فری ریڈیکلز پر Cistanche کے اثر کی تحقیق

مزید معلومات کے لیے:Ali.ma@wecistanche.com

دوسرا کلاؤڈ فاریسٹ ایک پرانا ژانگ ہونگجنگ

فی الحال، یہ خیال کیا جاتا ہے کہ مشین کے مدافعتی فعل میں کمی کا تعلق عمر بڑھنے سے ہے۔ اس مطالعہ کی بنیاد پرCistancheچوہوں کے مزاحیہ اور سیلولر مدافعتی افعال کو بڑھا سکتے ہیں اور ڈی-گیلیکٹوز کی وجہ سے عمر بڑھنے والے ماڈل کے خلاف لڑ سکتے ہیں، ہم نے چوہوں پر دوا کے اثر کا مزید مطالعہ کیا۔ اوزون کی سانس<. 3)="" induces="" strong="" antagonistic="" effects="" of="" aging="" and="" aging="" caused="" by="" strong="">آزاد ذراتجسم میں منشیات کے گروپ میں چوہوں کے کیمیلومینیسینس اظہار کی شرح میں اضافہ ہوا، SOD میں اضافہ ہوا جیورنبل "پلازما، گھٹنے اور ران کے ٹشوز میں لپڈ پیرو آکسائیڈز کے مواد اور کوریڈور ٹشوز کی MAOB جیورنبل میں کمی آئی؛ مختلف خوراک گروپوں کے درمیان خوراک کے اثر کا تعلق تھا۔ ذیلی عمر کے خلاف چوہوں کی عمر بڑھنے کا اثر کے مطالعہ کے مطابق ہے۔Cistancheچوہوں میں مدافعتی فنکشن میں اضافہ۔Cistancheمدافعتی فعل کو بڑھا سکتا ہے، جسم کی تناؤ مخالف صلاحیت کو بہتر بنا سکتا ہے، اور یہ مناسب ہے کہ بالواسطہ طور پر نقصانات کو حاصل یا ختم کیا جائے۔آزاد ذراتجسم کو. ، 1WMAO-B کی جیورنبل کو روکنا۔ تاکہ عمر بڑھنے میں تاخیر کا اثر حاصل کیا جا سکے۔ یہ تجربہ استعمال کے لیے تجرباتی بنیاد فراہم کرتا ہے۔Cistancheعمر بڑھنے کے خلاف اور بعض بوڑھوں کی بیماریوں کے علاج میں۔

مفت ریڈیکلز کے فوائد اور مضر اثرات کے لیے کلک کریں۔

1 مواد اور طریقے

1.1 مواد

1.1.1 منشیات اور ری ایجنٹس:Cistanchedeserticola YC Ma کو 3 بار پانی میں کاڑھا گیا، کاڑھیوں کو ملایا گیا، مناسب مقدار میں مرتکز کیا گیا، اور ایتھنول کی ایک خاص مقدار شامل کی گئی۔ 24 گھنٹے کھڑے رہنے کے بعد اسے فلٹر کیا گیا۔ فلٹریٹ کو بغیر الکحل کے لیے بخارات بنا دیا گیا تھا۔ استعمال کرنے سے پہلے بھاپ والے پانی سے تیار کریں 0.25 فیصد ~0.5 فیصد ارتکاز۔ ml میں lg کے بارے میں خام ادویات شامل ہیں)۔ Luminol (luminol)، ®National E Merck کمپنی کی مصنوعات Huang Howling Oxidation 88 (HO)، Hypochromatic Howling (HX)، معیاری tetra ethoxy propane، سبھی سگما کمپنی کی مصنوعات، نمک، بینزالکونیم، چانگزو گوانگمنگ بائیو کیمیکل ریسرچ انسٹی ٹیوٹ؛ cyclohexane، شنگھائی ریجنٹ نمبر 1 سے ایک پروڈکٹ؛ تھیوباربیٹورک ایسڈ، شنگھائی ریجنٹ نمبر 2، لوزھان کی ایک مصنوعاتسپر آکسائیڈبرخاست کرنا, شنگھائی چائنیز اکیڈمی آف سائنسز مصنوعات انسٹی ٹیوٹ آف بائیو کیمیکل مصنوعات۔

Cistanche

1.1 2 انسٹرومنٹ بیک مین LS-98OO33 مائع سکنٹیلیشن صرف گنتی، Shimadzu RF-540 فلوروسینس اسپیکٹرو فوٹومیٹر، 752 الٹرا وائلٹ گریٹنگز اسپیکٹرو فوٹومیٹر-G1-20ایک تیز رفتار ریفریجریٹڈ سینٹری فیوج، CPS}{1} الٹراسونک pulverizer.

1.1.3 جانوروں کے ICR چوہے، 2 ماہ پرانے، وزن 20±2 گرام، جیانگسو تجرباتی جانوروں کے مرکز کے ذریعے فراہم کردہ۔

1.2 طریقہ

چوہوں کو کنٹرول میں تقسیم کیا گیا تھا (Q ماحول میں داخل نہ ہوں)، ماڈل، اور دوائیوں کے گروپ، ہر ایک میں 10 چوہوں، بغیر کسی پابندی کے تیز پانی کھاتے ہیں۔ ادویات کے گروپ کو دو خوراکی گروپوں میں تقسیم کیا گیا تھا، جلد 2، شمارہ 7، 1994، چائنیز جرنل آف چائنیز میٹیریا میڈیکاCistancheاقتباس100 اور 200 ملی گرام/کلوگرام (خام ادویات 20 اور 4Qg/kg کے برابر) بالترتیب کھلایا گیا۔ کنٹرول گروپ اور ماڈل گروپ کو ہر روز عام نمکین کی مساوی مقدار دی جاتی تھی۔ انتظامیہ گروپ اور ماڈل گروپ کو O، ماحولیات (0.9 X 10-^Oaft ڈگری)، مسلسل 2. دن دیا گیا۔ ہر انگلی کے تناؤ کا ٹیسٹ تجربے کے 21 ویں دن کیا گیا تھا۔

1. 2.1 برداشت کا ٹیسٹ مندرجہ بالا گروپوں میں سے ہر ایک میں چوہوں کو 40 سینٹی میٹر اور 12±l پانی کی گہرائی میں ڈالیں۔ Water®L کے کنٹینر میں، وقت شروع کریں جب تک کہ یہ نیچے تک نہ ڈوب جائے اور حرکت نہ کرے، جو چوہوں کے لیے تیراکی کا وقت ہے۔

   
   

1.2.2 وارم پروف ٹیسٹ ماؤس کو پہلے 15 پر سیٹ کیا گیا ہے۔ 2 منٹ تک پانی میں تیریں، اور پھر جمنے کے مکمل وقت کا مشاہدہ کرنے کے لیے 15P فریزر میں داخل ہوں۔

1.2.3 ایٹموسفیرک ہائپوکسیا ٹالرینس ٹیسٹ چھوٹے گلوٹین کو سوڈیم لائم سے بھری 250 ملی لیٹر چوڑے منہ والی بوتل میں ڈالیں اور سیل کرنے کے بعد ہر گروپ میں چوہوں کے زندہ رہنے کا وقت ریکارڈ کریں۔

1.2.4 دماغ کی قسم B monoamine oxidase (MACXB) کا تعین ادبی زبانی طریقہ کے مطابق، چوہوں کا پورا دماغ لیں، مناسب مقدار میں پری کولڈ 0.2mol/L فاسفیٹ بفر (PH7.4) شامل کریں۔ )، ہوموجنیٹ، اور الٹراساؤنڈ (24kC) 3 بار، کل دو بار، 30sr1000r/min، 0C کے وقفہ کے ساتھ 30 منٹ کے لیے کچلیں۔ 17000r/منٹ پر سپرنٹنٹ، 30 منٹ کے لیے 4C، سپرناٹینٹ کو ضائع کر دیں اور precipitate لیں، اور مناسب مقدار استعمال کریں۔ .2mo(/L PH7.4) تیزاب کو بفر کیا جاتا ہے اور خام ابال کا محلول بنانے کے لیے اسے دوبارہ معطل کیا جاتا ہے۔ خام ابال کے محلول کی مناسب مقدار لیں، 16mmol/L benzamidine 0.3ml شامل کریں، مندرجہ بالا فاسفیٹ بفر کو 3mL بنانے کے لیے استعمال کریں، اور فاسفورک ایسڈ ڈرم 3ml بفر محلول کو خالی ٹیوب کے طور پر استعمال کریں۔ تمام ٹیسٹ ٹیوبیں 37 پر رکھی گئی ہیں۔ پانی کے غسل میں 3 گھنٹے تک ہلائیں، اسے باہر نکالیں، رد عمل کو ختم کرنے کے لیے 6 فیصد پیروکسی ایسڈ ڈالیں، پھر 3m [سائیکلوہیکسین، مکس کرنے کے لیے ہلائیں، 1 اومن کے لیے 1000r/منٹ پر سینٹری فیوج، اور اسے اوپر لے جائیں واضح محلول کی جاذبیت 242nm پر ماپا جاتا ہے، اور چینی امائن شامل کرنے سے پہلے خالی ٹیوب کو گرم رکھنا ہوتا ہے۔ پروٹین کی خرابی کا تعین فولن-فینول طریقہ سے کیا جاتا ہے، بچھڑے کے سیرم البومین کو معیاری پروٹین کے طور پر۔ ایک انزائم ایکٹیویٹی یونٹ اور ایک انزائم ایکٹیویٹی یونٹ کی تعریف اس طرح کی گئی ہے کہ 37P 0.01/3h کی جذب میں تبدیلی کے ساتھ انزائم کی مقدار پیدا کرتا ہے۔'

1. 2. 5 سیرمسپر آکسائیڈبرخاست کرنا(SOD) سرگرمی کا تعین (5 mu I، ماؤس سیرم 10M، luminescent مرکب میں شامل کیا گیا (0، 1mmol/L luminol اور 0.1mmol/L hypoxanthine کے ذریعے ملایا گیا) 980 میں، رکھیں اسے 20 منٹ کے لیے 37C انکیوبیٹر میں رکھیں۔ اسے نکالنے کے بعد، رد عمل شروع کرنے کے لیے ہوانگ گوانین آکسیڈیس شامل کریں۔ بیک مین LS~98OO مائع فلیش میڈیم میں، 1 منٹ کے آخر میں روشنی کی تعداد کا حساب کیا جاتا ہے۔ سنگل فوٹون کا پتہ لگانے۔ com کو یونٹ کے طور پر استعمال کیا جاتا ہے۔ luminescence inhibition ریٹ کا حساب کمتر سیرم گروپ کے ساتھ خالی کے طور پر کیا جاتا ہے۔ اس کے علاوہ، معیاریسپر آکسائیڈبرخاستگیارتکاز (abscissa) اور luminescence inhibition rate (coordinate) پہلے کی طرح معیاری پروٹین مواد کے تعین کے طور پر استعمال ہوتا ہے۔ 1. 2.6 پلازما، دماغ اور جگر میں لپڈ پیرو آکسائیڈ (LPO) کا تعین ④ ماؤس پلازما کے 50 کین لیں، جگر اور دماغ کو ہم آہنگ کریں (0.2mol/L فاسفیٹ بفر pH7.4 استعمال کریں 10 فیصد ارتکاز میں تیار کردہ ہوموجینائزر میں ہر 50 آباؤ اجداد میں، l/24mol/L سلفرک ایسڈ 4ml، 1 فیصد فاسفورک ایسڈ 0.5ml، ملا کر 5 منٹ کے لیے رکھ دیں، 10 منٹ کے لیے 1000r/mm پر سینٹری فیوج کریں، اور سپرنٹنٹ کی خواہش ظاہر کی۔ 2 ملی لیٹر l/24mol/L سلفیورک ایسڈ اور 0.3 ملی لیٹر 10 فیصد کیلشیم فاسفیٹ کو پرسیپیٹیٹ میں ڈالیں، اچھی طرح مکس کریں، 1000r/منٹ پر سینٹری فیوج کریں، اور 1ml مزاحمتی بزدلانہ پانی کو پرسیپیٹیٹ میں ڈالیں، اچھی طرح مکس کریں تاکہ سسپنشن بن جائے۔ ٹوٹا ہوا باربیٹل ایسڈ ریجنٹ 1ml، 95 پر۔ تیل کے غسل میں 14 کے لیے ٹھنڈا ہونے کے بعد، 5ml n-butanol شامل کریں، اچھی طرح مکس کریں *100Or/min centrifugation 10mtn، n-butanol مرحلہ لیں، اور RF پر فلوروسینس کی شدت کی پیمائش کریں{{ 33} OS اسپیکٹرو فوٹومیٹر (حوصلہ افزائی طول موج 515mn، اخراج کی لمبائی 553nm)، اس کے علاوہ، معیاری ٹیٹرا ایتھوکسی پروپین اور رشتہ دار فلوروسینس کی شدت کو معیاری وکر کے طور پر استعمال کریں۔

   
   

2. 

2 نتائج

2.1 فری ریڈیکلز سے زخمی ہونے والے چوہوں کے برداشت کے ٹیسٹ پر اثرات

ماڈل گروپ میں چوہوں کے تیراکی کا وقت کنٹرول گروپ کے مقابلے میں نمایاں طور پر کم تھا، جبکہ انتظامیہ کے گروپ کا تیراکی کا وقت زیادہ دیر تک جاری رہا، اور زیادہ خوراک والا گروپ کنٹرول گروپ (ٹیبل 1) کی طرح تھا۔

جدول 1: کا اثرCistancheمفت قبر کی چوٹ کے ماؤس ماڈل کے تیراکی برداشت ٹیسٹ پر

2.2 گرم رکھنے کی صلاحیت پر اثر

ماڈل گروپ میں چوہے کم درجہ حرارت پر تیزی سے جم جاتے ہیں، اور وقت کنٹرول گروپ کے مقابلے میں کم ہوتا ہے، جبکہ دو خوراک والے گروپوں کے چوہے جمنے کا وقتCistancheیہ نہ صرف ماڈل گروپ سے لمبا ہے بلکہ کنٹرول گروپ سے بھی لمبا ہے، اس بات کی نشاندہی کرتا ہے۔Cistancheنہ صرف اینٹی فری ریڈیکل نقصان کا اثر ہے بلکہ اس کے واضح اثرات بھی ہیں۔ سردی سے گرم رکھنے کی صلاحیت میں اضافہ کریں (ٹیبل 2)۔

جدول 2: کا اثرCistancheمفت اچھی چوٹ کے چوہوں کے ماڈل میں سینہان کی صلاحیت پر

2.3 ماحول کے دباؤ پر ہائپوکسیا کو برداشت کرنے کی صلاحیت پر اثر

انتظامیہ کے بعدCistanche، چوہے عام دباؤ اور ہائپوکسیا میں زندہ رہے۔Cistancheآزاد قسم کی چوٹ کے ماؤس ماڈل سینہان کی صلاحیت پر اثر ماڈل گروپ کے مقابلے میں نمایاں طور پر طویل تھا اور کنٹرول گروپ کے مقابلے میں بھی زیادہ تھا، جس سے ظاہر ہوتا ہے کہCistancheہائپوکسیا کے لئے چوہوں کی رواداری کو بڑھا سکتا ہے۔ فورس (ٹیبل 3)

جدول 3:Cistanche's مفت بنیاد پرست نقصان کے ماؤس ماڈل

2.4 MAO-B کی زندگی پر اثر

O سانس لینے کے بعد، ماڈل گروپ کے دماغی ٹشو MAO-B کی سرگرمی ہم منصب گروپ کے مقابلے میں نمایاں طور پر زیادہ تھی، اور انتظامیہ گروپ کی MAO-B سرگرمی میں اضافہ کو نمایاں طور پر روک دیا گیا تھا۔

جدول 4: کا اثرCistancheمفت قبر کی چوٹ کے ماؤس ماڈل میں 1SB قسم کی مونوامین آکسائڈ وائن (MAO~B) کی سرگرمی پر

2. 5 ایس او ڈی جیورنبل پر اثر

ماڈل گروپ میں سیرم کی chemiluminescence روک تھام کی شرح دوسرے گروپوں کے مقابلے میں نمایاں طور پر کم تھی، اور SOD سرگرمی میں نمایاں کمی واقع ہوئی تھی۔ منشیات کے گروپ کی SOD سرگرمی میں نمایاں اضافہ ہوا، اور زیادہ خوراک والا گروپ کنٹرول گروپ سے زیادہ تھا (نیچے جدول 5 دیکھیں)

جدول 5: ماڈل سیرمسپر آکسائیڈڈسمیوٹیز (SOD) سرگرمی لپڈ پیرو آکسائیڈ (ZLPO) کے مواد پر سب سے بلند 2.6 اثر ہے۔

2.6 ماڈل گروپ کے پلازما، جگر اور دماغی بافتوں میں لپڈ پیرو آکسائیڈ (LFO) کے مواد میں نمایاں اضافہ ہوا، اور انتظامیہ کے بعد LPO مواد میں نمایاں کمی واقع ہوئی۔ بڑی خوراک اور خوراک کے گروپ نے دماغی بافتوں میں ایل پی او کو کنٹرول گروپ (ٹیبل 6) کی سطح تک کم کر دیا تھا۔

ٹیبل 6: فری ریڈیکل نقصان کے ماؤس ماڈل میں پلازما، جگر، اور لپڈ پیرو آکسائیڈ (LPO) کی سطح پر گوشت Axun کا اثر

3 بحث

عمر بڑھنا زندگی کے عمل میں ایک مثبت رجحان ہے۔ مادر وطن کی روایتی ادویات نے بڑھاپے کے خلاف برسوں میں بھرپور تجربہ اور ادویات کے ذرائع جمع کیے ہیں۔ حالیہ برسوں میں، گھریلو اسکالرز نے روایتی چینی ادویات سے بڑھاپے کے خلاف موثر ادویات تلاش کرنے پر توجہ مرکوز کی ہے۔ اس وقت، جسم کی عمر بڑھنے کے آزاد بنیاد پرست نظریہ کو تیزی سے دیکھا جا رہا ہے. اگرچہآزاد ذراتجسم میں عام حالات میں پیدا ہوتے ہیں، بافتوں کے خلیے SOD اور دیگر اینٹی آکسیجن زہریلے انزائم سسٹم کے مسلسل ہٹانے کی وجہ سے محفوظ رہتے ہیں۔ Oa ایک مضبوط آکسیڈینٹ ہے۔ ، جسم میں آزاد بنیاد پرست ردعمل شروع کر سکتے ہیں. آکسیجن کی ضرورت سے زیادہ سانس کی وجہ سے نسل پیدا ہوتی ہے۔آزاد ذراتجسم میں، جو جسم کے اینٹی ٹولرنس سٹیل سسٹم کی صفائی کی صلاحیت سے زیادہ ہے، جس سے نیوکلک ایسڈ، پروٹین، امینو ایسڈ، کاربوہائیڈریٹس، اور لپڈ مرکبات کو نقصان پہنچتا ہے، اس طرح خلیات کی تشکیل اور کام کو نقصان پہنچتا ہے، اور عمر بڑھنے کا باعث بنتا ہے ⑶۔ یہ تجربہ ظاہر کرتا ہے کہ آکسیجن 7 کو سانس لینے کے بعد چوہوں کی جسمانی طاقت، گرم رکھنے کی صلاحیت اور ہائپوکسیا کو برداشت کرنے کی صلاحیت کم ہو جاتی ہے، جیسا کہ بوڑھے جانوروں کے جسمانی افعال میں کمی کی کارکردگی ہے۔ اس سے پتہ چلتا ہے کہ نوجوان چوہے ڈی محرک حاصل کرنے کے بعد عمر رسیدہ ماڈل کا سبب بن سکتے ہیں۔Cistancheمندرجہ بالا اشارے میں تبدیلیوں میں نمایاں بہتری آئی ہے۔

سپر آکسائیڈآزاد ذراتجسم میں تھوڑے وقت کے لیے موجود ہوتے ہیں اور بنیادی طور پر ایس او ڈی کے ذریعے ختم ہوتے ہیں۔ عام طور پر، SOD کی سرگرمی کی پیمائش کرکے اس کی سطح یا عکاسی ہوتی ہے۔ قدرتی طور پر عمر رسیدہ چوہوں اور آزاد بنیاد پرست چوہوں کے جسم میں مختلف اینٹی آکسیڈنٹس کم ہو جاتے ہیں، سوڈ کی سرگرمی کم ہو جاتی ہے، جس کی وجہ سے اس کی صفائی کی صلاحیت کم ہو جاتی ہے۔آزاد ذرات, لپڈ پیرو آکسائیڈ کے مواد میں اضافہ کا باعث بنتا ہے۔ دماغ میں قسم B monoamine oxidase (MA0-B) کی سرگرمی عمر کے ساتھ بڑھتی ہے۔ MAOB مرکزی ہائپوتھیلمس میں عمر بڑھنے والی حیاتیاتی گھڑی کا بنیادی کنٹرول ہے کلاک ورک کا عمر بڑھنے سے گہرا تعلق ہے۔ ⑴ اس تجرباتی ماڈل گروپ میں چوہوں کے دماغوں میں MA0-B کی سرگرمی میں اضافہ ہوا ہے، جو عمر رسیدہ جانوروں کے ساتھ بایو کیمیکل تبدیلیوں کو ظاہر کرتا ہے۔