حصہ 1 Cistanche Tubulosa Phenylethanoid Glycosides کی Microemulsion-based Transdermal ترسیل کی تیاری اور تشخیص

رابطہ: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 ای میل:audrey.hu@wecistanche.com

JIANHUA YANG1*, HUANHUAN XU1-3*, اور et al.

خلاصہ

موجودہ مطالعہ کا بنیادی مقصد فراہم کرنے کے لئے ایک ناول مائیکرو ایمولشن (ME) تشکیل تیار کرنا تھا۔cistanche سے phenylethanoid glycoside(PG) جلد کے لائٹنرز اور سن اسکرین میں استعمال کے لیے۔ تیل کے مرحلے کا انتخاب منشیات کی حل پذیری کی بنیاد پر کیا گیا تھا، جب کہ سرفیکٹنٹ اور cosurfactant کو ان کی حل پذیری کی صلاحیت اور اس کارکردگی کی بنیاد پر منتخب کیا گیا تھا جس کے ساتھ انہوں نے MEs بنائے تھے۔ سیوڈو ٹرنری فیز ڈایاگرام ایم ای ریجنز کا اندازہ کرنے کے لیے بنائے گئے تھے اور آئل ان واٹر ایم ای کی پانچ فارمولیشنز کو گاڑیوں کے طور پر منتخب کیا گیا تھا۔ ME فارمولیشن کو بہتر بنانے اور نمکین محلول کے مقابلے میں اس کی پارگمیتا کا جائزہ لینے کے لیے ان وٹرو جلد کے پارمیشن کے تجربات کیے گئے۔ آپٹمائزڈ ME کی فزیکو کیمیکل خصوصیات اور PG کی پارمیٹنگ کی صلاحیت(cistanche سے phenylethanoid glycoside) اس ME کی طرف سے فراہم کی بھی تحقیقات کی گئیں۔ آپٹمائزڈ ME فارمولیشن isopropyl myristate (7 فیصد، w/w)، Cremorphor EL (21 فیصد، w/w)، پروپیلین گلائکول (7 فیصد، w/w) اور پانی (65 فیصد، w/w) پر مشتمل تھی۔ PG کی مجموعی رقم(cistanche سے phenylethanoid glycoside) جو کہ ایکسائزڈ ماؤس کی جلد سے گزرتا تھا جب ME لے جاتا تھا ~ 1.68 گنا تھا جب PG کو صرف نمکین محلول کے ذریعے لے جایا جاتا تھا۔ مائیکرو ایملشن میں PG کی مجموعی مقدار (4149.650±37.3 µg·cm-2 ) نمکین محلول میں PG سے نمایاں طور پر زیادہ تھی (2288.63±20.9 µg· سینٹی میٹر-2)۔ مزید برآں، پارگمیتا گتانک نے اشارہ کیا کہ کنٹرول حل (8.87±0.49 cm/hx10-3 بمقابلہ 5.41±0.12 cm/hx10-3) کے مقابلے PG کی ٹرانسڈرمل ڈیلیوری کے لیے آپٹمائزڈ مائیکرو ایمولشن زیادہ موثر کیریئر تھا۔ ایک ساتھ لے کر، نمکین محلول کے مقابلے میں ME-کیریڈ PG کی پارمیٹنگ کی صلاحیت میں نمایاں اضافہ ہوا۔

cistanche

تعارف

Herba cistanche,ایک ٹانک جڑی بوٹی جو عام طور پر صحرائی علاقوں میں تقسیم ہوتی ہے، روایتی چینی ادویات میں اکثر استعمال ہوتی رہی ہے۔ آج تک، اس کی بایوفارماسیوٹیکل خصوصیات کی چھان بین کے لیے متعدد مطالعات کا انعقاد کیا گیا ہے، جن میں یادداشت کی بہتری، جنسی قوت، فری ریڈیکل اسکیوینگنگ، اور عمر رسیدگی کے خلاف سرگرمی (1) شامل ہیں۔ H. cistanche کا بڑا جزو ہے۔phenylethanoid glycoside (PG). پچھلے مطالعات سے یہ بات سامنے آئی ہے کہ پی جی ٹائروسینیز کی سرگرمی کو روکتا ہے، جو انسانی جسم میں میلانین کی ترکیب کے لیے شرح کو محدود کرنے والا انزائم ہے (2)۔ اس کے علاوہ، PG(cistanche سے phenylethanoid glycoside) 2،2-ڈائفنائل-1-پکریل ہائیڈرزائل ریڈیکلز (3) کو ختم کرنے اور الٹرا وایلیٹ (UV) تابکاری سے کیریٹنوسائٹس کی حفاظت کے لیے ذمہ دار بتایا گیا ہے۔ لہذا، اس جزو میں جلد کی خرابی کی صلاحیت ہوسکتی ہے۔ بنیادی ادویات کا استعمال عام طور پر کاسمیٹک شعبوں میں ہوتا رہا ہے، جس میں دوا براہ راست جسم کی سطح پر پہنچائی جاتی ہے (4)۔ Microemulsions (ME) ایک نیا منشیات کی ترسیل کا نظام ہے جو روایتی طور پر تیل، سرفیکٹینٹ، cosurfactant اور پانی کے مراحل (5) پر مشتمل ہے اور یہ رپورٹ کیا گیا ہے کہ لیپوفیلک ادویات (6) کی شرح اور جذب کو بہتر بنایا گیا ہے۔ اس کے علاوہ، اس کی تسلی بخش حل پذیری، جلد کی کم جلن اور زیادہ پارگمیتا کی وجہ سے، یہ توقع کی جاتی ہے کہ اس کا استعمال منشیات کی مقامی ترسیل میں کیا جائے گا (7,8)۔ ہمارے بہترین علم کے مطابق، کچھ مطالعات کی گئی ہیں جہاں PG کو مائیکرو ایمولشن کا استعمال کرتے ہوئے حالات کی دوائیوں کے ذریعے پہنچایا گیا تھا۔ موجودہ مطالعہ میں، ٹرانسڈرمل انتظامیہ کے لیے ایک تیل میں پانی (O/W) نینو ایملشن کی ترسیل کا نظام قائم کیا گیا تھا، اور PG کو نینو ایملشن (9,10) میں شامل کیا گیا تھا۔ دریں اثنا، وٹرو میں ٹرانسڈرمل ریلیز کی تحقیقات کرکے پی جی پر مبنی نینو ایملشن کی تیاری اور خصوصیت کی گئی۔

مواد اور طریقے ری ایجنٹس۔

Cremorphor EL اور isopropyl myristate (IPM) Sigma Aldrich سے خریدے گئے تھے۔ مرک ملی پور (Darmstadt، جرمنی)۔ ایتھنول، اولیک ایسڈ (OA)، اور Tween-80 Guangcheng Chemical Reagent Co., Ltd. (Tianjin, China) سے خریدے گئے تھے۔ ایتھائل اولیٹ شنگھائی کیمیکل ریجنٹ کمپنی لمیٹڈ (شنگھائی، چین) سے خریدی گئی تھی۔ استعمال ہونے والے تمام کیمیکلز اور سالوینٹس تجزیاتی ریجنٹ گریڈ کے تھے۔ Cistanche tubulosa phenylethanoid glycosides JIANHUA YANG1*, HUAN HUAN XU1-3*, SHANSHAN WU2, BOWIE JU2, DANDAN ZHU2, YAO YAOYUAI{9} اور JUAMEI } شعبہ فارمیسی، پہلا منسلک ہسپتال؛ 2 شعبہ قدرتی ادویات، کالج آف فارمیسی، سنکیانگ میڈیکل یونیورسٹی، ارومچی، سنکیانگ 830011؛ 3 ڈپارٹمنٹ آف فارمیسی، کنگھوا ہسپتال، ڈونگ گوان، گوانگ ڈونگ 523003، PR چین کو 2 دسمبر 2015 کو موصول ہوا؛ 29 نومبر 2016 کو قبول کیا گیا، DOI: 10.3892/MMR.2017.6147 سے خط و کتابت: ڈاکٹر جنپنگ ہو، شعبہ قدرتی ادویات، کالج آف فارمیسی، سنکیانگ میڈیکل یونیورسٹی، 393 Xinyi Road, Urumqi, Xinjiang, 830p-150p-100p @yeah.net * یکساں طور پر تعاون کیا مطلوبہ الفاظ: phenylethanoid glycoside, microemulsion, transdermal delivery, skin lightener, sunscreen yang et al: ME-based PG برائے کاسمیٹک ایپلی کیشن 1110 پی ایچ جی کی تیاری۔ پی ایچ جی(cistanche سے phenylethanoid glycoside) معمول کے مطابق بیان کیا گیا تھا (11)۔

ہوا سے خشکC. tubulosa80 فیصد EtOH کے ساتھ پرکولیشن کے ذریعے طاقت اور نکالا گیا تھا۔ پرکولیٹ دباؤ کے تحت بخارات بن گیا تھا، اس کے بعد بقایا سیال کو فلٹر کیا گیا تھا۔ فلٹریٹ کو ایک SP-825 میکرو پورس رال کالم پر مرتکز کیا گیا تھا اور 0، 30، 50، 70، اور 90 فیصد EtOH کو بطور ایلیوینٹس پانی میں استعمال کیا گیا تھا۔ 30-50 فیصد EtOH ایلیوینٹس کو پی ایچ جی سے بھرپور حصہ حاصل کرنے کے لیے مرتکز اور خشک کیا گیا تھا۔ UV سپیکٹرو فوٹومیٹری نے پی ایچ جی کے مواد کی نشاندہی کی۔(cistanche سے phenylethanoid glycoside) 87.6 فیصد تھا۔ ME کے لیے تیل، سرفیکٹنٹس، اور cosurfactants کی اسکریننگ۔ حل پذیری ٹیسٹ ایک اعلیٰ دوائیوں کی لوڈنگ کی صلاحیت کے ساتھ ME فارمولیشن کی تیاری کے لیے مناسب اجزاء کو منتخب کرنے کے لیے کیے گئے تھے۔ اس عمل میں، PG کی اضافی مقدار درج ذیل میں سے ہر ایک کے 4 ملی لیٹر میں شامل کی گئی: IPM، مائع پیرافین، OA، Cremophor EL، Tween‑80، absolute ethanol، propylene glycol، glycerin، اور PEG400 بالترتیب اس کے بعد، نتیجے میں آنے والے مرکب کو 72 گھنٹے کے لیے 37˚C پر باہم ہلایا گیا، اس کے بعد 10 منٹ کے لیے 12,830 xg پر سینٹرفیوگریشن کیا گیا۔ اس کے بعد، گولی کو میتھانول میں دوبارہ معطل کر دیا گیا، اور PG کا تعین UV سپیکٹرو فوٹومیٹری کا استعمال کرتے ہوئے 333 nm پر کیا گیا۔ میتھانول میں تیل، سرفیکٹنٹس اور کوسالوینٹس کے مناسب پتلا حل ایک خالی کنٹرول کے طور پر کام کرتے ہیں۔ فیز ڈایاگرام کی تعمیر۔ موجودہ مائیکرو ایمولشن باؤنڈری کے لیے اجزاء کی ارتکاز رینج حاصل کرنے کے لیے، سیوڈو ٹرنری فیز ڈایاگرام کو پانی کے ٹائٹریشن کے طریقہ کار کا استعمال کرتے ہوئے بنایا گیا تھا جیسا کہ پہلے بیان کیا گیا ہے (12)۔ تھری فیز ڈایاگرام 1:3، 1:1، اور 3:1 وزن کے تناسب سے سرفیکٹینٹ سے cosurfactant کے ساتھ تیار کیے گئے تھے۔ تیل کے مرحلے اور سرفیکٹنٹ مرکب کو پھر 1:9، 2:8، 3:7، 4:6، 5:5، 6:4، 7:3، 8:2 اور 9:1 کے وزن کے تناسب پر ملایا گیا۔ . تیل اور سرفیکٹنٹ مکسچر کو یکساں طور پر ملایا گیا تھا اور شفاف ME حاصل کرنے تک کمرے کے درجہ حرارت پر مقناطیسی ہلچل (300 rpm) کے تحت صاف پانی کے ساتھ قطرہ قطرہ پتلا کیا گیا تھا۔ سیوڈو ٹرنری فیز ڈایاگرام کو مکمل کرنے کے لیے اجزاء کا ارتکاز ریکارڈ کیا گیا تھا۔ ان خاکوں کی بنیاد پر، PG پر مبنی ME کی تیاری کے لیے مواد کی مناسب ارتکاز کا انتخاب کیا گیا تھا۔ ME کی تیاری اور PG کا آبی محلول۔ کل 5 MEs (ME1-5) کا انتخاب سرفیکٹنٹ کے ساتھ فیز ڈایاگرام کے مطابق کیا گیا تھا: Cosurfactant وزن کا تناسب 3:1 (ٹیبل I)۔ سرفیکٹنٹ اور cosurfactant کے مرکب کے ساتھ تیل ملا کر مائکرو ایملشن سسٹم تیار کیا گیا تھا، اور پانی کو 37˚C پر مقناطیسی ہلچل (300 r/min) کے ساتھ تیل کے مراحل میں ٹھیک ٹھیک شامل کیا گیا تھا۔ سسٹمز کو 30 منٹ تک ہلکے مقناطیسی ہلچل کا استعمال کرتے ہوئے متوازن کیا گیا جس کے بعد الٹراسونیکیشن کے تحت PG کی مناسب مقدار کو تحلیل کیا گیا۔ آبی محلول اسی پی جی مواد کے ساتھ تیار کیا گیا تھا جسے صاف پانی میں تحلیل کیا گیا تھا۔ مائکرو ایمولشن کی خصوصیت۔ MEs کے اوسط قطرہ کے سائز اور پولی ڈسپیرسٹی انڈیکس کا اندازہ فوٹوون کوریلیشن سپیکٹروسکوپی (مالورن انسٹرومینٹس، لمیٹڈ، مالورن، یوکے) کے ذریعے کیا گیا۔ تمام نمونوں کو 1:5 کے تناسب سے پانی سے پتلا کیا گیا اور 0.22 µm فلٹر کے ذریعے فلٹر کیا گیا۔ یہ ٹیسٹ تھرموسٹیٹک چیمبر میں 25˚C پر سہ رخی میں کیا گیا تھا۔ ٹرانسمیشن الیکٹران مائکروسکوپی (JEM-100CXII؛ JEOL لمیٹڈ، ٹوکیو، جاپان) کا استعمال کرتے ہوئے پی جی مائیکرو ایمولشنز کی شکل کا مشاہدہ کیا گیا۔ مختصراً، پتلا نمونے کا ایک قطرہ فلم لیپت تانبے کے گرڈ پر جمع کیا گیا تھا، اس کے بعد 2 فیصد فاسفوٹونگسٹک ایسڈ آبی محلول کے ایک قطرے سے داغدار تھے۔

مائیکرو ایمولشنز کے اوسط قطرہ قطرہ کا تعین کمرے کے درجہ حرارت پر فوٹوون کوریلیشن سپیکٹروسکوپی آلہ (BI{{0}SM; Brookhaven Instruments Corporation, Holtsville, NY, USA) کے ذریعے کیا گیا تھا۔ NDJ-8S ڈیجیٹل ویزکومیٹر (Shanghai Precision and Scientific Instrument Co., Ltd., Shanghai, China) کا استعمال کرتے ہوئے ME گاڑیوں کی viscosity 25˚C پر ماپا گیا۔ 1 روٹر 60 rpm پر سیٹ ہے۔ پی ایچ کا تعین MEs کی pH قدروں کا تعین Phs‑3C ڈیجیٹل ایسڈیمیٹر (شنگھائی REX انسٹرومینٹس فیکٹری، شنگھائی، چین) کا استعمال کرتے ہوئے 25˚C پر کیا گیا تھا۔ اضطراری اشاریہ جات کو تھرموسٹیٹک ایبی ریفریکٹومیٹر (آپٹیکل انسٹرومنٹ فیکٹری، شنگھائی، چین) سے ماپا گیا۔ جلد کے ٹشوز کی تیاری۔ 20 گرام وزنی نر کنمنگ چوہے سنکیانگ میڈیکل یونیورسٹی (سنکیانگ، چین) کے تجرباتی جانوروں کے مرکز سے خریدے گئے۔ 10 چوہوں (6 ہفتے پرانے) کو کمرے کے درجہ حرارت (24±2˚C) پر 50±15 فیصد نمی کے ساتھ 12 گھنٹے روشنی/12 گھنٹہ تاریک سائیکل پر 1 ہفتہ تک انکولی خوراک دی گئی۔ تمام جانوروں کو معیاری خوراک اور پانی تک رسائی حاصل تھی۔ بالوں کو برقی کلپر سے ہٹا دیا گیا تھا۔ کلورل ہائیڈریٹ (10 فیصد) کے ساتھ ٹرمینل اینستھیزیا کے بعد subcutaneous انجیکشن کے ذریعے، جلد کے ٹشوز کو پیٹ کے علاقے سے نکال دیا گیا اور subcutaneous fat اور connective tissue کو ہٹا دیا گیا۔ ٹشوز کو رات بھر 4˚C پر فریج میں رکھا گیا تھا۔ مطالعہ کے پروٹوکول کو سنکیانگ میڈیکل یونیورسٹی (سنکیانگ، چین) کی اخلاقی کمیٹی نے منظور کیا تھا۔ وٹرو پارمیشن اسٹڈی میں۔ پارمیشن کے تجربات کیے گئے جیسا کہ پہلے بیان کیا گیا تھا (12)۔ ایکسائز شدہ جلد کو عمودی پھیلاؤ سیل کے ڈونر اور ریسیپٹر چیمبر کے درمیان 2.8 سینٹی میٹر 2 کے موثر پھیلاؤ والے حصے کے ساتھ بند کیا گیا تھا۔ رسیپٹر چیمبر تازہ، عام نمکین سے بھرا ہوا تھا۔ بازی سیل کو دوبارہ گردش کرنے والے پانی کے غسل کا استعمال کرتے ہوئے 37˚C پر برقرار رکھا گیا تھا اور رسیپٹر چیمبرز میں حل کو 200 rpm پر مسلسل ہلایا جاتا تھا۔ اس کے بعد، ٹیسٹ فارمولیشن (1.0 ملی لیٹر) کو آہستہ سے ڈونر چیمبر میں رکھا گیا۔ اس کے بعد، ریسیپٹر چیمبر میں محلول کا 3 ملی لیٹر ہٹا دیا گیا اور پہلے سے طے شدہ وقفوں (0، 2، 4، 6، 8، 10 اور 24 گھنٹے) پر تازہ نارمل نمکین کے مساوی حجم کے ساتھ تبدیل کر دیا گیا۔ ریسیپٹر چیمبر سے حاصل کردہ نمونہ پی جی کا تعین کرنے کے لیے استعمال کیا گیا تھا۔(cistanche سے phenylethanoid glycoside)333 nm کی طول موج پر UV سپیکٹروسکوپی کا استعمال کرتے ہوئے سطحیں۔ PG کی مجموعی مقدار جو ایکسائزڈ ماؤس کی جلد کے ذریعے پھیلتی ہے درج ذیل فارمولے کے مطابق شمار کی گئی تھی۔

جہاں ایک مقررہ وقت میں Qn جمع شدہ رقم تھی t، Cn ہر نمونے لینے کے وقت وصول کنندہ کے حل کی منشیات کا ارتکاز ہے، Ci نمونے کا منشیات کا ارتکاز ہے، S مؤثر بازی کا علاقہ ہے (S{{0} }}.8 cm2 ) اور V0 اور Vi بالترتیب ریسیور سلوشن اور نمونے کے حجم ہیں۔ PG کی مجموعی رقم (Qn)(cistanche سے phenylethanoid glycoside)permeated کو ہر ایک فارمولیشن کے لیے وقت (t) کے فنکشن کے طور پر پلاٹ کیا گیا تھا۔ ماؤس کی جلد کے ذریعے ایک مستحکم حالت (Jss, µg/cm-2 /h-1 ) پر PG کے پارمیشن کی شرح کا حساب Qnversus وقت کے پلاٹ کے لکیری حصے کی ڈھلوان سے لگایا گیا تھا۔ پارگمیتا گتانک (Kp، cm/h) کا حساب درج ذیل فارمولے کے مطابق کیا گیا تھا۔

جہاں Kp پارگمیتا گتانک ہے، Jss وہ بہاؤ ہے جس کا حساب مستحکم حالت میں کیا جاتا ہے، اور C0 منشیات کے ارتکاز کی نمائندگی کرتا ہے جو گاڑی میں مستقل رہتی ہے۔ جلد برقرار رکھنے کا مطالعہ۔ مندرجہ ذیل حصوں میں سابق ویوو پارمیشن رویے، مجموعی رقم، پارگمی کی شرح، پارگمیتا گتانک اور جلد کو برقرار رکھنے کی خصوصیات کے درمیان آپٹمائزڈ ME فارمولیشنز (PG مواد، 2 فیصد، w/w) اور آبی محلول کے موازنہ کی تفصیل دی گئی ہے۔ پارمیشن کے تجربے کے اختتام پر، جلد میں منشیات کی بقایا سطح کا تعین ہوموجنائزیشن کے طریقہ کار سے کیا گیا۔ عام نمکین سے دھونے کے بعد، جلد کو چھوٹے حصوں میں کاٹ کر ایک شیشے کی ٹیوب میں رکھ دیا گیا جس میں 3 ملی لیٹر میتھانول موجود تھا برف کے غسل میں۔ نمونے کو 12000 r/منٹ کی رفتار سے ہم آہنگ کیا گیا۔ 2 منٹ کے لیے rpm، اور پھر 25˚C پر 30 منٹ کے لیے افقی طور پر 12,830 xg پر سینٹرفیوج کیا گیا۔ سپرنٹنٹ کو مائکرو پورس فلٹر (0.45 µm) اور پی جی(cistanche سے phenylethanoid glycoside)سپرنٹنٹ میں سطحوں کا تعین UV سپیکٹروسکوپی کے ذریعہ 333 nm کی طول موج پر کیا گیا تھا۔ استحکام کا مطالعہ۔ پی جی سے بھری ہوئی ME کی جسمانی استحکام کی جانچ وضاحت، ذرہ سائز کے تجزیہ اور مرحلے کی علیحدگی کے ذریعے کی گئی، جو 2‑8˚C اور کمرے کے درجہ حرارت پر 3 ماہ تک دیکھی گئی۔ ME کی جسمانی استحکام کا اندازہ لگانے کے لیے سینٹرفیوگریشن 30 منٹ کے لیے 25˚C پر 12,830 xg پر کی گئی۔ زیادہ سے زیادہ اسٹوریج درجہ حرارت کا فیصلہ کرنے کے لئے پی جی کی فیز علیحدگی اور حراستی کی ماہانہ چھان بین کی گئی۔ کیمیائی استحکام کا اندازہ منشیات سے لدی فارمولیشنوں پر کیا گیا، جو 2‑8˚C اور کمرے کے درجہ حرارت پر ذخیرہ کیا گیا، PG مواد کے ساتھ UV سپیکٹرو فوٹومیٹری کے ذریعے 333 nm پر تعین کیا گیا۔ جلد کی حساسیت کا ٹیسٹ۔ جلد کی حساسیت کے ٹیسٹ خرگوشوں (وزن 2.02.5 کلوگرام) پر کیے گئے تاکہ تیار شدہ فارمولیشن کے حالات کے استعمال کی پریشان کن صلاحیت کا اندازہ لگایا جا سکے جیسا کہ پہلے بیان کیا گیا ہے (13)۔ ہالینڈ کے نو خرگوش (16 ہفتے پرانے؛ وزن 20-2.5 کلوگرام؛ 5 نر اور 4 مادہ) سنکیانگ میڈیکل یونیورسٹی کے تجرباتی جانوروں کے مرکز سے حاصل کیے گئے تھے۔ جانوروں کو کمرے کے درجہ حرارت (24±2˚C) پر 50±15 فیصد نمی کے ساتھ 12 گھنٹے روشنی/12 گھنٹہ تاریک سائیکل پر 1 ہفتہ تک انکولی خوراک دی گئی۔ تمام جانوروں کو معیاری خوراک اور پانی تک رسائی حاصل تھی۔ قربانی کے لیے ایئر ایمبولزم کا استعمال کیا گیا۔ موجودہ مطالعہ میں استعمال ہونے والے پروٹوکول کو سنکیانگ میڈیکل یونیورسٹی (سنکیانگ، چین) کی اخلاقیات کمیٹی نے منظور کیا تھا۔ پیٹھ کے بالوں کو ME فارمولیشنز کی انتظامیہ سے 24 گھنٹے پہلے ہٹا دیا گیا تھا۔ جانوروں کو مندرجہ ذیل گروپوں میں تقسیم کیا گیا تھا: ایک آپٹمائزڈ ME گروپ (n{31}})، جس میں 2 فیصد (w/w) PG پر مشتمل آپٹمائزڈ ME کی ٹاپیکل ایڈمنسٹریشن کے ساتھ؛ ایک PG نمکین گروپ (n=3)، نمکین محلول کی ٹاپیکل انتظامیہ کے ساتھ جس میں 2 فیصد (w/w) PG؛ اور سیلائن گروپ (n=3) کو کنٹرول کریں، جو کہ نارمل نمکین کی ٹاپیکل ایڈمنسٹریشن سے مشروط ہے۔ انتظامیہ کی جانب سے 5 دن تک دن میں دو بار کارکردگی کا مظاہرہ کیا گیا۔ جانوروں کو جلد میں خارش یا تبدیلی کی علامات کے لیے دیکھا گیا، بشمول erythema، papule، flakiness اور dryness (14)۔ منشیات کی واپسی کے بعد، واحد یا ایک سے زیادہ انتظامیہ کا مشاہدہ 3 دن تک جاری رکھا گیا۔ ٹیسٹ کے علاقے کے جلن کے اسکور کا اندازہ مندرجہ ذیل معیارات کے مطابق erythema اور edema کی حد کا اندازہ لگا کر کیا گیا: 1، کوئی ظاہری ردعمل نہیں؛ 2، ایک معمولی ردعمل؛ 3، ایک اعتدال پسند ردعمل اور 4، ایک شدید ردعمل (15,16)۔ آخر میں، مندرجہ ذیل مساوات کا استعمال کرتے ہوئے ہر حالت کے لئے کل جلن کے اسکور کا حساب لگایا گیا:

شماریاتی تجزیہ. ڈیٹا کو اوسط ± معیاری انحراف کے طور پر پیش کیا جاتا ہے۔ ڈیٹا کا تجزیہ تغیر کے یک طرفہ تجزیہ کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا جس کے بعد کم از کم اہم فرق ٹیسٹ کیا گیا۔ SPSS سافٹ ویئر ورژن 19 کا استعمال کرتے ہوئے ڈیٹا کا تجزیہ کیا گیا۔{2}} (IBM SPSS, Armonk, NY, USA)۔ پی<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistically="" significant="">

نتائج اور مباحثہ

ME کے لیے تیل، سرفیکٹنٹس، اور کو-سرفیکٹنٹس کی اسکریننگ۔ پی جی(cistanche سے phenylethanoid glycoside)مائع پیرافین اور اولیک ایسڈ میں تقریباً اگھلنشیل تھا، لیکن IPM (ٹیبل II) میں اعتدال پسند حل پذیری دیکھی گئی۔ آئی پی ایم جلد میں پھیلاؤ کے گتانک کو بڑھاتا ہے اور اس کے نتیجے میں پارمیشن گتانک (17,18) میں اضافہ ہوتا ہے۔ اس کے علاوہ، IPM کو عام طور پر MEs کی تیاری کے لیے منتخب کیا جاتا ہے کیونکہ اس کی معروف پارمیشن بڑھانے والی خصوصیات اور بائیو کمپیٹیبلٹی۔ MEs کی کامیاب تشکیل کے لیے سرفیکٹنٹ کا انتخاب اہم ہے کیونکہ یہ تیل کے پانی کے انٹرفیس (19) پر فلم بنا کر انٹرفیشل تناؤ کو کم کرنے میں معاون ہے۔ موجودہ مطالعہ میں، PG نے Tween-80 (28.051 mg/ml; Table II) کے مقابلے Cremophor-EL (40.193 mg/ml; Table II) میں زیادہ حل پذیری ظاہر کی۔ لہذا، CremophorEL کو مزید مطالعات میں استعمال کے لیے اس کی حل پذیری پروفائل اور غیر آئنک سرفیکٹنٹ کے طور پر اس کی کم زہریلے سطح کی وجہ سے منتخب کیا گیا تھا۔ مزید برآں، اس کے آبی محلول نے PG کی اچھی حل پذیری کا مظاہرہ کیا۔ cosurfactants کے درمیان PG کی سب سے زیادہ حل پذیری propylene glycol (48.714 mg/ml؛ جدول II) میں دیکھی گئی۔ اس کے علاوہ، پروپیلین گلائکول میں IPM اور CremophorEL کے ساتھ MEs بنانے کی صلاحیت ہے۔ ایک ساتھ لے کر، IPM، CremophorEL، اور propylene glycol کو PG-loaded MEs کی تشکیل کے لیے بالترتیب تیل کے مرحلے، سرفیکٹنٹ، اور cosurfactant کے طور پر استعمال کیا گیا۔ سیڈو-ٹرنری فیز ڈایاگرام کی تعمیر۔ موجودہ مطالعے میں، مائیکرو ایمولشنز کے لیے اجزاء کی ارتکاز کی حد کو منتخب کرنے کے لیے مرحلے کے خاکے بنائے گئے تھے، اور نشان زدہ علاقے واضح O/WMEregion (تصویر 1) کی نشاندہی کرتے ہیں۔ سٹریٹم کورنیئم کے ہائیڈریشن اثر اور ڈرمل پارمیشن کے درمیان قریبی تعلق کی اطلاع پہلے دی جا چکی ہے (20)، اور MEs میں منشیات کی تھرموڈینامک سرگرمی جلد میں منشیات کے اخراج اور دخول کے پیچھے ایک اہم محرک قوت تھی (20,21) )۔ کم سرفیکٹنٹ مرکب مواد کے ساتھ ME میں منشیات کی تھرموڈینامک سرگرمی کو جلد میں دوائیوں کے اخراج اور دخول کے لئے ایک اہم محرک قوت ثابت کیا گیا تھا (22,23)۔

The decreased concentration of surfactant in dispersed systems may also increase the rate of drug release and its permeation in the skin (24,25). Thus, the water content ranged between 50 and 70%, while that of the surfactant and cosurfactant ranged between 20 and 45%. The microemulsion domain was determined by visual inspection for clarity and fluidity. The rest of the region in the phase diagrams represents turbid and conventional emulsions based on visual observation (Fig. 1). No liquid crystalline structure was observed using the cross polarizer. The area of the O/W ME region was expanded following the increase of the Km value (Fig. 1). These findings were consistent with previous studies, which demonstrated that a higher level of surfactant reduces interfacial tension of the colloidal solution more effectively, thereby improving the fluidity of the interface and increasing the entropy of the system (21,24). Thus, it is reasonable to speculate that the effect of CremophorEL on ME regions depends on the other ME components, especially the cosurfactant. The combination of short to medium carbon chain length alcohols, including propylene glycol, with single-chain surfactants, may lower interfacial tension due to increased fluidity at the interface. Additionally, medium carbon chain length alcohols may induce elevation of miscibility of the aqueous and oily phases due to the partitioning behavior between the two phases. Finally, in the presence of a Km ratio of 3:1, the ratio of the surfactant mixture to oil was 1:9 or 2:8. MEs prepared with a ratio of surfactant mixture to oil >2:8 گندے اور غیر مستحکم تھے (تصویر 2)۔

ME1‑5 کی حتمی ترکیبیں جدول I. ME کی تیاری اور خصوصیات میں درج ہیں۔ ME1-5 کی طبعی خصوصیات جدول III میں درج ہیں۔ منتشر نظام میکروسکوپی طور پر یکساں، یکساں اور شفاف تھے، بغیر کسی قسم کے۔ ان MEs کے اوسط قطرہ کے سائز کی حد 30.56 اور 79.21 nm (تصویر 3؛ جدول III) کے درمیان ہے، جس میں پولی ڈسپرسٹی-انڈیکس کی قدریں 0.187 اور 0.321 کے درمیان ہیں۔ (ٹیبل III)۔ اس نے ایک تنگ سائز کی تقسیم کے ساتھ یکساں ME کا اشارہ کیا۔ اس کے علاوہ، قطرہ کا سائز تیل کے مواد کے تناسب سے بڑھتا ہے لیکن سرفیکٹنٹ مرکب مواد کے ساتھ کم ہوتا ہے۔ اس رجحان کو ME آئل کور کی توسیع سے منسوب کیا جا سکتا ہے، اور اعلی سرفیکٹینٹ ارتکاز کو زبردستی تیل پانی کے انٹرفیشل تناؤ کو کم کرنے کے لیے قطرہ قطرہ کے سائز کو کم کرنا ہے۔ مزید برآں، سرفیکٹنٹ کی سطح میں اضافہ اور پانی میں کمی کے نتیجے میں ME viscosity کو بڑھا دیا گیا۔ تمام MEs کی pH قدریں 5 کی مناسب رینج میں آئیں۔ جسمانی استحکام کے حوالے سے، ٹیسٹ شدہ MEs میں سے کسی بھی مرحلے میں علیحدگی، ٹوٹنا یا منشیات کی بارش نہیں دیکھی گئی، جس سے یہ ظاہر ہوتا ہے کہ MEs میں سینٹرفیوگریشن کے خلاف تسلی بخش تھرموڈینامک استحکام ہے۔ ڈائی سولیوبلٹی ٹیسٹ سے پتہ چلتا ہے کہ پانی میں گھلنشیل ڈائی (میتھائل اورنج) پورے ME سسٹم میں یکساں طور پر تقسیم ہوتا ہے، جس سے یہ ظاہر ہوتا ہے کہ تشکیل شدہ ME O/W قسم کا تھا (ڈیٹا نہیں دکھایا گیا)۔ مائیکرو گرافس نے ایک کروی خاکہ کے ساتھ الگ الگ واحد ME5 بوندوں کا انکشاف کیا (تصویر 4)۔ Exvivo جلد کے پارمیشن کا مطالعہ۔ تمام جانچ شدہ گاڑیوں کے پارمیشن پروفائلز نے زیرو آرڈر ریلیز کینیٹکس (26,27) کی پیروی کی اور ME5 نے PG (86.795±0.23 µg/cm-2 کا سب سے زیادہ ٹرانسڈرمل فلکس فراہم کیا۔ }} /h-1؛ تصویر 5؛ جدول III)۔ موجودہ مطالعے میں، پی جی کی جلد کے پھیلاؤ پر تیل کے مواد اور سرفیکٹنٹ مرکب کے اثرات کا تعین کیا گیا تھا۔ نتائج نے اشارہ کیا کہ سرفیکٹینٹس جھلی کی روانی میں اضافہ، منشیات کی حل پذیری، اور سٹریٹم کورنیم سے لپڈ نکال کر جلد کے پھیلاؤ کو بڑھاتے ہیں۔ ME1 (69.57 ± {48}}.78، P=0۔{55}}094)، ME2 (44.326±0.84، P{{50}} {86}}052), ME3 (79.859±0.12, P=0.039) اور ME4 (58.332±0.39 µg/cm-2 /h-1 , P=0.0063، تصویر 5؛ جدول III) یہ پچھلے مطالعے کے نتائج سے مطابقت رکھتا تھا، جس میں سرفیکٹینٹ کی سطح (12,28) کے اضافے کے ساتھ ME ڈرگ کارگو کی تھرموڈینامک سرگرمی کم ہو سکتی ہے۔ )۔ دیگر ME1 (80.51±0.87 mPa.s, P=0.0076), ME2 (47.52±0.54 mPa.s, P{{88) کے مقابلے ME5 (30.43±0.12 mPa.s) کی viscosity کم تھی۔ }}.0089)، ME3 (60.49±1.34 mPa.s، P=0.0094) اور ME4 (43.27±0.21 mPa.s، P=0.0059)۔