حصہ 2: قدرتی اور مصنوعی چالکنز کی اینٹی کینسر سرگرمی

حصہ 1 حاصل کرنے کے لیے لنک پر کلک کریں:https://www.xjcistanche.com/news/part1-anticancer-activity-of-natural-and-synt-54977104.html

مزید معلومات کے لیے رابطہ کریں۔tina.xiang@wecistanche.com

3. کینسر مخالف سرگرمی

چالکونمشتقات مختلف اہداف پر کام کرتے ہیں، جیسے aromatase، ATP بائنڈنگ کیسٹ ذیلی فیملی G ممبر 2 (ABCG2)، چھاتی کے کینسر سے بچنے والا پروٹین (BCRP)، ایکٹیویٹڈ نیوکلیئر B سیل گروتھ فیکٹر (NF-kB)، ویسکولر اینڈوتھیلیل گروتھ فیکٹر (VEGF)، اور ٹائروسین کناز ریسیپٹرز (ایپیڈرمل گروتھ فیکٹر ریسیپٹر (EGFR) اور mesenchymal-epithelial ٹرانزیشن فیکٹر (MET)، حساس اور تھراپی مزاحم کینسروں میں وٹرو اور ویوو میں اہم سرگرمیاں دکھاتے ہیں [161,162]۔ چالیکونز کی اینٹی پرولیفیریٹو سرگرمی کا ایک اہم طریقہ کار روکنا ہے۔ ٹیوبلین کی اور ان مرکبات کی مائکروٹیوبولس کے ساتھ مداخلت، عناصر جو مائٹوسس اور سیل ریپلیکشن کے عمل میں خلیوں کی شکل اور افعال کو برقرار رکھنے کے لیے ضروری ہیں۔apoptosis. چالکون مالیکیولز میں ٹرائیمیتھوکسیفینائل کی باقیات کی موجودگی ان مرکبات کی ناقابل واپسی اینٹی مائٹوٹک سرگرمی کے لیے سازگار ہے، جو مائیکل قسم کے اضافی رد عمل کے ذریعے ٹیوبلین میں سیسٹین کی باقیات کے ساتھ تعامل کرنے کی صلاحیت رکھتے ہیں [163]۔ مزید برآں، چالکونز میں ٹرائیمیتھوکسیفینائل کی باقیات کو کوئنولین یا کوئنازولین سے تبدیل کرنا اینٹی ٹیوبلین سرگرمی کے لیے سازگار ہے۔ یہ heterocyclic chalcones باقی Cys241 کے ساتھ ہائیڈروجن بانڈز بناتے ہیں اور کولچیسین بائنڈنگ سائٹ سے مضبوطی سے جڑ جاتے ہیں (combretastatin A-4، Figure7 کی طرح) [164,165]۔

3.1 کینسر مخالف خصوصیات کے ساتھ قدرتی چالکونز 3.1.1.Licochalcones (AD)

Glycyrrhiza کی کچھ پرجاتیوں کی جڑیں اور rhizomes روایتی ادویات میں معدے کے السر، دمہ اور سوزش کے علاج کے لیے استعمال ہوتے ہیں۔ لیکوریس سے 600 سے زیادہ مرکبات کو الگ تھلگ کیا گیا ہے، جس میں اہم حیاتیاتی طور پر فعال اجزاء سیپونین ہیں اورflavonoids. flavonoids کے درمیان، retrochalcones، licochalcones A، B، C، D، E، اور G، اور اسکیمیٹائز کی ایک سیریز کی نشاندہی کی گئی۔ لیکورائس ایکٹیو کمپاؤنڈز کے حیاتیاتی اثرات پر متعدد مطالعات ہیں، جن میں سب سے اہم ہے۔غیر سوزشی، antimicrobial، antioxidant، antiulcer، cytoprotective، اور cytotoxic خصوصیات [166,167]۔

3.1.2 Licochalcon A

Licochalcone A (LA, Tables S1, and S2, Compound 1) Glycyrrhiza urakensis, G.glabra, اور G.inflata (Fabaceae) سے الگ تھلگ ایک فلاوونائڈ ہے۔ اس کے پاس ہے۔اینٹیٹیمر, سوزش مخالف، antimicrobial، antiparasitic، مخالف موٹاپا، antioxidant، and antiosteoporotic خصوصیات،اینٹی کینسرکینسر کے خلیات کی مختلف اقسام کے لیے ایل اے کا اثر ظاہر کیا گیا ہے، بشمول گیسٹرک کینسر کے خلیات BCG-823، HepG2، OVCAR-3، اور SK-OV-3 (ڈمبگرنتی کینسر کے خلیات) MCF{{ 5}}، اور A549 [168-171]۔ مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ ایل اے U87 گلیوما خلیوں، ناسوفرینجیل کینسر کے خلیات، اپکلا ڈمبگرنتی کارسنوما خلیات، اور مثانے کے کینسر کے خلیوں کے اپوپٹوسس کو اکساتا ہے۔ چالکون میں آٹوفیجی کو بڑھانے اور چھاتی کے کینسر کے خلیوں میں سیل سائیکل کو روکنے کی صلاحیت بھی ہے۔ اس کے علاوہ، یہ چھاتی کے کینسر [172] میں مخصوص پروٹین 1 کو دبا کر اپوپٹوس کو اکساتا ہے۔ ایل اے میں برانن پھیپھڑوں کے فبروبلاسٹ خلیوں پر سائٹوٹوکسیٹی کم ہے۔ اس کے علاوہ، اس میں ٹیومر کی نشوونما کو روکنے اور cis-Platinum-induced toxicity[173] کو کم کرنے کی صلاحیت ہے۔ میکانزم جس کے ذریعے فلیوونائڈز اینٹی کینسر ایجنٹ کے طور پر کام کرتے ہیں ان میں گیسٹرک کینسر میں ہیکسوکینیز-2-ثالثی ٹیومر گلائکولائسز کو دبا کر اکٹ کی سرگرمی کو روکنا، میٹالوپروٹینیز 2 اظہار کی کمی اور منہ کے کینسر کے خلیوں میں اپوپٹوس کی شمولیت، miR کی صلاحیت میں اضافہ{16} شامل ہیں۔ اینڈوپلاسمک ریٹیکولم میں تناؤ پیدا کرنے اور انسانی پھیپھڑوں کے خلیوں میں اپوپٹوس کو دلانے کے لیے، PI3K/Akt/mTor ایکٹیویشن میں کمی اور چھاتی کے کینسر میں آٹوفجی میں کمی، سیل سائیکل کے G2/M مرحلے کو روکنا، MEK/ERKand کے ذریعے سیل کے حملے کو دبانا۔ انسانی گلیوما خلیوں میں ADAM9 سگنلنگ راستے، اور انسانی جگر کے خلیوں میں کیسپیس پر منحصر اپوپٹوس دلانا [174]۔ ایک اور طریقہ کار جس کے ذریعہ LA ایک مضبوط سائٹوٹوکسک اثر کو ظاہر کرتا ہے وہ ہے ROS-حوصلہ افزائی apoptosis۔ مثال کے طور پر، چالکون آکسیڈیٹیو تناؤ کو اکساتا ہے اور اس کے نتیجے میں، مائٹوکونڈریل پر منحصر راستوں کے ذریعے اور اینڈوپلاسمک ریٹیکولم [175] میں آکسیڈیٹیو عمل کو شامل کرکے T24 خلیات (انسانی پیشاب کے مثانے کے کارسنوما سے اخذ کردہ سیل لائنز) کے اپوپٹوسس کو جنم دیتا ہے۔ LA کی cytotoxicity اور genotoxicity پر ایک اور مطالعہ Bortolotto et al نے تیار کیا تھا۔ ایل اے کا موازنہ ٹرانس چالکون (ٹیبلز S1 اور S2، کمپاؤنڈ 2) سے کیا گیا۔ MCF-7 اور 3T3 (ایمبریونک فائبروبلاسٹ سیل لائنوں) پر قدرتی چالکونز (LA اور trans-chalcone) کی سائٹوٹوکسیٹی کا تعین 24 اور 48 گھنٹے پر کیا گیا تھا۔ نتائج 48 گھنٹے علاج کے بعد سائٹوٹوکسک سرگرمی کی نشاندہی کرتے ہیں۔ ایک cytotoxicity MTT(3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyl tetrazolium bromide) پرکھ نے MCF پر خوراک پر منحصر ردعمل ظاہر کیا۔ {45}} خلیات ٹرانس چالکون اور LA کے ساتھ علاج کیے گئے۔ تجزیہ کردہ مرکبات کے لیے، 3T3 خلیوں کے مقابلے MCF-7 خلیات پر جینوٹوکسٹی بہتر پائی گئی۔ ڈی این اے کی تحریف کا سبب بنتا ہے۔قوت مدافعتتباہ شدہ خلیات کو ختم کرنے کے لیے چالو کرنا۔ تاہم، تنزلی ڈی این اے خلیات کو کم کرنے کے لیے مدافعتی نظام کو فعال کرنا ایک دائمی سوزش کے عمل میں حصہ ڈالتا ہے۔ مزید برآں، انحطاط شدہ ڈی این اے کے لیے سیلولر ردعمل کو اندرونی اپوپٹوٹک پاتھ وے کو شامل کرکے درست کیا جا سکتا ہے۔ G1 مرحلہ ایک ایسی حالت ہے جو ڈی این اے کی نقل سے پہلے ہوتی ہے، جس میں سیلولر حالات (میٹابولزم، سگنلنگ، اور سیل کا سائز) جیسے عوامل سیل سائیکل کی ترقی کو متاثر کرتے ہیں، جس کی وجہ سے DNA خلیوں میں دوبارہ تعمیر ہوتا ہے یا LA کے apoptosis.IC50 کے عمل کو شروع کرتا ہے۔ 60.46 یو ایم ہے۔ ٹرانس چالکون G1 مرحلے میں سیل سائیکل ناکہ بندی کو اکساتا ہے اور سیلولر اپوپٹوس کو تیز کرتا ہے۔ یہ تجویز کیا گیا ہے کہ ایل اے اور ٹرانس چالکون کے ساتھ علاج مائٹوکونڈریل پاتھ وے کے ذریعے اپوپٹوس کو اکساتا ہے، اس بات پر غور کرتے ہوئے کہ اس راستے کے اہم جینز کی شمولیت 24 گھنٹے کے بعد ہوتی ہے، جیسے کہ پروٹین اپوپٹوس کا پروٹیز ایکٹیویٹر فیکٹر 1 اور Bcl{{ سے وابستہ پروٹین X۔ 9}}۔ اگرچہ MCF-7 سیل لائنوں میں کیسپیس 3 کی کمی کے بارے میں جانا جاتا ہے، لیکن ایک مطالعہ سے پتہ چلتا ہے کہ ان چالکونز کے ساتھ علاج پولی (ADP-ribose) پولیمریز (PARP) کے کلیویج کو متاثر کرتا ہے، ایک پولیمریز جس کے دو ٹکڑوں میں کلیویج ایک اشارے ہے۔ apoptosis کے. جبر

تجرباتی PCR تجزیہ میں Bcl-2 جین کے ذریعے LA اور ٹرانس چالکون نے دکھایا، پروٹین کی سطح پر، MCF-7 خلیوں کے لیے خوراک پر منحصر انتظامیہ اور ایک اندرونی راستے کی ثالثی۔ Cyclin D1 ایک اور پروٹین ہے جو MCF-7 سیل لائنوں پر چالکونز کی موجودگی میں دبایا جاتا ہے۔ یہ پروٹین G1 سے S مرحلے تک بڑھنے کے لیے اہم ہے اور چھاتی کے کینسر سمیت کچھ کینسروں کے لیے ایک اہم بائیو مارکر ہے۔ ان وجوہات کی بناء پر، سائکلن ڈی 1 انحطاط نئے اینٹیٹیمر ایجنٹوں کی شناخت کے لیے ایک پرکشش ہدف ہے اور اس کا تعلق سیل سائیکل بلاکیڈ [176] سے ہے۔

Qui et al. وٹرو میں پھیپھڑوں کے کینسر کے خلیوں پر ایل اے کے اثر کا بھی جائزہ لیا۔ فلاوونائڈ کے علاج سے A549 اور H460 خلیات (انسانی نان سمال سیل پھیپھڑوں کا کارسنوما) کی قابل عملیت میں نمایاں کمی واقع ہوئی، یہ تبدیلی خوراک سے سخت متاثر ہوتی ہے۔ کل 40 μM لیکوچلکون پھیپھڑوں کے کینسر کے خلیوں کی نشوونما کو 45-80 فیصد تک روکتا ہے۔ علاج کے 24 یا 48 گھنٹے کے بعد۔ اس کے علاوہ، مرکب عام انسانی پھیپھڑوں کے اپکلا خلیوں پر کم سائٹوٹوکسیٹی کو ظاہر کرتا ہے۔ اس بات کو اجاگر کرنے کے لیے کہ آیا LA کے ذریعے پھیپھڑوں کے کینسر کے خلیوں کی نشوونما کو روکنے کا ایک طریقہ سیل سائیکل بلاکیڈ ہے، سیل لائنوں کا علاج مختلف طریقوں سے کیا گیا تھا۔ 16 گھنٹے کے لیے مرکب کی ارتکاز پھر سیل سائیکل کا بہاؤ سائٹومیٹری کے ذریعے تجزیہ کیا گیا۔ نتائج ظاہر کرتے ہیں کہ خوراک کے لحاظ سے، چالکون A549 اور H460 خلیوں پر G2/M مرحلے کو روکتا ہے۔ /propidium iodide Colorimetric طریقہ۔ نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ LA-علاج شدہ گروپ میں apoptotic خلیات جمع ہیں، جو استعمال شدہ ارتکاز پر منحصر ہے۔ اس کے علاوہ، پروٹین کی سطح apoptosis کے ساتھ iated کی جانچ مغربی دھبے کے طریقہ سے کی گئی۔ کلیویڈ PARP اور کلیویڈ کیسپیس 3 کی سطحیں بلند ہو جاتی ہیں، اور پری کیسپیس 3 اینٹی پوپٹوٹک پروٹین، PARP، Bcl-xL، اور Bcl-2 میں چالکون کے علاج کے بعد 20 گھنٹے کی کمی واقع ہوتی ہے۔ یہ نتائج بتاتے ہیں کہ LA-حوصلہ افزائی apoptosis PARP/Bcl-2 راستے سے وابستہ ہے[177]۔ مالیکیولر ماڈلز نے ظاہر کیا کہ LA کو EGFR کی ATP بائنڈنگ جیبوں میں بند کیا گیا تھا، بشمول exon 19 ڈیلیٹ میوٹیشن، L858R سنگل سائٹ میوٹیشن، L858R/T790M ڈبل میوٹیشن، اور جنگلی قسم۔ L858R/790M اتپریورتنوں میں، LA میں کیشن-II تعامل کے ذریعے Lys745 کے ساتھ تعامل کرنے کی صلاحیت ہے۔ Met793، Lvs745، اور Asp 855 پر WT EGFRand licochalcone کے درمیان ہائیڈروجن بانڈز بنتے ہیں۔ Exon 19 ڈیلیٹ جیب کی شکل کو تبدیل کرنے کی صلاحیت رکھتا ہے جس میں licochalcone کے ساتھ تعامل کو سمجھا جاتا ہے، Met793، G793 اور G792 کے ساتھ ہائیڈروجن بانڈز بنتے ہیں۔ . ایل اے کے سلیکو تجزیوں میں حاصل کردہ ڈیٹا مختلف قسم کے تغیرات [178] پر نئے، منتخب EGFR روکنے والوں کی شناخت کے لیے ایک اہم نکتہ ہے۔

مزید معلومات حاصل کرنے کے لیے کلک کریں۔ استثنیٰ پر

3.1.3 لیکوچلکون بی

اینٹی کینسرlicochalcone B (LB، Tables S1، اور S2، کمپاؤنڈ 3) کے اثرات مختلف سیل لائنوں پر تجزیہ کے ذریعے ظاہر کیے گئے، بشمول مثانے کے کینسر T24 اور EJ، منہ کے کینسر کے خلیات HN22 اور HSC4، MCF-7، A375 سے انسانی خلیات۔ (ایک انسانی میلانوما سیل لائن)، اور A431 (اسکواومس سیل کارسنوما)۔ مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ LB کینسر کے خلیوں کی نشوونما کو متاثر کرتا ہے، میٹاسٹیسیس کی تشکیل کو روکتا ہے، سیل سائیکل کو روکتا ہے، اور apoptosis کو اکساتا ہے[161]۔ Kang et al. نے مالیکیولر میکانزم کی تحقیقات کی جس کے ذریعے LB انسانی میلانوما میں apoptosis اور squamous cell carcinomas کے خلیوں کو اکساتا ہے۔ Licochalcone کو اندرونی اور بیرونی دونوں راستوں سے A375 اور A431 خلیوں کے apoptosis کو اکسانے کے لیے دکھایا گیا ہے۔ ٹرپین بلیو سٹیننگ کے ساتھ چالکون کے اینٹی پرولیفیریٹو اثر کی جانچ کرنے کی صورت میں، یہ دیکھا گیا کہ ایل بی سیل کی قابل عملیت میں نمایاں کمی لاتا ہے، یہ کمی ارتکاز کے ساتھ منسلک ہے ایل بی کے اضافے کے بعد، سیل کی خصوصیات میں نمایاں تبدیلیاں دیکھی گئیں، بشمول خلیے کا سنکچن، خلیے کی جھلیوں کا ٹوٹنا، اور بکھرے ہوئے نیوکلئس خلیوں کے فیصد میں اضافہ۔ پری جی1-فیز سیلز اور اپوپٹوٹک سیلز کی فیصد میں اضافہ بھی نوٹ کیا گیا [38]۔ ایک اور تحقیق سے پتہ چلتا ہے کہ LB G2/M فیز میں سیل سائیکل کو نمایاں طور پر بلاک کرتا ہے HepG2-قسم کے کینسر سیل لائنوں کی صورت میں، اور مثانے اور چھاتی کے ٹیومر سیلز کی صورت میں، کمپاؤنڈ بلاکس S فیز [179]۔ سونگ وغیرہ نے JAK2-قسم کے غذائی نالی کے کارسنوما اسکواومس خلیوں کی نشوونما پر LB کے دبانے والے اثر کو اجاگر کیا۔ ڈاکنگ اسٹڈیز آٹوڈاک وینا سافٹ ویئر کے ساتھ کی گئیں، جو بائنڈنگ موڈ کی پیشن گوئی کرنے کے لیے استعمال ہوتی تھیں۔ روک تھام کی صلاحیت کے ساتھ JAK2 ریسیپٹر کی ساخت پروٹین ڈیٹا بینک (PDB اندراج 2B7A، باقیات 840-1.132) میں دستیاب ہے۔ IAK2 ایک اہم کردار ادا کرتا ہے، سائٹوکائن سگنلنگ کا انٹرا سیلولر ثالث ہونے کے ناطے، اور JAK خاندان کا ٹائروسین کناز پروٹین ہے۔ ATP مضبوطی سے پابند ہے۔

میگنیشیم آئنز ٹائروسین کنیز کے کیٹلیٹک ڈومین میں۔ ڈاکنگ پیرامیٹر میں، تفتیش شدہ جگہ کے سائز میں ATP بائنڈنگ سائٹ شامل ہے جس کی خصوصیات باقیات 855-863 اور 822 ہے، جہاں ATP کا حساب مختلف ممکنہ JAK2 روکنے والوں کے ساتھ کیا گیا تھا۔ پیشین گوئیوں میں، ایل بی لیگنڈ مارون اسکیچ سافٹ ویئر کے ساتھ بنایا گیا تھا۔ ڈاکنگ کے بعد، بہترین تین ممکنہ بائنڈنگ ویریئنٹس اکٹھے کیے گئے، جن میں ایک جیسی وابستگی ہے۔ JAK2[180,181] پر ATP بائنڈنگ جیب کے ساتھ LB کے تعامل کے حوالے سے پیشین گوئیوں کے نتائج سازگار تھے۔

3.1.4.لیکوچلکون سی

Licochalcone C (LC، Tables S1، اور S2، مرکب 4) monocyte سیل لائنوں پر سوزش کے ردعمل کو کم کرنے کے لیے جانا جاتا ہے۔ یہ iNOS اظہار میں کمی اور سپر آکسائیڈ خارج کرنے، کیٹالیس، اور گلوٹاتھیون پیرو آکسیڈیس کے اینٹی آکسیڈینٹ نیٹ ورک کی سرگرمی کی بحالی کی وجہ سے ہے۔ Kwak et al. ROS، c-Jun NH2 ٹرمینل kinase (INK)، اور p38mitogen-activated protein kinase (MAPK) کے درمیان تعلق کو بیان کرنے کے لیے ایک مطالعہ کیا اور KYSE 30 اور KYSE450 غذائی نالی کے کینسر سیل لائنوں پر apoptosis کو شامل کرنے میں LC کے اثرات کو قائم کیا۔ پچھلے مطالعات نے 24 گھنٹے کے بعد LC ٹریٹمنٹ (45 ug/mL) کے لیے IC50 اقدار کا تعین کیا ہے تاکہ A549، MCF-7، اور T24 سیل لائنوں کے پھیلاؤ کو روکا جا سکے۔ تین سیل لائنوں کے لئے 40,47 اور 68 فیصد کی روک تھام حاصل کی گئی۔ Kwak et al. غذائی نالی کے کینسر کے خلیوں کے پھیلاؤ کی وٹرو روک تھام میں خوراک اور وقت پر منحصر ہے۔ تجزیہ کردہ پانچ سیل اقسام میں سے، KYSE30 اور KYSE450، جن میں عام جینیاتی مدد ہے، کا LC علاج کے لیے ایک جیسا ردعمل تھا۔ نرم آگر میں اینکریج سے آزاد نمو کے تجزیہ میں، نتائج KYSE30 اور KYSE450 خلیوں کی کالونیاں بنانے کی صلاحیت میں نمایاں کمی کی نشاندہی کرتے ہیں۔ ارتکاز پر منحصر ہے، چالیکونز نے دونوں سیل لائنوں میں اپوپٹوسس کی حوصلہ افزائی کی۔ کمپاؤنڈ نے p24 اور p27 (سیل سائیکل کے G1 اور S مراحل میں منفی ٹرانزیشن ریگولیٹرز) کے اوپر کی طرف ریگولیشن کو بھی آمادہ کیا اور ڈاؤن اسٹریم سائیکلن D. LC کو ریگولیٹ کیا جس نے KYSE30 اور KYSE450 سیلوں میں ROS جنریشن میں بھی اضافہ کیا۔ ROS mitogen-activated protein kinase (MAPK) کے راستے کو چالو کرتا ہے اور حوصلہ افزائی کرتا ہے۔سیل apoptosis. اس کے علاوہ، کمپاؤنڈ نے JNK، c-Jun، اور p38 فاسفوریلیشن کی سطح میں اضافہ کیا اور اپوپٹوٹک راستے کو چالو کیا [182]۔ سونگ ایٹ ال کے ڈاکنگ اسٹڈی کی طرح۔ LB[180] کے لیے، Oh et al. نے LC اور انسانی JAK2 خلیات کے درمیان پابند تعاملات کو نمایاں کیا۔ ڈاکنگ سمولیشن آٹوڈاک وینا کا استعمال کرتے ہوئے کی گئی۔ ڈاکنگ اسٹڈی شروع کرنے کے لیے، JAK2 ریسیپٹر کا ڈھانچہ، جسے ایکسرے کے تجربے سے حل کیا گیا تھا، پروٹین ڈیٹا بینک (PDB انٹری 2B7A) سے حاصل کیا گیا تھا۔ LC ligand کی ساخت مارون Sketch سافٹ ویئر کے ذریعہ تیار کی گئی تھی اور Chimera سافٹ ویئر کے ذریعہ اسے بہتر بنایا گیا تھا۔ JAK2 کی اتپریرک سائٹ کو قبضے کے علاقے (اوشیشوں 929-935)، ایک DFGloop (اوشیشوں 994-996)، اور ایک Ploop (اوشیشوں 858-865) سے منسلک کیا گیا تھا۔ ATP کی پہچان کے لیے لوپ کی شکل کا قبضہ کا علاقہ ضروری ہے اور مادوں کے ساتھ ہائیڈروجن بانڈ بناتا ہے۔ DFGloop میں تین امینو ایسڈ (aspartic acid، phenylalanine، اور glycine) ہوتے ہیں اور اس کا تعلق کیٹلیٹک فاسفوریلیشن کے لیے درکار دھات کے بائنڈنگ سے ہوتا ہے۔ Ploop ligands کے ساتھ تعامل کو مستحکم کرنے اور تشکیل دینے کے لیے مفید ہے۔ جیسا کہ دیکھا جا سکتا ہے، ممکنہ پابندی کی پیشین گوئی تین فعال جگہوں پر کی گئی تھی۔ ڈاکنگ کے مطالعہ سے پتہ چلتا ہے کہ LC ATP بائنڈنگ سائٹ کے ساتھ JAK2 سے تعامل کرتا ہے اور اشارہ کیا کہ JAK2 اس کا براہ راست ہدف ہے۔ چلکون نے P-JAK2 [183,184] کی ATP جیب سے منسلک ہوکر JAK2 آٹو فاسفوریلیشن کو بھی دبا دیا۔

3.1.5 لیکوچلکون ڈی

Licochalcone D(LD, Tables S1, and S2, Compound 5) ایک فعال فلیوونائڈ ہے جو گلیسریزا انفلاٹا سے الگ تھلگ ہے۔ حساس اور گیفٹینیب مزاحم انسانی خلیات کا استعمال کرتے ہوئے پھیپھڑوں کے کینسر کے خلیات (EGFR اور MET) کے دو اہداف کے ذریعے سیل کے پھیلاؤ کو روکنے کے لیے LD کی صلاحیت کا جائزہ لینے کے لیے ایک مطالعہ کیا گیا۔ ای جی ایف آر اور ایم ای ٹی پر چلکون کے براہ راست پابند ہونے کو سمجھنے کے لیے، گیفٹینیب-حساس سیل لائنز (HCC827) اور گیفٹینیب-ریزسٹنٹ سیل لائنز (HCC827GR) استعمال کیے گئے تھے۔ تشخیص کے نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ flavonoid دو ریسیپٹرز سے منسلک ہوتا ہے، EGFR اور MET kinases کی سرگرمی کو ATP کے مسابقتی روکنے والے کے طور پر دباتا ہے۔ ای جی ایف آر کمپلیکس میں، چالکون کے پاس دو ہائیڈروجن بانڈز ہوتے ہیں جو Met793 کے ذریعہ DFG لوپ میں Asp855 کے مرکزی نقطہ اور پس منظر کے کونے کے طور پر بنائے جاتے ہیں۔{10}Hydroxy-3-(3-methyl but{{13} }enyl)فینائل گروپ اور 3،4-ڈائی ہائیڈروکسی-2-میتھوکسی فینائل گروپ ایک ہی جہاز پر فکس ہیں اور ہائیڈروفوبک باقیات Leu718, Val726, اور Ala743 of P loop اور Leu 844 کے درمیان بلاک ہیں۔ میٹ کمپلیکس میں، کیٹو

چالکون کا گروپ Met1160 کے ساتھ ایک ہائیڈروجن بانڈ بناتا ہے۔ Tyr1159 مرکزی نقطہ کے طور پر اور Ploop کے le1084، Vall092، Ala1108، اور Lys1110 کو اسی طرح ایک ٹوپی سے ڈھانپ دیا گیا تھا۔ Luis کو Met1160 کے مرکزی نقطہ اور Leu1140، Met1211، اور ALA1221 کے نچلے ATP پاکٹ کی سائیڈ ہائیڈروفوبک زنجیروں سے بھی مضبوطی سے تعاون حاصل ہے۔ EGFR بائنڈنگ پوزیشن MET بائنڈنگ پوزیشن سے ملتے جلتے ہیں، جو ہائیڈروجن بانڈز اور ہائیڈروفوبک تعامل کی تشکیل کرتی ہے۔ Chalcone دو ریسیپٹرز کے لیے بائنڈنگ ریجن میں یکساں طور پر واقع ہے۔ کمپلیکس کے استحکام کو ہائیڈروفوبک تعامل کے ذریعہ بڑھایا جاسکتا ہے۔ پیش گوئی شدہ نتائج کا تجرباتی اعداد و شمار کے ساتھ موازنہ کیا گیا، جس سے یہ ظاہر ہوتا ہے کہ فلاوونائڈ مسابقتی طور پر دو رسیپٹرز کو روکتا ہے [185]۔

3.1.6 Xanthohumol

پرینائل چالکونز، ان کے ساختی تنوع کی وجہ سے، مختلف حیاتیاتی خصوصیات رکھتے ہیں، بشمول سوزش، اینٹی کینسر، اور antimutagenic سرگرمیاں [186]۔ مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ پرینیل گروپوں کے ساتھ قدرتی چالکونز p53 کے ساتھ مداخلت کرنے کی صلاحیت رکھتے ہیں۔ مثال کے طور پر، A549 خلیوں کا پرینائل چالکون xanthohumol (XN، Tables S1، اور S2، کمپاؤنڈ 6) کے ساتھ علاج اپوپٹوٹک سیل کی موت کو آمادہ کرتا ہے اور G1 مرحلے میں سیل سائیکل کو روکتا ہے۔ یہ سرگرمیاں سیل سائیکل سے p53 اور p21 کے اپ گریجشن اور سائکلن D1 کی کمی کی وجہ سے ہیں۔ اپوپٹوسس کیسپیس 3 [187] کے ایکٹیویشن سے ہوتا ہے۔

XN((3'-(3,3-dimethylallyl)-2',A',4-trihydroxy-6'methoxychalcone) سب سے زیادہ وافر مقدار میں پہلے سے تیار شدہ فلاوونائڈ ہے ({{7) }}۔flavonoidsجہاں یہ 0.96 mg/L سے زیادہ ارتکاز میں موجود ہے۔ اپنی منفرد حیاتیاتی سرگرمیوں اور صحت پر اس کے سازگار اثرات کی وجہ سے، حال ہی میں پرینیلچلکون کا وسیع پیمانے پر مطالعہ کیا گیا ہے [188]۔ اس کمپاؤنڈ میں علاج کی حفاظت اور مختلف حیاتیاتی سرگرمیاں ہیں، بشمول انسداد کینسر، اینٹی ذیابیطس، اینٹی سوزش، اینٹی آکسیڈینٹ، اور اینٹی بیکٹیریل خصوصیات۔ حالیہ برسوں میں، مطالعات کی بڑھتی ہوئی تعداد نے پھیپھڑوں کے کینسر، ہیپاٹو سیلولر کارسنوما، چھاتی کا کینسر، لیوکیمیا، پروسٹیٹ کینسر، لبلبے کا کینسر، بڑی آنت کا کینسر، لبلبے کا کینسر، اور گلیوبلاسٹوما کینسر میں XN کی اینٹی کینسر سرگرمی کا ایک وسیع میدان عمل ظاہر کیا ہے۔ کینسر کے خلیات کا ایکس این این میں ایکسپوژر ان کے پھیلاؤ، ہجرت، اور حملے کو روکتا ہے اور آٹوفجی کو ماڈیول کرتا ہے۔ چالکون میں اپوپٹوس کو دلانے اور سیل سائیکل [189-193] کو روکنے کی صلاحیت بھی ہے۔ اس کے علاوہ، چالکون کیسپیس سرگرمی پر منحصر اور آزادانہ طور پر اپوپٹوس کو اکساتا ہے اور کینسر کے خلیوں کے حملے اور انجیوجینیسیس [194] کو روکتا ہے۔ اس کی سوزش، اینٹی آکسیڈینٹ، اور کینسر مخالف خصوصیات مرکب کے کیموپریوینٹیو اثر سے منسلک ہیں [195]۔ Prenylchalcone کو 8-prenylnaringenin میں بھی میٹابولائز کیا جاتا ہے، جو کہ آج تک کا سب سے طاقتور فائٹوسٹروجن ہے [196]۔

اکٹ (جسے پروٹین کناز بی یا پی کے بی بھی کہا جاتا ہے) ایک مخصوص سیرین/تھریونائن-پروٹین کناز ہے اور سیلولر سگنلنگ پاتھ ویز میں ایک اہم نقطہ ہے۔ اکٹ کی سرگرمی کئی قسم کے کینسروں میں تبدیل ہوتی ہے اور مختلف حیاتیاتی عمل میں شامل ہوتی ہے، بشمول سیل کے پھیلاؤ، اپوپٹوسس، نقل، نقل مکانی، اور حملہ۔ اکٹ سے منسلک ہونے کی XN کی صلاحیت کی تصدیق کرنے کے لیے، Schrodinger Suite 2015 سافٹ ویئر کا استعمال کرتے ہوئے ان سلیکو ڈاکنگ اسٹڈی کی گئی۔ پانی کے مالیکیولز کو ہٹا دیا گیا، اور ہائیڈروجن ایٹموں کے لیے پی ایچ 7 سمجھا گیا۔ ڈاکنگ اسٹڈی کے لیے اے ٹی پی بائنڈنگ سائٹ تیار کی گئی۔ XN کو LigPrep پروگرام کا استعمال کرتے ہوئے پیرامیٹرز کی غیر موجودگی میں ڈاکنگ کے لیے تیار کیا گیا تھا۔ اس کے بعد، بہترین ساختی نمائندگی حاصل کرنے کے لیے Glide پروگرام کے ساتھ اضافی درستگی کا طریقہ استعمال کرتے ہوئے، Aktl اور Akt2 کے ساتھ XN کی ڈاکنگ اسٹڈیز غیر حاضر پیرامیٹرز کے ساتھ تھیں۔ ڈاکنگ اسٹڈی کے نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ XN Ala230، Glu228، Glu234، اور Lys158 کے ساتھ اور Akt2 کے Glu236، Thr213، اور Lvs181 کے ساتھ ہائیڈروجن بانڈ بناتا ہے۔ زینوگرافٹ (PDX) ماڈلز کی شناخت بنیادی تحقیقی مطالعات کو کلینیکل ایپلی کیشنز میں ترجمہ کرنے کے لیے کی گئی تھی۔ بڑھتی ہوئی حد تک، عطیہ کرنے والے مریضوں کی حیاتیاتی اور جینیاتی خصوصیات کو PDX ماڈلز کے ذریعے محفوظ سمجھا جاتا ہے، جو سیل لائن پر مبنی ماڈلز کے مقابلے میں بڑا فائدہ ہے۔ PDX ماڈل بائیو مارکر کا تجزیہ کرنے اور کلینیکل ٹرائلز میں XN تھراپی کے ردعمل کی پیش گوئی کرنے کے لیے استعمال کیے گئے تھے۔ پرینیلچلکون کے کیموپریوینٹیو اثرات کا موازنہ اکٹ کی سطح کی بنیاد پر کیا گیا۔ نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ ٹیومر ماڈل جو اکٹ کی اعلی سطح کا اظہار کرتے ہیں جب XN [197] کے ساتھ علاج کیا جاتا ہے تو ٹیومر کے حجم اور وزن میں نمایاں کمی واقع ہوتی ہے۔ Guo et al. گیسٹرک کینسر میں XN کے اثر کا وٹرو اور vivo میں مطالعہ کیا، جس سے ظاہر ہوتا ہے کہ پرینیلچلکون کیسپیسز کو چالو کرکے، Bcl-2 کو ریگولیٹ کرکے، اور PI3K/Akt/mTOR kinase کو متاثر کرکے apoptosis کو اکساتا ہے۔ XN ارتکاز پر منحصر انداز میں گیسٹرک کینسر کے خلیوں کی عملداری کو روکتا ہے۔ سیل لائنوں پر، flavonoid SGC-7901 خلیات کی عملداری پر بہترین اثر ڈالتا ہے اور GES-1 سیلز پر 6، 8، اور 10 ug/mL چالکون پر اس پیرامیٹر کو متاثر نہیں کرتا ہے۔ فلو سائٹومیٹرک تجزیہ سے، یہ دیکھا گیا کہ پرینیلچلون گیسٹرک کینسر میں اپوپٹوٹک خلیوں کی تعداد میں نمایاں اضافہ کرتا ہے۔ پرو اور اینٹی اپوپٹوٹک پروٹین پر XN کے اثر کو مغربی بلاٹ تجزیہ کے ذریعہ اجاگر کیا گیا تھا۔ Bcl-2 اور Bcl-XL پروٹین کی سطح flavonoid انتظامیہ کے بعد کم ہوئی، یہ کمی زیر انتظام ارتکاز سے منسلک ہے۔ XN نے Bax اور Bid پروٹین کی سطح میں بھی اضافہ کیا، 10 uM/mL چالکون کے لیے بہترین سرگرمی دیکھی گئی۔ اس کے علاوہ، کلیویڈ کیسپیس 3 اور کلیویڈ PARP پروٹین کی سطحوں میں چالکون کی موجودگی میں نمایاں اضافہ ہوا۔ ان وجوہات کی بناء پر، یہ کہا جا سکتا ہے کہ فلیوونائڈز پرو اور اینٹی اپوپٹوٹک پروٹین کی سطح کو سازگار اور نمایاں طور پر متاثر کرتے ہیں۔ XN کا کل 10 uM/mL SGC-7901 خلیوں کے اہم اپوپٹوس کو اکساتا ہے۔ کل 8 اور 6 uM/mL چالکون بالترتیب 34 ± 3 فیصد خلیات اور 23 ± 2 فیصد خلیات کے apoptosis کو اکساتا ہے۔ مزید برآں، flavonoid نمایاں طور پر PI3K، Akt، اور mTOR کے فاسفوریلیشن میں ترمیم کرتا ہے p-PTEM کی سطح کو بڑھاتا ہے اور p-Akt (Thr308)، p-Akt (Ser473)، اور m-Tor (Ser2448) کی سطح کو کم کرتا ہے۔ نتیجے کے اعداد و شمار سے پتہ چلتا ہے کہ پرینیلچلکون اکٹ، پی ٹی ای این، جی ایس کے-3، اور ایم ٹی او آر کی سطحوں کو نمایاں طور پر متاثر نہیں کرتا ہے۔ SGC7901xenograft چوہوں میں تعین سے پتہ چلتا ہے کہ XN علاج نے نسبتاً ارتکاز پر منحصر انداز میں ٹیومر کے حجم کو کم کیا۔ Vivo میں PI3K/Akt سگنلنگ کو دبانے کی تصدیق کرنے کے لیے، زینوگرافک ٹیومر پر فاسفوریلیٹڈ اکٹ اور ایم ٹی او آر اظہار کا جائزہ لیا گیا۔ hematoxylin اور eosin حصوں کے پیتھولوجیکل معائنہ نے اہم مورفولوجیکل اسامانیتاوں کا انکشاف کیا۔ تاہم، XN ارتکاز پر منحصر فاسفوریلیٹڈ اکٹ اور ایم ٹی او آر کی سطح کو کم کرتا ہے۔ کنٹرول سیلز [198] کے مقابلے پرینیلچلکون کے علاج سے سیل کے پھیلاؤ میں نمایاں کمی آئی اور ٹیومر سیل اپوپٹوسس میں اضافہ ہوا۔

XN، 10 umol/L سے زیادہ ارتکاز پر، وٹرو میں لبلبے کے کینسر کے خلیات کے پھیلاؤ کو روکتا ہے۔ 5 umol/L سے کم ارتکاز پر، چالکون لبلبے کے کینسر کے خلیوں میں NF-kB پر منحصر انجیوجینک سرگرمی کو روکتا ہے۔ اس ارتکاز پر، لبلبے کے خلیوں پر WST-1 طریقہ سے کوئی سائٹوٹوکسیٹی نہیں دیکھی گئی۔ تاہم، مطالعہ کا نتیجہ یہ تھا کہ XN VEGF اور IL-8 (ایک انٹرلییوکن) کی پیداوار کو کم کرکے لبلبے کے کینسر سے متاثرہ انجیوجینیسیس کو متاثر کرتا ہے، جو مخصوص اور NF-kB غیر فعال ہونے کے ذریعے ثالثی کرتا ہے [194]۔ XN کی کینسر مخالف سرگرمی کا جائزہ لیں، سیل کے پھیلاؤ کا تعین کرنے کے لیے HepG2 سیل لائنوں کو MTT تجزیہ کا نشانہ بنایا گیا۔ ارتکاز اور وقت کے لحاظ سے پرینیلچلکون نے سیل کے پھیلاؤ کو کم کیا۔ زاؤ وغیرہ۔ مشاہدہ کیا کہ سیل لائنوں کو ایک دن کے لیے XN کے 200 μM تک ظاہر کرنا 2-3 دنوں تک 100-200 μM چالکون کے ساتھ علاج کرنے کے مقابلے میں کم موثر ہے۔ چالکون کے 50 um پر، 3 دن کے بعد HepG2 سیل کے پھیلاؤ کی اہم روک تھام دیکھی گئی۔ اسی مطالعہ میں، یہ دکھایا گیا تھا کہ پرینیلچلکون کیسپیس 3 کی سرگرمی میں نمایاں اضافہ کا سبب بنتا ہے۔ مزید برآں، مغربی دھبے کے تجزیے سے، یہ دکھایا گیا کہ XN کا 100-150 uM سیل لائنوں پر NF-kBprotein کے اظہار کو نمایاں طور پر روکتا ہے۔ اس تجزیے سے یہ بھی دیکھا گیا کہ پرینیلچلکون p53 پروٹین کے اظہار کو بڑھانے کی صلاحیت رکھتا ہے، اور XN کے 20 uM نے بیکس سگنلنگ کی شدت کا تعین کیا، یہ وقت [199] کے ساتھ منسلک ہے۔ XN کے حفاظتی پروفائل کے مطالعے سے پتہ چلتا ہے کہ 1000 mg/kg کمپاؤنڈ چوہوں میں اہم اعضاء اور ہومیوسٹاسس کے کام کو تبدیل نہیں کرتا ہے۔ Prenylchalcone T خلیوں میں IL-2 کی پیداوار کو بڑھانے کی صلاحیت رکھتا ہے، جو کہ ثالثی مدافعتی ردعمل کو فروغ دینے کی صلاحیت کو ظاہر کرتا ہے۔ XN -12 کو بھی روکتا ہے۔ جو بالواسطہ طور پر ٹرانسکرپشن مالیکیولز کو چالو کرکے مدافعتی نظام میں خلیات کی تفریق پیدا کرتا ہے۔ CytotoxicTlymphocytes سیلولر انفیکٹر کی ایک قسم ہے جو سیلولر استثنیٰ کے لیے اہم ہے اور اینٹی ٹیومر امیونولوجی کے عمل میں اہم کردار ادا کرتی ہے۔ CD8 پلس T cytotoxic lymphocytes CTL-P کے طور پر موجود ہیں، Vivo میں ایک غیر فعال سیل کا پیش خیمہ۔ یہ پیشگی Th1 سائٹوکائنز کی موجودگی میں اینٹیجن کے ذریعے فعال ہوتا ہے اور پھر بالغ سائٹوٹوکسک ٹی لیمفوسائٹس میں تیار ہوتا ہے۔ CD8 پلس/CD25 پلس میں نمایاں اضافہ کا مظاہرہ کیا گیا، جس کے بعد ٹیومر مائکروکلیمیٹ میں Th2 سے Th1 کی منتقلی ہوئی۔ CD8 پلس /CD25* T خلیات کا تناسب بہت بڑھ جاتا ہے جب cytotoxic T lymphocytes CoCl2 کے ذریعے 4T1 سیل لائنوں پر چالو ہوتے ہیں۔ Th1 اور Th2 خلیوں کا کام مختلف سائٹوکائنز کے اخراج پر منحصر ہے۔ Th1 اور Th2 سائٹوکائنز پر XN کے اثرات کی تحقیقات کے لیے، Zhang et al. ELISA کٹس کا استعمال کرتے ہوئے Th1l اور Th2- سے وابستہ سائٹوکائنز کے سیرم کی سطح کا تعین کیا۔ پرینائل ڈیریویٹیو کو نمایاں طور پر Th1 سائٹوکائن ایکسپریشن (بشمول IL-2 اور IFN-y) میں اضافہ اور Th2 سائٹوکائن کی سطح کو کم کرتے ہوئے دکھایا گیا ہے (بشمول IL-4 اور IL-10)۔ اس نتیجے کی وضاحت اس حقیقت سے کی گئی ہے کہ Th1 اور Th2 باہمی روکنے والے ہیں۔ اس کے علاوہ، Th1/Th2 کا تناسب بہاؤ cytometry کے ذریعے طے کیا گیا تھا، جس سے ظاہر ہوتا ہے کہ اس میں XN سے نمایاں اضافہ ہوا ہے۔ اسی طرح کے مطالعات نے مختلف ٹیومر کے لئے اس تلاش کی اطلاع دی ہے۔ گردن اور سر کے اعلی درجے کے اسکواومس سیل کارسنوماس والے مریضوں میں Th1 سائٹوکائنز کی سطح کم ہوتی ہے ان مریضوں کے مقابلے میں جو کم شدید ہوتے ہیں اور جن میں Th2 سائٹوکائنز کی سطح زیادہ ہوتی ہے۔ امتزاج تھراپی ٹیومر کے ماحول میں Th2 سے Th1 سائٹوکائنز کی منتقلی پیدا کرتی ہے۔ مطالعات کے نتائج Th1/Th2 سائٹوکائن تناسب کی خرابی کی نشاندہی کرتے ہیں، یہ تبدیلی کئی قسم کے ٹیومر کے لیے دیکھی جاتی ہے، اکثر کینسر کے آخری مراحل میں۔ Thl/'Th2 سائٹوکائن تناسب پر XN کے ممکنہ طریقہ کار کی تصدیق کرنے کے لیے، Th1 اور Th2 تفریق کے راستے میں کلیدی عوامل کے اظہار کا تعین کیا گیا تھا۔ جسمانی طور پر، Th0 خلیات کو متناسب طور پر Thl اور Th2 خلیوں میں فرق کیا جاتا ہے۔ اس کے علاوہ، نقلی مالیکیولز 4 اور 6 کی ایکٹیویشن Th0 سے Th1 اور Th2 خلیوں میں فرق کرنے میں اہم کردار ادا کرتی ہے۔ T-bet اور GATA-3 بھی دو اہم کردار ادا کرتے ہیں۔ CpG-ODN(cytosine-phosphorothioate-guanine جس میں ایک oligodeoxynucleotide شامل ہے)، ایک طاقتور Th1 ضمنی، T-bet اور lung ماڈل 1 اور 4 میں ٹرانسکرپشنی مالیکیولز کو چالو کرکے GATA-3 کے اظہار اور ٹرانسکرپشنی مالیکیول 6 کے ایکٹیویشن کو کم کرتا ہے۔ XN T-bet اظہار کو بڑھاتا ہے اور GATA-3 اظہار کو کم کرتا ہے۔ XN کی موجودگی میں ٹرانسکرپشنی مالیکیول 4 کی ایکٹیویشن میں اضافہ ہوتا ہے، لیکن یہ ٹرانسکرپشنی مالیکیول 6 کی ایکٹیویشن کو متاثر نہیں کرتا ہے۔ اس وجہ سے، یہ کہا جا سکتا ہے کہ ٹرانسکرپشنی مالیکیول 4 کی ایکٹیویشن Th1/Th2 سائٹوکائن کو ریگولیٹ کرنے میں مثبت کردار ادا کرتی ہے۔ XN [200] سے تناسب۔

نوچ سگنلنگ پاتھ وے چھاتی کے کینسر میں اہم کردار ادا کرتا ہے، جو کہ اس کے علاج کے لیے علاج کا ہدف ہے۔ یہ چھاتی کے کینسر کے آغاز اور بڑھنے میں ملوث ہے، اس راستے کی غیر معمولی سرگرمی اس پیتھالوجی سے وابستہ ہے۔ گاما سیکریٹیز انحیبیٹرز اور اینٹی ڈیلٹا نما مونوکلونل اینٹی باڈی 4 کے ذریعے نوچ سگنلنگ پاتھ وے کی روک تھام شدید لمفوبلاسٹک لیوکیمیا اور ٹھوس ٹیومر کے علاج کے لیے سازگار ہے۔ ان ایجنٹوں کے میکانزم میں سیل سائیکل کی رکاوٹ یا اپوپٹوسس اور انجیوجینیسیس میں خلل شامل ہیں۔ سورج وغیرہ۔ چھاتی کے کینسر کے سیل لائنوں پر XN کی علاج کی صلاحیت کی چھان بین کی، اس کی سیل کے پھیلاؤ کو روکنے، سیل سائیکل کو روکنے، اور وٹرو میں اپوپٹوس کو دلانے کی صلاحیت کو اجاگر کیا۔ Vivo میں ٹیومر کی نشوونما میں کمی کا بھی تعین کیا گیا تھا۔ اس کے علاوہ، نوچ سگنلنگ پاتھ وے کے ذریعے انسانی چھاتی کے کینسر کے خلیوں کی نشوونما کو روکنے کے لیے پرینیلچلکون کے امکان کی بھی تحقیق کی گئی ہے۔ اس بات کا تعین کرنے کے لیے کہ آیا XN نوچ سگنلنگ پاتھ وے کو نشانہ بناتا ہے، ایک فنکشنلائزڈ نوچ 1 طریقہ استعمال کیا گیا تھا، گاما سیکریٹیز انحیبیٹر (DAPT) کو بطور کنٹرول استعمال کرتے ہوئے۔ مطالعہ کا مقصد اس امکان کا جائزہ لینا تھا کہ پرینیلچلکون Notch1 کی CBF1 ٹرانسجن کی پابند سرگرمی کو کم کرتا ہے۔ XN کو پھیلاؤ کو روکنے اور نوچ 1 کے راستے کو روک کر apoptosis کو دلانے کے لیے دکھایا گیا ہے۔ مزید برآں، MTT طریقہ اور ہلکی مائیکروسکوپی کے ذریعے، یہ دکھایا گیا کہ پرینیلچلکون چھاتی کے کینسر کے سیل لائنوں پر خلیوں کے پھیلاؤ کو روکتا ہے۔ پچھلے مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ نوچ پاتھ وے روکنے والے EGFR اظہار کے بھی روکتے ہیں، چھاتی کے کینسر میں ایک اور مجرم عنصر۔ اس کے علاوہ، XN ٹیومر میٹاسٹیسیس سے وابستہ پروٹین پر کام کرتا ہے اور ان پروٹینوں کے اظہار کو بڑھا کر سیل کی منتقلی کو روکتا ہے۔ ایک مطالعہ نے G0/G1 مرحلے میں سیل سائیکل کی ناکہ بندی اور MCF-7 اور MDA-MB-231 خلیوں کے لیے XN [201] کے لیے اپوپٹوس کی شمولیت پر روشنی ڈالی۔

3.1.7.Panduretin A

اینٹی کینسرپینڈوریٹ اے (PA، Tables S1، اور S2، کمپاؤنڈ 7) کی سرگرمی کا مطالعہ کیا گیا ہے، جو بوسنبرگیا پینڈوریٹ سے الگ تھلگ ایک سائکلوہیکسانیلچالکون ہے۔ پودے میں پرینائل چالکونز اور دیگر فلیوونائڈز بڑے بائیو ایکٹیو مالیکیولز کے طور پر ہوتے ہیں، جن کو لٹریچر میں انسانی لبلبے کی سیل لائن PANC-1 پر ترجیحی سائٹوٹوکسک خصوصیات کے لیے بیان کیا گیا ہے۔ [202,203] PA میلانوما، بڑی آنت کے اڈینو کارسینوما، اور پروسٹیٹ کینسر میں فعال ہے۔ پروٹومک تجزیوں سے پتہ چلتا ہے کہ PA میں میلانوما خلیوں پر سائٹوٹوکسائٹی ہے جو مائٹوکونڈریل آکسیڈیٹیو فاسفوریلیشن کے عمل کی تنزلی پر منحصر ہے، جس میں سیکریٹری پاتھ وے اور اپوپٹوسس کی سرگرمی آکسیڈیٹیو عمل سے ہوتی ہے۔ اس سلسلے میں، یہ دکھایا گیا ہے کہ آکسیڈیٹیو تناؤ بلند ROS [204] کے ثانوی ردعمل کے طور پر آٹوفجی کو متحرک کرنے کا نتیجہ ہو سکتا ہے۔ ادب اس بات کی نشاندہی کرتا ہے کہ PA کے 9 ug/mL کا ارتکاز MCF-7 خلیات اور HT-29 خلیات (انسانی بڑی آنت کے کینسر کی سیل لائن) کی نشوونما کو مکمل طور پر روکتا ہے[205]۔ چالکون مختلف قسم کے خلیوں پر کینسر مخالف خصوصیات رکھتا ہے، بشمول میلانوما، بڑی آنت کا اڈینو کارسینوما، اور پروسٹیٹ کینسر [204]۔ لیو وغیرہ۔ MCF-7، T47D (انسانی چھاتی کا کینسر)، اور MCF-10A (نان ٹیومر بریسٹ سیل) سیل لائنوں پر چالکون کے سائٹوٹوکسک اثر کو اجاگر کیا۔ MCF-7 سیلز پر PA کی IC50 قدریں 24h پر 15 uM اور 48 h پر 11.5 μM تھیں۔ T47D سیلز کی صورت میں، IC50 24h پر 17.5 μM اور 48 h پر 14.5 μM تھی۔ PA MCF-10A خلیات کے پھیلاؤ کو متاثر نہیں کرتا ہے۔ میکانزم کی نشاندہی کرنے کے لیے جن کے ذریعے چالکون GO/G1 مرحلے میں MCF-7 سیلوں میں سیل سائیکل بلاکڈ کو اکساتا ہے، ویسٹرن بلاٹ تجزیہ استعمال کیا گیا، جس کا مقصد سیل سائیکل میں ریگولیٹری پروٹینز کی ماڈیولیشن کا جائزہ لینا تھا۔ نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ PA کا علاج cyclin D1 اور CDK4expression میں کمی لاتا ہے اور p21Cip1 اور p27 اظہار کو بڑھاتا ہے، اس طرح G0/Gl مرحلے میں ناکہ بندی کی وضاحت ہوتی ہے۔ Kaempferia pandurate سے الگ تھلگ PA اینڈروجن سے آزاد PC-3 (پروسٹیٹ اڈینو کارسینوما) سیلز اور انسانی DU145 (ایک انسانی پروسٹیٹ کینسر سیل لائن) سیلز میں سیل سائیکل بلاکڈ کو اکساتا ہے۔ انٹرنیوکلیوسومل ڈی این اے فریگمنٹیشن اپوپٹوس کا مارکر ہے۔ چونکہ کم سالماتی وزن والے ڈی این اے کے ٹکڑے پانی کے محلول میں خلیات پر داغ لگا کر نکالے جاتے ہیں، اس لیے اپوپٹوٹک خلیوں کی شناخت ڈی این اے مواد کے فریکوئنسی ہسٹوگرام کے ذریعے کی جا سکتی ہے۔ ذیلی G1 فیز MCF-7 سیل کی آبادی کا تجزیہ کیا گیا۔ خلیوں کا G1 مرحلے کا مواد 1.17 ± 0.11 تھا اور PA（10,15، اور 20 μM） کے ساتھ علاج کیے جانے والے خلیوں میں یہ بالترتیب 1.84±0.18,2.62±0.21، اور 4.52±0.28 تھا۔ چالکون ٹریٹمنٹ میں اضافہ MCF-7 لائنوں پر ڈی این اے فریگمنٹیشن کی شدت کی وجہ سے ہوا، اس حقیقت کی تصدیق ذیلی G1 فیز سیل کی آبادی [206] سے ہوتی ہے۔

کینسر کے خلیوں کے حملے اور میٹاسٹیسیس کے کلیدی پروٹینوں میں، انڈکشن میٹرکس میٹالوپروٹینیسز ہے۔ وہ ایکسٹرا سیلولر میٹرکس کے اجزاء کو کم کرتے ہیں اور خلیوں کے حملے اور منتقلی کو آسان بناتے ہیں۔ اس کے علاوہ، میٹالوپروٹینیسز کا زیادہ اظہار اپیٹیلیل-میسینچیمل منتقلی کو آمادہ کر سکتا ہے۔ PA میٹالوپروٹینیز 2 کے سراو اور ایکٹیویشن کو دباتا ہے، جس کی وجہ سے انسانی امبلیکل ویین اینڈوتھیلیل سیل (HUVEC) سیلز پر اینڈوتھیلیل سیل کی منتقلی، یلغار، اور مورفوجینیسیس کی روک تھام ہوتی ہے۔ اس کے علاوہ، پھیپھڑوں کے کینسر کے خلیات [207] میں میٹالوپروٹینیز 2 کو کم کرنے کے لیے چالکونز کی ذیلی زہریلی خوراکیں کافی ہیں۔

3.1.8 الائچی

الائچی (CD، Tables S1، اور S2، کمپاؤنڈ 8)، Campomanesia adamantium (Myrtaceae) سے ایک چالکون، DNA کے ٹکڑے کو بڑھاتا ہے اور PC-3 خلیوں میں NF-kB کی سرگرمی کو کم کرتا ہے۔ یہ نتائج پروسٹیٹ کینسر [20] کے علاج میں چالکون کی علاج کی صلاحیت کی نشاندہی کرتے ہیں۔ سی ڈی کو سب سے زیادہ فعال اینٹیٹیمر مرکبات میں سے ایک سمجھا جاتا ہے جس میں ایپسٹین بار وائرس کو چالو کرنا شامل ہے [208]۔ سی ڈی کے اینٹی کینسر اثرات اپوپٹوس کی شمولیت، سیل کے پھیلاؤ اور منتقلی کی روک تھام، اور سیل سائیکل پر اثر و رسوخ کے ساتھ منسلک ہوتے ہیں۔ چالکون میں کینسر کے خلیات کی تھراپی کے خلاف مزاحمت کو کم کرنے کی صلاحیت بھی ہے۔ 5-فلوروراسل یا cis-Platinum کے ساتھ مل کر، اینٹیٹیمر سرگرمیاں حاصل کی جاتی ہیں۔ مثال کے طور پر، سی ڈی میں بڑی آنت کے کینسر کے خلیات کی کیموتھراپی کے خلاف مزاحمت کو نمایاں طور پر روکنے، اپوپٹوس کو اکسانے، کیسپیسس 3 اور 9 کو چالو کرنے، بیکس پروٹین کے اظہار کو آسان بنانے، c-myc کو نمایاں طور پر روکتا ہے، اور مخصوص 50 اور NF-kB [209] رکھنے کی صلاحیت رکھتا ہے۔ ] Hou et al. 5- فلوروراسل مزاحم گیسٹرک کینسر کے خلیات پر CD کے علاج کی صلاحیت اور سالماتی میکانزم کی چھان بین کی۔ BGC-823/5-fluorouracil سے 5-fluorouracil کی حساسیت کی تصدیق apoptosis میں اضافہ اور CD کی موجودگی میں سیل سائیکل کو مسدود کرنے سے ہوئی۔ چالکون Wnt/ -catenin سگنلنگ پاتھ وے (جو ٹیومرجینیسیس میں اہم کردار ادا کرتا ہے) کو دبا کر کینسر کے خلیات کی حساسیت کو 5-فلوروراسیل تک بڑھاتا ہے، اور Wnt/ -catenin جینز میں متحرک تغیرات اینٹی کینسر تھراپی کے خلاف مزاحمت سے وابستہ ہیں۔ . یہ P-glycoprotein، -catein، اور TCF-4 کے اظہار کو روکتا ہے۔ مزید برآں، CD خاص طور پر -catenin/TCF-4 کمپلیکس کی تشکیل کو روکتا ہے، اس طرح غیر معمولی Wnt/ -catenin سگنلنگ [210] کا سبب بنتا ہے۔ بیڈ روم وغیرہ۔ HepG2 خلیوں پر CD کے antiproliferative اور apoptotic اثرات کی تحقیقات کی۔ کی روک تھام کی کارروائی

HepG2 سیل کے پھیلاؤ پر چالکون 72 گھنٹے کے بعد اہم تھا، سائٹوٹوکسیٹی 5-فلوروراسل سے ملتی جلتی تھی۔ معیارات کے طور پر استعمال ہونے والے دوسرے کیموتھراپیٹک ایجنٹوں کے لیے مقرر کردہ قدریں (مثلاً صرافینیب) بہت کم تھیں۔ اس کے علاوہ، مرکب کا سائٹوٹوکسک اثر ٹیومر کے خلیات پر منتخب ہوتا ہے اور عام خلیوں پر منفی اثر نہیں ڈالتا، جو کہ 5-فلوروراسل کے مقابلے میں سی ڈی کا ایک فائدہ ہے۔ سیل سائیکل کے G1 مرحلے میں CD کا جمع ہونا 72 گھنٹے کے بعد دیکھا گیا اور سیل ڈویژن [211] کو روک کر HepG2 سیل کی نشوونما کو روکتا ہے۔

CD اور 5-fluorouracil کے تقابلی ڈاکنگ اسٹڈیز اور BaxBH3 کے ساتھ اس کے تعامل سے پتہ چلتا ہے کہ 5-فلوروراسیل میں CD سے زیادہ پابند توانائی ہوتی ہے۔ چالکون تین ہائیڈروجن بانڈز (Phe30, Val50, اور Gln52) بناتا ہے۔ CD اور Bcl کے درمیان تعامل تین ہائیڈروجن بانڈز (Asp15, Gln18, اور Ser28) کے ذریعے حاصل کیا جاتا ہے، اور 5-کی صورت میں فلوروراسل چار بانڈز کے ذریعے حاصل کیا جاتا ہے۔ مزید برآں، اس تعامل کی صورت میں، CD کی بائنڈنگ انرجی 5-فلوروراسل کی صورت میں کم ہے۔ یہ چالکون کی ساخت میں خوشبودار باقیات سے منسوب کیا جاسکتا ہے، جو II بانڈز میں شامل ہیں، جو فعال جیب کو مستحکم کرنے کی صلاحیت رکھتے ہیں اور پابند توانائی میں کمی کا سبب بنتے ہیں۔ سلیکو اسٹڈیز کے نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ 5-فلوروراسل میں کیسپیس 3 کے مقابلے میں زیادہ پابند توانائیاں ہوتی ہیں CD کے مقابلے میں۔ سی ڈی کیسپیس 3 (Cys163 اور Arg64) کے ساتھ تعامل میں دو ہائیڈروجن بانڈز دکھاتا ہے۔ چالکون میں TYR204 کے ساتھ II-II بانڈز بھی ہیں۔ 5-فلوروراسیل کی فری بائنڈنگ انرجی CD سے برتر ہے، جس کی وضاحت چالکون کی ساخت میں دو خوشبودار باقیات کے ذریعے فعال جیب کے استحکام سے ہوتی ہے [212]۔

3.1.9 لونچو کارپین

لونچوکارپین (ٹیبلز S1 اور S2، کمپاؤنڈ 9) ایک قدرتی چالکون ہے جو لونچیوکارپس سیریسس سے نکالا جاتا ہے۔ اس چالکون کے سائٹوٹوکسک اثرات نیوروبلاسٹوما اور لیوکیمیا سیل لائنوں پر بیان کیے گئے ہیں۔ یہ معلوم ہے کہ SK-N-SH نیوروبلاسٹوما لائنوں پر 50 uM lonchocarpin کے ساتھ علاج کے 24 گھنٹے بعد، AMPK فاسفوریلیشن کی شمولیت ہوتی ہے، جو گلوکوز کے جذب کو بڑھاتا ہے اور پروٹین کی ترکیب کو روکتا ہے۔ چالکون میں سیل کی عملداری کو کم کرنے کی صلاحیت بھی ہے۔ کولوریکٹل کینسر سیل لائنوں پر HCT116، SW480، اور DLD، لونچو کارپین سیل کی عملداری کو 20μM تک کم کرتا ہے۔ مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ لونچو کارپین میں H292 پھیپھڑوں کے کینسر کے خلیات کو وٹرو میں کیسپیس-3-کی وجہ سے روکنے کی صلاحیت ہوتی ہے جو اپوپٹوسس سے پہلے ہوتی ہے۔ اس کے علاوہ، لونچو کارپین کو Xenopus laevis کے ایمبریونک ماڈلز میں ویوو میں Wnt/ -catenin سگنلنگ کو روکنے کے لیے دیکھا گیا ہے۔ چالکون کے انجکشن Wnt8-مخصوص ریسیپٹر ماڈل (SO1234) میں لگانے کے نتیجے میں Wnt/ -catenin سگنلنگ ریسیپٹر جین ایکٹیویشن [213] کے 82 فیصد دبائو میں آیا۔

چن وغیرہ کی ایک تحقیق میں، 3D-QSAR تجزیہ کے نتائج ہائیڈروفوبک C-4، C-5، C-11، C-1/، اور C کی نشاندہی کرتے ہیں۔ lonchocarpin میں -2 تعامل۔ یہ تعامل اس کمپاؤنڈ کی سائٹوٹوکسک صلاحیت کو بڑھاتا ہے، جس میں ماڈل میں 23 فیصد کا حصہ ہے۔ لونچو کارپین کے لیے ڈاکنگ اسٹڈیز نے ہائیڈروفوبک 3D-QSAR ماڈل کی طرح ہی نتائج حاصل کیے، جس میں ہائیڈروفوبک سطح C-4, C-5, C-11, C-1' میں تھی۔ ، اور C-2'لونکوکارپائن کے علاقے Bcl-2 کمپلیکس کے ساتھ تعامل کرتے ہیں۔ Bcl-2 پروٹین کا ہائیڈروفوبک لوپ BaxBH3 پیپٹائڈ کے ساتھ ایک کمپلیکس بناتا ہے، جسے مصنوعی نیویٹوکلاکس یا لونچو کارپین مرکبات کے ذریعے روکا جا سکتا ہے۔ اس سے ظاہر ہوتا ہے کہ Bcl-2 خاندان کے افراد کا ہائیڈروفوبک لوپ H292 خلیوں پر loncocarpine-induced apoptosis کا ہدف ہے اور اس طرح caspase 3 [214] کو چالو کرنا ہے۔

کینسر مخالف خصوصیات کے ساتھ دیگر قدرتی چالکون ہیں بوٹین (ٹیبلز S1 اور S2 کمپاؤنڈ 10)، isoliquiritigenin (Tables S1 اور S2، کمپاؤنڈ 11)، flavokawain (Tables S1 اور S2، کمپاؤنڈ 12)، اور isobavachalcone (ٹیبلز S1 اور S2، کمپاؤنڈ 13) [155]۔

حصہ 3 حاصل کرنے کے لیے لنک پر کلک کریں:https://www.xjcistanche.com/news/part3-anticancer-activity-of-natural-and-synt-54978140.html