گیسٹرک کینسر سے وابستہ ٹیومر مائیکرو ماحولیاتی استثنیٰ میں لیور کناز B1 (LKB1) کی تشخیصی قدر

خلاصہ:

لیور کناز B1 (LKB1) ایک ٹیومر دبانے والا جین ہے، جس کا غیر فعال ہونا ٹیومر کی مختلف اقسام میں کثرت سے ہوتا ہے۔ تاہم، آیا LKB1 کا تعلق گیسٹرک کینسر (GC) کی طبی خصوصیات سے ہے اور ٹیومر کے استثنیٰ کو منظم کرنا نامعلوم ہے۔ اس مطالعہ میں، ہم نے ظاہر کیا کہ صحت مند افراد کے سیرم میں LKB1 کا بہت زیادہ اظہار ہوتا ہے (n = 176) جی سی مریضوں کے مقابلے (n = 416) اور طبی نتائج اور GC مریضوں میں بقا کی اچھی شرح سے بھی وابستہ ہے۔ مزید برآں، مدافعتی چوکیوں اور ٹی سیل ایکٹیویشن سے وابستہ جین، جیسے PD−1، پی ڈی−L1، CD8A، CD8B، CD28، اور GZMM، اعلی LKB1 اظہار کے ساتھ GC سب گروپس میں انتہائی اظہار خیال کیا گیا تھا۔ تازہ گیسٹرک کینسر والے ٹشوز کے مقابلے میں، LKB1 کا اظہار CD3+CD8+ اور CD3+CD8+CD28+ تازہ ملحقہ غیر میں ٹی سیلز میں کیا گیا تھا۔ کینسر کے ؤتکوں. CD3+CD8+ T خلیات نے ایک IFN تیار کیا۔−مخالف−کینسر کے مدافعتی ردعمل. مزید برآں، CD3+CD8+ T خلیات کا تناسب جس نے LKB کا اظہار کیا تھا، IFN کے ساتھ مثبت تعلق رکھتا تھا۔−اظہار. مزید برآں، کم LKB1 اظہار والے GC مریضوں میں معروضی ردعمل کی شرح ناقص تھی، اور جب پیمبرولیزوماب کے ساتھ علاج کیا جاتا ہے تو ترقی سے پاک بقا اور مجموعی طور پر بقا بدتر ہوتی ہے۔ آخر میں، LKB1 GC مریضوں میں ایک ممکنہ مدافعتی چوکی ہو سکتا ہے۔

cistanche tubulosa-antitumor کے فوائد

مطلوبہ الفاظ:

LKB1; گیسٹرک کینسر؛ طبی نتائج؛ مدافعتی چوکی؛ CD3+CD8+ T خلیات

1. تعارف

دنیا بھر میں، گیسٹرک کینسر (GC) صحت عامہ کا مسئلہ ہے اور یہ پانچواں سب سے زیادہ کثرت سے تشخیص کی جانے والی مہلک بیماری ہے [1,2]۔ اگرچہ GC کے لیے عام علاج کے طریقے، جیسے گیسٹرک ریسیکشن، کیموتھراپی، ریڈی ایشن، اور ٹارگٹڈ علاج، بڑے پیمانے پر کلینیکل پریکٹس میں استعمال ہوتے ہیں [3]، 5−اعلی درجے کی GC کی سال کی بقا کی شرح <20% ہے۔ جی سی تھراپی [4,5] میں پیشرفت کے نتیجے میں، امیونو تھراپی کو ایک جدید طریقہ سمجھا جاتا ہے [6] جس نے اس بیماری کے علاج کو واضح کیا ہے [7]۔ امیونو تھراپی کے دور میں، پروگرام شدہ سیل ڈیتھ 1 (PD−1)/PD−لیگنڈ 1 (PD−L1) کو کینسر کی تشخیص اور امیونو تھراپی کے ردعمل کی پیشین گوئی کے لیے بائیو مارکر دکھایا گیا ہے، لیکن یہ کافی حد تک حساس نہیں ہے۔ لہذا، GC کے لئے امیونو تھراپی میں ناول پیش گوئی کرنے والے بائیو مارکر کی شناخت کرنا ضروری ہے۔

لیور کناز B1 (LKB1)، جسے STK11 بھی کہا جاتا ہے، ایک سیرین/تھریونائن کناز ہے جو کہ متعدد ٹشوز میں وسیع پیمانے پر موجود ہے [8]۔ بڑھتے ہوئے شواہد سے پتہ چلتا ہے کہ LKB1 کینسر کی متعدد اقسام میں ٹیومر کو دبانے والا کلیدی ہے، جیسے لبلبے کا کینسر [9]، میلانوما [10,11]، غیر−چھوٹے سیل پھیپھڑوں کا کینسر [12,13]، اور سروائیکل کینسر [14]۔ مزید برآں، LKB1 مدافعتی خلیوں کے افعال کے ضابطے میں شامل ہونے کے لیے جانا جاتا ہے [10]۔ T خلیوں میں LKB1 کی کمی معدے کی پولیپوسس کی نشوونما کو فروغ دیتی ہے [15] اور اس میں IL بھی شامل ہوتا ہے۔−11−JAK/STAT3 راستہ معدے کی ٹیومرجینیسیس کی طرف جاتا ہے [16]۔ مزید برآں، LKB1 میکروفیج فنکشن میں ایک اہم کردار ادا کرتا ہے جیسے کہ سیل کی نشوونما، میٹابولزم، اور پولرائزیشن [17]۔ حالیہ مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ ایل کے بی 1 کا نقصان ٹیومر کے مدافعتی مائکرو ماحولیات کی ترمیم میں شامل ہوسکتا ہے [18]۔ خاص طور پر، LKB1 کی کمی ٹی کو دبا دیتی ہے۔−پھیپھڑوں کے کینسر کے مریضوں کے ٹیومر مائکرو ماحولیات میں پروینفلامیٹری سائٹوکائن کی پیداوار اور نیوٹروفیل بھرتی کو فروغ دے کر سیل کی سرگرمی [19]۔ محدود تعداد میں مطالعات نے LKB1 اظہار، طبی نتائج، مدافعتی سیاق و سباق، اور GC میں علاج کے ردعمل کے درمیان تعلق کو واضح کیا ہے۔ اس مطالعے میں، ہم نے LKB1 اظہار اور GC مریضوں میں طبی نتائج کے درمیان ایک وابستگی کا مظاہرہ کیا۔ اس کے علاوہ، ہم نے یہ ظاہر کیا کہ LKB1 کا کم اظہار مدافعتی مائیکرو ماحولیات کو فروغ دیتا ہے اور اس کے نتیجے میں جی سی کے مریضوں میں تشخیص خراب ہو سکتی ہے۔ مزید یہ کہ ایل کے بی 1 کے اعلی اظہار کے ساتھ جی سی مریضوں کو پیمبرولیزوماب کے علاج سے زیادہ فوائد حاصل ہوئے۔ ٹیومر امیونولوجی میں LKB1 کی تشخیصی قدر اور ممکنہ کردار پر یہاں تبادلہ خیال کیا گیا ہے اور GC کے تحت ایک ممکنہ میکانزم کو سمجھنے میں معاون ثابت ہو سکتا ہے۔

cistanche tubulosa - مدافعتی نظام کو بہتر بنانا

2. مواد اور طریقہ

2.1 مریض اور خون کے نمونے۔

اس سابقہ ​​مطالعہ کو زیجیانگ کینسر ہسپتال کی مقامی اخلاقیات کمیٹی (IRB−2021−154) نے منظور کیا تھا۔ ہم نے جنوری 2015 اور اگست 2022 کے درمیان 176 صحت مند بالغوں اور 416 GC مریضوں سے خون کے نمونے جمع کیے اور 26 GC مریضوں سے تازہ کینسر کے ٹشوز اور ملحقہ غیر کینسر والے ٹشوز کے 26 جوڑے اکٹھے کیے۔ دوسرے مہلک ٹیومر کی تاریخ والے مریضوں کو خارج کردیا گیا تھا۔

2.2 CEA، CA19−9، AFP، اور LKB1 کا اظہار

ایک تجارتی ELISA ٹیسٹ کٹ (RX106671H; Ruixinbio, Quanzhou, Fujian, China) ایک معیاری پروٹوکول کے مطابق پلازما کے نمونوں میں LKB1 اظہار کی سطح کا جائزہ لینے کے لیے استعمال کیا گیا تھا۔ مختصراً، متعلقہ پلازما کے نمونے (50 µL) اور معیاری ماڈل پروٹین (50 µL) 96−well پلیٹوں میں شامل کیے گئے۔ اس کے بعد، 100 µL HRP− لیبل والے اینٹی باڈی کو شامل کیا گیا اور 96−well پلیٹوں کو 37 ◦C پر 1 گھنٹے کے لیے انکیوبیٹ کیا گیا۔ پھر، پلیٹوں کو واشنگ بفر سے تین بار دھویا گیا۔ سبسٹریٹ مکسچر (100 µL) شامل کیا گیا تھا اور پلیٹوں کا تجزیہ OD 450 پر مائکروپلیٹ ریڈر میں کیا گیا تھا۔ کیمیلومینیسینس کا استعمال CEA (CFDA 20163402679، سیمنز ہیلتھ کیئر تشخیصی مصنوعات، شنگھائی، چین)، CA19FDA-1912018202679 کا تعین کرنے کے لیے کیا گیا تھا۔ Siemens Healthcare Diagnostic Products., Shanghai, China) اور AFP اظہار (CFDA 20173400053, Siemens Healthcare Diagnostic Products., Shanghai, China)۔ SPSS 19.0 سافٹ ویئر (IBM, Armonk, NY, USA) CEA، CA19−9، AFP، اور LKB1 کے ریسیور آپریٹنگ خصوصیت (ROC) منحنی خطوط کے تحت علاقے کا تعین کرنے کے لیے استعمال کیا گیا تھا۔ TNM پیتھولوجک مرحلے، FIGO مرحلے، اور HER2 اظہار کی بنیاد پر، 416 GC مریضوں کو مختلف ذیلی گروپوں میں تقسیم کیا گیا تھا۔ جی سی مریضوں کے مختلف ذیلی گروپوں میں LKB1 اظہار کا تجزیہ کرنے کے لئے ایک جوڑا ٹی ٹیسٹ استعمال کیا گیا تھا۔

2.3 مدافعتی خلیوں میں LKB1 اظہار اور مدافعتی چوکیوں کے ساتھ ایسوسی ایشن کا تجزیہ

پین−کینسر [CAMOIP] (http://www.camoip.net/) میں امیونو تھراپی کے ملٹی اومکس پر جامع تجزیہ (1 جنوری 2{{10}}23 کو حاصل کیا گیا) تجزیہ کرنے کا ایک ٹول ہے۔ کینسر جینوم تجزیہ (TCGA) اور امیون چیک پوائنٹ انحیبیٹر (ICI) - علاج شدہ پروجیکٹس سے اظہار اور تغیراتی ڈیٹا۔ ایک معیاری پروسیسنگ پائپ لائن کا استعمال جی سی مریضوں میں امیونوجنیسیٹی اور راستے کی افزودگی کا تجزیہ کرنے کے لئے کیا گیا تھا۔ CAMOIP کو GC مریضوں میں LKB1 اظہار کے مطابق مختلف مدافعتی خلیوں کے تاثرات کا تجزیہ کرنے کے لئے بھی استعمال کیا گیا تھا۔ UCSC Xena ڈیٹا بیس (https://xena.ucsc.edu/public) (1 جنوری 2023 کو حاصل کیا گیا) ایک کینسر جینومکس ڈیٹا تجزیہ پلیٹ فارم ہے جو کینسر کے متعدد نمونوں سے ہسٹولوجک ڈیٹا کے تصور اور تجزیہ کی حمایت کرتا ہے۔ UCSC Xena ڈیٹا بیس LKB1، T−cell امیون چیک پوائنٹ جینز، T−cell ایکٹیویشن، اور mRNA اظہار کی اینٹیجن پیشکش فراہم کرتا ہے۔ R زبان (4.2.1) کا استعمال کرتے ہوئے ایک پیچیدہ ہیٹ میپ بنایا گیا تھا۔ SPSS 19.0 سافٹ ویئر (IBM, Armonk, NY, USA) کوارٹائل کی بنیاد پر LKB1 اظہار کا تجزیہ کرنے کے لیے استعمال کیا گیا تھا۔ ہم نے LKB1 اظہار کی ثالثی قدر کے مطابق GC مریضوں کو LKB1 اعلی اور کم اظہار گروپوں میں تقسیم کیا۔ T−cell امیون چیک پوائنٹ جینز، T−cell ایکٹیویشن، اور GC مریضوں میں LKB1 اعلی اور کم اظہار والے GC مریض ذیلی گروپوں میں mRNA اظہار کی اینٹیجن پریزنٹیشن کا تجزیہ کرنے کے لیے ایک t-ٹیسٹ استعمال کیا گیا تھا۔ p اقدار <0.001 کو شماریاتی لحاظ سے اہم سمجھا جاتا تھا۔

cistanche tubulosa-antitumor کے فوائد

2.4 فلو سائٹومیٹری

تازہ کینسر زدہ (n {{0}}) اور تازہ ملحقہ غیر کینسر والے ٹشوز (n=26) جو انٹراپریٹو طریقے سے حاصل کیے گئے تھے کو 30 منٹ کے اندر ٹشو ملنگ محلول میں پیس دیا گیا۔ ملنگ سلوشن اور پیریفرل بلڈ مونو نیوکلیئر سیل (PBMCs) (1 × 106 سیل/mL) کو فاسفیٹ بفرڈ نمکین (PBS) (50µL، CR20012؛ Zhejiang Crenry، Zhejiang، China) میں جمع کیا گیا تھا جس میں 0.5٪ البم بی ایس اے کے ساتھ ضمیمہ کیا گیا تھا۔ (تھرمو فشر، والتھم، ایم اے، یو ایس اے) اور 15 منٹ تک اینٹی ہیومن مونوکلونل اینٹی باڈیز کے ساتھ انکیوبیٹڈ۔ اینٹی ہیومن مونوکلونل اینٹی باڈیز استعمال کی گئیں، جیسا کہ ٹیبل 1 اور سپلیمنٹری ٹیبل S1 اور سپلیمنٹری فگر S1 میں دکھایا گیا ہے: anti−LKB1 (PTG، ووہان، ہوبی، چین)؛ anti−CD68 (Biolegend, San Diego, CA, USA)؛ anti−CD209 (Biolegend, San Diego, CA, USA)؛ anti−CD28 (Biolegend, San Diego, CA, USA)؛ anti−CD45/CD56/CD19 (بیک مین کولٹر، سینٹ لوئس، MO، USA)؛ anti−CD45/CD4/CD8/CD3 (بیک مین کولٹر، سینٹ لوئس، MO، USA)؛ anti−CD4, CD3 (بیک مین کولٹر، سینٹ لوئس، MO، USA)؛ anti−CD45RO (بیک مین کولٹر، سینٹ لوئس، MO، USA)؛ anti−CD8 (بیک مین کولٹر، سینٹ لوئس، MO، USA)؛ anti−CD38 (بیک مین کولٹر، سینٹ لوئس، MO، USA)؛ اور anti−CD45RA (بیک مین کولٹر، سینٹ لوئس، MO، USA)۔ ایک CD3/CD4/CD8/CD28/PD−1 کا پتہ لگانے والی کٹ Raise Care (Hangzhou, China) سے خریدی گئی تھی۔ نتائج کا تجزیہ کرنے کے لیے CXP تجزیہ سافٹ ویئر اور بیک مین کولٹر FC 500 فلو سائٹو میٹر استعمال کیا گیا [20,21]۔ کارخانہ دار کی ہدایات کے مطابق جی سی کے مریضوں سے پلازما کے نمونوں میں سائٹوکائن کا پتہ لگانے کے لیے ایک سائٹوکائن کا پتہ لگانے والی کٹ (سیجر، ڈالیان، چین) استعمال کی گئی تھی۔

جدول 1. طبی پیرامیٹرز کے ساتھ جی سی کے مریضوں اور صحت مند افراد کے درمیان موازنہ۔

2.5 تازہ بافتوں میں مدافعتی خلیوں کا تناسب

تازہ کینسر (n=26) اور تازہ ملحقہ غیر کینسر والے ٹشوز (n=26) میں مدافعتی خلیوں کے تناسب کا تجزیہ کرنے کے لیے ایک ٹی ٹیسٹ استعمال کیا گیا تھا۔ تازہ کینسر اور تازہ ملحقہ غیر کینسر والے ٹشوز میں LKB1+ اور PD1+LKB1+ مدافعتی خلیوں کے تناسب کے درمیان فرق کا جوڑا بنائے گئے ٹی ٹیسٹ کے ذریعے تجزیہ کیا گیا۔ SPSS 19۔{9}} سافٹ ویئر (IBM, Armonk, NY, USA) تازہ کینسر اور تازہ ملحقہ غیر کینسر والے ٹشوز میں مدافعتی خلیوں کے تناسب اور سائٹوکائنز کے درمیان تعلق کا تعین کرنے کے لیے استعمال کیا گیا تھا۔

2.6۔ ٹشو امیونو ہسٹو کیمسٹری (IHC)

Zhejiang کینسر ہسپتال کے Biobank نے تازہ کینسر (n=26) اور تازہ ملحقہ غیر کینسر والے ٹشوز (n=26) فراہم کیے ہیں جو اس مطالعہ میں استعمال ہوئے ہیں۔ ایک IHC کٹ (Beijing Zhongshan Golden Bridge Biotechnology Co., Ltd., Beijing, China) IHC کو مینوفیکچرر کی ہدایات کے مطابق انجام دینے کے لیے استعمال کیا گیا تھا۔ مختصراً، پیرافین سیکشنز کو یکے بعد دیگرے ڈیپرافینائز کیا گیا، ری ہائیڈریٹ کیا گیا اور اینٹیجن کی بازیافت کے لیے ابالا گیا۔ بنیادی LKB1 اینٹی باڈی (IPB0924 [dilution ratio, 1:100]؛ Baijia, Taizhou, Jiangsu, China) اور انٹرفیرون گاما (IFN−) اینٹی باڈی (IPB0703 [ڈائلیشن ریشو، 1:100]؛ بائیجیا، تائیژو، جیانگسو، چین) کمرے کے درجہ حرارت پر 2 گھنٹے کے لئے انکیوبیٹ کیا گیا تھا۔ حصوں کو پی بی ایس سے تین بار دھویا گیا۔ ایک ہسٹو کیمیکل پولیمر بڑھانے والا (400 µL) پیرافین سیکشنز میں 20 منٹ کے لیے شامل کیا گیا، اس کے بعد پی بی ایس کے ساتھ 3 واش کیے گئے۔ اس کے بعد، ثانوی اینٹی باڈیز کو پیرافن سیکشنز میں شامل کیا گیا، اور 20 منٹ تک انکیوبیٹ کیا گیا، اس کے بعد واشنگ، ڈی اے بی سٹیننگ، کاؤنٹر سٹیننگ اور ماؤنٹنگ کی گئی۔

2.7۔ LKB1 اظہار کی بنیاد پر GC مریضوں کا Pembrolizumab پر علاج کا ردعمل

پیمبرولیزوماب کے علاج کے ردعمل اور جی سی مریضوں کے طبی اعداد و شمار جو مدافعتی چیک پوائنٹ ناکہ بندی (آئی سی بی) سے گزر رہے ہیں پچھلی رپورٹ [22] سے حاصل کیے گئے تھے۔ SPSS 19۔ ہم نے LKB1 اظہار کی ثالثی قدر کے مطابق GC مریضوں کو LKB1 اعلی اور کم اظہار گروپوں میں تقسیم کیا۔ R زبان (4.2.1) LKB1 اظہار کے مطابق GC مریضوں کے pembrolizumab علاج کے ردعمل کا تعین کرنے کے لئے استعمال کیا گیا تھا۔ PD−L1 کے اظہار کا تجزیہ SPSS 19{12}} سافٹ ویئر (IBM, Armonk, NY, USA) نے چوتھائی کی بنیاد پر کیا تھا۔ ثالثی قدر کے مطابق GC مریضوں کو PD−L1 اعلی اور کم اظہار گروپوں میں تقسیم کیا گیا تھا۔ LKB1 اور PD−L1 اظہار کی بنیاد پر، GC مریضوں کو PD−L1 اعلی اور کم اظہار والے ذیلی گروپوں کے اندر LKB1 اعلی اور کم میں درجہ بندی کیا گیا تھا، اور Python کو ذیلی گروپوں میں پیمبرولیزوماب علاج کے ردعمل کی عکاسی کرنے کے لیے استعمال کیا گیا تھا۔ Pembrolizumab کے ساتھ علاج کیے جانے والے GC مریضوں کی مجموعی طور پر بقا اور ترقی سے پاک بقا کا تجزیہ Kaplan-Meier طریقہ استعمال کرتے ہوئے لاگ-رینک ٹیسٹ کے ساتھ کیا گیا۔

2.8۔ شماریاتی تجزیہ

شماریاتی تجزیے SPSS 19 کا استعمال کرتے ہوئے کیے گئے۔{1}} سافٹ ویئر (IBM, Armonk, NY, USA)۔ مریض کے زندہ رہنے کی تصدیق ٹیلی فون کے ذریعے کی گئی تھی اور لاگ-رینک ٹیسٹ کے ساتھ Kaplan-Meier طریقہ استعمال کرتے ہوئے تجزیہ کیا گیا تھا۔ p اقدار < 0.05 کو شماریاتی لحاظ سے اہم سمجھا جاتا تھا۔ مزید برآں، Kaplan−Meier Plotter (http://www.kmplot.com) (1 جنوری 2023 کو حاصل کیا گیا) کا استعمال GC مریضوں کی بقا پر LKB1 (اعلی بمقابلہ کم اظہار) کے اثر کی تصدیق کے لیے کیا گیا تھا۔ Python کا استعمال GC مریضوں کی طبی خصوصیات اور پیرامیٹرز کی عکاسی کرنے کے لیے کیا گیا تھا۔

3. نتائج

3.1 جی سی مریضوں میں LKB1 اظہار اور کلینک کی خصوصیات کے درمیان ایسوسی ایشن

اس تحقیق میں 416 جی سی کے مریض (268 مرد اور 148 خواتین) اور 176 صحت مند افراد (87 مرد اور 89 خواتین) شامل تھے۔ صحت مند افراد اور جی سی کے مریضوں کی خصوصیات کا خلاصہ شکل 1A اور جدول 1 میں کیا گیا ہے۔ جی سی کے مریضوں کے طبی نتائج کا خلاصہ کیا گیا ہے، بشمول CEA، CA19−9، AFP، اور HER2 اظہار، پیتھولوجک گریڈ، یونین فار انٹرنیشنل کینسر کنٹرول (UICC) ) ٹیومر کا مرحلہ، لمف نوڈ کی شمولیت، اور دور میٹاسٹیسیس (شکل 1B، میزیں 1 اور 2)۔ جیسا کہ شکل 1C میں دکھایا گیا ہے، CEA، CA19−9، اور AFP کا GC مریضوں کے سیرم میں بہت زیادہ اظہار کیا گیا تھا، جبکہ LKB1 کا صحت مند افراد میں بہت زیادہ اظہار کیا گیا تھا۔ CEA، CA19−9، اور AFP کے مقابلے میں، LKB1 میں بہترین خاصیت اور حساسیت تھی (AUC=0.727؛ شکل 1D)۔ کلینیکل پیرامیٹرز میں سے، LKB1 اسٹیج T3−4، N2−3، M1، اور اسٹیج III−IV میں UICC اسٹیجنگ کے معیار کے مطابق نمایاں طور پر کم تھا (p < {{30}}۔{34}} 5، p < 0.05، p <0.001، اور p <0.01، بالترتیب؛ شکل 1E اور جدول 2)۔ اس کے علاوہ، LKB1 کو اس کے منفی GC مریضوں (شکل 1F) میں عددی طور پر بہت زیادہ ظاہر کیا گیا تھا۔ اس طرح، ان نتائج نے تجویز کیا کہ LKB1 ممکنہ طور پر GC کی ترقی میں شامل ہے۔

شکل 1. LKB1 اظہار اور طبی خصوصیات کے درمیان تعلقات۔ (A، B)، صحت مند افراد میں طبی خصوصیات (n=176) اور GC مریضوں (n=416) کو ازگر کا استعمال کرتے ہوئے نقشہ بنایا گیا۔ (C)، CEA، CA19−9، اور AFP کا اظہار GC مریضوں اور صحت مند افراد کے سیرم میں ماپا گیا۔ (D)، CEA، CA19−9، اور AFP کے مقابلے میں، LKB1 کی حساسیت اور خاصیت زیادہ تھی۔ (E)، LKB1 کا اظہار اسٹیج N2−3، M1، اور اسٹیج III−IV GC مریضوں میں کم تھا۔ (F)، LKB1 کا عددی طور پر اس کے2-منفی GC مریضوں میں اظہار کیا گیا تھا۔ HER2-~+: HER2 منفی GC مریض۔ HER2++~+++: سوائے HER2 منفی GC مریضوں کے۔ غیر جوڑا ہوا ٹی ٹیسٹ، * p < 0۔{24}}5, ** p < 0.01, *** p < 0.001۔

جدول 2. جی سی کے مریضوں کی بنیادی خصوصیات۔

3.2 LKB1 GC کے مریضوں میں مدافعتی مائیکرو ماحولیات کو فروغ دیتا ہے۔

TCGA ڈیٹا بیس کے مطابق، T−cell ریسیپٹر کمپلیکس اعلی اور کم LKB1 اظہار والے GC مریضوں کے درمیان نمایاں طور پر مختلف تھا (شکل 2A)۔ ہم نے مزید دکھایا کہ اعلی اور کم LKB1 اظہار کے ذیلی گروپوں میں GC مریضوں میں T خلیوں کا اظہار مختلف ہے، بشمول CD8+ T خلیات، ریگولیٹری T خلیات، نیوٹروفیلز، اور eosinophils (شکل 2B)۔ اس کے علاوہ، LKB1 اظہار اور T−cell امیون چیک پوائنٹس، T−cell ایکٹیویشن، اور اینٹیجن پریزنٹیشن (شکل 2C) میں شامل جینوں کی اپ گریجشن کے درمیان مضبوط ارتباط کے نمونے دیکھے گئے۔ ہم نے LKB1 اعلی اور کم اظہار کے ذیلی گروپوں کے اندر PD−1، PD−L1، CD8A، CD8B، CD28، اور GZMM mRNA اظہار پر مبنی GC مریضوں کو مزید مستحکم کیا۔ دلچسپ بات یہ ہے کہ تمام جینز کا اظہار LKB1 − ہائی ایکسپریشن سب گروپ (شکل 2D) میں کیا گیا تھا۔ LKB1، PD−1، اور PD−L1 اظہار نے چپچپا اور پھیلا ہوا قسم میں محدود فرق ظاہر کیا (ضمنی اعداد و شمار S2)۔ یہ اعداد و شمار بتاتے ہیں کہ LKB1 کا تعلق GC مریضوں میں T−cell ایکٹیویشن فینوٹائپ اور T−cell امیون چیک پوائنٹ سے ہو سکتا ہے۔

3.3 LKB1 کو GC میں T (CD3+CD8+) سیل انفلٹریٹس میں منتخب طور پر ظاہر کیا جاتا ہے

مدافعتی مائیکرو ماحولیات میں LKB1 اظہار کا تعین کرنے کے لیے، ہم نے پیریفرل خون (B)، تازہ کینسر (T) اور ملحقہ غیر کینسر والے ٹشوز (N) میں چھ مدافعتی دراندازی خلیوں کے اظہار کی پیمائش کی، اور GC مریضوں میں سائٹوکائن اظہار کی 12 اقسام ( شکل 3A)۔ ہم نے تمام چھ مدافعتی دراندازی خلیوں کی کثرت کی بنیاد پر LKB1 اظہار کا بھی مظاہرہ کیا، بشمول B خلیات، T خلیات، نیوٹروفیلز، میکروفیجز، اور ڈینڈریٹک خلیات (شکل 3A اور سپلیمنٹری فگر S3)۔ ہم نے پایا کہ ٹی خلیات (CD3+CD8+) کا تناسب ملحقہ غیر کینسر والے ٹشوز (N) میں زیادہ تھا، جبکہ T خلیات کا تناسب (CD3+CD{{ 9}}) تازہ کینسر والے ٹشوز (T) میں زیادہ تھا، اور دوسرے T خلیات نے تازہ کینسر والے (T) اور ملحقہ غیر کینسر والے ٹشوز (N؛ شکل 3B) کے درمیان محدود فرق ظاہر کیا۔ مزید برآں، T خلیات (CD3+CD8+LKB1+, CD3+CD8+CD28+LKB1+, CD 3+CD8+CD28+PD−1+LKB1+) کا تازہ ملحقہ غیر کینسر والے ٹشوز (N; شکل 3C) میں نمایاں طور پر زیادہ تناسب تھا۔ دوسرے مدافعتی خلیوں میں LKB1 کا اظہار تازہ کینسر (T) اور ملحقہ غیر کینسر والے ؤتکوں (N) کے درمیان یکساں تھا، سوائے نیوٹروفیلز (ضمنی اعداد و شمار S3)۔ ایک ساتھ، ان نتائج نے یہ ظاہر کیا کہ LKB1 خاص طور پر T (CD3+CD8+، CD3+CD8+CD28+) سیل انفلٹریٹ مائکرو ماحولیات سے وابستہ ہو سکتا ہے۔ جی سی کے مریضوں میں۔

شکل 2. LKB1 T−cell ایکٹیویشن جین اور مدافعتی چوکیوں سے وابستہ ہے۔ (A) T−cell ریسیپٹر کمپلیکس نے LKB1 اعلی اور کم اظہار کے ذیلی گروپس میں سب سے بڑا فرق ظاہر کیا۔ (B) CAMOIP ڈیٹا بیس کا تجزیہ LKB1 اعلی اور کم اظہار والے ذیلی گروپوں کے درمیان مدافعتی خلیوں کے امتیازی اظہار کا۔ (C) ہیٹ میپ LKB1 اظہار (n=407) کی بنیاد پر دستخطی مدافعتی جین سیٹ کے لیے z−score نارملائزڈ log−cpm اقدار دکھاتا ہے۔ (D) PD−1، PD−L1، CD8A، CD8B، CD28، اور GZMM کا LKB1−high GC مریض ذیلی گروپ میں انتہائی اظہار خیال کیا گیا۔ غیر جوڑا ہوا t-ٹیسٹ، ns: کوئی خاص فرق نہیں، * p < 0۔{15}}5, ** p < 0۔{19}}1, *** p < 0.001 , **** p < 0.0001۔

شکل 3. LKB1 کا تعلق GC مریضوں میں T-cell infiltration سے ہے۔ (A) ہیٹ میپ پردیی خون (B)، تازہ کینسر (T)، اور ملحقہ غیر کینسر والے ٹشوز (N)، اور سائٹوکائن اظہار میں مدافعتی خلیوں کا تناسب دکھاتا ہے۔ (B) تازہ کینسر (T) اور ملحقہ غیر کینسر والے ٹشوز (N) میں مختلف قسم کے T خلیات کا تناسب۔ (C) تازہ کینسر (T) اور ملحقہ غیر کینسر والے ٹشوز (N) میں LKB1 کا اظہار کرنے والے T خلیوں کے مختلف تناسب۔ پیئرڈ ٹی ٹیسٹ، * p < 0۔{7}}5, ** p < 0.01, *** p < 0.001۔

3.4 LKB1 ممکنہ طور پر IFN− اظہار کے ساتھ منسلک ہے۔

ہم نے فرض کیا کہ LKB1 کا اظہار مدافعتی خلیوں میں ہوتا ہے جو مدافعتی خلیوں کے فنکشن سے منسلک ہوتا ہے۔ نتائج کی بنیاد پر، ہم نے امیون انفلٹریشن سیل (LKB1+) کے تناسب اور سائٹوکائن ایکسپریشن (شکل 4A) کے درمیان تعلق کا تجزیہ کیا۔ پچھلے مطالعے سے پتہ چلتا ہے کہ IFN− T خلیات (CD3+CD8+) کے ذریعہ تیار کردہ GC مریضوں میں اینٹی−PD−1 ناکہ بندی کے ساتھ طبی افادیت اور بقا کی پیش گوئی کرنے کے لیے ایک مؤثر اشارے ہے [23,24] . ہم نے پایا کہ صرف T سیل (CD3+LKB1+) اور (CD3+CD8+LKB1+) تناسب کا IFN− کے ساتھ تھوڑا سا مثبت تعلق تھا۔ تازہ کینسر (T) اور ملحقہ غیر کینسر والے ٹشوز (N؛ شکل 4B) میں اظہار۔ اگلا، ہم نے مذکورہ تازہ کینسر (T) اور ملحقہ غیر کینسر والے ٹشوز (N) میں LKB1 اور IFN− اظہار کا تعین کیا اور پایا کہ LKB1 اظہار IFN− اظہار (شکل 4C) کے برخلاف کینسر والے ٹشوز میں نمایاں طور پر کم تھا۔ ان نتائج نے تجویز کیا کہ LKB1 کا T خلیات (CD3+CD8+, CD3+CD8+CD{{ کے ذریعے خفیہ کردہ اینٹی ٹیومر IFN− اظہار کے ساتھ مثبت تعلق ہو سکتا ہے۔ 23}})۔

شکل 4. LKB1 مثبت طور پر IFN− اظہار کے ساتھ منسلک ہے۔ (A) امیون سیل انفلٹریٹ (LKB1+) تناسب اور سائٹوکائن اظہار کے درمیان تعلق کا تجزیہ۔ (B) تازہ کینسر میں IFN− اظہار کے ساتھ T سیل (CD3+LKB1+) اور (CD3+CD8+LKB1+) کا ارتباط (T) اور ملحقہ غیر کینسر والے ٹشوز (N)۔ (C) تازہ کینسر (T) اور ملحقہ غیر کینسر والے ٹشوز (N) میں LKB1 اور IFN− اظہار کے امیونو ہسٹو کیمیکل تجزیے۔

3.5 LKB1 GC میں Pembrolizumab کے لیے اچھی ردعمل کی پیش گوئی کرتا ہے۔

نتائج کی بنیاد پر، LKB1 ممکنہ مدافعتی چوکی ہو سکتا ہے۔ جیسا کہ شکل 5A میں اشارہ کیا گیا ہے، LKB1 کا کم اظہار 2015 سے 2019 تک GC مریضوں کی بقا کی بنیاد پر نمایاں طور پر مختصر مجموعی بقا سے متعلق تھا۔ 1 جنوری 2023 تک رسائی حاصل کی گئی) نے یہ بھی اشارہ کیا کہ LKB1 اظہار نے GC مریضوں کی تشخیص کو نمایاں طور پر متاثر کیا، کم LKB1 اظہار والے مریضوں میں مجموعی طور پر بقا نمایاں طور پر کم ہے (شکل 5B)۔ اگلا، امیونو تھراپی کے لئے LKB1 کی پیش گوئی کی قیمت کا اندازہ کرنے کے لئے، پیمبرولیزوماب کے ساتھ علاج کیے جانے والے جی سی مریضوں پر مشتمل آئی سی بی کوہورٹ کا تجزیہ کیا گیا (ٹیبل 3)۔ اعلی LKB1 اظہار والے GC مریضوں کے مقابلے میں، کم LKB1 اظہار والے ذیلی گروپ میں مقصدی ردعمل کی شرح میں کمی تھی (ORR؛ شکل 5C)۔ مزید برآں، LKB1 کے کم اظہار کے ساتھ GC مریضوں نے بدتر PFS اور OS (شکل 5D) کا مظاہرہ کیا۔ پچھلے مطالعے سے پتہ چلتا ہے کہ PD−L1 mRNA کا اظہار پیمبرولیزوماب علاج کی افادیت سے وابستہ تھا [6]۔ اس کے علاوہ، LKB1 اور PD−L1 اظہار کی بنیاد پر، GC مریضوں کو PD−L1 اعلی اور کم اظہار کے ذیلی گروپوں کے اندر LKB1 اعلی اور کم میں درجہ بندی کیا گیا تھا۔ جیسا کہ شکل 5E میں دکھایا گیا ہے، LKB1 اور PD−L1 دونوں کے اعلی اظہار کے ساتھ GC مریضوں میں سب سے زیادہ ORR تھا۔ GC مریضوں میں PD−L1/LKB1 اظہار اور مالیکیولر پیرامیٹرز کے درمیان تعلق کا خلاصہ جدول 4 میں کیا گیا ہے۔ ایک ساتھ لے کر، LKB1 GC مریضوں میں پیمبرولیزوماب کے ردعمل کی پیش گوئی کرنے کے لیے ایک ممکنہ مدافعتی چوکی ہو سکتا ہے۔

جدول 3. معدنی گیسٹرک کینسر کے مریض کا پیمبرولیزوماب پر ردعمل۔

جدول 4. LKB1/PD−L1 اظہار اور مالیکیولر پیرامیٹرز کے درمیان تعلق۔

شکل 5۔ LKB1 اظہار جی سی کے مریضوں میں پیمبرولیزوماب کے ردعمل کی پیش گوئی کرتا ہے۔ (A) LKB1 اظہار کی اعلی سطح 2015 سے 2019 تک GC کے مریضوں میں طویل عرصے تک بقا کے ساتھ منسلک تھی۔ (B) کپلن-میئر پلٹر نے ظاہر کیا کہ LKB1 کی اعلی سطح نے GC کے مریضوں کی بقا کو طویل کیا۔ (C) اسٹیک شدہ بار اور آبشار کے پلاٹ LKB1 اظہار کی بنیاد پر ICB کوہورٹ (n=43) میں pembrolizumab کے لیے ردعمل ظاہر کرتے ہیں۔ (پیئرسن کا χ2 ٹیسٹ)۔ (D) LKB1 اظہار کی بنیاد پر ICB کوہورٹ (n=43) میں ترقی کے Kaplan−Meier curves−free survival (PFS) اور مجموعی طور پر بقا (OS)۔ (E) PD−L1 اعلی اور کم اظہار والے GC مریضوں کے ذیلی گروپوں میں LKB1 mRNA اظہار کی بنیاد پر، ہیٹ میپ نے ICB کوہورٹ (n=43) میں pembrolizumab اور مالیکیولر پیرامیٹرز کے لیے ردعمل کا مظاہرہ کیا۔ جی ایس، جینیاتی طور پر مستحکم؛ MSI−H، مائیکرو سیٹلائٹ عدم استحکام−ہائی؛ EBV، EBV مثبت؛ سگنیٹ رنگ سیل: گیسٹرک سگنیٹ رنگ سیل کارسنوما؛ ORR، مقصدی ردعمل کی شرح؛ ایس ڈی، مستحکم بیماری؛ PR، جزوی ردعمل؛ PD، ترقی پسند بیماری؛ CR، مکمل جواب؛ M/D اڈینو، اعتدال سے مختلف اڈینو کارسینوما؛ P/D اڈینو، غیر تسلی بخش اڈینو کارسینوما؛ W/D اڈینو، اچھی طرح سے مختلف اڈینو کارسینوما؛ مخلوط (W/D اور P/D)، اچھی طرح سے تفریق شدہ اڈینو کارسینوما اور غیر تسلی بخش اڈینو کارسینوما۔

4. بحث

جی سی ایک عام مہلک بیماری ہے اور دنیا بھر میں کینسر سے ہونے والی اموات کی تیسری بڑی وجہ ہے [17,18]۔ پچھلی دہائیوں میں، GC کے لیے علاج اور تشخیصی حکمت عملیوں میں نمایاں بہتری آئی ہے [19]۔ تاہم، مؤثر تشخیصی مارکروں کی کمی کی وجہ سے، مریضوں کی تشخیص اکثر ابتدائی طور پر ایک اعلی درجے کے مرحلے پر ہوتی ہے، جس میں 5 سال کی بقا کی شرح ہوتی ہے۔<20% [25,26]. Therefore, there is an urgent need to explore tumor markers with favorable specificity and sensitivity for GC diagnosis. In this study, we first showed that LKB1 expression was decreased in GC serum. Compared with GC diagnostic biomarkers mainly used in clinical practice, including CEA, CA19−9, and a−1−fetoprotein (AFP), LKB1 showed the best specificity and sensitivity. Furthermore, LKB1 was associated with clinical features of GC patients, such as grade, invasion depth, TNM stage, UICC stage, and vital status. These results suggested that LKB1 serves as a tumor suppressor gene and suppresses GC progression.

cistanche پلانٹ میں مدافعتی نظام میں اضافہ

Cistanche Enhance Immunity مصنوعات دیکھنے کے لیے یہاں کلک کریں۔

【مزید پوچھیں】 ای میل:cindy.xue@wecistanche.com / واٹس ایپ: 0086 18599088692 / وی چیٹ: 18599088692

LKB1 کی اصل شناخت 1997 میں ہوئی تھی اور اسے STK11 کے نام سے بھی جانا جاتا ہے [27]۔ LKB1 ایک اہم انسانی ٹیومر کو دبانے والا جین ہے، اور غیر چھوٹے سیل پھیپھڑوں کے کینسر (NSCLC) کے مریضوں میں LKB1 اتپریورتن یا جینومک نقصان کثرت سے KRAS تبدیلیوں کے ساتھ ہوتا ہے۔ اس امتزاج کے نتیجے میں انتہائی جارحانہ فینوٹائپ اور بقا کی شرح میں کمی واقع ہوتی ہے [28–30]۔ LKB1 سے متعلق زیادہ تر رپورٹس بنیادی طور پر پھیپھڑوں کے کینسر پر مرکوز ہیں، GC میں LKB1 کے کردار پر محدود رپورٹس کے ساتھ۔ پچھلے مطالعہ سے پتہ چلتا ہے کہ LKB1 اظہار جی سی کے مریضوں میں خراب تشخیص کے ساتھ منسلک ہوسکتا ہے [31]؛ تاہم، آیا LKB1 ممکنہ تشخیصی مارکر کے طور پر کام کرتا ہے اور امیونو تھراپیٹک ہدف قائم نہیں کیا گیا ہے۔ ہمارے مطالعے سے پتہ چلتا ہے کہ، پہلی بار، LKB1 کے کم اظہار نے GC کے مریضوں میں پیمبرولیزوماب کے لیے کمتر علاج کے ردعمل کا باعث بنا، یہ تجویز کرتا ہے کہ LKB1 ممکنہ امیونو تھراپیٹک ہدف ہو سکتا ہے۔

cistanche tubulosa - مدافعتی نظام کو بہتر بنانا

حال ہی میں، جی سی [32,33] کے طبی علاج میں امیونو تھراپی نے بہت اچھے فوائد دکھائے ہیں۔ PD−1/PD−L1 ناکہ بندی ایک ناول اور امید افزا علاج کی حکمت عملی کے طور پر ابھری ہے [34]، جس میں ٹیومر مخالف قوت مدافعت کی اہمیت پر زور دیا گیا ہے اور کینسروں میں سائٹوٹوکسک ٹی لیمفوسائٹ (CTLs، CD8+) کی خرابی کو معمول بنایا گیا ہے [35] . متعدد کینسروں میں، CTL کی دراندازی ٹیومر کے رجعت کو منظم کرتی ہے اور اسے ایک مثبت تشخیصی اشارے سمجھا جاتا ہے [36]۔ تاہم، مطالعے نے اشارہ کیا ہے کہ دراندازی میں CTL کی خرابی مدافعتی چوری اور بالآخر کینسر کے خلیوں پر حملہ کرنے میں ناکامی کا باعث بنتی ہے [37]۔ PD−1/PD−L1 ناکہ بندی کا مظاہرہ غیر فعال CTL کے ذریعے قائم ٹیومر کو ختم کرنے کے لیے کیا گیا تھا جو اینٹی ٹیومر استثنیٰ کو بحال کرتا ہے [38]۔ ہم نے دکھایا کہ PD−1/PD−L1 کا GC مریضوں کے LKB1 کے اعلیٰ اظہار کرنے والے ذیلی گروپوں میں بہت زیادہ اظہار کیا گیا تھا، یہ تجویز کیا گیا تھا کہ LKB1 T−cell مدافعتی چوکیوں سے وابستہ ہو سکتا ہے۔ مزید برآں، IFN− ایک سائٹوکائن ہے جو وائرل نقل کو روکتا ہے اور CD8+T خلیات [39] کے ذریعہ جاری کردہ مخصوص اینٹیجنز کی پیشکش کو بڑھاتا ہے۔ اس کے علاوہ، ہم نے پایا کہ T سیل ایکٹیویشن اور اینٹیجن پریزنٹیشن جین بھی GC مریضوں کے ذیلی گروپوں میں LKB1 ہائی ایکسپریشن، اور T (CD3+CD8+LKB1+ کے ساتھ بہت زیادہ اظہار کیا گیا تھا، CD3+CD8+CD28+LKB1+) خلیوں کا GC مریضوں کے تازہ ٹشوز میں IFN− اظہار کے ساتھ مثبت تعلق تھا۔ اس طرح، ہم نے اندازہ لگایا کہ LKB1 T سیل (CD3+CD8+، CD3+CD8+CD28+) کے اخراج میں رکاوٹ بن سکتا ہے اور مثبت طور پر اینٹی کے ساتھ وابستہ ہے۔ ٹیومر IFN− اظہار۔ بنیادی طریقہ کار جس کے ذریعے LKB1 سائٹوٹوکسک T−cell ایکٹیویشن سے وابستہ ہے مزید تفتیش کی ضمانت دیتا ہے۔

حوالہ جات

1. لیوبیک، ای جی؛ Curtius, K.; جیون، جے؛ ہیزلٹن، ڈبلیو ڈی کینسر کے واقعات کے منحنی خطوط پر ٹیومر کی ترقی کا اثر۔ کینسر ریس 2013، 73، 1086–1096۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

2. لی، وائی؛ وہ، ایکس۔ فین، ایل. ژانگ، ایکس؛ Xu, Y.; Xu, X. گیسٹرک کینسر میں ایک نئے مدافعتی پروگنوسٹک ماڈل کی شناخت۔ کلین ترجمہ اونکول۔ 2021، 23، 846–855۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

3. لوٹز، ایم پی؛ Zalcberg, JR; Ducreux، M.؛ اجانی، جے اے؛ ایلم، ڈبلیو. آسٹ، ڈی. بینگ، وائی جے؛ Cascinu, S.; ہولشر، اے. Jankowski, J.; ET رحمہ اللہ تعالی. EORTC سینٹ گیلن بین الاقوامی ماہرین کے اتفاق رائے کی جھلکیاں گیسٹرک، معدے، اور غذائی نالی کے کینسر کے بنیادی علاج پر - ابتدائی معدے کے کینسر کی ذیلی قسموں کے لیے امتیازی علاج کی حکمت عملی۔ یور جے کینسر 2012، 48، 2941–2953۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

4. تھامسن، آئی.؛ وین گیسٹل، YR؛ وین رامشورسٹ، بی؛ Luyer, MD; Bosscha, K.; Nienhuijs, SW; Lemmens, VE; ڈی ہنگ، گیسٹرک اصل کا IH Peritoneal carcinomatosis: واقعات، بقا، اور خطرے کے عوامل پر آبادی پر مبنی مطالعہ۔ انٹر جے کینسر 2014، 134، 622–628۔ [کراس ریف]

5۔ کہراماں، ص۔ Yalcin, S. اس کے-2 مثبت ایڈوانسڈ گیسٹرک کینسر کے نظاماتی علاج میں حالیہ پیشرفت۔ آنکو ٹارگٹس وہاں۔ 2021، 14، 4149–4162۔ [کراس ریف]

6. کونو، K.؛ Nakajima, S.; میمورا، K. گیسٹرک کینسر کے لیے مدافعتی چوکی روکنے والوں کی موجودہ حیثیت۔ گیسٹرک کینسر 2020، 23، 565–578۔ [کراس ریف]

7. لارڈک، ایف۔ شتارا، K.؛ جنجیگیان، YY گیسٹرک کینسر میں افق پر نئے ایجنٹ۔ این۔ اونکول۔ 2017، 28، 1767–1775۔ [کراس ریف]

8. Zhang, Y.; مینگ، Q. سورج، ق. Xu, ZX; چاؤ، ایچ. وانگ، Y. LKB1 کی کمی کی وجہ سے ٹیومرجینیسیس اور غیر نوپلاسٹک بیماریوں میں میٹابولک ری پروگرامنگ۔ مول میٹاب۔ 2021، 44، 101131۔ [کراس ریف]

9. کوٹکیس، ایف۔ نکولے، بی این؛ رومانے، اے۔ کارنک، آر. گو، ایچ۔ ناگلے، جے ایم؛ بوکھلی، ایم. ہیورڈ، ایم سی؛ Li, YY; چن، ٹی. ET رحمہ اللہ تعالی. LKB1 کا نقصان سیرین میٹابولزم کو ڈی این اے میتھیلیشن اور ٹیومرجینیسیس سے جوڑتا ہے۔ فطرت 2016، 539، 390–395۔ [کراس ریف]

10. Su, KH; ڈائی، ایس. تانگ، Z. سو، ایم؛ Dai, C. ہیٹ شاک فیکٹر 1 AMP- ایکٹیویٹڈ پروٹین کناز کا براہ راست مخالف ہے۔ مول سیل 2019, 76, 546–561.e8۔ [کراس ریف]

11. اولویڈی، ایم. Tisserand, JC; لوسیانی، ایف۔ Boeckx، B.؛ Wouters, J.; لوپیز، ایس. ریمبو، ایف۔ Aibar, S.; Thienpont، B.؛ بارا، جے؛ ET رحمہ اللہ تعالی. تقابلی oncogenomics tyrosine kinase FES کو میلانوما میں ٹیومر دبانے والے کے طور پر شناخت کرتا ہے۔ جے کلین تفتیش کریں۔ 2017، 127، 2310–2325۔ [کراس ریف]

12. ہالسٹین، پیئ؛ ایچنر، ایل جے؛ برون، ایس این؛ کمیریڈی، اے۔ سوینسن، آر یو؛ ویرا، ایل آئی؛ راس، ڈی ایس؛ Rymoff, TJ; Hutchins, A.; گالویز، ایچ ایم؛ ET رحمہ اللہ تعالی. AMPK سے متعلقہ کنیزز SIK1 اور SIK3 ثالثی کلیدی ٹیومر - NSCLC میں LKB1 کے دبانے والے اثرات۔ کینسر ڈسکو۔ 2019، 9، 1606–1627۔ [کراس ریف]

13. سوینسن، آر یو؛ پارکر، SJ؛ ایچنر، ایل جے؛ کولار، ایم جے؛ والیس، ایم؛ برون، ایس این؛ Lombardo, PS; وان نوسٹرینڈ، جے ایل؛ Hutchins, A.; ویرا، ایل. ET رحمہ اللہ تعالی. acetyl-CoA carboxylase کی روک تھام فیٹی ایسڈ کی ترکیب اور غیر چھوٹے سیل پھیپھڑوں کے کینسر کے ٹیومر کی نشوونما کو پری کلینیکل ماڈلز میں روکتی ہے۔ نیٹ میڈ. 2016، 22، 1108–1119۔ [کراس ریف]

14. زینگ، Q.؛ چن، جے؛ لی، وائی۔ Werle, KD; زاؤ، آر ایکس؛ کوان، CS؛ وانگ، وائی ایس؛ Zhai, YX; وانگ، جے ڈبلیو؛ یوسف، ایم. ET رحمہ اللہ تعالی. LKB1 سیلولر میٹابولزم کو نشانہ بنا کر HPV سے وابستہ کینسر کے بڑھنے کو روکتا ہے۔ آنکوجین 2017، 36، 1245–1255۔ [کراس ریف]

15. پوفنبرگر، ایم سی؛ Metcalfe-Roach, A.; Aguilar, E.; چن، جے؛ Hsu, BE; وونگ، اے ایچ؛ جانسن، RM؛ فلن، بی؛ سمبورسکا، بی. ما، ای ایچ؛ ET رحمہ اللہ تعالی. T خلیوں میں LKB1 کی کمی معدے کی پولیپوسس کی نشوونما کو فروغ دیتی ہے۔ سائنس 2018، 361، 406–411۔ [کراس ریف]

16. اولیلا، ایس. ڈومینیک-مورینو، ای. لاجانین، کے. وونگ، آئی پی؛ ترپاٹھی، ایس. پینٹینمیکو، این. گاو، وائی؛ یان، وائی؛ نیمیلا، ای ایچ؛ وانگ، ٹی سی؛ ET رحمہ اللہ تعالی. سٹرومل Lkb1 کی کمی معدے کی ٹیومرجینیسیس کا باعث بنتی ہے جس میں IL{{3}JAK/STAT3 راستہ شامل ہوتا ہے۔ جے کلین تفتیش کریں۔ 2018، 128، 402–414۔ [کراس ریف]

17. سنگ، ایچ. فیرلے، جے؛ سیگل، آر ایل؛ Laversanne, M.; Soerjomataram, I.; جیمل، اے. Bray, F. عالمی کینسر کے اعدادوشمار 2020: GLOBOCAN 185 ممالک میں 36 کینسر کے لیے دنیا بھر میں واقعات اور اموات کا تخمینہ۔ CA کینسر جے کلین۔ 2021، 71، 209–249۔ [کراس ریف]

18. Pons-Tostivint, E.; Lugat, A.; فونٹانا، جے ایف؛ ڈینس، ایم جی؛ Bennouna, J. STK11/LKB1 پھیپھڑوں کے کینسر میں مدافعتی ردعمل کی ماڈیولیشن: حیاتیات سے علاج کے اثرات تک۔ سیلز 2021، 10، 3129۔ [کراس ریف]

19. کویاما، ایس. Akbay, EA; Li, YY; عارف، اے آر؛ Skoulidis, F.; Herter-Sprie, GS; Buczkowski, KA; لیو، وائی؛ عواد، ایم ایم؛ Denning, WL; ET رحمہ اللہ تعالی. STK11/LKB1 کی کمی پھیپھڑوں کے ٹیومر مائکرو ماحولیات میں ٹی سیل کی سرگرمی کو دبانے کے لیے نیوٹروفیل بھرتی اور پروانفلامیٹری سائٹوکائن کی پیداوار کو فروغ دیتی ہے۔ کینسر ریس 2016، 76، 999–1008۔ [کراس ریف]

20. جنجیگیان، وائی وائی؛ مارون، ایس بی؛ چتیلا، ڈبلیو کے؛ ملنگ، بی۔ چوان، ایس ایس؛ الٹرمین، سی. چو، جے ایف؛ سیگل، ایم ایف؛ سیمنز، ایم زیڈ؛ ممتاز، ص. ET رحمہ اللہ تعالی. اس کے 2-مثبت غذائی نالی، گیسٹرک، یا گیسٹرو-oesophageal جنکشن کینسر میں فرسٹ لائن پیمبرولیزوماب اور ٹراسٹزووماب: ایک اوپن لیبل، سنگل آرم، فیز 2 ٹرائل۔ لینسیٹ آنکول۔ 2020، 21، 821–831۔ [کراس ریف]

21. پیکارڈ، ای. Verschoor, CP; ما، جی ڈبلیو؛ Pawelec، G. مدافعتی مناظر، جینیاتی ذیلی قسموں اور کولوریکٹل کینسر میں امیونو تھراپی کے ردعمل کے درمیان تعلقات۔ سامنے والا۔ امیونول۔ 2020، 11، 369۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

22. کم، ایس ٹی؛ کرسٹیسکو، آر. باس، اے جے؛ کم، کے ایم؛ اوڈیگارڈ، جے آئی؛ کم، کے؛ لیو، ایکس کیو؛ شیر، ایکس؛ جنگ، ایچ. لی، ایم؛ ET رحمہ اللہ تعالی. میٹاسٹیٹک گیسٹرک کینسر میں PD-1 روک تھام کے کلینیکل ردعمل کی جامع مالیکیولر خصوصیات۔ نیٹ میڈ. 2018، 24، 1449–1458۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

23. ساواس، پی. ویراسامی، بی۔ Ye, C.; سلیم، اے. منٹوف، سی پی؛ Caramia, F.; سالگاڈو، آر. برن، DJ؛ ٹیو، زیڈ ایل؛ دشینتین، ایس. ET رحمہ اللہ تعالی. چھاتی کے کینسر کے T خلیات کی سنگل سیل پروفائلنگ بہتر تشخیص سے وابستہ ٹشو میں رہنے والے میموری سبسیٹ کو ظاہر کرتی ہے۔ نیٹ میڈ. 2018، 24، 986–993۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

24. بریوٹز، اے. Eickhoff, S.; ڈاہلنگ، ایس. کواسٹ، ٹی. بیدوئی، ایس. کروزیک، RA؛ کرٹس، سی. گربی، این. بارچیٹ، ڈبلیو. Iannacone، M. ET رحمہ اللہ تعالی. CD8(+) T سیلز آرکیسٹریٹ pDC-XCR1(+) پرائمنگ کو بہتر بنانے کے لیے ڈینڈریٹک سیل مقامی اور فنکشنل کوآپریٹیوٹی۔ استثنیٰ 2017، 46، 205–219۔ [کراس ریف]

25. کنوشیتا، جے۔ یاماگوچی، ٹی. موریاما، ایچ. فوشیدا، S. اسٹیج IV گیسٹرک کینسر کے لیے تبادلوں کی سرجری کی موجودہ حیثیت۔ سرگ آج 2021، 51، 1736-1754۔ [کراس ریف]

26. Du, Y.; Wei, Y. معدے کے کینسر میں قدرتی قاتل خلیوں کی علاج کی صلاحیت۔ سامنے والا۔ امیونول۔ 2018، 9، 3095۔ [کراس ریف]

27. زاؤ، آر ایکس؛ Xu, ZX LKB1 ٹیومر دبانے والے کو نشانہ بنانا۔ کرر منشیات کے اہداف 2014، 15، 32–52۔ [کراس ریف]

28. Skoulidis, F.; گولڈبرگ، ME؛ گرینوالٹ، ڈی ایم؛ Hellmann, MD; عواد، ایم ایم؛ گینر، جے ایف؛ شروک، اے بی؛ ہارٹمیئر، آر جے؛ Trabucco, SE; ہم جنس پرستوں، ایل. ET رحمہ اللہ تعالی. STK11/LKB1 اتپریورتن اور KRAS-Mutant پھیپھڑوں کے اڈینو کارسینوما میں PD−1 روکنے والا مزاحمت۔ کینسر ڈسکو۔ 2018، 8، 822–835۔ [کراس ریف]

29. کم، جے؛ لی، ایچ ایم؛ Cai, F.; کو، بی؛ یانگ، سی. Lieu, EL; محمد، ن. Rhyne, S.; لی، کے؛ Haloul، M. ET رحمہ اللہ تعالی. Hexosamine biosynthesis پاتھ وے KRAS/LKB1 اتپریورتی پھیپھڑوں کے کینسر میں قابل ہدف ذمہ داری ہے۔ نیٹ میٹاب۔ 2020، 2، 1401–1412۔ [کراس ریف]

30. کتاجیما، ایس. تانی، ٹی. اسپرنگر، بی ایف؛ کیمپیسی، ایم؛ اوساکی، ٹی. ہراتانی، K.؛ چن، ایم؛ کنیلسن، ای ایچ؛ مہادیون، این آر؛ رائٹر، جے؛ ET رحمہ اللہ تعالی. MPS1 روکنا KRAS-LKB1 اتپریورتی پھیپھڑوں کے کینسر کی امیونوجنیسیٹی کو پرائم کرتا ہے۔ کینسر سیل 2022, 40, 1128–1144e1128۔ [کراس ریف]

31. Hu, M.; زاؤ، ٹی. لیو، جے؛ زو، ز. Xu, Q.; گونگ، پی. Guo, H. LKB1 کا گھٹا ہوا اظہار epithelial-mesenchymal منتقلی کے ساتھ منسلک ہے اور گیسٹرک کینسر میں ایک ناموافق تشخیص کا باعث ہے۔ ہم پاتھول۔ 2019، 83، 133–139۔ [کراس ریف]

32. ہوگنر، اے. موہلر، ایم. گیسٹرک کینسر میں امیونو تھراپی۔ کرر اونکول۔ 2022، 29، 1559–1574۔ [کراس ریف]

33. کول، سی.؛ چارالمپاکس، این. Tsakatikas, S.; کوریز، این آئی؛ Papaxoinis, G.; Karamouzis, MV; Koumariano, A.; شیزاس، ڈی. گیسٹرک کینسر کے لیے امیونو تھراپی: 2021 کی تازہ کاری۔ امیونو تھراپی 2022، 14، 41–64۔ [کراس ریف]

34. اولیوا، ایس. Troia, R.; D'Agostino، M. بوکاڈورو، ایم. متعدد مائیلوما میں PD-1/PD-L1 روکنے والوں کے استعمال میں ہم جنس پرستوں کے وعدے اور نقصانات۔ سامنے والا۔ امیونول۔ 2018، 9، 2749۔ [کراس ریف]

35. فرہود، بی. نجفی، ایم. Mortezaee, K. CD8(+) cytotoxic T lymphocytes in cancer immunotherapy: A جائزہ۔ جے سیل فزیول 2019، 234، 8509–8521۔ [کراس ریف]

36. کلاتھیل، ایس جی؛ تھاناوالا، Y. ہیپاٹو سیلولر کارسنوما اور وائرل ہیپاٹائٹس میں قدرتی قاتل خلیات اور ٹی سیلز: مستقبل کے امیونو تھراپیٹک اپروچز کے لیے موجودہ حیثیت اور تناظر۔ سیلز 2021، 10، 1332۔ [کراس ریف]

37. ژانگ، ایچ. جیانگ، آر. چاؤ، جے؛ وانگ، جے؛ Xu, Y.; ژانگ، ایچ. لڑکے.؛ فو، ایف۔ شین، وائی؛ ژانگ، جی؛ ET رحمہ اللہ تعالی. کینسر سے وابستہ فائبروبلاسٹ میں PS1 کے ذریعہ CTL توجہ کو ریگولیٹ کیا جاتا ہے۔ سامنے والا۔ امیونول۔ 2020، 11، 999۔ [کراس ریف]

38. ژاؤ، ایم. Xie, L.; کاو، جی؛ لی، ایس؛ وانگ، پی. وی، زیڈ؛ Luo, Y.; فینگ، جے؛ یانگ، ایکس؛ ہوانگ، Q. ET رحمہ اللہ تعالی. CD4(+) T−cell ایپیٹوپ پر مبنی ہیٹرولوگس پرائم بوسٹ ویکسینیشن اینٹی ٹیومر امیونٹی اور PD-1/PD-L1 امیونو تھراپی کو مضبوط کرتی ہے۔ J. Immunother. کینسر 2022, 10, e004022. [کراس ریف]

39. وانگ، ڈبلیو. گرین، ایم. چوئی، جے ای؛ Gijón، M.؛ کینیڈی، پی ڈی؛ جانسن، جے کے؛ لیاو، پی. لینگ، ایکس؛ Kryczek, I.; فروخت، A.؛ ET رحمہ اللہ تعالی. CD8+ T خلیات کینسر کے امیونو تھراپی کے دوران ٹیومر فیروپٹوسس کو منظم کرتے ہیں۔ فطرت 2019، 569، 270–274۔ [کراس ریف]