحلے پر تیار کیا گیا جہاں Mos phagocytosed اور خراب گردے کے ٹشو کو ہضم کرتا ہے۔ لہذا، Res-Mos میں ROS کی پیداوار میں اضافہ DN میں منفی اثر نہیں ہوسکتا ہے۔ذیابیطس نیفروپتی).

کے اثراتCCR2ذیابیطس نیفروپیتھی پر مخالف INCB3344

CCL2 ذیابیطس کے ماڈل چوہوں (43-46) کے گردوں میں بہت زیادہ متاثر ہوتا ہے اور گلوومیرولر پوڈوکیٹس (47) پر اس کے عمل کی وجہ سے البومینوریا کے بڑھنے میں ملوث ہوتا ہے۔ مزید برآں، سوزش والی جگہوں پر مونوسائٹ کی دراندازی کو بنیادی طور پر CCL2 کے ذریعے منظم کیا جاتا ہے، اور CCL2 محترمہ کو گردے کے ٹشو کی طرف راغب کرتا ہے (ذریعہCCR2ثالثی سگنلنگ) اور DN میں اہم کردار ادا کرتا ہے۔ذیابیطس نیفروپیتھیروگجنن (46,47)۔ سی سی ایل 2 گلومیرولر پوڈوکیٹس، میسنجیئل سیلز، اور نلی نما اپکلا خلیات کے ذریعہ تیار کیا جاتا ہے اور گردے میں بیچوالا سوزش، نلی نما ایٹروفی، اور فائبروسس (44, 48,49) پیدا کرتا ہے۔ کئی کی انتظامیہCCR2ذیابیطس کے ماڈل چوہوں کے مخالفوں کو حال ہی میں گردے میں Mo کی دراندازی کو دبانے اور DN کو روکنے کے لیے دکھایا گیا تھا۔(ذیابیطس نیفروپتی)ترقی (50-53)۔ البتہ،CCR2مخالفوں کو انسانوں میں طبی طور پر استعمال نہیں کیا گیا ہے، شاید اس کی وجہ مختصر فارماسولوجیکل نصف زندگی اور انسان کے لیے کم وابستگی جیسے مسائل ہیں۔CCR2. اس کے برعکس، INCB3344 اعلی انتخابی صلاحیت کے ساتھ انسانی monocytes سے منسلک ہو سکتا ہے۔CCR2اور انسان یا ماؤس کے جسم میں فارماکوکینیٹک نصف زندگی طویل ہے (8,9)۔

موجودہ مطالعہ میں، INCB3344 DN میں گردے میں BM-Mos کی منتقلی کو دبا سکتا ہے۔ذیابیطس نیفروپیتھی); تاہم، Res-Migos پر اس کا واضح اثر نہیں ہوا، یہ تجویز کرتا ہے کہ BM- اور Res-Mφ آبادیوں میں مختلف خصوصیات ہیں۔ مزید برآں، INCB3344 نے Mgs کو M2 فینوٹائپ (M2 پولرائزیشن) میں پولرائز کیا، جو proinflammatory کو اینٹی سوزش فینوٹائپ میں تبدیل کرنے کا اثر تجویز کرتا ہے۔

خاص طور پر، INCB3344 نے دونوں قسم کے Mos میں TNF کی پیداوار کو نمایاں طور پر کم کیا، جس نے DN کی بہتری میں سب سے زیادہ حصہ ڈالا ہو گا۔ذیابیطس نیفروپیتھی)۔ TNF- گردے کی ہائپر ٹرافی، البومین کے اخراج، اور DN میں گردے کے کام میں کمی میں ملوث ہے۔ذیابیطس نیفروپیتھی) (3، 54) اور ایک پیلیوٹروپک سائٹوکائن ہے جو آٹوکرائن اور پیراکرائن طریقے سے دیگر سائٹوکائنز کی پیداوار کو متحرک کرتی ہے (55-58)۔ لہذا، TNF-o کی روک تھام دیگر اشتعال انگیز ثالثوں کی ایک قسم کو روکنے کا کام کر سکتی ہے جو DN پر اس کے فائدہ مند اثرات کا سبب بن سکتے ہیں۔(ذیابیطس نیفروپتی). جیسا کہCCR2محرک intracellular glycogen synthase kinase 3(GSK3)(59) کی سرگرمی کے ذریعے TNF-a کی پیداوار کا باعث بنتا ہے، ہم نے قیاس کیا کہ INCB3344 نے گردے Mos میں اس راستے کو روک کر TNF- کی پیداوار کو روکا ہے۔ تاہم، ہم سمجھتے ہیں کہ اس ماڈل میں GSK3 کی سطحوں کا جائزہ لیا جانا چاہیے، اور اس قیاس آرائی کی تصدیق کے لیے مزید مطالعات کی ضرورت ہے۔ مزید برآں، ہمارے نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ زیادہ تر گلومیرولر Mos BM-Mos تھے، اور glomerular BM-Mos میں TNF کی پیداوار گردے کے دوسرے BM-Mos سے زیادہ تھی۔ یہ نتائج بتاتے ہیں کہ INCB3344، جس نے BM-Mφ شماروں کو دبایا (مزید خاص طور پر)، بنیادی طور پر میسنجیئل پھیلاؤ کو کم کرکے اور پوڈوسائٹس کی حفاظت (WT میں اضافہ-1) کے ذریعے گلوومیرولر گھاووں کی بہتری میں اہم کردار ادا کیا۔

CCR2TLR9 دبانے (60,61) کے ذریعے TNF- pro-duction کو روکنے کی اطلاع دی گئی ہے، اور TLR9 اظہار گردے کے پیرانچیما میں نہیں دیکھا گیا، بشمول tubules، interstitium، اور glomeruli، سوائے اس خلیات کے جو کہ موجودہ وقت میں مورفولوجیکل طور پر Mos کے طور پر تصور کیے جاتے ہیں۔ مطالعہ لہذا، INCB3344 انتظامیہ نے دونوں قسم کے Mos میں TLR9 اظہار کو بھی کم کیا۔ ایک ساتھ لے کر، نتائج نے تجویز کیا کہ INCB3344 نہ صرف گردے میں BM-Mg کی سوزش کی دراندازی کو دباتا ہے بلکہ سوزش سے متعلق ان کے نقصان دہ افعال کو بھی دباتا ہے اور DN کے خاتمے میں معاون ثابت ہو سکتا ہے۔(ذیابیطس نیفروپتی).

آخر میں، BM-Mos نے TLR9 کا اظہار کیا اور TNF-a کو ذیابیطس کے چوہوں میں غیر ذیابیطس چوہوں کے مقابلے میں زیادہ کثرت سے جاری کیا، جبکہ Res-Mos نے زیادہ ROS تیار کیا اور ذیابیطس کے چوہوں میں بڑھتی ہوئی phagocytic سرگرمی کو ظاہر کیا۔ INCB3344, aCCR2مخالف، کم TLR9 اظہار اور TNF- دونوں قسم کے Mos سے رہائی اور Res-Mos کے ذریعہ ROS کی پیداوار میں کمی۔ یہ تبدیلیاں البومینوریا اور سیرم سی آر کی سطح میں کمی کے ساتھ ساتھ ذیابیطس کے چوہوں میں پیتھولوجیکل بہتری کی وضاحت کرتی ہیں۔ ہم تجویز کرتے ہیں کہ INCB3344 میں DN کے علاج کی مضبوط صلاحیت ہے۔(ذیابیطس نیفروپتی)کلینک میں

نقطہ نظر اور اہمیت

ہم نے یہ ظاہر کیا کہCCR2مخالف INCB3344 البومینوریا اور سیرم سی آر کی سطح کو کم کر سکتا ہے اور ڈی این کے ساتھ چوہوں میں میسنجیئل پھیلاؤ اور پوڈوسیٹ اظہار کو بہتر بنا سکتا ہے۔(ذیابیطس نیفروپتی). یہ فائدہ مند اثرات BM-Mos سے TNF- پیداوار میں کمی اور Res-Mφs سے ROS کی رہائی کے ذریعے استعمال کیے گئے تھے، یہ دونوں Mos اور M2 پولرائزیشن کی دونوں اقسام میں TLR9 اظہار میں کمی پر مبنی تھے۔ مستقبل میں، اس ریسیپٹر مخالف کو ایک مضبوط متبادل کے طور پر استعمال کیا جا سکتا ہے یا انجیوٹینسین II ریسیپٹر بلاکر اور سوڈیم گلوکوز کوٹرانسپورٹر کے ساتھی کے طور پر استعمال کیا جا سکتا ہے-2 مریضوں کے علاج کے لیے تاکہ DN کو بڑھنے سے روکا جا سکے۔(ذیابیطس نیفروپتی).

حوالہ جات

1. Qi C. MaoX، Zhang Z.Wu H، درجہ بندی اور تفریق کی تشخیصذیابیطس نیفروپتی. جے ذیابیطس ریس 2017:8637138,2017۔ doi:10.1155/2017/8637138۔

2. You H, Gao T, Cooper TK, Brian Reeves W, Awad AS. میکروفیجز ذیابیطس کے گردوں کی چوٹ میں براہ راست ثالثی کرتے ہیں۔ J Physiol Renal Physiol 305:F1719-F1727,2013۔ doi:10.1152/ajprenal.00141.2013۔

3. Awad AS, You H, Gao T, Cooper TK, Nedospasov SA, Vacher J, Wilkinson PF, Farrell FX, Brian Reeves W. Macrophage سے ماخوذ ٹیومر نیکروسس فیکٹر-الفا ذیابیطس کے گردوں کی چوٹ میں ثالثی کرتا ہے۔ کڈنی انٹ 88:722-733,2015.doi:10.1038/ki.2015.162.

4. Lin M, Yiu WH, Wu HJ, Chan LY, Leung JC, Au WS, Chan KW, Lai KN, Tang SC. ٹول نما رسیپٹر 4 میں نلی نما سوزش کو فروغ دیتا ہے۔ذیابیطس نیفروپتی. J Am Soc Nephrol 23:86-102, 2012. doi:10.1681/asn.2010111210.

5. Hou Y, Shi Y, Han B, Liu X, Qiao X, Qi Y, Wang L. اینٹی آکسیڈینٹ پیپٹائڈ SS31 آکسیڈیٹیو تناؤ کو روکتا ہے، CD36 کو کم کرتا ہے، اور گردوں کے افعال کو بہتر بناتا ہے۔ذیابیطس نیفروپتی. نیفرول ڈائل ٹرانسپلانٹ 33: 1908-1918, 2018.doi:10.1093/ndt/gfy021۔

6. Seok SJ, Lee ES, Kim GT, Hyun M, Lee JH, Chen S, Choi R, Kim HM, Lee EY, Chung CH. CCL2/ کی ناکہ بندیCCR2سگنلنگ میں بہتری آتی ہے۔ذیابیطس نیفروپتیDB/DB چوہوں میں۔ نیفرول ڈائل ٹرانسپلانٹ 28:1700-1710،2013۔ doi:10.1093/ndt/gfs555۔

7. Brodmerkel CM, Huber R, Covington M, Diamond S, Hall L, Collins R, Leffet L, Gallagher K, Feldman P, Collier P, Stow M, Gu X, Baribaud F, Shin N, Thomas B, Burn T, Hollis G , Yeleswaram S, Solomon K, Friedman S, Wang A, Xue CB, Newton RC. شیرل پی، وڈی کے. ایک ناول چوہا فعال کی دریافت اور فارماسولوجیکل خصوصیاتCCR2مخالف، INCB3344.J Immunol 175:5370-5378, 2005. doi:10.4049/jimmunol.175.8.5370.

8. Shin N، Baribaud F، Wang K، Yang G، Wynn R، Covington MB، Feldman P، Gallagher KB، Leffet LM، Lo YY، Wang A، Xue CB، Newton RC، Scherle PA۔ INCB3344 کی فارماسولوجیکل خصوصیات، انسان کا ایک چھوٹا مالیکیول مخالفCCR2. بائیو کیم بائیو فیز ریس کمیون 387: 251–255، 2009. doi:10. 1016/j.bbrc.2009.06.135.