PartⅠQi Sui Zhu Shui پلاسٹر AQP1 اور MAPK سگنلنگ کو روکتا ہے جگر کے نقصان کو کم کرتا ہے جو سرروٹک ایسائٹس کی وجہ سے ہوتا ہے

خلاصہ

1. مقصد

اس وقت جدید طب میں سیرروٹک ایسائٹس کا کوئی خاص علاج نہیں ہے۔ Qi Sui Zhu Shui پلاسٹر (QSZSP) جلوہ گر میں استعمال ہوا ہے۔ اس مطالعے کا مقصد سیرروٹک جلودر کے علاج میں QSZSP کے عمل کے طریقہ کار اور ایکواپورین 1 (AQP1) کے ساتھ اس کے تعلقات کی تحقیقات کرنا تھا۔

2. طریقے

چوبیس چوہوں کو چار گروپوں میں تقسیم کیا گیا، ہر گروپ میں چھ چوہے تھے۔ کاربن ٹیٹرا کلورائیڈ-زیتون کا تیل ماڈلنگ میں لگایا جاتا ہے۔ کنٹرول اور ماڈل گروپس کا علاج خالی جیل پلاسٹر (2 سینٹی میٹر × 2 سینٹی میٹر) سے کیا جاتا ہے، QSZSP کم خوراک والے گروپ کا علاج Qi Sui Zhu Shui پلاسٹر (1 cm × 1 cm) سے کیا جاتا ہے، اور QSZSP ہائی ڈوز گروپ کا علاج Qi سے کیا جاتا ہے۔ سوئی زو شوئی پلاسٹر (2 سینٹی میٹر × 2 سینٹی میٹر)۔ جسمانی وزن اور پیٹ کے فریم میں تبدیلیوں کی پیمائش کی گئی، جگر، گردے اور پیریٹونیم میں ہسٹوپیتھولوجیکل تبدیلیاں ایچ ای سٹیننگ میں دیکھی گئیں، جگر کے فنکشن سے متعلق بائیو کیمیکل انڈیکسز کا پتہ چلا، اور AQP1 اظہار میں تبدیلیاں اور MAPK راستے کو چالو کرنا۔ IHC سٹیننگ اور ویسٹرن بلاٹ میں جگر، گردے اور پیریٹونیل ٹشوز کا جائزہ لیا گیا۔

3. نتائج

کاربن ٹیٹرا کلورائیڈ جگر کے تیل کے انجیکشن کے ایک ہفتے کے بعد، ماڈل گروپ کے چوہوں نے اپنے جسمانی وزن میں آہستہ آہستہ اضافہ کیا، اور ماڈل چوہوں کے پیٹ کا فریم وقت کے ساتھ ساتھ بڑھتا رہا۔ سیرروٹک ایسائٹس ماڈل کی تعمیر کے 16 ہفتوں کے بعد، جگر، گردے، اور پیریٹونیم کو نمایاں طور پر نقصان پہنچا، اور چوہوں میں TBiL، AST، ALT، Cr، BUN، K، Na، اور Ca کے سیرم کی سطح نمایاں طور پر زیادہ تھی ( P < 0۔{3}}01) اور ALB کی سطحیں کنٹرول گروپ کے مقابلے میں نمایاں طور پر کم تھیں (P < 0.001)۔ 4 ہفتوں کے علاج کے بعد، جگر، گردے، اور پیریٹونیل زخموں میں بہتری آئی۔ TBiL, AST, ALT, Cr, BUN, K, Na, اور Ca کی سطحیں نمایاں طور پر کم تھیں (P <0.001) اور ALB کی سطحیں ماڈل گروپ کے مقابلے نمایاں طور پر زیادہ (P <0.001) تھیں۔ AQP1، p-ERK، p-JNK، اور p-p38 کے علاوہ ای پروٹین کا اظہار جگر، گردے اور پیریٹونیم میں روکا ہوا پایا گیا۔

4. نتیجہ

QSZSP جگر، پیریٹونیم، اور گردے میں AQP1 اور MAPK سگنلنگ پاتھ وے کے پروٹین ایکسپریشن کو روکتا ہے تاکہ جگر، گردے، اور سیرروٹک ایسائٹس کی وجہ سے ہونے والی پیریٹونیئل چوٹ کو دور کیا جا سکے، اس طرح پیٹ کے فریم کی غیر معمولی نشوونما کو کم کیا جاتا ہے۔

مطلوبہ الفاظ

AQP1، MAPK سگنلنگ، جگر کی چوٹ، جلودر،Cistanche سپلیمنٹس.

حاصل کرنے کے لیے یہاں کلک کریں۔Cistanche کے فوائد

تعارف

سروسس ایک عام طبی بیماری ہے، جو جگر کے ٹشوز پر مختلف پیتھوجینک عوامل کی مسلسل یا بار بار کارروائی کی وجہ سے ہیپاٹوسیٹس کے انحطاط، نیکروسس، تخلیق نو، اور ریشے دار بافتوں کے پھیلاؤ جیسی پیتھولوجیکل تبدیلیوں کی ایک سیریز کی وجہ سے ہوتی ہے، بنیادی طور پر جگر کے طور پر ظاہر ہوتا ہے۔ فنکشن میں کمی [1]۔ دنیا بھر میں سروسس کا پھیلاؤ نامعلوم ہے۔ ریاستہائے متحدہ میں سروسس کا پھیلاؤ تقریباً 0.15 فیصد –0.27 فیصد ہے [2]۔ 69 فیصد لوگ نہیں جانتے کہ انہیں سروسس ہے، اور ذیابیطس، شراب نوشی، ہیپاٹائٹس سی اور ہیپاٹائٹس بی، مرد ہونا، اور بوڑھا ہونا، یہ سب سروسس سے وابستہ ہیں [3]۔ ایٹولوجی سے قطع نظر، سائروسیس کے 50 فیصد مریضوں میں سیروٹک کارڈیو مایوپیتھی ہو جائے گی [4]۔ ریاستہائے متحدہ کے لئے 2017 کی قومی اہم اعدادوشمار کی رپورٹ میں بتایا گیا ہے کہ تقریبا 4.5 ملین بالغ، یا بالغ آبادی کا 1.8 فیصد، جگر کی دائمی بیماری اور سروسس کا شکار ہیں۔ 41,473 افراد جگر کی دائمی بیماری اور سروسس سے مر گئے [5]۔

جلودر سروسس کا سب سے نمایاں طبی مظہر ہیں۔ یہ پیٹ کی گہا میں غیر معمولی سیال کا جمع ہونا ہے۔ معاوضہ سروسس کے تقریباً 60 فیصد مریضوں میں تشخیص کے 10 سال کے اندر غیر معمولی پیریٹونیل سیال جمع ہونے کی نشوونما ہوتی ہے اور سیرروٹک جلودر کی خراب تشخیص، خاص طور پر ریفریکٹری ایسائٹس، بہت سی مہلک پیچیدگیاں پیدا کر سکتی ہے، جو سروسس کے مریضوں کے معیار زندگی اور بقا کی شرح کو سنجیدگی سے متاثر کرتی ہے۔ [7]۔ جگر کے کینسر کے 90 فیصد کیسز کا تعلق سروسس کی موجودگی سے ہوتا ہے [8]۔

روایتی چینی ادویات (TCM) میں مہلکیت کو روکنے یا تاخیر کا اثر ہوتا ہے اور اس میں زہریلا پن کم ہوتا ہے [9]۔ چینی جڑی بوٹیوں کا طویل مدتی استعمال دائمی ہیپاٹائٹس بی کے مریضوں میں سروسس کے خطرے کو کم کر سکتا ہے [10]۔ Qi Sui Zhu Shui plaster (QSZSP) Radix Astragali، Radix Kansui، Radix Aucklandiae، Poria، Herba Leonuri، Radix Salviae miltiorrhizae، اور Pericarpium Arecae پر مشتمل ہے۔ پچھلے کلینیکل مطالعہ سے پتہ چلتا ہے کہ سیرروٹک ایسائٹس کے مریضوں کے QSZSP کے معاون علاج کے نتیجے میں پیشاب کی پیداوار میں بہتری، 24 گھنٹے پیشاب میں سوڈیم کا اخراج، کریٹینائن میں کمی، اور بلیروبن کی مجموعی سطح، البومن مواد میں اضافہ، QSZSP کے ساتھ 3 ماہ کے مسلسل علاج کے بعد جلودر کی تکرار کی شرح میں بہتری آئی۔ [11]۔ کیو ایس زیڈ ایس پی اور سیرروٹک ایسائٹس پر کچھ مطالعات ہیں۔ کیو ایس زیڈ ایس پی اور جگر کے سائروسیس کے اجزاء پر تحقیق کی تاریخ میں، سیرروٹک جلودر کے بنیادی علاج کے لیے ژاؤژانگ ٹائی محفوظ ہے [12]۔ Salviae miltiorrhizae نمایاں طور پر سروسس اور پورٹل ہائی بلڈ پریشر کو کم کرتا ہے [13]۔ سیروٹک جلودر کے علاج میں QSZSP کے عمل کے ایجنٹوں پر مزید مطالعات کی ضرورت ہے۔

چینل، اور اس کے بعد، CHIP28 کا نام ایکواپورین رکھا گیا [14، 15]۔ تیرہ ایکواپورنز (AQP0-AQP12) کی شناخت کی گئی ہے [16–18]۔ Aquaporins میں تین isoforms ہوتے ہیں۔ پہلی ذیلی قسم صرف پانی کے مالیکیولز کو منتقل کرتی ہے، دوسری ذیلی قسم پانی کے مالیکیولز، یوریا، گلیسرول وغیرہ کو منتقل کرتی ہے، اور تیسری ذیلی قسم توانائی کی کھپت یا ضابطہ [19-21] کے بغیر مسلسل کھلے چینلز کو منتقل کرتی ہے۔ Aquaporin 1 (AQP1) پہلی ذیلی قسم سے تعلق رکھتا ہے، جو کہ ایک ٹیٹرمر کے طور پر موجود ہے اور صرف پانی کے مالیکیولز کو جھلی کے پار منتقل کرنے کی اجازت دیتا ہے، اور یہ ایک آزاد پانی کا چینل ہے [22, 23]۔ جگر، پیریٹونیم، اور گردے قریبی رابطے میں اعضاء ہیں، اور AQP1 جگر، پیریٹونیم، اور گردے میں تقسیم ہوتا ہے [24]۔ انسانی جسم میں پانی کی مقدار جسمانی وزن کا 70 فیصد ہے، اور پیریٹونیئل گہا میں پانی کی غیر معمولی پیداوار-جذب-اخراج جلودر کی تشکیل کا ایک اہم عنصر ہے [19]۔ AQP1 ایکواپورین میں سے ایک ہے جو صرف پانی کے مالیکیولز کی نقل و حمل میں شامل ہے۔ سروسس میں جلودر جگر میں سیال کے بڑھنے کا باعث بنتا ہے، اور اضافی سیال پیریٹونیم میں منتقل ہو جاتا ہے، جو کافی پانی کو دوبارہ جذب نہیں کر پاتا اور بالآخر گردے کے ذریعے پانی کے دوبارہ جذب میں اضافہ ہوتا ہے، اس لیے AQP1 مطالعہ کے لیے ایک اہم انٹرمیڈیٹ ہو سکتا ہے۔ جلودر کا میٹابولزم۔

ابتدائی طور پر، سروسس جگر کے افعال میں کمی اور پیٹ اور چھاتی کی گہاوں میں سیال جمع ہونے میں اضافہ کا باعث بنتا ہے، جس سے جلودر بنتا ہے [25]۔ جلوہ عام طور پر سروسس میں ہوتا ہے [6]۔ جلودر پیٹ کی گہا میں غیر معمولی سیال جمع ہونا ہے [6]۔ سرروٹک جلودر گردے کی خرابی کا باعث بن سکتا ہے [26]۔ پیریفرل آرٹیریل واسوڈیلیشن مفروضے میں، گردہ جلودر کے تمام 5 مراحل میں شامل ہوتا ہے [27]۔ جگر، پیریٹونیم اور گردے میں AQP1 اظہار کو جوڑ کر، ہم سیرروٹک جلودر میں "جگر-پیریٹونیئل-کڈنی" محور تجویز کرتے ہیں اور تجویز کرتے ہیں کہ یہ سیرروٹک جلودر کی تشکیل میں اہم کردار ادا کرتا ہے۔ یہ اطلاع دی گئی ہے کہ AQP1 کو گلیل خلیوں میں MEK1/2 inhibitors کے ذریعہ منظم کیا جاتا ہے [28]۔ پروسٹیٹ کینسر کے خلیوں میں، AQP1 پروٹین ایکسپریشن لیول p38MAPK [29] کے ذریعے ریگولیٹ ہوتے ہیں۔ انسانی pleural mesothelial خلیات میں، peptidoglycan AQP1 پروٹین اظہار کے p38 MAPK ریگولیشن کو روکتا ہے [30]۔ لہذا، MAPK کا راستہ "جگر-پیریٹونیئل-کڈنی" کے محور میں AQP1 تبدیلیوں کی سمت ہو گا۔

سیرروٹک ایسائٹس کے علاج میں QSZSP کے کردار اور AQP1 کے ساتھ اس کے تعلقات کی ابھی تک اطلاع نہیں دی گئی ہے۔ ہم قیاس کرتے ہیں کہ "جگر-پیریٹونیئل-کڈنی" محور پانی کے تحول کا ایک فعال محور ہے جس میں ایکواپورین عام مادی بنیاد ہے، جو پیریٹونیل سیال کی "پیداوار-جذب-خارج" میں شامل ہے اور اس کی تشکیل میں کلیدی کردار ادا کرتا ہے۔ cirrhotic جلودر کی. MAPK پاتھ وے AQP1 کے QSZSP ریگولیشن میں ثالثی کر سکتا ہے۔ لہذا، اس مطالعہ میں، ہم نے QSZSP کے ساتھ وٹرو میں سرروٹک ایسائٹس کے ساتھ چوہوں کا علاج کیا، جگر، گردے، اور پیریٹونیم میں ہسٹوپیتھولوجیکل تبدیلیوں کا مشاہدہ کیا، اور AQP1 اظہار میں تبدیلیوں اور جگر، گردے، اور پیریٹونیل میں MAPK کے راستے کو چالو کرنے کا اندازہ کیا۔ سائروٹک جلودر اور اس کے طریقہ کار کے علاج میں QSZSP کے اثر کو واضح کرنے کے لئے ٹشوز۔

Cistanche اقتباس

مواد اور طریقے

1. ریجنٹس۔

استعمال کیے جانے والے ریجنٹس مندرجہ ذیل ہیں: میکلن سے کاربن ٹیٹرا کلورائیڈ (C805332)، یہائی کیری گولڈن ڈریگن فش سیریلز سے زیتون کا تیل، آئل اینڈ فوڈ اسٹف کمپنی لمیٹڈ (چین)، نیشنل فارماسیوٹیکل گروپ کیمیکل ریجنٹ کمپنی سے زائلین اور مطلق ایتھنول، لمیٹڈ (چین)، سولاربیو (چین) سے eosin (E8090) اور نیوٹرل رال (G8590) اور سروس سے ہیماتوکسیلین (G1004)۔

2. کیوئ سوئی زو شوئی پلاسٹر کا عمل۔

Qi Sui Zhu Shui پلاسٹر Radix Astragali، Radix Kansui، Radix Aucklandiae، Poria، Herba Leonuri، Radix Salviae miltiorrhizae، اور Pericarpium Arecae پر مشتمل ہے۔ مندرجہ بالا سات چینی ادویات "چینی فارماکوپیا" 2010 ایڈیشن کی دفعات کے مطابق، روایتی چینی طب کی گوانگسی یونیورسٹی کے پہلے منسلک ہسپتال سے خریدی گئیں۔

ریڈکس آسٹراگلی، پوریا اور ہربا لیونوری کے ہر 1 گرام میں 12 ملی لیٹر پانی ڈالا جاتا ہے اور اسے 30 منٹ کے لیے بھگو دیا جاتا ہے، پانی کے اخراج کو 3 بار، 1.5 گھنٹے ہر بار دہرایا جاتا ہے، اور عرقوں کو ملا کر فلٹر کیا جاتا ہے۔ . Radix Kansui، Radix Aucklandiae، Radix Salviae miltiorrhizae، اور Pericarpium Arecae کے ہر 1 جی میں 6 ملی لیٹر 85 فیصد ایتھنول شامل کیا جاتا ہے اور 30 ​​منٹ تک بھگو دیا جاتا ہے، پانی کے ریفلوکس نکالنے کو دو بار دہرایا جاتا ہے، ہر بار 1.5 گھنٹہ، اور عرق نکالا جاتا ہے۔ فلٹر مندرجہ بالا دونوں عرقوں کو ملا کر خشک پاؤڈر تیار کرنے کے لیے ویکیوم کے نیچے خشک کیا گیا تھا۔ بیس میں 60 فیصد سوڈیم ایکریلیٹ، 30 فیصد کاربومر، 10 فیصد ایلومینیم گلائسینیٹ، اور 6 گنا گلیسرین شامل ہے۔ دخول بڑھانے والا 50 فیصد ایزون اور 50 فیصد پروپیلین گلائکول پر مشتمل ہے۔ بیس، دخول بڑھانے والا، اور خشک پاؤڈر ملایا جاتا ہے۔ کوٹر (RK-200, Tianjin Ruikang Babu Pharmaceutical Biotechnology Co., Ltd.) QSZSP تیار کرنے والا استعمال کیا جاتا ہے۔ ہائیڈروجیل پیسٹ ایک RK-200 ہائیڈروجل کوٹنگ مشین (تیانجن روئکانگ بابو فارماسیوٹیکل بائیوٹیکنالوجی کمپنی) کے ذریعے تیار کیا جاتا ہے۔ اس پروڈکٹ کی ہر گولی Radix Astragali میں Astragalus methylase (C41H68O14) پر مشتمل ہے، جو 0.6932 mg سے کم نہیں، اور Radix Kansui میں Euphorbia grandis dienol (C30H50O)، 1.4766 mg سے کم نہیں۔

3. جانور۔

تین گورجز یونیورسٹی کے جانور، چوبیس چوہے، نر، جن کا وزن 200∼250 گرام ہے، کو کسی مخصوص پیتھوجین (مخصوص پیتھوجین سے پاک، SPF) کی حالت میں اٹھایا گیا تھا۔ کھانا کھلانے کا ماحول 22-26 ڈگری، رشتہ دار نمی کا 50 فیصد -60 فیصد ہے۔ ماڈلنگ دو ہفتوں میں شروع ہو جائے گی۔ کاربن ٹیٹرا کلورائیڈ-زیتون کا تیل 4:6 کے تناسب میں، 3 ملی لیٹر/کلوگرام جسمانی وزن کی انٹرا پیریٹونیل انجیکشن کی خوراک، اور انجیکشن ہفتے میں دو بار (چار دن اور سات دن) گیارہ ہفتوں کے لیے دیے گئے۔ کنٹرول گروپ کے لیے، زیتون کے تیل کی مساوی مقدار کا ایک آئسوٹونک انٹراپریٹونیل انجکشن دیا گیا تھا۔ وزن اور پیٹ کا فریم ہر انجیکشن سے پہلے ماپا جاتا ہے۔ اس مدت کے دوران، چوہوں کے لیے پینے کے پانی کا 10 فیصد ارتکاز تیار کرنے کے لیے 75 فیصد طبی الکحل کے ساتھ کشید پانی کا استعمال کیا گیا۔ آخر کار، علاج کے چار ہفتوں کے اندر، چوہوں کے جسمانی وزن (ٹیبل 1)، اور پیٹ کا فریم (ٹیبل 2) ہفتے میں دو بار 15 ہفتوں تک ناپا گیا۔

4. علاج اور نمونے لینے.

چوبیس چوہوں کو چار گروپوں میں تقسیم کیا گیا تھا، ہر گروپ میں چھ چوہے، تمام چوہوں کے پیٹ پر ڈیہیئرز تھے، اور ڈیہائرنگ ایریا 3 سینٹی میٹر × 3 سینٹی میٹر تھا۔ کنٹرول گروپ (کون) کو خالی جیل پلاسٹر (2 سینٹی میٹر × 2 سینٹی میٹر) کے ساتھ علاج کیا جاتا ہے؛ ماڈل گروپ (موڈ)، خالی جیل پلاسٹر (2 سینٹی میٹر × 2 سینٹی میٹر)؛ QSZSP کم خوراک والا گروپ، Qi Sui Zhu Shui پلاسٹر (1 cm × 1 cm)؛ اور QSZSP ہائی ڈوز گروپ، Qi Sui Zhu Shui پلاسٹر (2 cm × 2 cm)۔ یہ خستہ حال چوہوں کے پیٹ کی جلد پر دن میں ایک بار 6 گھنٹے کے لیے 4 ہفتوں تک لگائے جاتے تھے۔ کاربن ٹیٹرا کلورائیڈ-زیتون کا تیل ہفتے میں ایک بار پیٹھ میں ذیلی طور پر انجیکشن لگایا جاتا تھا تاکہ سروسس کے الٹ جانے سے بچا جا سکے۔ چار ہفتوں کے بعد، جانوروں کو بے ہوشی اور خون بہنے سے مارا گیا۔ اگر جانور مردہ نہیں تھے، تو جانوروں کو پینٹوباربیٹل سوڈیم کی زیادہ مقدار (100 ملی گرام/کلوگرام) کے ساتھ موت کے لیے بے ہوشی کی گئی تھی۔ بے ہوشی کے بعد، جانور سانس لینے یا دل کی دھڑکن کے بغیر مر گئے۔ فلٹر پیپر کا طریقہ جلوہ حاصل کرنے کے لیے استعمال کیا جاتا ہے۔ پیٹ کی شہ رگ سے خون جمع کیا جاتا ہے اور سینٹرفیوج کیا جاتا ہے، اور سیرم جمع کیا جاتا ہے۔ جگر کے ٹشو، گردے کے ٹشو، اور پیریٹونیل ٹشو کی مناسب مقدار کو 4 فیصد پیرافارمیلڈہائیڈ کے ساتھ کاٹ کر طے کیا جاتا ہے۔ اس کے علاوہ، جگر، پیریٹونیم اور گردے کے ٹشوز کو انتہائی کم درجہ حرارت والے ریفریجریٹر میں −80 ڈگری پر محفوظ کیا گیا تھا۔ چوہوں کے جگر، گردے اور پیریٹونیل ٹشوز کو پانی کی کمی اور موم میں سرایت کر دی گئی تھی۔ حصوں کو −20 ڈگری پر منجمد کیا گیا تھا اور 3 μm کی موٹائی میں کاٹا گیا تھا، حصوں کو پھیلانے کے لیے پانی کے غسل کا استعمال کیا گیا تھا، حصوں کو سلائیڈوں سے جوڑا گیا تھا، اور حصوں کو بیک اپ کے لیے 4 ڈگری پر محفوظ کیا گیا تھا۔

Cistanche پاؤڈر

5. Hematoxylin اور Eosin (HE) سٹیننگ۔

حصوں کو 4 منٹ کے لئے ہیماتوکسیلین محلول میں داغ دیا گیا تھا ، اس کے بعد 2 منٹ اور 15 سیکنڈ کے لئے بہتے ہوئے نل کے پانی سے کللا کیا گیا تھا۔ اس کے بعد حصوں کو 3 منٹ کے لئے eosin محلول کے ساتھ انسداد کیا گیا۔ 30 سیکنڈ کے لیے بالترتیب 80 فیصد اور 95 فیصد ایتھنول کی صفائی کی گئی۔ اس کے بعد حصوں کو زائلین میں 3 سیکنڈ کے لیے صاف کیا گیا اور غیر جانبدار بلسم کے ساتھ نصب کیا گیا۔ داغ لگنے کے بعد، حصوں کو ایک خوردبین کا استعمال کرتے ہوئے دیکھا گیا، اور نمونوں کے متعلقہ حصوں کو جمع کرنے اور ان کا تجزیہ کرنے کے لیے Leica Application Suite کا استعمال کیا گیا۔

6. بائیو کیمیکل تجزیہ۔

سیرم کے نمونوں کو 4 ڈگری پر پگھلنے کے بعد، شینزین مینڈرے BS420 آٹومیٹک بائیو کیمیکل تجزیہ کار کے ذریعے سیرم کے نمونوں کا پتہ لگایا گیا، اور TBiL، AST، ALT، ALB، Cr، BUN، K، Na، اور Ca کی تعداد کا تعین شینزین مائروئی ( شینزین، چین) میچنگ بائیو کیمیکل کٹ۔

7. امیونو ہسٹو کیمیکل سٹیننگ۔

جگر، پیریٹونیم، اور گردے کے ؤتکوں میں AQP1 کے پروٹین اظہار کی جانچ امیونو ہسٹو کیمسٹری کے ذریعے کی گئی۔ سلائیڈوں کو 1 گھنٹے کے لیے 65 ڈگری پر بیک کیا گیا، زائلین میں 30 منٹ تک بھگو دیا گیا، اور گریڈینٹ الکحل میں ہائیڈریٹ کیا گیا۔ 1 mM Tris-EDTA بفر سلوشن (G1203, Servicebio) 125 ڈگری اور 103 kPa پر 18 منٹ کی مرمت کے لیے استعمال کیا گیا، 3 فیصد H2O2 (نیشنل فارماسیوٹیکل گروپ کیمیکل ریجنٹ کمپنی، لمیٹڈ، چین) کے ساتھ 10 منٹ تک انکیوبیٹ کیا گیا۔ 10 فیصد بکرے کا سیرم (SL038، Solarbio) 30 منٹ کے لیے، اور پرائمری اینٹی باڈی AQP1 (PAB45863، Bioswamp) کے ساتھ ٹائٹریٹڈ، peritoneum dilution 1:250، اور جگر اور گردے کی dilution 1:400 راتوں رات 4 ڈگری سینٹی گریڈ پر۔ حصوں کو 4 ڈگری سے کمرے کے درجہ حرارت پر منتقل کیا گیا اور 45 منٹ کے لئے چھوڑ دیا گیا۔ Max Vision TM HRPPolymer اینٹی ریبٹ سیکنڈری اینٹی باڈی (KIT-5020, MXB) کے ساتھ 60 منٹ تک 37 ڈگری پر علاج کیا گیا۔ DAB (DA1010, Solarbio) کے ساتھ علاج کیا جاتا ہے جب تک کہ حصوں کا رنگ تبدیل نہ ہو۔ حصوں کو باری باری بھگو دیں، ہیماتوکسیلین 3 منٹ، 75 فیصد الکوحل 5 منٹ، 85 فیصد الکوحل 5 منٹ، 95 فیصد الکوحل 5 منٹ، 100 فیصد الکوحل 10 منٹ، زائلین 10 منٹ۔ غیر جانبدار رال مہر حصوں. Leica Application Suite امیج سسٹم کا استعمال نمونے کے متعلقہ حصوں کو حاصل کرنے کے لیے کیا گیا تھا۔ نیوکلی ہیماتوکسیلین کے ساتھ نیلے رنگ کے داغے ہوئے تھے، اور DAB نے مثبت بھورا پیلا دکھایا۔

8. مغربی دھبہ۔

جگر، پیریٹونیم، اور گردے کے ٹشوز میں p38، p-p38، ERK1/2، p-ERK1/2، JNK1/2/3، p-JNK1/2/3، اور AQP1 کی پروٹین کی سطحوں کا تجزیہ مغربی بلاٹ کے ذریعے کیا گیا۔ . ٹشو کے نمونوں کو RIPA lysate (R0010، Solarbio) میں یکساں کیا گیا تھا جس میں 4 ڈگری سینٹی گریڈ پر پروٹیز روکنے والا تھا اور 15 منٹ کے لیے 12000 جی پر سینٹرفیوج کیا گیا تھا۔ BCA پروٹین آسے کٹ (PC0020، Solarbio) کا استعمال کرتے ہوئے پروٹین کی حراستی کی پیمائش کی گئی۔ پروٹین (20 ug) کو 12 فیصد سوڈیم ڈوڈیسائل سلفیٹ-پولیاکریلامائڈ جیل الیکٹروفورسس کے ذریعہ الگ کیا گیا تھا اور پولی وینیلائڈین فلورائڈ جھلیوں (IPVH00010، ملی پور) پر منتقل کیا گیا تھا۔ ٹریس بفرڈ نمکین میں کمرے کے درجہ حرارت پر 5 فیصد سکم دودھ کے ساتھ جھلیوں کو بلاک کیا گیا تھا اور p-ERK1/2 (ab214036)، JNK1/2/3 (ab208035)، p-JNK1/2/ کے خلاف بنیادی اینٹی باڈیز کے ساتھ انکیوبیٹ کیا گیا تھا۔ 3 (ab76572)، اور p-p38 (ab47363) Abcam (UK) سے، اور ERK1/2 (MAB37123)، p38 (PAB37381)، AQP1 (PAB45863)، اور GAPDH (PAB36269) Bioswamp (چین) سے، رات 4 بجے ڈگری GAPDH اینٹی باڈی (PAB36269، Bioswamp) کو اندرونی حوالہ کے طور پر منتخب کیا گیا تھا۔ تمام بنیادی اینٹی باڈی کم کرنے کا تناسب 1:1000 ہے۔ اس کے بعد جھلیوں کو ٹریس بفرڈ نمکین سے دھویا گیا اور بکرے کے اینٹی خرگوش IgG سیکنڈری اینٹی باڈی (SAB43714، Bioswamp، 1: 20000) میں کمرے کے درجہ حرارت پر 2 گھنٹے تک انکیوبیٹ کیا گیا۔ اموبلون ویسٹرن ایچ آر پی (WBKLS0500، ملی پور) کا استعمال کرتے ہوئے رنگین رد عمل کے ذریعہ امیونوری ایکٹیویٹی کا تصور کیا گیا۔ جھلیوں کو ایک خودکار کیمیلومینیسینس تجزیہ کار (ٹینن 5200، ٹینن) کے ساتھ اسکین کیا گیا تھا۔

9. شماریاتی تجزیہ۔

شماریاتی تجزیے SPSS 23{1}} سافٹ ویئر کا استعمال کرتے ہوئے کیے گئے۔ تمام اعداد و شمار کو اوسط ± معیاری انحراف (SD) کے طور پر پیش کیا گیا تھا۔ دونوں گروپوں کے درمیان موازنہ آزاد نمونہ ٹی ٹیسٹ کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا تھا۔ ایک طرفہ انووا کا استعمال تین یا زیادہ گروپوں کے درمیان فرق کا موازنہ کرنے کے لیے کیا گیا تھا، اور پوسٹ ہاک فشر کا کم از کم اہم فرق (LSD) ٹیسٹ انفرادی گروپ کے موازنہ کے لیے استعمال کیا گیا تھا۔ P < 0.05 کی قدروں کو شماریاتی لحاظ سے اہم سمجھا جاتا تھا۔

Cistanche کے اثرات

حوالہ جات

[1] D. Schuppan اور NH Afdhal، "Liver cirrhosis،" The Lancet, vol. 371، نمبر 9615، صفحہ 838–851، 2008۔

[2] بی شرما اور ایس جان، ہیپاٹک سروسس۔ StatPearls, StatPearls Publishing LLC., Treasure Island, FL, USA, 2022۔

[3] S. S. Scaglione, S. Kliethermes, G. Cao, et al.، "امریکہ میں سائروسیس کی وبائیات: ایک آبادی پر مبنی مطالعہ،" جرنل آف کلینیکل گیسٹرو اینٹرولوجی، والیم۔ 49، نمبر 8، صفحہ 690–696، 2015۔

[4] LA Lyssy اور MP Soos، Cirrhotic Cardiomyopathy. StatPearls, StatPearls Publishing LLC., Treasure Island, FL, USA, 2022۔

[5] اے شرما اور ایس ناگلی، جگر کی دائمی بیماری۔ StatPearls, StatPearls Publishing LLC., Treasure Island, FL, USA, 2022۔

[6] ایف اے روچلنگ اور آر کے زیٹرمین، "جلدوں کا انتظام،" منشیات، والیم۔ 69، نمبر 13، صفحہ 1739–1760، 2009۔

[7] R. Planas, S. Montoliu, B. Balest´e, et al.، "Cirrhotic ascites کے انتظام کے لیے ہسپتال میں داخل مریضوں کی قدرتی تاریخ،" کلینیکل گیسٹرو اینٹرولوجی اینڈ ہیپاٹولوجی، جلد۔ 4، نہیں 11، صفحہ 1385–1394، 2006۔

[8] A. Zanetto, E. Campello, F. Pelizzaro, and F. Farinati, "Cirrhosis اور hepatocellular carcinoma کے مریضوں میں Hemostatic alterations: لیبارٹری شواہد اور طبی اثرات،" Liver International: بین الاقوامی ایسوسی ایشن فار دی اسٹڈی کا آفیشل جرنل جگر کا، 2022۔

[9] Z. Yi, Q. Jia, Y. Lin, et al.، "نیٹ ورک فارماسولوجی پر مبنی MAPK سگنلنگ پاتھ وے کے ذریعے چوہوں میں گیسٹرک کینسر کے precancerous گھاووں کے علاج میں ایلین گرینولز کا طریقہ کار،" فارماسیوٹیکل بیالوجی، جلد . 60، نمبر 1، صفحہ 87-95، 2022۔

[10] ZJ Hou, JH Zhang, X. Zhang, et al.، "حقیقی دنیا کی ترتیب میں دائمی ہیپاٹائٹس بی کے مریضوں میں سروسس کے واقعات پر NA اینٹی وائرل تھراپی کے ساتھ مل کر طویل مدتی روایتی چینی ادویات: ایک سابقہ ​​مطالعہ،" ثبوت پر مبنی تکمیلی اور متبادل دوائی: eCAM، جلد۔ 2020، آرٹیکل ID 3826857، 8 صفحات، 2020۔

[11] HZ Qiu Hua اور D. Mao، "CiSuiZuShui-Paste کے ساتھ TCM پوائنٹ ایپلی کیشن کے اثرات سروسس کے ریفریکٹری ایسائٹس کے مریضوں میں زندگی کے معیار پر،" چینی جرنل آف انٹیگریٹڈ ٹریڈیشنل چائنیز اینڈ ویسٹرن میڈیسن آن ہاضمہ، جلد۔ 17، نمبر 5، صفحہ 306–309، 2009۔

[12] F. Xing, Y. Tan, G.-J. یان، وغیرہ، "سیروٹک جلودر پر چینی جڑی بوٹیوں کی کیٹپلاسم Xiaozhang ٹائی کے اثرات،" Ethnopharmacology کے جرنل، جلد. 139، نمبر 2، صفحہ 343–349، 2012۔

[13] H. Wang, XP Chen, and FZ Qiu, "Salviae miltiorrhizae cirrhotic چوہوں میں نائٹرک آکسائیڈ کو روک کر سروسس اور پورٹل ہائی بلڈ پریشر کو کم کرتا ہے،" Hepatobiliary and Pancreatic Diseases International: HBPD INT، جلد۔ 2، نہیں 3، صفحہ 391–396، 2003۔

[14] BM Denker, BL Smith, FP Kuhajda, and P. Agre, "Identification, purification, and partial characterization of a novel Mr 28,000 integral membrane protein from erythrocytes and renal tubules," Journal of Biological Chemistry ، جلد۔ 263، نمبر 30، صفحہ 15634–15642، 1988۔

[15] P. Agre, S. Sasaki, and MJ Chrispeels, "Aquaporins: a family of water channel proteins," The American Journal of Physiology, vol. 265، نمبر 3، آرٹیکل ID F461، 1993۔

[16] AS Verkman، MO Anderson، and MC Papadopoulos، "Aquaporins: اہم لیکن پرہیزگار منشیات کے اہداف،" Nature Reviews Drug Discovery، vol. 13، نمبر 4، صفحہ 259–277، 2014۔

[17] Z. Draelos، "Aquaporins: an introduction to a key factor in the mechanism of skin hydration," The Journal of Clinical and aesthetic dermatology, vol. 5، نہیں 7، صفحہ 53–56، 2012۔

[18] AS Verkman، "صرف پانی کے چینلز سے زیادہ: ایکواپورین کے غیر متوقع سیلولر کردار،" جرنل آف سیل سائنس، والیم۔ 118، نمبر 15، صفحہ 3225–3232، 2005۔

[19] M. Suzuki اور S. Tanaka، "فقیرانہ ایکواپورنز کی ساخت اور متنوع افعال،" Seikagaku The-Journal of Japanese Biochemical Society، جلد۔ 86، نہیں 1، صفحہ 41–53، 2014۔

[20] AD سیلز، CH لوبو، AA Carvalho، AA Moura، and APR Rodrigues، "Review Structure, function, and localization of aquaporins: their possible implications on gamete cryopreservation،" Genetics and Molecular Research, vol. 12، نمبر 4، صفحہ 6718–6732، 2013۔

[21] J. وان B¨ulow، "Aquaporins--خلیہ کی جھلی میں پانی کے راستے اور علاج کے اہداف،" Medizinische Monatsschrift fur Pharmazeuten، جلد۔ 36، نمبر 3، صفحہ 86–94، 2013۔

[22] A. یول، "ایکواپورین کے فنکشنل ڈومینز-1: فزیالوجی کی کلیدیں، اور منشیات کی دریافت کے اہداف،" کرنٹ فارماسیوٹیکل ڈیزائن، والیم۔ 13، نمبر 31، صفحہ 3212–3221، 2007۔

[23] جی بنگا، "پہلے دریافت شدہ واٹر چینل پروٹین، جسے بعد میں ایکواپورین 1 کہا جاتا ہے: سالماتی خصوصیات، افعال، اور طبی اثرات،" مالیکیولر اسپیکٹس آف میڈیسن، والیم۔ 33، نمبر 5-6، صفحہ 518–534، 2012۔

[24] MYS Kalani, AS Filippidis, and HL Rekate, "Hydrocephalus and aquaporins: the role of aquaporin-1," Acta Neurochirurgica Supplementum, vol. 113، صفحہ 51–54، 2012۔

[25] NJ شاہ، OY Mousa، K. Syed، اور S. John، Acute on Chronic Liver Failure، StatPearls Publishing LLC., Treasure Island, FL, USA, 2022۔

[26] JS Pedersen, F. Bendtsen, and S. Møller، "Cirrhotic ascites کا انتظام،" دائمی بیماری میں علاج کی پیشرفت، والیوم۔ 6، نمبر 3، صفحہ 124–137، 2015۔

[27] DV Garbuzenko اور NO Arefyev، "Cirrhotic ascites کے مریضوں کے انتظام کے لیے موجودہ نقطہ نظر،" World Journal of Gastroenterology، vol. 25، نمبر 28، صفحہ 3738–3752، 2019۔

رونگ جین ژانگ 1 ین لیو 1 منٹ لی 2 یونگ لن ہوانگ 3 اور ژین ہینگ سانگ 3

1 شعبہ ہیپاٹولوجی، گوانگسی یونیورسٹی آف چائنیز میڈیسن، ناننگ، چین کا پہلا منسلک ہسپتال

2 شعبہ میڈیکل لیبارٹری، چینی طب کی گوانگسی یونیورسٹی کا پہلا منسلک ہسپتال، ناننگ، چین

3 شعبہ ہیپاٹولوجی، گوانگسی یونیورسٹی آف چائنیز میڈیسن، ناننگ، چین