SLC37A2، فاسفورس سے متعلق ایک مالیکیول ہموار پٹھوں کے خلیوں میں کیلسیفائیڈ شہ رگ میں اضافہ ہوتا ہے Ⅱ

نتائج

میں امیدوار مالیکیولز تلاش کریں۔فاسفیٹ-حوصلہ افزائی کیلکیفائیڈAoSMC.ایسے مالیکیولز کو تلاش کرنے کے لیے جن کا اظہار کیلسیفائیڈ AoSMC میں بڑھتا ہے، تقریباً 26،000 جینز کا ڈی این اے مائیکرو رے تجزیہ کیلسیفائیڈ AoSMC اور نان کیلیسیفائیڈ AoSMC mRNA کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا۔ شکل 1 مختلف جینوں کا ہیٹ میپ دکھاتا ہے جس کا اظہار AoSMC کے درمیان 2.6 mM کے ساتھ کلچر نہیں کیا گیا ہے اور جو 2.6 mM P کے ساتھ 12 دن کے لئے مہذب ہے۔ کلچرڈ بمقابلہ غیر مہذب AoSMC پر کل 3,066 جینز میں دو گنا سے زیادہ اضافہ ہوا ہے۔ بڑھے ہوئے اظہار کے ساتھ جینز آسٹیو بلاسٹ کی تشکیل سے متعلق مالیکیول تھے جیسے آسٹیوپونٹن، پیریوسٹن آسٹیو بلاسٹ مخصوص عنصر (POSTN)، Wnt3، interleukin-6 (IL-6)، اورفبروبلاسٹ نمو کا عنصر23 (FGF23) کے ساتھ ساتھ SLC سپر فیملی میں کئی مالیکیولز (ٹیبل 1)۔ ان مالیکیولز میں سے، ہم نے SLC37A2 پر توجہ مرکوز کی جس کے لیے mRNA 2.6 mM P کے ساتھ AoSMCnot کلچرڈ 2.6 mM P کے ساتھ AoSMC کلچرڈ پر 3.1 گنا بڑھ گیا۔ SLC37A2 اظہار پر سوزش کی.عروقی کیلکیفیکیشنسوزش کے ذریعہ فروغ دینے کی اطلاع دی گئی ہے لہذا ہم نے جانچ کی کہ آیا SLC37A2 mRNA سوزش کے ردعمل سے متاثر ہوتا ہے۔ LPS کے علاج کے بعد 24 گھنٹے میں، IL-6 میں نمایاں اضافہ ہوا AoSMC کے مقابلے LPS کے ساتھ علاج نہیں کیا گیا (تصویر 2A)۔ یہ نتائج ایل پی ایس کے علاج کے بعد 72 گھنٹے بعد بھی دیکھے گئے۔ SLC37A2mRNA اظہار (تصویر 2B) میں گروپوں کے درمیان کوئی خاص فرق نہیں تھا۔

گردے کے کام کے لیے 25% ایکیناکوسائیڈ اور 9% ایکٹیو سائیڈ کے ساتھ قدرتی آرگینک سیسٹانچ ایکسٹریکٹ حاصل کرنے کے لیے یہاں کلک کریں۔

Wecistanche کی معاون خدمت - چین میں سب سے بڑا cistanche برآمد کنندہ:

ای میل:wallence.suen@wecistanche.com

واٹس ایپ٪ 2ftel٪3a٪7b٪7b0٪7d٪7d

مزید تفصیلات کے لیے خریداری کریں:

https://www.xjcistanche.com٪2014-شاپ

فاسفیٹ سے حوصلہ افزائی شدہ کیلسیفائیڈ AoSMC میں SLC37A2 کا اظہار۔ اس بات کا تعین کرنے کے لیے کہ آیا SLC37A2 کیلکیفیکیشن میں شامل ہے، ہم نے SLC37A2 mRNA کے اظہار کا غیر کیلسیفائیڈ اور کیلسیفائیڈ AoSMC (تصویر 3) پر جائزہ لیا۔ AoSMC میں 2.6 mM P کے ساتھ 6 دنوں کے لیے کیلسیفیکیشن کا مشاہدہ کیا گیا، اور AoSMC میں 2.6 mM P کے ساتھ 12 دن تک زیادہ جدید کیلکیفیکیشن کا مشاہدہ کیا گیا (تصویر 3A)۔ کیلسیفائیڈ AoSMC پر نان کیلسیفائیڈ AoSMC (تصویر 3B) کے مقابلے Runx2 mRNA نمایاں طور پر بڑھ گیا۔ SLC37A2 mRNA نے کیلسیفائیڈ AoSMC میں دن 3 سے نمایاں طور پر اضافہ ہونا شروع کیا، اور دن 9 کو، کیلسیفائیڈ AoSMC غیر کیلسیفائیڈ AoSMC (Noncalcified AoSMC) کے مقابلے میں تقریباً دو گنا بڑھ گیا۔ 3C)۔ غیر کیلسیفائیڈ AoSMC (تصویر 3D) کے مقابلے کیلسیفائیڈ AoSMC میں SLC37A2 پروٹین کے اظہار میں 6ویں دن تقریباً دو گنا اضافہ ہوا۔

CKD ماڈل چوہوں میں SLC37A2 کا اظہار۔

یہ ظاہر کرنے کے لیے کہ آیا SLC37A2 Vivo میں vascular calcification میں ملوث ہے، ہم نے SLC37A2 mRNA اظہار کو ایڈنائن سے متاثرہ CKD چوہوں کے برتنوں پر جانچا۔ ایڈنائن سے متاثرہ CKD چوہے تصویر 4A میں دکھائے گئے پروٹوکول کے مطابق بنائے گئے تھے۔ جدول 2 قربانی کے دن جسمانی وزن اور بائیو کیمیکل ڈیٹا دکھاتا ہے۔ کا جسمانی وزناڈینائن سے متاثرہ CKDغیر CKD چوہوں کے مقابلے میں چوہے نمایاں طور پر کم تھے۔ غیر CKD گروپ کے مقابلے میں، CKD گروپوں میں پلازما P اور Cr کی سطحیں زیادہ تھیں، اور پلازما کیلیولز کم تھیں، اور P، Ca، اور Cr کا 24-گھنٹہ پیشاب کا اخراج تھا۔ اس کے علاوہ، یہ نتائج CKD-HP گروپ میں زیادہ نمایاں تھے، جیسا کہ پچھلے مطالعات میں دیکھا گیا ہے۔ ہم نے CKD چوہوں کے aortic وریدوں میں mRNA اظہار کی جانچ کی (تصویر 4)۔ اگرچہ Runx2 mRNA کے اظہار میں کوئی خاص فرق نہیں تھا، ایک ٹرانسکرپشن عنصر جو عروقی کیلسیفیکیشن کے طریقہ کار میں ابتدائی حرکت کرتا ہے، گروپوں (تصویر 4B) کے درمیان osteopontin mRNA کے اظہار میں CKD-HP گروپ کے مقابلے میں نمایاں اضافہ ہوا ہے۔ سی کے ڈی گروپ اورCKD-LP گروپ(تصویر 4C) CK D-HP گروپ میں غیر CKD گروپ اور CKD-LP گروپ (تصویر 4D) کے مقابلے SLC37A2 mRNA اظہار بھی نمایاں طور پر بڑھا تھا۔ چونکہ ان چوہوں میں بڑے انفرادی فرق تھے، ہم نے آسٹیوپونٹن اور SLC37A2 mRNA کے درمیان ارتباط کا جائزہ لیا اور ان مالیکیولز کے درمیان ایک اہم ارتباط پایا (تصویر 4E)۔ thoracoabdominal aorta کے ہسٹولوجیکل معائنے میں صرف CKD-HP گروپ (تصویر 5A) کی شہ رگ میں درمیانی کیلکیفیکیشن کا انکشاف ہوا۔ شہ رگ پر SLC37A2 کی ایکسپریشن سائٹ کی جانچ کرنے کے لیے، ہم نے CKD-HPrats کی شہ رگ کی امیونوسٹیننگ کی۔ SLC37A2 کا اس علاقے میں سختی سے اظہار کیا گیا جہاںvascular calcificationواقع ہوا (تصویر 5 بی)۔

تصویر 1. 2.6 mM P کے ساتھ AoSMC غیر مہذب اور 2.6 mM P کے ساتھ ثقافت والے AoSMC کے درمیان مختلف انداز میں اظہار کردہ جین کا ہیٹ میپ۔ سرخ رنگ اعلی سگنل کی سطح کے ساتھ جینز کی نمائندگی کرتا ہے، اور سبز کم سگنل کی سطح کے ساتھ جین کی نمائندگی کرتا ہے۔ AOSMC aortic ہموار پٹھوں کے خلیات۔ آن لائن ورژن میں اعداد و شمار دیکھیں۔

بحث

ہم نے عروقی کیلکیفیکیشن میں شامل امیدوار P سے متعلقہ مالیکیولز کی تفتیش کی۔ ہمارے نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ SLC37A2 مالیکیولز میں سے ایک ہے جس کے ساتھ اضافہ ہوتا ہے۔vascular calcificationوٹرو میں اور ویوو میں۔

SLC37 خاندان SLC سپر فیملی سے تعلق رکھتا ہے اور اس میں پروٹین شامل ہیں: SLC37A 1-440) SLC37 فیملی اینڈوپلاسمک ریٹیکولم میمبرین میں ٹرانس میبرن پروٹین پر مشتمل ہے اور بیکٹیریل آرگن فاسفیٹ فاسفیٹ اینٹی پورٹر کے لیے ایک ترتیب ہم آہنگ ہے جسے SLC کے نام سے جانا جاتا ہے۔(474)گلوکوز6-فاسفیٹ ٹرانسپورٹر.(2-44 تاہم، SLC37A2 کے بارے میں کچھ رپورٹس ہیں، اور اس کے کام کے بارے میں تفصیلات پوری طرح سے سمجھ میں نہیں آئی ہیں۔ SLC37A2، جسے SPX2 کے نام سے بھی جانا جاتا ہے، کثرت سے murine macrophages، spleen، thymus، اور white adipose tissue (WAT) میں ظاہر ہوتا ہے۔ ) جینیاتی طور پر موٹے ماؤس ماڈلز اور Raw264.7 خلیات سے اخذ کردہ آسٹیوکلاسٹ نما خلیات۔ جانوروں کی بیماری کے ساتھ SLC37A2۔ (47-49) SLC37A2 کی خرابی کا سبب بنتا ہےcraniomandibular osteopathy(سی ایم او)، ٹیریر نسلوں میں خود کو محدود کرنے والی ہڈیوں کی بیماری۔ (47) دودھ دینے والے مویشیوں میں، ایک SLC37A2 ہوموزائگس میوٹیشن برانن کی موت کے لیے ذمہ دار ہے۔ (8.9) اس کے علاوہ۔ SLC37A2 کو وٹامن ڈی ٹارگٹ جینز کا ہدف سمجھا جاتا ہے۔ (لہذا) چھاتی کے کینسر کے بڑھنے میں فاسفر-Ser294 پروجیسٹرون ریسیپٹر ٹارگٹ جین کے امکانات پر بھی غور کیا گیا ہے (1) یہ اطلاع دی گئی ہے کہ سوزش عروقی کیلکیفیکیشن کا سبب بن سکتی ہے اور اس کو بڑھا سکتی ہے۔ (2s26) مزید. SLC37A2 میکروفیجز اور WAT میں کثرت سے ظاہر ہوتا ہے جو میکروفیج دراندازی سے متاثر ہوتے ہیں۔ (s) لہذا. ہم نے غور کیا کہ SLC37A2 ایک انو ہو سکتا ہے جس کا اظہار سوزش کے دوران ہوتا ہے۔. تاہم، ہماری دریافتوں نے AoSMC میں SLC37A2 اظہار میں کوئی اضافہ نہیں دکھایا جس میں اشتعال انگیز ردعمل ظاہر ہوتا ہے، یہ مالیکیول براہ راست اشتعال انگیز محرک سے متاثر نہیں ہوتا ہے۔ SLC37A2 سوزش کے علاوہ کسی اور طریقہ کار کے ذریعے عروقی کیلکیفیکیشن میں شامل ہو سکتا ہے۔

یہ اطلاع دی گئی ہے کہ SLC37A2 P سے منسلک کے طور پر کام کرتا ہے۔مخالف پورٹر. (41) اس کے علاوہ، SLC37A2 کو وٹامن ڈی کے لیے ایک ٹارگٹ جین بتایا گیا تھا، اور SLC37A2 جین میں ایک اہم وٹامن Dreceptor-binding site(ss2) SLC37A2 جینز کے اظہار اور وٹامن ڈی کی گردش کرنے والی شکلوں میں منظم طریقے سے منسلک تبدیلیاں شامل ہیں۔ انسانی پردیی خون mononuclear خلیات میں دیکھا گیا ہے. (50)وٹامن ڈی ریسیپٹرز 1a، 25-ڈائی ہائیڈروکسی وٹامن ڈی سے منسلک ہوتے ہیں، جو وٹامن ڈی کا میٹابولائٹ ہے، اور جین کے اظہار کو منظم کرتا ہے۔ lo، 25dihydroxyvitamin D، آنت میں Ca اور P کو جذب کرنے، ہڈی میں Ca کو متحرک کرنے، اور کین کے گردوں کے دوبارہ جذب میں کام کرتا ہے۔ (3) ایک رپورٹ ہے کہ ایڈنائن سے متاثرہ CKD ماڈل چوہوں میں، سیرم لا، 25-ڈائی ہائیڈروکسی وٹامن ڈی، اعلی پی خوراک لینے والے چوہوں میں نمایاں طور پر زیادہ تھا، اعلی درجے کی ویسکولر کیلسیفیکیشن کے ساتھ، کم چوہوں کے مقابلے -p غذا کی مقدار.

یہ دکھایا گیا ہے کہ vascular calcification کا طریقہ کار ہڈیوں کی تشکیل سے ملتا جلتا ہے۔ CMO کی وجہ سے ہونے والی SLC37A2 کی کمی کا طبی لحاظ سے انسانی infantile cortical hyperostosis سے موازنہ کیا جا سکتا ہے جسے Caffey disease بھی کہا جاتا ہے۔ SLC37A2 osteoblastic اور osteoclastic ہڈیوں کی تشکیل کے کام میں عدم توازن پیدا کرے گا، اور نتیجے کے طور پر، hyperostosis کا باعث بنے گا۔

Runx2 عروقی کیلکیفیکیشن کے لیے ایک ضروری ٹرانسکرپشن عنصر ہے۔ یہ بھی بتایا گیا ہے کہ Runx2 ایک آسٹیو بلاسٹ تفریق ٹرانسکرپشن عنصر ہے جس کا اظہار چھاتی کے اپکلا خلیوں کی نشوونما میں ہوتا ہے۔ (s435) Runx2 فاسفر-Ser294 پروجیسٹرون ٹارگٹ جینز کے ریگولیشن کے لیے ضروری معلوم ہوتا ہے، جو چھاتی کے کینسر کے بڑھنے سے وابستہ ہیں۔ SLC37A2 کو امیدوار فاسفر-Ser294 پروجیسٹرون ریسیپٹر ٹارگٹ جین سمجھا جاتا ہے۔ (s1)لہذا، یہ سمجھا جاتا ہے کہ Runx2 SLC37A2 کو ریگولیٹ کر سکتا ہے موجودہ مطالعے میں، CkD چوہوں کی شہ رگ میں SLC37A2 mRNA کا اظہار آسٹیوپونٹن mRNA سے منسلک تھا، جو Runx2 کے جین کو نشانہ بناتا ہے۔