راب اور آرف فیملیز کے چھوٹے جی ٹی پیز: نیوروڈیجنریشن میں انٹرا سیلولر اسمگلنگ کے کلیدی ریگولیٹرزⅡ

2. Neurodegeneration میں Rab GTPases

Rab خاندان کے چھوٹے GTPases ویسکولر ٹرانسپورٹ اور جھلیوں کی اسمگلنگ کو کنٹرول کرنے کے ذمہ دار ہیں۔ وہ اس نقل و حمل کے تمام مراحل کو منظم کرتے ہیں؛ کیریئرز کی بایوجنسیس، سائٹوسکلٹن میں ان کی نقل و حرکت، اور ہدف کی جھلیوں میں ان کا ٹیچرنگ [38,39]۔ جیسا کہ راس سپر فیملی کے باقی ممبران کے ساتھ ہے، راب GTPases کی سرگرمی کو GEFs، GAPs، اور GDIs کے ذریعے منظم کیا جاتا ہے۔ RabGEFs کے دو اہم خاندانوں کو بیان کیا گیا ہے۔ پہلا DENN ڈومین پر مشتمل GEFs کا خاندان ہے، جو مختلف Rab GTPases کو چالو کر سکتا ہے [40]۔ DENN ایک اتپریرک ڈومین ہے جو Rab GTPases [40] کے ساتھ براہ راست تعامل کرتا ہے۔ دوسرا Vps9 ڈومین پر مشتمل GEFs کا خاندان ہے، جو Rab5 GTPases [41] کے لیے مخصوص ہے۔

   الزائمر کی بیماری اور پارکنسن کی بیماری کے لیے جیڈ سیستانچ پر کلک کریں۔

ان دو خاندانوں کے علاوہ، دیگر پروٹینز کو Rab GTPases کے لیے GEFs کے طور پر کام کرتے دکھایا گیا ہے، جیسے TRAPP I اور Mon1/Ccz1 کمپلیکس، جو بالترتیب Rab1 اور Rab7 کے لیے GEFs ہیں [41]۔ دوسری طرف، جہاں GEFs ان کے درمیان کم ترتیب ہومولوجی کا اشتراک کرتے ہیں، Rab GAPs کو ایک منفرد خاندان، Tre-2/Bub2/Cdc16 (TBC)-ڈومین GAPs میں درجہ بندی کیا گیا ہے۔ انسانوں میں، ایک واحد GAP ہے جس میں یہ TBC ڈومین نہیں ہے، Rab3GAP کمپلیکس [41]۔ بدقسمتی سے، کئی Rab GTPases کے لیے GEFs اور GAPs کو ابھی تک بیان نہیں کیا گیا ہے [41,42]۔ ان کی ایکٹیویشن حالت (GDP-bound/GTP-bound) کے ذریعے ریگولیٹ ہونے کے علاوہ، Rab GTPases کو سائٹوسول یا جھلیوں میں ان کی فعال اور غیر فعال حالت دونوں میں پایا جا سکتا ہے۔

اس لوکلائزیشن کو سی ٹرمینل سیسٹین کی باقیات کے پرینیلیشن کے ذریعے کنٹرول کیا جاتا ہے۔ ایک بار ویسکولر ٹرانسپورٹ مکمل ہونے کے بعد، راب GTPases کو ری سائیکل کیا جانا چاہیے اور جھلیوں سے واپس سائٹوسول تک پہنچایا جانا چاہیے۔ GDIs پہلے سے تیار شدہ اور غیر فعال (GDP- پابند) Rab GTPases سے منسلک ہوتے ہیں اور پھر، GTPases کو جھلی سے ہٹا دیا جاتا ہے۔ اس طرح، Rab GTPases کی ری سائیکلنگ صرف اس وقت مکمل ہوتی ہے جب ویسکولر ٹرانسپورٹ مکمل ہو جاتی ہے اور GTPase کو GAP [41] کے ذریعے غیر فعال کر دیا جاتا ہے۔ بہر حال، prenylation ترجمہ کے بعد کی انوکھی ترمیم نہیں ہے جو Rab GTPases کو منظم کرتی ہے۔ کچھ ریبز کو کناسز جیسے p34cdc2 یا PD سے متعلقہ کناز LRRK2 [41,43] کے ذریعے فاسفوریلیٹ کیا جا سکتا ہے۔ PD کے ساتھ وابستہ LRRK2 کی روگجنک مختلف حالتوں کے نتیجے میں اس طرح کے فاسفوریلیشن میں اضافہ ہوتا ہے۔ ترجمہ کے بعد کی یہ ترمیم سوئچ II ڈومین میں ہوتی ہے، جو اس کے ریگولیٹرز کے ساتھ GTPase کے تعامل کے لیے اہم ہے۔ خاص طور پر، فاسفوریلیشن اس کے ریگولیٹرز کے ساتھ GTPase کے تعامل کو کم کرتا ہے [43,44]۔

جیسا کہ پہلے ذکر کیا گیا ہے، Rab GTPases مختلف انفیکٹر مالیکیولز [45] کے ساتھ تعامل کرنے کی صلاحیت کی وجہ سے ویسکولر ٹرانسپورٹ اور جھلیوں کی اسمگلنگ کے تمام اہم مراحل کو کنٹرول کرتے ہیں۔ کارگو کے انتخاب، ابھرتے ہوئے، اور کوٹ کی تشکیل کے لیے، Rab GTPases TIP47 یا retromer جیسے پروٹین کے ساتھ تعامل کرتے ہیں۔ مثال کے طور پر، Rab9-GTP دیر سے اینڈوسوم میں TIP47 کے ساتھ تعامل کرتا ہے، جس سے TIP47 کا اس کارگو کے ساتھ تعلق بڑھتا ہے جسے لے جانا ضروری ہے [46]۔ TIP47 مینوز 6-فاسفیٹ ریسیپٹرز (MPR) کے سائٹوپلاسمک ڈومینز کو پہچانتا ہے، جو اینڈوسوم سے گولگی کمپلیکس تک نقل و حمل کو چالو کرتا ہے [46]۔ ایک اور مثال ریٹرومر کمپلیکس کے ساتھ Rab7 کا تعامل ہے جو اینڈوسوم سے گولگی کمپلیکس ٹرانسپورٹ میں ثالثی کرتا ہے [47]۔ ویسکولر ٹرانسپورٹ کے ضابطے کے بارے میں، Rab GTPases موٹر پروٹینز جیسے کائنسین اور ڈائنینز کے ساتھ تعامل کرتے ہیں۔ کائنسین اور ڈائنین ATPases ہیں جو ATP hydrolysis کو تعمیری تبدیلیوں کو دلانے کے لیے استعمال کرتے ہیں جو کارگو کو بالترتیب مائیکرو ٹیوبولس کے پلس اینڈ اور مائنس اینڈ کی طرف لے جانے کے لیے محرک قوت پیدا کرتے ہیں [48]۔

Rab GTPases جیسے Rab3A, 6, 8A, 10, 11A, 14, 27A, اور 39B مائیوسین ٹائپ V کے ساتھ تعامل کرتے ہیں تاکہ ایکٹین فلیمینٹس [49] کے ذریعے آرگنیلز اور ویسیکلز کو منتقل کریں۔ مثال کے طور پر، Rab27A myosin قسم V اور melanophilin کے ساتھ تعامل کرتا ہے، میلانوسومز کو ایکٹین فلامینٹس کی طرف منتقل کرنے کے لیے ایک ٹرنری کمپلیکس بناتا ہے [50]۔ vesicles کے uncoating اور tethering کے کنٹرول کے لیے، Rab GTPases پروٹینز جیسے TRAPP، Exocyst، یا p115/Golgins کے ساتھ منسلک ہوتے ہیں۔ ایک مثال پی 115 کے ساتھ Rab1 کا تعامل ہے، جو ایک ٹیچرنگ پروٹین ہے جو SNARE کمپلیکس کی تشکیل کو اکساتا ہے اور گولگی جھلیوں میں COP I-coated vesicles کی ڈاکنگ کو متحرک کرتا ہے [51]۔ مزید برآں، Rab1 دوسرے ٹیتھرنگ عوامل جیسے GM130 اور GRASP65 کے ساتھ بھی بات چیت کرتا ہے تاکہ Golgi membranes vesicles [52] کے فیوژن کو آسان بنایا جا سکے۔

GM130 پھر گولگی ڈھانچے کی دیکھ بھال کے لیے ذمہ دار ہے [52]۔ یہ معلوم ہے کہ Rab GTPases پروٹین کے ساتھ تعامل کرتے ہیں جیسے Sro7 اور Rabenosyn-5 [45]۔ مثال کے طور پر، Rab8 Sro7 کے ساتھ تعامل کرتا ہے، SNARE پروٹین کے افعال کو سیل جھلیوں میں vesicles کے فیوژن میں ریگولیٹ کرتا ہے جبکہ Rabenosyn-5 Rab اور hVPS45 [53,54] کے درمیان Rab4 اور/یا Rab5 کو اکٹھا کر کے گٹھ جوڑ کا کام کرتا ہے۔ hVPS45-سے وابستہ Rabenosyn-5، جو پھر SNARE کو باندھتا ہے۔ آخر میں، Rab GTPases کارگو کے انتخاب، تشکیل، نقل و حمل، ڈاکنگ، اور ہدف کی جھلیوں کے ساتھ vesicles کے فیوژن کے ماسٹر ریگولیٹرز ہیں۔ اعصابی نظام میں جھلیوں کی اسمگلنگ کی اہمیت کو مدنظر رکھتے ہوئے، نیورانز نے محوروں اور ڈینڈرائٹس میں لمبی دوری سے پروٹین، آرگنیلز اور ریسیپٹرز کی نقل و حمل کو کنٹرول کرنے کے لیے مخصوص طریقہ کار تیار کیا ہے۔ Rab GTPases Synaptic vesicles کی ری سائیکلنگ، exocytosis اور endocytosis کو منظم کرتے ہیں۔ نیورو ٹرانسمیٹر کی آزادی؛ رسیپٹرز کی ٹریفک؛ اور اینٹروگریڈ اور ریٹروگریڈ محوری نقل و حمل [15]۔

مزید یہ کہ وہ ڈینڈرائٹس کی برانچنگ اور مورفوگنیسیس، نیورائٹ نمو، اور نشوونما کے دوران نیورونل ہجرت میں بھی شامل ہیں۔ اس طرح کے عمل کی اہمیت پر غور کرتے ہوئے، Rab GTPases کے dysregulation کا تعلق مختلف neurodegenerative بیماریوں سے ہے جیسے AD, PD, amyotrophic lateral sclerosis (ALS)، اور Charcot – Marie – Tooth (CMT) [8,15]۔ AD میں، مختلف Rab GTPases پیتھالوجی سے متعلق پروٹین کی نقل و حمل میں شامل ہیں، جیسے Tau, APP, BACE1, -secretase, -secretase, and A peptides. مزید برآں، ان GTPases کے اظہار کو پوسٹ مارٹم AD دماغ میں تبدیل کر دیا جاتا ہے [55]۔ PD کے بارے میں، یہ GTPases -syn [56] کی نقل و حمل کو کنٹرول کرتے ہیں۔ مزید برآں، Rab GTPases PD [57] میں LRRK2 kinase کی وجہ سے ہونے والے زہریلے پن میں ثالثی کر سکتے ہیں۔ جیسا کہ اوپر ذکر کیا گیا ہے، کچھ Rab GTPases LRRK2 کے ذیلی حصے ہیں اور اس فاسفوریلیشن میں dysregulation کو نیوروٹوکسائٹی اور Vivo [57,58] میں ڈوپیمینجک نیوران کے انحطاط کو دلانے کے لیے بیان کیا گیا ہے۔ اس کے تحت، ہم AD اور PD (شکل 2) کے آغاز اور بڑھنے میں مرکزی Rab GTPases کے مخصوص کرداروں کو بیان کرتے ہیں۔

2.1 رب 1

Rab1 GTPases اینڈوپلاسمک ریٹیکولم (ER) اور GA کے درمیان دو طرفہ نقل و حمل کو کنٹرول کرتا ہے، نیز گولگی جھلیوں کی تشکیل، سالمیت اور ری سائیکلنگ [38,59]۔ Rab1 خاندان دو isoforms پر مشتمل ہے: Rab1A اور Rab1B۔ دونوں isoforms کے لیے GEF TRAPP I ہے۔ TRAPP I پروٹینز کا ایک کمپلیکس ہے جو Rab1 کو متحرک کرتا ہے اور ER-Golgi ٹرانسپورٹ [41,60] میں شامل ہے۔ دوسری طرف، Rab1 کے غیر فعال ہونے کا ذمہ دار مالیکیول TBC1D20 GAP [41,61] ہے۔ بہت سے مطالعات گولگی جھلیوں کی سالمیت کو برقرار رکھنے میں Rab1 کے ساتھ ساتھ اس کے ریگولیٹرز کی اہمیت کو بھی اجاگر کرتے ہیں۔

Rab1A اور Rab1B کی غالب-منفی شکلوں کا زیادہ اظہار، دونوں GTPases کی کمی اور TBC1D20 GAP کی حد سے زیادہ کارکردگی GA [38] کے ٹکڑے ہونے کی حوصلہ افزائی کرتی ہے۔ 2.1.1 Rab1 اور ER–Golgi ٹریفک Rab1 ER اور GA کے درمیان نقل و حمل کو کنٹرول کرتا ہے، کیونکہ یہ GA [62–64] میں ER-vesicles کے فیوژن کے حق میں p115 اور GM130-GRASP65 کے ساتھ تعامل کر سکتا ہے۔ ان انفیکٹر مالیکیولز کے ساتھ تعامل کے ذریعے، Rab1 GA جھلیوں کی تشکیل، سالمیت اور ری سائیکلنگ کو کنٹرول کرتا ہے۔ ایک طرف، Rab1 اس ER–GA ٹریفک کو کنٹرول کرنے کے لیے p115 پروٹین کے ساتھ تعامل کرتا ہے، جو کہ ایک ویسیکل ٹیتھرنگ فیکٹر ہے [65]۔ دوسری طرف، جب Rab1 GA میں GM130-GRASP65 کمپلیکس کے ساتھ منسلک ہوتا ہے، تو یہ GA کے اسٹیکنگ اور ویسیکل بائنڈنگ [66,67] کو منظم کرتا ہے۔

GM130 گولگی جھلیوں کی سالمیت کے لئے ذمہ دار ہے [52]۔ مزید برآں، یہ خیال کیا جاتا ہے کہ p115 GA [62,64] میں ER-vesicle فیوژن کے لیے GM130-GRASP65 کے ساتھ تعامل کر سکتا ہے۔ مزید برآں، Rab1 GA اور ER کے درمیان ریٹروگریڈ ٹرانسپورٹ کو بھی کنٹرول کرتا ہے۔ ایسا کرنے کے لیے، GTPase GBF1 کے ساتھ تعامل کرتا ہے، Arf1 GTPase کے لیے ایک GEF جو COP I vesicles [68,69] کے بایوجنسیس میں شامل ہے۔ اگرچہ AD روگجنن میں ER – GA ٹریفک میں Rab1 کا کردار ابھی تک واضح نہیں ہے، لیکن یہ بیان کیا گیا ہے کہ یہ GTPase PD [19] میں ڈوپیمینجک نیوران کے نقصان کو روک سکتا ہے۔ PD میں، ممکنہ میکانزم میں سے ایک جس کے ذریعے -syn نیوروڈیجنریشن کو آمادہ کر سکتا ہے وہ ہے ER – GA ٹریفک کو روکنا [19]۔

یہ بیان کیا گیا ہے کہ جنگلی قسم (WT) -syn، نیز اتپریورتی -synA53T جو ابتدائی آغاز PD کا سبب بنتا ہے، ER–GA ٹریفک کو روکتا ہے، حالانکہ -synA53T اس رکاوٹ کو WT سے زیادہ تیزی سے شروع کرتا ہے۔ کوپر اور ساتھیوں نے یہ ثابت کیا ہے کہ رب 1 [19] کی موجودگی میں اس syn-duced toxicity کو روکا جاتا ہے۔ درحقیقت، ڈروسوفلا میلانوگاسٹر (D. melanogaster)، Caenorhabditis elegans (C. elegans)، اور چوہے کے نیوران کی بنیادی ثقافتوں میں جو WT -syn یا -synA53T کا اظہار کرتے ہیں، Rab1 کے اظہار نے ڈوپیمینرجک نیورونز کے نقصان کو بچایا [19]۔ یہ اعداد و شمار بتاتے ہیں کہ Rab1 ER – GA ٹریفک کے کنٹرول میں حفاظتی کردار ادا کر سکتا ہے اور اس وجہ سے PD میں نیوروڈیجنریشن کو روک سکتا ہے۔ ER-GA ٹریفک کے کنٹرول میں Rab1 اور اس کا کام بھی ALS سے متعلق ہے۔ SOD1، TDP-43، یا FUS پروٹین میں تغیرات جو اس نیوروڈیجینریٹیو بیماری کا سبب بنتے ہیں اس کے نتیجے میں Rab1 کی غلط لوکلائزیشن ہوتی ہے، نیز خراب ER–GA ٹرانسپورٹ اور ER تناؤ میں اضافہ ہوتا ہے [8]۔ Rab1 اوور ایکسپریشن، اس کے برعکس، اس تناؤ کے خلاف حفاظتی کردار ادا کرتا ہے [8,21]۔

2.1.2 Rab1 اور GA کی سالمیت

AD اور PD پیتھالوجیز کے کلاسیکی نشانات کے علاوہ، یہ بیان کیا گیا ہے کہ نیوران دونوں صورتوں میں ایک بکھرا ہوا GA پیش کرتے ہیں [70]۔ اس ٹکڑے کو مختلف وجوہات سے منسوب کیا گیا ہے، جیسے سائٹوپلازم میں پروٹین کے مجموعوں کی موجودگی، سائٹوسکلٹن میں تبدیلی، یا انٹرا سیلولر اسمگلنگ کی خرابی۔ اس سلسلے میں، Martínez-Menárguez et al. بیان کرتے ہیں کہ نیوروڈیجینریٹیو بیماریوں میں GA کے ٹکڑے ہونے کی بنیادی وجہ انٹرا سیلولر ٹرانسپورٹ میں تبدیلیاں ہیں [70]۔ متعدد مطالعات نے یہ ثابت کیا ہے کہ نیوروڈیجینریٹیو پیتھالوجیز میں، Rab1- ثالثی ٹریفک ڈیس ریگولیشن GA فریگمنٹیشن [16,17,70] کو اکساتا ہے۔ AD کے معاملے میں، وہ GA تبدیلیوں کو pTau کی سطح [71,72] سے منسلک کیا گیا ہے۔

2014 میں، جیانگ اور ساتھیوں کے مطالعے سے یہ بات سامنے آئی کہ GA کا ٹکڑا تاؤ ہائپر فاسفوریلیشن سے پہلے تھا [71]۔ ان کے مطابق، GA فریگمنٹیشن سائکلن پر منحصر کناز-5 (cdk5) اور ERK کے فعال ہونے کے ذریعے تاؤ فاسفوریلیشن کو فروغ دیتا ہے۔ مزید یہ کہ، AD کے مریضوں میں، NFTs کے سامنے آنے والے نیوران NFT کے بغیر نیوران کے مقابلے میں گولگی میں بڑے نقائص پیش کرتے ہیں [72]۔ نیوران جنہوں نے NFT کی تشکیل سے پہلے کھیل کے درمیانی درجے کو جمع کیا تھا انہوں نے GA [72] میں درمیانی خرابیاں ظاہر کیں۔ یہ اس بات کی تائید کرتا ہے کہ کھیل کی ترقی پسند جمع GA میں ساختی تبدیلیوں سے وابستہ ہے۔ Antón-Fernández اور معاونین کے مطابق، یہ تبدیلیاں پروٹین کی پروسیسنگ اور اسمگلنگ کو متاثر کر سکتی ہیں، اور اس وجہ سے، وہ AD [72] میں نیورونل dysfunction میں حصہ ڈال سکتے ہیں۔ مزید برآں، انسانی تاؤ اور چوہے کے پرانتستا کے بنیادی نیوران کا اظہار کرنے والے HeLa خلیوں میں Rab1A کی حد سے زیادہ کارکردگی نے GA کے ٹکڑے ہونے کو روکا، جبکہ siRNA کے ذریعہ GTPase کو خاموش کرنے سے اس کے ٹکڑے ہونے کو ہوا [16,17]۔

انہوں نے مشاہدہ کیا کہ Rab1A GM130 کے ساتھ چوہے کے پرانتستا سے نیوران کی بنیادی ثقافتوں میں مقامی بنا رہا تھا [16]۔ Rab1A کی خاموشی کا ایک اور اثر تاؤ سراو کو اپ ریگولیشن تھا۔ اس طرح، مصنفین نے تجویز پیش کی کہ AD [16] میں گولگی کی حرکیات اور تاؤ سراو کو ماڈیول کرنے کے لیے Rab1 ایک علاج کا ہدف ہو سکتا ہے۔ خلاصہ طور پر، GA فریکشننگ ٹاؤ فاسفوریلیشن [71]، NFT [72] میں pTau جمع، اور تاؤ سراو [16] سے وابستہ ہے۔ لہذا، Rab1 GTPase ریگولیشن اس طرح کے neurodegenerative عمل کو ماڈیول کر سکتا ہے۔ PD کے بارے میں، dopaminergic نیوران بھی GA فریگمنٹیشن کو ظاہر کرتے ہیں۔ خاص طور پر، سبسٹیٹیا نگرا پار کمپیکٹا کے ڈوپامینرجک نیوران جو زیادہ ایکسپریس ہیومن سیئن GA فریگمینٹیشن کو ظاہر کرتے ہیں، جو Rab1A [17] کو زیادہ ایکسپریس کرنے پر کم ہو جاتا ہے۔

مزید برآں، GA فریگمنٹیشن کو بچانے کے علاوہ، ڈوپامینرجک نیورونز میں Rab1A اوور ایکسپریشن نے موٹر فنکشنز میں بہتری کی حوصلہ افزائی کی۔ اس کے برعکس، نان پرنٹ ایبل Rab1A (Rab1A-∆CC) کا زیادہ اظہار GA کو ٹکڑے ہونے سے بچانے کے قابل نہیں تھا۔ اس نے GA کی سالمیت کی دیکھ بھال میں Rab1A کی اہمیت کو ظاہر کیا، اور اس کے نتیجے میں، موٹر افعال کے کنٹرول میں [17]۔ یہ اعداد و شمار بتاتے ہیں کہ Rab1A GTPase overexpression اس پیتھالوجی کے لیے علاج کا طریقہ ہو سکتا ہے۔ ایک حالیہ مطالعہ نے PD کے ساتھ انسانی مریضوں کے سبسٹیٹیا نگرا سے ڈوپامینرجک نیوران کا تجزیہ کیا ہے، اور انہوں نے یہ ظاہر کیا ہے کہ GA بکھرا ہوا ہے اور زندہ بچ جانے والے نیوران Rab1 GTPase [18] کی زیادہ کارکردگی دکھاتے ہیں۔

مصنفین تجویز کرتے ہیں کہ Rab1 کا یہ حد سے زیادہ اظہار GA کے ٹکڑوں کو دو نظریاتی میکانزم کے ذریعہ مجوزہ کر سکتا ہے: (1) زیادہ اظہار شدہ Rab1 ER-Golgi ٹرانسپورٹ کو تبدیل کر سکتا ہے، اس وجہ سے GA میں عدم توازن پیدا ہوتا ہے۔ (2) Rab1 گولگین کے ساتھ تعامل کر سکتا ہے-84، جو ٹکڑے ٹکڑے کرنے کو دلائے گا [18]۔ مجموعی طور پر، PD میں GA کے ٹکڑے ہونے کو دلانے یا روکنے میں Rab1 کے کردار کے حوالے سے تضادات ہیں۔ AD اور PD کے علاوہ، ALS ایک اور neurodegenerative بیماری ہے جو GA کے ٹکڑے ہونے کو پیش کرتی ہے۔ اس کی بڑی وجہ Rab1 [70] پر منحصر خفیہ راستے میں خلل معلوم ہوتی ہے۔ اس طرح، Rab1 اور GA کی سالمیت کو برقرار رکھنے میں اس کا کردار مختلف neurodegenerative بیماریوں میں ملوث ہے۔

2.1.3 Rab1 اور آٹوفاگوسوم کا کنٹرول

Rab1 GTPase، دیگر Rab GTPases جیسے Rab5، Rab7، Rab9A، Rab11، Rab23، Rab32، اور Rab33B کے ساتھ، آٹوفیگی سے متعلق پروٹین 9 (Atg9) کو بھرتی کرکے اس کے آغاز میں آٹوفاگوسم [73] کی تشکیل میں حصہ لیتا ہے، ایک ٹرانس میبرن پروٹین جو جھلیوں کو فاگوفور تک پہنچانے کے لیے ذمہ دار ہے، جو کہ آٹوفاگوسم [74,75] کی تشکیل سے پہلے کی ساخت ہے۔ جیسا کہ پہلے ذکر کیا گیا ہے، -syn اوور ایکسپریشن GA فریگمنٹیشن کو آمادہ کرتا ہے۔ یہ SKNSH ہیومن نیوروبلاسٹوما سیل لائن، HeLa، HEK293، اور M7- -syn چوہوں میں آٹوفجی کی بے ضابطگی کا باعث بنتا ہے [20]۔ Winslow اور ساتھیوں نے بیان کیا کہ -syn Rab1A/Atg9 محور کی سرگرمی کو بدل دیتا ہے۔ جب Rab1A کو خاموش کیا جاتا ہے اور -syn کو اوور ایکسپریس کیا جاتا ہے، تو Atg9 پروٹین نے ایک perinuclear پوزیشن پر لوکلائز کرنا بند کر دیا اور ایک پھیلی ہوئی تقسیم میں منتقل ہو گیا، جس کے نتیجے میں آٹوفاگوزوم کی تشکیل میں کمی واقع ہوئی [20]۔ اس طرح، Rab1A کی سرگرمی میں اضافہ آٹوفجی کے حق میں ہو سکتا ہے اور اس وجہ سے بیماری کی شدت کو کم کر سکتا ہے، کیونکہ اس طریقہ کار کو پروٹین کے مجموعوں کو ری سائیکل کرنے اور ختم کرنے کے لیے استعمال کیا جا سکتا ہے۔

2.2. Rab5

Rab5 اینڈو سائیٹوسس میں ایک اہم کردار ادا کرتا ہے، جو پلازما جھلی سے ابتدائی اینڈوسوم بنانے کے لیے آنے والے اینڈوسیٹک ویسیکلز کے فیوژن کے لیے ذمہ دار ہے۔ اس طریقہ کار کے ذریعہ، Rab5 اندرونی اور جھلی ریسیپٹرز کی اسمگلنگ کو منظم کرتا ہے [76]۔ Rab5 کے لیے بیان کردہ دو GEFs Ras/Rab Interactor 3 (RIN3) اور Rabex5 ہیں۔ RIN3 RIN1 اور RIN2 کے ساتھ GEFs کے RIN خاندان کا رکن ہے۔ تینوں کے پاس Vps9 ڈومین ہے، جو Rab5-مخصوص GEF کیٹلیٹک ڈومین ہے [77]۔ Rabex5 کے حوالے سے، یہ Vps9 ڈومین پر مشتمل GEFs کا سب سے زیادہ سمجھے جانے والا ممبر ہے۔ اس کے کیٹلیٹک ڈومین کے علاوہ، Rabex5 Rabaptin5 بائنڈنگ سائٹ پر مشتمل ہے، جو Rab5 اثر کرنے والا مالیکیول ہے۔ اس طرح، Rabex5 Rab5-ریگولیٹڈ Rabaptin5 سے مضبوطی سے جڑا ہوا ہے، جو Rabex5 GEF سرگرمی کو ریگولیٹ کرتا ہے، ایک فیڈ بیک لوپ بناتا ہے [78]۔ Rab5 ابتدائی اینڈوسومس میں Rabaptin5 کو بھرتی کرتا ہے، جو بعد میں جھلیوں کی ڈاکنگ اور فیوژن کے لیے ذمہ دار ہے [79]۔

ایک بار چالو ہونے کے بعد، Rabex5/Rab5/Rabaptin5 کمپلیکس اینڈو سائیٹک واسیکلز اور ابتدائی اینڈوسومس [79–81] میں مقامی ہو جاتا ہے۔ تین مالیکیولز فعال Rab5 کو مستحکم کرنے کے لیے کام کرتے ہیں جب یہ اپنے ہدف شدہ لوکلائزیشن تک پہنچ جاتا ہے، ایک مثبت فیڈ بیک لوپ بناتا ہے جو اس راستے کو ممکن بناتا ہے [38]۔ جیسا کہ اوپر بیان کیا گیا ہے کہ Rabaptin5 [79] کو Rab5 سگنل دے رہا ہے، Rab5 PI3K hVPS34-p150 کمپلیکس کے ذریعے سگنل دے سکتا ہے، جو ابتدائی اینڈوسومس [25,82,83] میں PI3P کی سطح کو بڑھاتا ہے۔ یہ PI3P EEA1 کی بھرتی کی اجازت دیتا ہے، ایک اور Rab5 انفیکٹر مالیکیول جو ابتدائی اینڈوسوم کے ساتھ ان کے فیوژن سے پہلے اینڈوسیٹک ویسیکلز کی ڈاکنگ کو منظم کرتا ہے [84]۔ مزید برآں، hVPS34-p150 TBC1D2 GAPs کو فعال کر کے منفی فیڈ بیک لوپ کو چالو کر سکتا ہے، جس کے نتیجے میں Rab5 GTPase غیر فعال ہو جاتا ہے [85]۔

TBC ڈومین پر مشتمل GAPs TBC1D3، RUTBC3، اور USP6NL کو Rab5 GAPs [12,41] کے طور پر بیان کیا گیا ہے۔ نیوروڈیجینریٹیو بیماریوں میں Rab5 کے کردار کو اینڈوسومل اسمگلنگ تک محدود کردیا گیا ہے۔ اس سلسلے میں، مختلف مطالعات نے AD [12,22,86–91] کے ساتھ ساتھ PD [12,92,93] کے murine ماڈلز میں Rab5 کی سرگرمی میں اضافے کا پتہ لگایا ہے۔ ہنٹنگٹن کی بیماری (HD) میں، Rab5 ابتدائی اینڈوسومز کی حرکت کو بھی کنٹرول کرتا ہے۔ ایچ ڈی ہنٹنگٹن (Htt) پروٹین میں تغیرات کی وجہ سے ہوتا ہے، جو GA اور vesicles پر واقع ہے۔ Htt Htt سے وابستہ پروٹین 40 (HAP40) کے ساتھ ایک کمپلیکس بناتا ہے اور Rab5 [94] کے ایک انفیکٹر مالیکیول کے طور پر کام کرتا ہے۔ HD میں، HAP40 کو الگ کر دیا جاتا ہے اور Htt-HAP40 کمپلیکس میں خلل پڑتا ہے۔ اس کے نتیجے میں، ابتدائی اینڈوسوم کی حرکت پذیری کم ہو جاتی ہے [94]۔ اس طرح، Rab5 ایچ ڈی میں اینڈوسومل حرکت پذیری کو بہتر بنانے کے لیے ایک علاج کا ہدف ہو سکتا ہے۔

2.2.1 Rab5 اور APP Processing

اینڈو سائیٹک اسمگلنگ میں بے ضابطگیاں AD کی اہم خصوصیات میں سے ایک ہیں، اور Cataldo اور معاونین کے مطابق، وہ A کے ذخائر سے پہلے ہیں [95]۔ بعد میں کی گئی ایک تحقیق نے یہ ظاہر کیا کہ Rab5 اوور ایکسپریشن اینڈوسوم میں اے پی پی کی انتہائی فعال پروسیسنگ کو بڑھا کر اس طرح کی اینڈوسیٹک بے ضابطگیوں کو دوبارہ پیدا کر سکتا ہے [22]۔ مورائن سیلز میں Rab5 کی حد سے زیادہ کارکردگی نے AD سے متعلق اینڈو سائیٹک تبدیلیاں پیدا کیں، جیسے کہ AD دماغوں کے نیوران میں مشاہدہ کیے جانے والے بڑے اینڈوسوم کی موجودگی [22]۔ مزید برآں، Rab5 اوور ایکسپریشن میں A 1-40 اور A 1-42 سراو کی سطحوں میں 2.5 گنا اضافہ ہوا [22]۔

مصنفین نے CTF کی سطح میں اضافہ بھی دیکھا۔ یہ CTFs ابتدائی اینڈوسوم کے ساتھ مل کر انڈوسومل پاتھ وے، CTF جنریشن، اور A پروڈکشن کے درمیان براہ راست تعلق کی تجویز کرتے ہیں۔ لہذا، AD میں مشاہدہ شدہ اینڈوسومل بے ضابطگیوں کو اے پی پی پروٹولیسس [22] میں نقائص سے وابستہ کیا جاسکتا ہے۔ اس سے پتہ چلتا ہے کہ اے پی پی پروسیسنگ اور اس کے نتیجے میں، A 1-40 اور A 1-42 نسل میں اس کی مطابقت کی وجہ سے Rab5 ایک علاج کا ہدف ہو سکتا ہے۔ پلیکسٹرین ہومولوجی اور فاسفوٹائروسین بائنڈنگ ڈومین- اور لیوسین زپر موٹیف پر مشتمل اڈاپٹر پروٹین (APPL1) کی بھرتی میں CTF کے کردار کو بھی بیان کیا گیا ہے [91]۔ اینڈوسومس میں، APPL1 فعال Rab5-GTP کو مستحکم کرتا ہے، جس سے پیتھولوجک ڈس ریگولیٹڈ اینڈوسیٹوسس ہوتا ہے [91]۔

اینڈوسومل پاتھ وے میں Rab5 کے کردار کو مدنظر رکھتے ہوئے، Grbovic اور معاونین دفاع کرتے ہیں کہ اینڈوسوم میں بے ضابطگیوں سے CTF میں اضافہ ہوتا ہے [22]، اور کم اور ساتھی اس بات کا دفاع کرتے ہیں کہ CTFs ان اینڈوسومل ڈس ریگولیشنز کو آمادہ کرتے ہیں [91]۔ مزید برآں، BACE1 کی shRNA خاموشی نے اینڈو سائیٹک نقائص کو پلٹا دیا، یہ تجویز کرتا ہے کہ APP پروٹولیسس اینڈوسیٹک نقائص کی وجہ ہو سکتا ہے [96]۔ آخر میں، یہ مطالعات ایک مثبت فیڈ بیک لوپ کی نشاندہی کرتے ہیں جس میں اے پی پی کی پروسیسنگ اینڈوسومل پاتھ وے کی بے ضابطگی کا باعث بن سکتی ہے، اور اینڈو سائیٹک پاتھ وے میں نقائص کے نتیجے میں اے پی پی پروسیسنگ میں اضافہ ہو سکتا ہے۔

2.2.2. Rab5 اور Axآنل

نقل و حمل عام بیسل فوربرین چولینرجک نیورونز (BFCNs) میں، اعصابی نمو کا عنصر (NGF) محوری سروں پر TrkA ریسیپٹر کو جوڑتا اور فعال کرتا ہے۔ اس کے بعد NGF-TrkA کمپلیکس کو Rab5 کے ذریعے ثالثی کی جانے والی اینڈوسیٹوسس کے ذریعے اندرونی بنایا جاتا ہے۔ اینڈوسومز کو مائکرو ٹیوبولس کے ذریعے خلیے کے جسم میں منتقل کیا جاتا ہے، جہاں نمو اور تفریق کے اشارے نیوکلئس تک پھیلائے جاتے ہیں [12]۔ پیتھولوجیکل حالات میں، بی ایف سی این نیورونز میں Rab5 کی حد سے زیادہ ایکٹیویشن ہوتی ہے، جس کے نتیجے میں ابتدائی اینڈوسوم بڑے ہوتے ہیں۔ یہ اینڈوسوم این جی ایف سگنلز کی ریٹروگریڈ محوری نقل و حمل میں مداخلت کرتے ہیں۔ مزید برآں، Rab5 کی سرگرمی میں اضافہ موٹر پروٹین کو بھی متاثر کر سکتا ہے، محوری نقل و حمل میں تبدیلی، اور خلیے کے جسم میں ٹرافک سگنلز کی نقل و حمل میں نقائص نیورونل ایٹروفی [12] کا باعث بنتے ہیں۔

اس سلسلے میں، GEF RIN3 کا تعلق ٹرافک سگنلز [77,97] کی نقل و حمل میں Rab5 کے زیادہ فعال ہونے سے ہے۔ مزید برآں، جینوم وائیڈ ایسوسی ایشن اسٹڈیز (GWAS) نے RIN3 کو AD [12,98–100] کی ترقی کے خطرے سے جوڑ دیا ہے۔ تاہم، یہ ابھی بھی واضح کرنے کی ضرورت ہے کہ آیا AD میں RIN3 فنکشن اور اظہار کو تبدیل کیا گیا ہے اور اگر دیگر Rab5 GEFs AD [12] میں Rab5 اوور ایکٹیویشن کو زیر کرتے ہیں۔ اس کے باوجود، ایک اور ممکنہ طریقہ کار موجود ہے جو Rab5 کی اوور ایکٹیویشن کی وضاحت کر سکتا ہے۔ جیسا کہ پہلے ذکر کیا گیا ہے، CTF APPL1 کو اینڈوسومز میں بھرتی کرتا ہے، جو Rab5-GTP کو مستحکم کرتا ہے۔ یہ کمپلیکس غیر منظم اینڈوسیٹک راستے کے ساتھ ساتھ تبدیل شدہ محوری نقل و حمل کی طرف جاتا ہے [12,91]۔ PD کے بارے میں، انسانی -syn کا جزوی طور پر اظہار کرنے والے murine ماڈلز نے Rab5 کی -syn پر منحصر ایکٹیویشن کا مظاہرہ کیا ہے جس کے نتیجے میں Rab5 اور dynein کمپلیکس میں dysregulation ہوتا ہے جس کے نتیجے میں endosomal dysfunction ہوتا ہے۔ یہ بنیادی طریقہ کار ہوسکتا ہے جو پیچھے ہٹنے والی محوری نقل و حمل میں بے ضابطگی اور PD [12,93] میں اس کے نتیجے میں نیورونل ایٹروفی کی وضاحت کرے گا۔

2.3 رب 7

Rab7 GTPase vesicular نقل و حمل کو منظم کرتا ہے، خاص طور پر دیر سے endocytic پاتھ وے [101]۔ یہ اینڈوسوم کی پختگی میں، اینڈوسوم اور لائسوزوم کی نقل و حمل میں، دیر سے اینڈوسومز اور لائسوسومز کے فیوژن میں، اور لائسوسومل بایوجنسیس [26,101,102] میں بنیادی کردار پیش کرتا ہے۔ Rab7 آٹوفاگوسوم کی ٹریفک میں بھی حصہ لیتا ہے [103]۔ ان تمام عملوں کی اہمیت کو مدنظر رکھتے ہوئے، Rab7 کو کینسر [26] اور نیوروڈیجنریشن [104] کے علاج کے ہدف کے طور پر تجویز کیا گیا ہے۔ Rab7 ایکٹیویشن کی ثالثی GEF Mon1-Ccz1 [27,105,106] کے ذریعے کی گئی ہے۔ وہ طریقہ کار جس کے ذریعے Mon1-Ccz1 Rab7 کی ایکٹیویشن میں ثالثی کرتا ہے اس میں Rab5 کا ایک انفیکٹر مالیکیول بننے اور ابتدائی اینڈوسومس [102,107] میں PI3P کے ساتھ تعامل کرنے کی صلاحیت ہوتی ہے۔

اس طرح، Rab5 اور Rab7 کے درمیان تبادلہ ہوتا ہے اور اینڈوسوم ابتدائی اینڈوسوم سے دیر سے اینڈوسوم تک جاتا ہے [105,107]۔ دوسری طرف، Rab7 کے لیے بیان کردہ GAPs ہیں TBC1D2A، TBC1D5، TBC1D15، اور EVI5-L [41]۔ راب7-دیر والے اینڈوسومز اور لائسو سومز میں جی ٹی پی اپنے انفیکٹر مالیکیول کے ذریعے راب انٹرایکٹنگ لیزوسومل پروٹین (RILP) [108] کو سگنل دے سکتا ہے۔ RILP dynein – dynactin موٹر کمپلیکس کو بھرتی کرتا ہے اور اس کے نتیجے میں، endosomes کو microtubules کے مائنس اینڈ کی طرف منتقل کیا جاتا ہے [109]۔ FYVE اور coiled-coil ڈومین پر مشتمل پروٹین 1 (FYCO1) Rab7 کا ایک اور انفیکٹر مالیکیول ہے جو مائکروٹیوبلز [110] کے پلس اینڈ کی طرف ویسکولر ٹرانسپورٹ میں ثالثی کرتا ہے۔ مزید یہ کہ، FYCO1 Rab7 اور LC3 پروٹین کے ساتھ ایک کمپلیکس بناتا ہے، جو آٹوفاگوسوم کی پختگی کا انچارج ہوتا ہے [111]۔

ایک بار جب یہ کمپلیکس بن جاتا ہے تو، آٹوفیجک واسیکلز کو مائکروٹوبول کے پلس اینڈ کی طرف منتقل کیا جاتا ہے [110]۔ اعصابی نظام کے بارے میں، دونوں آٹوفیجی اور راب 7 کے زیر انتظام اینڈولیسوومل ٹریفک کا تعلق پیتھالوجیز جیسے AD، PD، HD، یا Charcot– Marie–Tooth type 2B (CMT2B) [104,112] سے ہے۔ Rab7 زہریلے پیپٹائڈس کی ٹریفک میں ملوث ہے جیسے A vesicles [23] یا AD [29] میں Tau secretion اور PD [30] میں -syn کلیئرنس۔

2.3.1 Rab7 اور Traزہریلے پیپٹائڈس کی افزائش

AD میں، جمع ہونا اے پی پی پروسیسنگ میں بے ضابطگی کا نتیجہ ہو سکتا ہے، نیز زہریلے اولیگومرز کے خاتمے میں خرابی [113]۔ لہذا، Rab5 اور Rab7-کنٹرول شدہ اینڈولیسوسومل ٹریفک زہریلے پیپٹائڈس جیسے کہ A. اس سلسلے میں، N2a نیوروبلاسٹوما ماؤس سیل لائن کے ساتھ ساتھ چوہوں کے پرائمری نیورونل کلچرز میں ہونے والے مطالعے نے یہ ثابت کیا ہے کہ A 1-42 کو ابتدائی حالتوں میں مثبت ابتدائی اینڈوسومز میں اندرونی شکل دی جاتی ہے اور بعد میں، راب7-مثبت دیر سے اینڈوسومس [23] میں۔ یہ اعداد و شمار بتاتے ہیں کہ اینڈوسیٹک راستہ A کی کلیئرنس اور/یا خاتمے میں فعال طور پر شامل ہے۔

Rab5 اور Rab7 کی غالب-منفی شکلوں کی حد سے زیادہ اظہار، جو ان کے اثر کرنے والے مالیکیولز کے ذریعے سگنل کو باندھنے اور منتقل کرنے سے قاصر ہے، ان GTPases کے A 1-42 monomers اور oligomers کے ساتھ endosomes [23] میں جمع ہونے کو روکتا ہے۔ یہ A کلیئرنس میں ان GTPases اور endocytosis کی شمولیت کی حمایت کرتا ہے۔ کچھ مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ Rab5- اور Rab7-میڈیڈیٹیڈ ڈس ریگولیٹڈ اینڈولیسوسومل پاتھ وے کے زہریلے اثرات ہوتے ہیں [24,87,88]۔ پوسٹ مارٹم AD دماغوں میں Rab5 اور Rab7 پروٹین کی سطح میں اضافہ ہوا ہے [87,88]۔ مزید برآں، چوہے کے پرانتستا سے پرائمری نیورانز میں ایک مطالعہ نے یہ ثابت کیا ہے کہ Rab5- اور Rab7-A 1-42 کی ثالثی سے فعال انٹرنلائزیشن نیورونل موت کا باعث بنتی ہے [24]، اور مزید کہا کہ اینڈوسیٹوسس جنرل انحیبیٹر فینائل آرسین آکسائڈ (PAO) نے زہریلا کو کم کیا۔

یہ نتائج بتاتے ہیں کہ Rab5- اور Rab7-میڈیٹیڈ اینڈوسیٹوسس کو مسدود کرنا AD [24] میں نیورونل موت کو روکنے کے لیے ایک علاج کی حکمت عملی ہو سکتی ہے۔ جہاں تک تاؤ کا تعلق ہے، تیز رفتار ترقی پذیر AD اور 5XFAD چوہوں کے دماغوں کے دماغوں میں PTau [28] کے ساتھ مل کر Rab7A پروٹین کی سطح میں اضافہ ہوا ہے۔ مزید یہ کہ پرائمری کارٹیکل نیورونز اور ہیلا سیلز میں Rab7A اوور ایکسپریشن نے تاؤ سراو کی حوصلہ افزائی کی [29]۔ اس کے برعکس، Rab7A کی خاموشی، نیز اس کی غالب-منفی شکل کی حد سے زیادہ اظہار، جزوی طور پر تاؤ سراو کو روکتا ہے [29]۔ ان تمام اعداد و شمار کا مطلب یہ ہوسکتا ہے کہ Rab7 dysregulation تاؤ جمع کرنے کے ساتھ ساتھ AD [114] میں اس کے زہریلے اثرات کے پھیلاؤ میں بھی حصہ ڈال سکتا ہے۔

2.3.2 Rab7 اور Endolysosomal Trafficing of Membrane Recepٹورس

Endolysosomal راستے کی خرابی کا تعلق PD سے ہے، اور اس راستے میں حصہ لینے والے جین اس روگجنن سے متعلق ہیں [115]۔ Lrrk، D. melanogaster میں LRRK2 kinase کا ہومولوج، لیٹ اینڈوسومز اور لائسو سومز کی جھلیوں میں Rab7 کے ساتھ تعامل کرتا ہے اور اسے Rab7-لائسوزوم کے منحصر perinuclear لوکلائزیشن کو روکتا دکھایا گیا ہے [116]۔ اس کے برعکس، Lrrk کی اتپریورتی شکل، پیتھوجینک LRRK2G2019S کا ینالاگ، lysosomes کے perinuclear کلسٹرنگ کو فروغ دیتا ہے۔ اس طرح، Rab7 اور LRRK2G2019S PD [116] میں غیر فعال اینڈولیسوسومل راستے کو روک سکتے ہیں۔

یہ بیان کیا گیا ہے کہ LRRK2 ایپیڈرمل گروتھ فیکٹر ریسیپٹر (EGFR) [31] کے راب7-انحصار اینڈوسیٹک ٹریفک کو منظم کرتا ہے۔ اتپریورتی LRRK2G2019S کے اظہار کی وجہ سے ابتدائی سے دیر تک اینڈوسومل ای جی ایف آر کی اسمگلنگ میں تاخیر اور نتیجے میں ای جی ایف آر کے انحطاط میں تاخیر ہوئی۔ یہ نقائص Rab7 [31] کی جزوی طور پر فعال شکل کو زیادہ متاثر کرکے واپس کردیئے گئے تھے۔ رسیپٹرز کی اسمگلنگ کو منظم کرنے کے لئے Rab7 کی صلاحیت کو پہلے ہی ایک سے زیادہ سکلیروسیس (ایم ایس) [33] کے علاج کے طریقوں میں استعمال کیا گیا ہے۔ Rab7 کا زیادہ اظہار ٹول نما رسیپٹرز (TLRs) کی موجودگی کو منظم کر سکتا ہے اور اس وجہ سے اشتعال انگیز ردعمل کو کنٹرول کر سکتا ہے [33]۔ تاہم، Rab7 واحد Rab GTPase نہیں ہے جو ریسیپٹرز کی اسمگلنگ کو منظم کرتا ہے۔

مثال کے طور پر، Rab11 TLR اسمگلنگ کو اینڈوسوم کے ذریعے کنٹرول کرتا ہے [117]۔ اس سلسلے میں، Evi5 میں مخصوص سنگل نیوکلیوٹائڈ پولیمورفزم (SNPs) کی موجودگی، ایک Rab11GAP، کو MS [118] کی نشوونما کے لیے زیادہ حساسیت سے منسلک کیا گیا ہے۔ اس سے پتہ چلتا ہے کہ Rab11 TLR ریسیپٹرز کو ری سائیکل کر سکتا ہے، جس سے پیدائشی قوت مدافعت متاثر ہوتی ہے۔ ابھی حال ہی میں، Evi5 کو MS [119] کے ساتھ منسلک کیا گیا ہے اور یہ بیماری [120] کے مارکر کے طور پر استعمال ہوتا رہا ہے۔ یہ اعداد و شمار نیوروڈیجینریٹیو بیماریوں میں ریسیپٹرز کی ری سائیکلنگ کو فروغ دینے کے نقطہ نظر کے طور پر Rab GTPases سگنلنگ ریگولیشن کو دریافت کرنے کی دعوت دیتے ہیں۔

2.3.3 Parkin/Rab7/RILP

پارکن ایک ubiquitin E3 ligase ہے جو PD سے وابستہ ہے، کیونکہ اس انزائم میں تغیرات بیماری کی نشوونما کے لیے دوسرا سب سے عام جینیاتی خطرے کا عنصر ہیں [121]۔ Rab7 K38 ریزیڈیو ubiquitination Rab7 کو ایک فعال شکل میں برقرار رکھتا ہے اور اس کے نتیجے میں endocytic ٹریفک کو متاثر کرتا ہے [32]۔ PD کے مریضوں کے پرائمری فبروبلاسٹ کلچرز کے تجربات جن میں فنکشنل پارکن کی کمی ہے اور خلیات میں Rab7K38R اتپریورتی کی حد سے زیادہ کارکردگی کا مظاہرہ کرتے ہیں جو ہر جگہ نہیں ہو سکتے ہیں، یہ ظاہر کیا گیا ہے کہ ان حالات میں، Rab7 کی صلاحیت اس کے اثر کرنے والے مالیکیول Rab7-انٹریکٹنگ لائسوسومل پروٹین (RILP) سے منسلک ہوتی ہے۔ کم ہو گیا ہے [32]۔ RILP ایک Rab7 انفیکٹر مالیکیول ہے جو پارکن/Rab7 محور سگنلنگ کو منتقل کرنے میں ملوث ہے۔

خاص طور پر، RILP dynein – dynactin موٹر کمپلیکس کو بھرتی کرتا ہے تاکہ vesicles کو microtubules [108,109] کے مائنس اینڈ کی طرف لے جایا جا سکے۔ سونگ اور اس کے ساتھیوں کے مطابق، Rab7 dysregulation Parkin-/- خلیوں میں endocytic تبدیلیوں کی بنیادی وجہ ہو سکتی ہے۔ مزید یہ کہ Parkin/Rab7/endocytosis محور کی یہ بے ضابطگی PD پیتھالوجی [32] کی ترقی میں حصہ ڈال سکتی ہے۔

2.3.4 Rab7 اور Autophagy

Rab7 اپنی فعال شکل میں آٹوفاگوسوم کی تشکیل کے ساتھ ساتھ اس کی پختگی اور مائیکرو ٹیوبلس کی طرف نقل و حمل کو منظم کر سکتا ہے [104]۔ Rab7 کا مطالعہ اور آٹوفیجی میں اس کا کردار نیوروڈیجینریٹیو بیماریوں کے علاج کے لیے حکمت عملیوں کی ترقی میں سہولت فراہم کر سکتا ہے [104]۔ Rab7 کا تعلق CMT2B نیوروڈیجینریٹیو بیماری میں آٹوفجی سے ہے۔ یہ پیتھالوجی Rab7 میں مختلف غلط فہمی کی تبدیلیوں کی وجہ سے ہوتی ہے جو Rab7 کو آٹوفیجک کمپارٹمنٹس میں لوکلائزیشن کو کم کرنے اور آٹوفیجی میں کمی کا باعث بنتی ہے [8,34]۔ یہ بیان کیا گیا ہے کہ CMT2B Rab7 dysfunction کا براہ راست نتیجہ ہے، حالانکہ یہ ابھی بھی واضح کرنے کی ضرورت ہے کہ آیا یہ پیتھالوجی Rab7 کے فنکشن کے نقصان کی وجہ سے آٹوفیجک پاتھ وے میں کمی کا نتیجہ ہے [8]۔

PD کے بارے میں، HEK293 اور D. melanogaster -synA53T کے ساتھ کیے گئے مطالعے نے یہ ظاہر کیا کہ Rab7 اوور ایکسپریشن -syn مجموعوں کی کلیئرنس کے حق میں ہے [30]۔ مزید یہ کہ مصنفین نے شناخت کیا کہ Rab7 انسانی مادّہ نگارا [30] میں نیورومیلینن گرینولز میں مقامی ہے۔ Rab7/neuromelanin granules autophagosome نما حفاظتی آرگنیلز ہیں۔ Rab7 ان دانے داروں کی بایوجنسیس اور -syn مجموعوں کی کلیئرنس میں حصہ لیتا ہے [30]۔ اس کے علاوہ، D. melanogaster میں Rab7 اوور ایکسپریشن نے فینوٹائپ کو بچایا اور لوکوموٹر کے خسارے کو بہتر بنایا [30]۔ بہر حال، Rab7 واحد Rab GTPase نہیں ہے جسے آٹوفیجی کے ذریعے -syn کلیئرنس کو کنٹرول کرنے کے لیے بیان کیا گیا ہے۔ حال ہی میں، Rab27b کو اینڈولیسوسومل ٹریفک کو کنٹرول کرنے کے لیے دکھایا گیا ہے اور اس طرح آٹوفیجی [122] کے ذریعے -syn کی سراو اور کلیئرنس۔

اس کے مطابق، shRNA کے ذریعہ Rab27b کو خاموش کرنے سے insoluble -syn کی انٹرا سیلولر سطح میں اضافہ ہوا۔ مزید برآں، PD مریضوں کے پوسٹ مارٹم دماغوں نے Rab27b [122] کی پروٹین کی سطح میں اضافہ دکھایا ہے۔ اگرچہ وہ آٹوفیجک عمل سے متعلق نہیں ہیں، دوسرے راب GTPases بھی -syn کے ہومیوسٹاسس میں حصہ لیتے ہیں۔ جبکہ ان میں سے کچھ مجموعوں کی منظوری کے حامی ہیں، دوسرے ان کی تشکیل کے حق میں ہیں۔ مثال کے طور پر، Rab39B کلاسیکی طور پر GA اور پوسٹ سینیپٹک جھلی کے درمیان نقل و حمل کو منظم کرتا ہے۔ PD میں، Rab39B میں تغیرات کے نتیجے میں GTPase کا فنکشن ختم ہو گیا ہے اور اس کے نتیجے میں -syn ہومیوسٹاسس [123,124] کی بے ضابطگی میں۔

اس کے برعکس، PD کے مریضوں نے Rab35 کی بڑھتی ہوئی سطح کو ظاہر کیا ہے، جو -synA53T [125] کے بڑھے ہوئے جمع اور سراو کو فروغ دیتا ہے۔ اس کے علاوہ، پرائمری سیل کلچرز اور ویوو تجربات نے یہ ظاہر کیا کہ LRRK2-ثالثی Rab5 dysregulation نے شدید neurotoxicity اور dopaminergic neurons [57,58] کے نقصان کو جنم دیا۔

کیوں cistanche کھانے سے الزائمر کی بیماری اور پارکنسن کی بیماری سے بچا جا سکتا ہے۔

Cistanche میں کئی فعال مرکبات ہوتے ہیں جن کے نیورو پروٹیکٹو اثرات دکھائے گئے ہیں، جو الزائمر کی بیماری اور پارکنسنز کی بیماری کے بڑھنے کو روکنے یا سست کرنے میں مدد کر سکتے ہیں۔ ان مرکبات میں echinacoside، acteoside، اور verbascoside شامل ہیں، جن میں سوزش اور اینٹی آکسیڈنٹ خصوصیات پائی گئی ہیں جو نیوران کو نقصان سے بچا سکتی ہیں اور دماغ میں سوزش کو کم کر سکتی ہیں۔ مزید برآں، cistanche کو acetylcholine کی سطح کو بڑھانے کے لیے دکھایا گیا ہے، ایک نیورو ٹرانسمیٹر جو سیکھنے اور یادداشت کے لیے اہم ہے، جسے الزائمر کی بیماری میں کم کیا جا سکتا ہے۔ اگرچہ ان بیماریوں سے بچاؤ کے لیے cistanche کے ممکنہ فوائد کو مکمل طور پر سمجھنے کے لیے مزید تحقیق کی ضرورت ہے، لیکن یہ ابتدائی نتائج امید افزا ہیں۔

حوالہ

19. کوپر، اے اے؛ گٹلر، AD؛ کاشیکر، اے۔ ہینس، سی ایم؛ ہل، کے جے؛ بھولر، بی۔ لیو، کے؛ Xu, K.; Strathearn, KE; لیو، ایف. ET رحمہ اللہ تعالی. Alpha-synuclein ER-Golgi ٹریفک کو روکتا ہے اور Rab1 پارکنسنز کے ماڈلز میں نیوران کے نقصان کو بچاتا ہے۔ سائنس 2006، 313، 324–328۔ [کراس ریف]

20. Winslow, AR; چن، سی ڈبلیو؛ Corrochano, S.; Acevedo-Arozena, A.; گورڈن، ڈی ای؛ پیڈن، اے اے؛ Lichtenberg, M.; مینزیز، ایف ایم؛ روی کمار، بی۔ اماریسیو، ایس. ET رحمہ اللہ تعالی. -Synuclein macroautophagy کو متاثر کرتا ہے: پارکنسنز کی بیماری کے مضمرات۔ جے سیل بائیول۔ 2010، 190، 1023–1037۔ [کراس ریف] [پب میڈ] 21. Soo, KY; ہالورن، ایم؛ سندرامورتی، وی. پرکھ، ایس. ٹوتھ، آر پی؛ ساوتھم، کے اے؛ میک لین، CA؛ لاک، پی. کنگ، اے. فارگ، ایم اے؛ ET رحمہ اللہ تعالی. Rab1-انحصار ER-Golgi ٹرانسپورٹ کی خرابی SOD1، TDP-43، اور FUS سے وابستہ ALS میں ایک عام پیتھوجینک میکانزم ہے۔ ایکٹا نیوروپتھول۔ 2015، 130، 679–697۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

22. گربووک، او ایم؛ میتھیوز، پی ایم؛ جیانگ، وائی؛ شمٹ، ایس ڈی؛ دیناکر، آر. سمرز-ٹیریو، این بی؛ سیریسا، بی پی؛ نکسن، RA؛ Cataldo, AM Rab5-متحرک اپ ریگولیشن اینڈو سائیٹک پاتھ وے انٹرا سیلولر بیٹا کلیویڈ امائلائیڈ پیشگی پروٹین کاربوکسائل ٹرمینل فریگمنٹ لیول اور ایبیٹا کی پیداوار کو بڑھاتا ہے۔ J. Biol کیم 2003، 278، 31261–31268۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

23. لی، جے؛ کنیکیو، ٹی. شنوہارا، ایم؛ Zhang, Y.; لیو، ایم جے؛ سو، ایچ. Bu, G. Apolipoprotein E Isoforms کے ذریعے Amyloid- Endocytic Trafficing and Lysosomal Degradation کا تفریق ضابطہ۔ J. Biol کیم 2012، 287، 44593–44601۔ [کراس ریف]

24. گانا، ایم ایس؛ بیکر، جی بی؛ Todd, KG; Kar, S. inhibition of -amyloid1-42 انٹرنلائزیشن چوہا کارٹیکل کلچرڈ نیوران میں اینڈوسومل-لائسوسومل سسٹم کو مستحکم کرکے نیورونل موت کو کم کرتی ہے۔ نیورو سائنس 2011، 178، 181–188۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

25. گیلولی، ڈی جے؛ رائبورگ، سی۔ Stenmark، H. Phosphatidylinositol 3- فاسفیٹ ابتدائی اینڈوسوم کے مائیکرو ڈومینز میں پایا جاتا ہے۔ ہسٹو کیم۔ سیل بائیول۔ 2003، 120، 445–453۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

26. Guerra, F.; Bucci، C. ٹیومر کی ترقی اور سسپلٹین کیمورسٹینس میں RAB7 پروٹین کا کردار۔ کینسر 2019، 11، 1096۔ [کراس ریف] 27۔ نورڈمین، ایم۔ کیبریرا، ایم. پرز، اے. بروکر، سی. Ostrowicz, C.; Engelbrecht-Vandré, S.; Ungermann, C. The Mon1-Ccz1 کمپلیکس دیر سے Endosomal Rab7 homolog Ypt7 کا GEF ہے۔ کرر بائول 2010، 20، 1654–1659۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

28. ظفر، ص. یونس، این. Correia, S.; شفیق، ایم. طاہر، ڈبلیو. شمٹز، ایم؛ فیرر، I.؛ Andréoletti, O.; Zerr, I. کریوٹزفیلڈ-جیکوب بیماری اور الزائمر کی بیماری میں Rab7a اور Tau کا تناؤ کے لیے مخصوص تبدیل شدہ ریگولیٹری ردعمل۔ مول نیوروبیول۔ 2017، 54، 697–709۔ [کراس ریف] 29. روڈریگ، ایل. محمد، ن. Desjardins, A.; Lippé, R.; فون، ای اے؛ Leclerc, N. Rab7A تاؤ سراو کو منظم کرتا ہے۔ J. نیورو کیم۔ 2017، 141، 592–605۔ [کراس ریف]

30. ڈنٹر، ای. ساریڈاکی، ٹی۔ نپولڈ، ایم. بیر، ایس. Diederichs, L.; کومنگ، ڈی. فینسکی، ایل. مئی، سی. مارکس، K.؛ Voigt, A.; ET رحمہ اللہ تعالی. Rab7 -synuclein ایگریگیٹس کی کلیئرنس کو دلاتا ہے۔ J. نیورو کیم۔ 2016، 138، 758–774۔ [کراس ریف]

31. Gómez-Suaga، P.؛ Rivero-Ríos، P.؛ Fdez, E.; Blanca Ramirez، M. فیرر، I.؛ Aiastui, A.; لوپیز ڈی منین، اے. Hilfiker، S. LRRK2 Rab7 کی سرگرمی میں کمی کے ذریعے دیر سے اینڈوسومل بڈنگ کو روک کر انحطاطی رسیپٹر کی اسمگلنگ میں تاخیر کرتا ہے۔ ہم مول جینیٹ 2014، 23، 6779–6796۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

32. نغمہ، ص. Trajkovic, K.; سونمی، ٹی. Krainc, D. Parkin Endo-Lysosomal پاتھ وے کے Endosomal تنظیم اور فنکشن کو ماڈیول کرتا ہے۔ J. Neurosci. 2016، 36، 2425–37۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

33. کلیور، ای جے؛ وین ڈیر پاؤ کران، ٹی سی ٹی ایم؛ لان، ایل سی؛ کرنگل، ایچ۔ کمنگس، آر ڈی؛ بوما، جی؛ کرال، جی؛ وین ڈائی، I. Trichuris suis گھلنشیل مصنوعات Rab7b کے اظہار کی حوصلہ افزائی کرتی ہیں اور انسانی ڈینڈریٹک خلیوں میں TLR4 ردعمل کو محدود کرتی ہیں۔ جینز امیون۔ 2015، 16، 378–387۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

34. کولیچیا، ڈی. Stasi، M. لیونارڈی، ایم. مینگنیلی، ایف۔ نولانو، ایم؛ وینزیانی، بی ایم؛ سینٹورو، ایل۔ Eskelinen, E.-L.; چیاریلو، ایم؛ Bucci, C. پیریفرل نیوروپتی چارکوٹ-میری-ٹوتھ قسم 2B میں آٹوفجی کی تبدیلی۔ آٹوفیجی 2018، 14، 930-941۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

35. ہل، K.؛ لی، وائی۔ بینیٹ، ایم؛ McKay، M. Zhu, X.; شیرن، جے؛ ٹورے، ای. لہ، جے جے؛ لیوی، اے آئی؛ کاہن، RA Munc18 انٹرایکٹنگ پروٹینز: ADP-ribosylation عنصر پر منحصر کوٹ پروٹین جو الزائمر کے پیشگی پروٹین کی ٹریفک کو منظم کرتے ہیں۔ J. Biol کیم 2003، 278، 36032–36040۔ [کراس ریف] 36. بنسل، اے. کرشنر، ایم؛ زو، ایل. Cai, D.; Zhang, L. ناریل کا تیل ADP-ribosylation عنصر 1 (ARF1) کی روک تھام کے ذریعے amyloid precursor protein (APP) کے اظہار اور amyloid peptides کے اخراج کو کم کرتا ہے۔ دماغ ریس 2019، 1704، 78-84۔ [کراس ریف]

37. گرفن، ای ایف؛ یان، ایکس۔ کالڈویل، کے اے؛ کالڈ ویل، GA نیوروڈیجنریشن کے الزائمر اور پارکنسنز کی بیماری کے ماڈلز میں Vps41-ثالثی نیورو پروٹیکشن کے الگ الگ فنکشنل رولز۔ ہم مول جینیٹ 2018، 27، 4176–4193۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

38. گود، بی. لیو، ایس. اسٹوری، بی راب پروٹینز گولگی کمپلیکس ڈھانچے کے بڑے عامل کے طور پر۔ چھوٹے GTPases 2018, 9, 66–75۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

39. ہوما، وائی۔ ہیراگی، ایس. فوکوڈا، ایم راب فیملی آف چھوٹے جی ٹی پیز: ان کے ضابطے اور افعال پر ایک تازہ ترین نظریہ۔ FEBS J. 2021, 288, 36-55. [کراس ریف]

40. مارات، AL؛ Dokainish, H.; میک فیرسن، PS DENN ڈومین پروٹینز: ریگولیٹرز آف راب GTPases۔ J. Biol کیم 2011، 286، 13791–13800۔ [کراس ریف]

41. مولر، ایم پی؛ گوڈی، GEFs، GAPs اور GDI کے ذریعے Rab سرگرمی کا RS مالیکیولر کنٹرول۔ چھوٹے GTPases 2018, 9, 5–21۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

42. کوچ، ڈی. رائے، اے. علی، میں؛ Bleimling, N.; Friese, T.; Brockmeyer, A.; جیننگ، پی. گوڈ، بی؛ Itzen, A.; مولر، ایم پی؛ ET رحمہ اللہ تعالی. چھوٹے GTPases کے لیے نامعلوم GEFs کی شناخت کے لیے ایک پل ڈاؤن طریقہ کار۔ چھوٹے جی ٹی پیز 2016، 7، 93–106۔ [کراس ریف]

43. سٹیگر، ایم. ٹونیلی، ایف. Ito, G.; ڈیوس، پی. ٹرسٹ، ایم. ویٹر، ایم. واچٹر، ایس. Lorentzen, E.; ڈیڈی، جی؛ ولسن، ایس؛ ET رحمہ اللہ تعالی. Phosphoproteomics سے پتہ چلتا ہے کہ پارکنسنز کی بیماری کناز LRRK2 Rab GTPases کے ذیلی سیٹ کو منظم کرتی ہے۔ Elife 2016, 5, e12813. [کراس ریف] [پب میڈ]

44. Madero-Pérez, J.; Fdez, E.; فرنانڈیز، بی. Ordóñez, AJL; رامریز، ایم بی؛ Gómez-Suaga، P.؛ Waschbüsch, D.; Lobbestael, E.; Baekelandt, V.; نیرن، اے سی؛ ET رحمہ اللہ تعالی. LRRK2 میں پارکنسن کی بیماری سے وابستہ تغیرات Rab8a فاسفوریلیشن کے ذریعے سینٹروسومل نقائص کا سبب بنتے ہیں۔ مول نیوروڈیجنر۔ 2018، 13، 3. [کراس ریف] 45. ہوٹاگلنگ، اے ایچ؛ نووک، جھلی ٹریفک اور سیل فزیالوجی میں راب GTPases کا PJ کردار۔ فزیول Rev. 2011, 91, 119-149. [کراس ریف]

46. ​​کیرول، کے ایس؛ حنا، جے؛ سائمن، آئی۔ کریس، جے؛ باربیرو، پی. Pfeffer، TIP47 کے ذریعے ریسیپٹر بھرتی کی سہولت فراہم کرنے میں Rab9 GTPase کا SR کردار۔ سائنس 2001، 292، 1373–1376۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

47. لیو، ٹی ٹی؛ گومز، ٹی ایس؛ ساکی، بی کے؛ Billadeau, DD; برڈ، اینڈوسوم میچوریشن کے دوران ریٹرومر ثالثی کارگو ایکسپورٹ کا CG Rab GTPase ریگولیشن۔ مول بائول سیل 2012، 23، 2505–2515۔ [کراس ریف]

48. ہارگن، سی پی؛ میکفری، MW Rab GTPases، اور مائکروٹوبول موٹرز۔ بائیو کیم۔ Soc ٹرانس 2011، 39، 1202–1206۔ [کراس ریف]

49. لنڈسے، اے جے؛ جولیویٹ، ایف۔ ہارگن، سی پی؛ خان، اے آر؛ راپوسو، جی؛ McCaffrey, MW; Goud, B. متعدد ناول Rab-myosin Va تعاملات کی شناخت اور خصوصیت۔ مول بائول سیل 2013، 24، 3420–3434۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

50. ناگاشیما، K.؛ توری، ایس. یی، زیڈ۔ ایگاراشی، ایم. Okamoto, K.; ٹیکوچی، ٹی. Izumi, T. Melanophilin Rab27a اور myosin Va کو اپنے الگ الگ کوائلڈ کوائل والے علاقوں سے براہ راست جوڑتا ہے۔ FEBS Lett. 2002، 517، 233–238۔ [کراس ریف]

51. Guo, Y.; Linstedt، AD vesicle ڈاکنگ پروٹین p115 کا GTPase Rab1b سے بائنڈنگ COPI ویسیکل کوٹ کی جھلی کی بھرتی کو منظم کرتا ہے۔ سیل لاجسٹ 2013، 3، e27687۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

52. ناکامورا، N. GM130 کے ابھرتے ہوئے نئے کردار، ایک cis-Golgi میٹرکس پروٹین، اعلی ترتیب والے سیل کے افعال میں۔ جے فارماکول۔ سائنس 2010، 112، 255–264۔ [کراس ریف]

53. نیلسن، ای. Christoforidis, S.; Uttenweiler-Joseph, S.; Miaczynska, M.; Dewitte, F.; ولیم، ایم؛ ہوفلاک، بی۔ Zerial, M. Rabenosyn-5، ایک ناول Rab5 اثر کرنے والا، hVPS45 کے ساتھ پیچیدہ ہے اور FYVE فنگر ڈومین کے ذریعے اینڈوسومز میں بھرتی کیا گیا ہے۔ جے سیل بائیول۔ 2000، 151، 601–612۔ [کراس ریف]

54. راہجینگ، جے۔ Caplan, S.; نسلاوسکی، این۔ ممالیہ کے خلیوں میں اینڈوسیٹک اسمگلنگ کے ضابطے میں پابند شراکت دار Rabenosyn-5 اور Vps45 کے لیے مشترکہ اور الگ کردار۔ ختم سیل ریس 2010، 316، 859–874۔ [کراس ریف]

55. ژانگ، ایکس۔ ہوانگ، TY؛ یانسی، جے؛ لوو، ایچ. ژانگ، Y.W. الزائمر کی بیماری میں Rab GTPases کا کردار۔ اے سی ایس کیم۔ نیوروسکی 2019، 10، 828–838۔ [کراس ریف]

56. ش، م. ش، ج۔ Xu, Y. Rab GTPases: پارکنسنز کی بیماری کے مالیکیولر پاتھ وے میں کلیدی کھلاڑی۔ سامنے والا۔ سیل نیوروسکی 2017، 11، 81۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

57. جیونگ، جی آر؛ جنگ، E.-H. بی، جے آر؛ جون، ایس. کانگ، ہائی کورٹ؛ پارک، C.-H.؛ شن، J.-H.؛ یاماموتو، Y. تاناکا یاماموتو، K. ڈاسن، VL؛ ET رحمہ اللہ تعالی. LRRK2 کے ذریعہ Rab GTPases کا غیر منظم فاسفوریلیشن نیوروڈیجنریشن کو اکساتا ہے۔ مول نیوروڈیجنر۔ 2018، 13، 8۔ [کراس ریف]

58. سٹیگر، ایم. ڈیز، ایف. Dhekne, HS; Lis, P.; نیروجوگی، آر ایس؛ کرائیل، او۔ ٹونیلی، ایف. مارٹینز، TN؛ Lorentzen, E.; Pfeffer, SR; ET رحمہ اللہ تعالی. LRRK2-ثالثی rab GTPase فاسفوریلیشن کا منظم پروٹومک تجزیہ ciliogenesis سے تعلق قائم کرتا ہے۔ Elife 2017, 6, e31012. [CrossRef][PubMed]

59. لیو، ایس. سٹوری، B. کس طرح راب پروٹین گولگی کی ساخت کا تعین کرتے ہیں۔ انٹر Rev. Cell Mol. بائول 2015، 315، 1–22۔ [پب میڈ]

60. اشیدا، ایم. اوگوچی، ME؛ فوکوڈا، ایم. ریب سمال جی ٹی پیز کے لیے گوانائن نیوکلیوٹائڈ ایکسچینج فیکٹرز (جی ای ایف) کی متعدد اقسام۔ سیل کی ساخت. فنکشن 2016، 41، 61–79۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

61. فوکوڈا، ایم ٹی بی سی پروٹین: جی اے پیز برائے ممالیہ چھوٹے GTPase Rab؟ بائیوسی۔ Rep. 2011, 31, 159-168. [کراس ریف] [پب میڈ]

62. Sztul, E.; لوپاشین، V. خفیہ جھلیوں کی ٹریفک میں ٹیتھرنگ عوامل کا کردار۔ ایم۔ جے فزیول۔ سیل فزیول۔ 2006، 290، C11–C26۔ [کراس ریف]

63. Sztul, E.; لوپاشین، V. ER-Golgi جھلی ٹریفک میں vesicle tethering عوامل کا کردار۔ FEBS Lett. 2009، 583، 3770–3783۔ [کراس ریف]

64. گروشنز، بی ایل؛ اورٹیز، ڈی. نووِک، پی ریبز اور ان کے اثر کرنے والے: جھلیوں کی ٹریفک میں مخصوصیت حاصل کرنا۔ پروک ناٹل اکاد۔ سائنس USA 2006، 103، 11821–11827۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

65. گرابسکی، آر. Hay, J.; Sztul, E. ٹیتھرنگ فیکٹر P115: tether-SNARE تعاملات کے لیے ایک نیا ماڈل۔ بائیو آرکیٹیکچر 2012، 2، 175–180۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

66. Hu, F.; شی، ایکس۔ لی، بی؛ ہوانگ، ایکس؛ موریلی، ایکس۔ شی، این. گولگی دوبارہ جمع کرنے والے پروٹین GRASP65 اور گولگی میٹرکس پروٹین GM130 کے درمیان تعامل کی ساختی بنیاد۔ J. Biol کیم 2015، 290، 26373–26382۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

67. ژانگ، ایکس۔ Wang, Y. GRASPs Golgi کی ساخت اور فنکشن میں۔ سامنے والا۔ سیل دیو۔ بائول 2015، 3، 84۔ [کراس ریف] 68۔ الواریز، سی۔ گارسیا ماتا، آر. برینڈن، ای. Sztul, E. COPI بھرتی ایک Rab1b پر منحصر میکانزم کے ذریعے وضع کی جاتی ہے۔ مول بائول سیل 2003، 14، 2116–2127۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

69. مونیٹا، پی. سلاوین، آئی.؛ رومیرو، این. Alvarez, C. Rab1b GBF1 کے ساتھ تعامل کرتا ہے اور ARF1 ڈائنامکس اور COPI ایسوسی ایشن دونوں کو ماڈیول کرتا ہے۔ مول بائول سیل 2007، 18، 2400–2410۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

70. Martínez-Menárguez, J.Á.; Tomás, M.; Martínez-Martínez، N.؛ مارٹنیز الونسو، ای گولگی فریگمنٹیشن ان نیوروڈیجینریٹیو ڈیزیز: کیا کوئی عام وجہ ہے؟ سیلز 2019، 8، 748۔ [کراس ریف]

جاری ہے

الازنے آرازولا ساسٹرے 1,2، مریم لوق مونٹورو 1، ہیڈریانو ایم لاسرڈا 3، فرانسسکو لیویرو 1,4،* اور جوزے ایل زوگازا 1,2,5،

1 اچوکاررو باسکی سینٹر فار نیورو سائنس، UPV/EHU کا سائنس پارک، 48940 Leioa، سپین؛ alazne.arrazola@ehu.eus (AAS); miriamluquem@gmail.com (MLM)

2 شعبہ جینیٹکس، فزیکل اینتھروپولوجی اور اینیمل فزیالوجی، یونیورسٹی آف باسک کنٹری UPV/EHU، 48940 Leioa، Spain

3 Three R Labs, Science Park of the UPV/EHU, 48940 Leioa, Spain; hadrilac@gmail.com 

4 ہسپتال 12 ڈی اکتوبر ریسرچ انسٹی ٹیوٹ (i پلس 12)، 28041 میڈرڈ، سپین 5 IKERBASQUE، Basque Foundation for Science, 48013 Bilbao, Spain * خط و کتابت: fcollavero.imas12@h12o.es (FL); joseluis.zugaza@ehu.es (JLZ)