پالک میتھانولک عرق ذیابیطس کے چوہوں میں ریٹینل انحطاط کو کم کرتا ہے حصہ 2

از راہ کرم رابطہ کریںoscar.xiao@wecistanche.comمزید معلومات کے لیے

3. نتائج

3.1. پالک کا میتھانولک ایکسٹریکٹ (SME) بوائین سیرم البمین (BSA) گلائکیشن ان وٹرو 3.1.1 کو روکتا ہے۔ ایڈوانسڈ گلائیکیشن اینڈ پروڈکٹس (AGEs) اور Fructosamine کی تشکیل پر SME کا اثر

BSA پر SME کے مختلف ارتکاز پر antiglycation اثر کا تعین کیا گیا تھا۔ اس اثر کا اندازہ مرکب میں AGEs اور fructosamine کی تشکیل کی روک تھام سے کیا گیا: BSA-کم کرنے والی شکر (گلوکوز یا fructose) اور BSA-methylglyoxal (BSA-MGO) انکیوبیشن کے چار ہفتوں کے بعد۔ جدول 1 فلوروسینس کے ذریعہ AGEs کی تشکیل کے نتائج کو ظاہر کرتا ہے۔cistanche عضو تناسل کی ترقیBSA-کم کرنے والی شکر اور BSA-MGO مرکب میں SME کے ساتھ 200 mg/mL (SME-200)، مثبت کنٹرول (BSA-گلوکوز، BSA-fructose، اور BSA-) کے مقابلے AGEs کی سطح کم ہو گئی۔ ایم جی او) (پی<0.05). concentrations="" below="" 20mg/ml="" did="" not="" show="" significant="" differences="" compared="" to="" positive="" controls.="" the="" inhibition="" of="" ages="" formation="" by="" aminoguanidine(ag)="" in="" bsa-reducing="" sugars="" and="" bsa-mgo="" was="" higher="" than="" sme-200=""><0.05) and,="" therefore,="" than="" the="" positive="" controls=""><0.01). both="" sme-200="" and="" ag="" decreased="" fructosamine="" concentrations="" compared="" with="" controls=""><0.05).sme-200 compared="" to="" agin="" incubation="" with="" bsa-mgo="" further="" reduced="" the="" level="" of="" fructosamine=""><0.05)(table>

3.1.2 کاربونیل اور کم تھیول گروپس کی سطحوں پر ایس ایم ای کا اثر

اس بات کا تعین کرنے کے لیے کہ آیا ایس ایم ای کاربونیل گروپس کی تشکیل سے متعلق بی ایس اے آکسیڈیشن کو روکتا ہے اور اس کے گلائیکیشن کے دوران تھیول گروپس کی کمی، ان وٹرو اسیسز کیے گئے۔ ٹیبل 1 بی ایس اے کو کم کرنے والی شکر اور بی ایس اے-ایم جی او کے مرکب کا استعمال کرتے ہوئے انکیوبیشن حالات میں کاربونیل گروپس کی سطح دکھاتا ہے۔ خاص طور پر، SME-200 نے مثبت کنٹرولز کے مقابلے میں نمایاں کمی کی حوصلہ افزائی کی (p<0.05). as="" expected,="" ag="" significantly="" inhibited="" the="" formation="" of="" carbonyl="" groups="" in="" the="" bsa-reducing="" sugars="" and="" bsa-mgo="" (p=""><0.01), demonstrating="" its="" inhibitory="" effect="" on="" protein="" carbonylation,="" as="" reported="" [39].="" between="" sme="" and="" ag,="" there="" was="" no="" difference="" in="" carbonylation="">

مزید جاننے کے لیے براہ کرم یہاں کلک کریں۔

بی ایس اے میں تھیول گروپ کی سطح کا تعین گلائیشن پرکھ کے دوران کیا گیا تھا۔ ایس ایم ای ارتکاز نے تمام مرکب میں تھیول گروپس کو محفوظ رکھنے کا رجحان ظاہر کیا۔ ایس ایم ای-200 میں، بی ایس اے کو کم کرنے والی شکر میں تھیول گروپس کی سطح میں نمایاں اضافہ پایا گیا (p<0.05) and="" the="" bsa-mgo=""><0.01) compared="" to="" positive="" controls.="" ag="" induced="" the="" highest="" conservation="" of="" thiol="" groups="" in="" bsa-reducing="" sugars="" and=""><0.05). however,="" in="" the="" incubation="" of="" sme-200="" with="" bsa-mgo,="" thiol="" group="" levels="" are="" higher="" compared="" to="" ag="" (p=""><0.05) (table="">

پچھلے پرکھ میں مطالعہ کیے گئے SME کے 5، 10، اور 25 mg/mL کے ارتکاز نے AGEs، fructosamine، carbonyl گروپ کی تشکیل، اور BSA کے thiol گروپوں کی کمی (ڈیٹا نہیں دکھایا گیا) کی روک تھام کے لیے اہم سطحیں نہیں دکھائیں۔

ضمیمہ 2 میں، شوگر کو کم کرنے کے ساتھ BSA کے انکیوبیشن کے دوران پیدا ہونے والے ممکنہ کاربونیل اور AGEs مرکبات دکھائے گئے ہیں۔ MGO یا glyoxal incubation کے ذریعے تیار کردہ BSA کے کم thiol گروپ (cys34) کی تبدیلی کے نتیجے میں آنے والے مالیکیولز کو بھی دکھایا گیا ہے [40-42]۔

3.2.STZ-حوصلہ افزائی ذیابیطس چوہوں (STZ) کے ریٹنا میں SME کا مطالعہ

3.2.1.کاربوکسی میتھائل-لائسین (سی ایم ایل) کی تشکیل پر ایس ایم ای کا اثر اور ایس ٹی زیڈ میں AGEs ریسیپٹر (RAGE) کے ساتھ اس کا تعامل

شکل 1 STZ کے ریٹنا پر CML کی تشکیل، RAGE اظہار، اور CML-RAGE تعامل (CML/RAGE) پر 400 mg/kg پر SME کے اثرات دکھاتا ہے۔ شکل 1A میں، یہ دیکھا گیا ہے کہ CML اور RAGE دونوں گینگلیئن سیل پرت (GCL)، اندرونی سیل پرت (INL)، اور بیرونی نیوکلیئر پرت (ONL) میں تقسیم کیے گئے ہیں، جبکہ CML/RAGE کو ملا ہوا بنیادی طور پر INL میں تقسیم کیا گیا تھا۔cistanche سالسا فوائدشکل 1B-D ریٹنا کی مختلف تہوں میں CML، RAGE، اور CML/RAGE کے لیے مربوط نظری کثافت (OD) دکھاتا ہے (کم سے کم سے زیادہ سے زیادہ باکس اور وِسکر پلاٹ کے طور پر پیش کیا گیا ہے)۔ ڈیٹا (مطلب ± SD) ضمیمہ A (ٹیبل A1) میں شامل ہیں۔

تصویر 1. کاربوکسی میتھائل-لائسین (CML) پر پالک میتھانولک ایکسٹریکٹ (SME) کا اثر، ایڈوانسڈ گلائیکیشن اینڈ پروڈکٹس (RAGE) کے لیے رسیپٹر، اور اسٹریپٹوزوٹوسن-حوصلہ افزائی ذیابیطس چوہوں کے ریٹنا میں CML-RAGE تعامل (CML/RAGE) ایس ٹی زیڈ)۔ (A) CML، RAGE اور CML/RAGE داغوں کی تقسیم نارموگلیسیمک چوہوں (NG)، STZ کے ریٹینا میں دکھائی گئی ہے، جس کا علاج امینوگوانائڈائن (STZ-AG) سے کیا جاتا ہے اور SME (STZ-SME) سے علاج کیا جاتا ہے۔ (BD) انٹیگریٹڈ آپٹیکل ڈینسٹی (IOD, lum/pixel²) دکھائیں گینگلیون سیل لیئر (GCL)، اندرونی نیوکلیئر لیئر (INL)، اور بیرونی نیوکلیئر لیئر (ONL) میں ہر ایک امیونوسٹیننگ کے لیے ایک باکس اور وِسکر پلاٹ میں۔ *p<0.01 compared="" to="" ng;=""><0.01 compared="" to="" stz;="" and=""><0.01 compared="" to="" stz-ag.magnification="" 200×.n1="PR" =="" photoreceptors.="">cistanche tubulosa dosage redditشکل 1B سے پتہ چلتا ہے کہ SME نے STZ (p<0.01). the="" treatment="" with="" ag(stz-ag)presented="" a="" more="" significant="" decrease="" than="" stz-sme="" in="" cml="" staining="" in="" both="" inl="" and=""><0.05). in="" gcl,="" there="" was="" no="" difference.="" in="" ng,="" cml="" staining="" was="" lower="" in="" the="" three="" retinal="" layers="" than="" in="" all="" those="" treated="" with="" stz(p≤0.05).="" figure="" 1c,="" and="" d="" show="" that="" stainings="" for="" rage="" and="" cml/rage="" were="" higher="" in="" stzthan="" stz-sme,="" stz-ag,="" and="" ng=""><>

Cistanche بڑھاپے کو روک سکتا ہے۔

STZ-SME اور STZ-AG کے درمیان RAGE داغ کے بارے میں، GCL اور INL کے درمیان کوئی فرق نہیں تھا، جبکہ ONL میں، STZ-SME میں اضافہ دیکھا گیا تھا (p<0.01).stz-sme decreased="" cml/rage="" in="" all="" three="" retinal="" layers="" compared="" to="" stz=""><0.01), whereas="" stz-agin="" gcl="" and="" onlinduced="" a="" more="" significant="" decrease="" than="" sme=""><0.01). in="" inl,="" between="" stz-ag="" and="" stz-sme,="" there="" was="" no="">

3.2.2 ایس ٹی زیڈ کے ریٹنا میں ایس ایم ای کا اینٹی آکسیڈینٹ اثر

SME کے اینٹی آکسیڈینٹ اثر کا اندازہ NADPH oxidase-4 (Nox-4)، inducible nitric oxide synthase (iNOS)، اور nitrotyrosine (NT) کے لیے امیونوسٹیننگ کے ذریعے کیا گیا۔ شکل 2A ریٹنا کی تین تہوں (GCL، INL، اور ONL) میں ہر ایک امیونوسٹیننگ کی تقسیم کو ظاہر کرتا ہے۔ شکل 2B-D ہر مارکر کے لیے مثبت خلیوں کا فیصد دکھاتا ہے جو کم از کم سے زیادہ سے زیادہ باکس اور سرگوشی کے پلاٹ کے طور پر پیش کیا جاتا ہے۔ ڈیٹا (مطلب ± SD) ضمیمہ A(ٹیبل A2) میں شامل ہیں۔ Nox4 سٹیننگ (شکل 2B) کے لیے، SME ٹریٹمنٹ (STZ-SME) نے STZ (p<0.05). comparing="" stz-sme="" with="" stz-ag,="" stz-sme="" showed="" a="" lower="" decrease="" for="" nox4="" in="" the="" three="" retinal="" layers="" (p=""><0.05).>iNOS امیونوسٹیننگ کو تین ریٹنا لیورز میں بھی تقسیم کیا گیا تھا (شکل 2A)۔ شکل 2C میں، STZ-SME نے STZ(p<0.01). comparing="" sme="" effect="" with="" ag="" in="" this="" immunostaining,="" stz-ag="" decreased="" significantly="" in="" the="" three="" retinal="" layers=""><0.01). figure="" 2dshows="" the="" percentage="" of="" the="" positive="" cells="" for="" nt="" in="" the="" different="" groups.="" sme="" decreased="" this="" value="" for="" all="" retinal="" layers="" compared="" to=""><0.01). when="" the="" percentage="" between="" sme="" and="" ag="" was="" compared,="" there="" was="" no="" difference="" in="" gcl,="" whereas,="" in="" inl="" and="" onl,="" stz-sme="" had="" a="" lower=""><0.01). the="" ng="" group="" showed="" the="" lowest="" oxidative="" markers="" than="" the="" stz="" group="" (p="" <="" 0.01).="">cistanche แอมเวย์ذیابیطس ریٹنا میں ایس ایم ای کا اینٹی آکسیڈینٹ اثر میلونڈیالڈہائڈ (ایم ڈی اے) کی تشکیل کی سطح کے ذریعہ بھی طے کیا گیا تھا۔ Figure3 مطالعہ کیے گئے گروپوں میں MDA کی تعداد کو ظاہر کرتا ہے۔ STZ-SME اور STZ-AG میں، MDA کی سطحیں (5.1±0.1 اور 4.34±1{{10}) STZ(6.3±0.8;p) کے مقابلے میں کم ہوئیں<0.01). comparing="" stz-sme="" with="" stz-ag,="" the="" levels="" are="" increased="" in=""><0.05).in ng(2.07±0.42),="" the="" levels="" were="" lowest="" compared="" to="" the="" stz="" groups=""><>

شکل 2. ایس ٹی زیڈ کے ریٹنا میں ایس ایم ای کا اینٹی آکسیڈینٹ اثر۔ (A) NADPH oxidase 4(Nox-4)(A)، inducible nitric oxide synthase (iNOS)، اور nitrotyrosine (NT) کے لیے امیونو فلوروسینس کے نمائندہ مائکرو گراف۔ (BD) NG، STZ، STZ-AG، اور STZ-SME گروپوں میں ہر ایک امیونوسٹیننگ کے لیے GCL، INL، اور ONL میں مثبت خلیات کے فیصد کے باکس اور وِسکر پلاٹ دکھائیں۔ نیوکلی DAPI (نیلے) سے داغے ہوئے تھے۔*p<0.01 compared="" to="" ng;="" α=""><0.05 compared="" to="" stz,="" and="" β=""><0.01 compared="" to="" stz-ag.magnification="" 200×.="" in="" supplement="" 3,="" dapi="" and="" each="" specific="" antibody="" stain="" are="" shown="" in="" a="" single="" channel="" and="" the="" fused="">

شکل 3. ذیابیطس کے ریٹنا میں ایس ایم ای کا اینٹی آکسیڈنٹ اثر لپڈ پیرو آکسیڈیشن کے ذریعے طے ہوتا ہے۔ NG، STZ، STZ-AG اور STZ-SME گروپس میں Malondialdehyde (MDA) کی سطحوں کا تجزیہ کیا گیا۔ ارتکاز باکس اور سرگوشی کے پلاٹ میں دکھایا گیا ہے۔*p< 0.01="" compared="" to="" ng;=""><0.01 compared="" to=""><0.05compared to="">

3.2.3. ایس ٹی زیڈ کی ریٹینل سوزش پر ایس ایم ای کا اثر

نیوکلیئر NF-kB p65، ویسکولر اینڈوتھیلیل گروتھ فیکٹر (VEGF)، اور glial fibrillary acidic protein (GFAP) کی داغدار فیصد کا اندازہ اس بات کا تعین کرنے کے لیے کیا گیا کہ آیا STZ میں SME کا علاج ریٹنا کی سوزش کو کم کرتا ہے۔

NF-kB کا جوہری داغ تمام گروپوں میں تین ریٹنا تہوں (GCL، INL، اور ONL) میں واقع تھا (شکل 4A)۔ STZ-SME نے STZ اور STZ-AG کے مقابلے میں NF-kB داغ کا کم فیصد پیش کیا۔ تین ریٹنا لیورز (پی<0.01)(figure 4b).="" similarly,="" diabetic="" rats="" treated="" with="" ag(stz-ag)showed="" that="" nf-staining="" is="" decreased="" in="" all="" three="" lavers="" of="" the="" retina="" compared="" to="" stz="" (p=""><0.05). the="" ng="" group="" showed="" the="" lowest="" values="" of="" the="" percentage="" of="" nf-kb="" staining="" in="" the="" three="" layers="" of="" the="" retina=""><0.01). the="" data="" (mean±="" sd)="" are="" included="" in="" appendix="" a(table="" a3).="" retinal="" vegf="" staining="" (figure="" 4a)="" and="" the="" percentage="" of="" positive="" cells="" were="" evaluated="" in="" the="" experimental="" groups="" (figure="" 4c).vegf="" staining="" was="" mainly="" localized="" to="" gcl="" (figure="" 4a).in="" stz,="" the="" percentage="" of="" vegf="" positive="" cells="" is="" increased(42.1="" ±="" 4.42)="" compared="" to=""><><0.01),and><0.01).however, there="" was="" no="" significant="" difference="" between="" smes="" and="" ag.="" the="" percentage="" of="" vegf="" staining="" in="" the="" ng="" group="" was="" the="" lowest="" of="" all=""><>

شکل 4. STZ کی ریٹنا کی سوزش میں SME کا اثر۔ (A) نیوکلیئر NF-kB کے لیے امیونوسٹیننگ کی نمائندہ تصاویر (سرخ تیروں سے ظاہر ہوتا ہے)، ویسکولر اینڈوتھیلیل گروتھ فیکٹر (VEGF؛ پیلے رنگ کے تیروں سے ظاہر ہوتا ہے)، اور glial fibrillary NG، STZ، STZ-AG، اور STZ-SME گروپس میں تیزابی پروٹین (GFAP؛ سرخ اور سفید تیر بالترتیب زیادہ سے زیادہ اور کم از کم داغ کی شدت کی نشاندہی کرتے ہیں۔ (B، C) باکس اور وِسکر پلاٹ بالترتیب جوہری NF-kB (GCL، INL، اور ONL) اور VEGF (GCL میں) کے لیے مثبت داغ کا فیصد دکھاتے ہیں۔ (D) میں، ریٹنا کے ساتھ GFAP کے داغ کے لیے IOD دکھایا گیا ہے۔*p<0.01 compared="" to=""><0.01 compared="" to="" stz;="" andβ=""><0.01 compared="" to="" stz-ag.magnification="" 200×.="">ریٹنا کی سوزش کا تعین بھی جی ایف اے پی داغ کے ذریعہ ایسٹروگلیوسس (شکل 4A) کے مارکر کے طور پر کیا گیا تھا ، اور ریٹنا کی تہوں کے ساتھ اس کی تقسیم کو IOD (شکل 4D) کے ذریعہ مقدار میں طے کیا گیا تھا۔ STZ کے ریٹنا میں، GFAP کی موجودگی GCL سے INL (IOD=3126± 1018) تک دیکھی گئی، جبکہ NG گروپ میں، GFAP بنیادی طور پر عصبی فائبر کی تہہ (IOD=1160 ±) میں دیکھی گئی۔ 561؛ ص<0.01). in="" stz-sme,="" gfap="" staining="" was="" decreased="" (iod="2192±752)" compared="" to=""><0.01)and compared="" to="" stz-ag(iod=""><0.0018). however,="" there="" were="" no="" significant="" differences="" between="" stz="" and="">

STZ کے ریٹنا میں S100 کیلشیم بائنڈنگ پروٹین B (S100B) کی سطح پر 3.2.4.SME کا اثر

S100B پروٹین کا تعلق ریٹنا کی سوزش سے ہے جو NF-kB کے نیوکلیئر انٹرنلائزیشن کے ذریعے ریگولیٹ ہوتا ہے۔ لہذا، اس بات کی جانچ کرنے کے لیے کہ آیا SME STZ کے ریٹنا میں S100Bexpression کو متاثر کرتا ہے، اس پروٹین کے لیے امیونوسٹیننگ (IOD) کی گئی۔ تمام گروپوں میں ، S100B داغ کو GCL سے ONL (شکل 5A) میں تقسیم کیا گیا تھا۔ شکل 5B سے پتہ چلتا ہے کہ NG میں S100B سٹیننگ کا IOD علاج شدہ گروپوں کے مقابلے ONL میں سب سے زیادہ تھا (p<0.01), but="" was="" lower="" in="" gcl="" and=""><0.01).in sme,="" the="" iod="" of="" s100b="" staining="" was="" decreased="" in="" the="" three="" layers="" compared="" to=""><0.01 for="" all="" layers).="">کتنا cistanche لینا ہے؟SME میں، GCL اور INL میں S100B کا داغ AG (دونوں، پی) سے کم تھا۔<0.01); however,="" in="" onl,="" there="" was="" no="" difference.="" the="" data="" (mean="" ±="" sd)="" are="" included="" in="" appendix="" a="" (table="">

3.2.5 ایس ٹی زیڈ میں ریٹینل انحطاط پر ایس ایم ای کا اثر

STZ کے GCL، INL، اور ONL کے ریٹنا انحطاط میں SME کے حفاظتی اثر کا اندازہ ٹرمینل deoxynucleotidyl transferase (TdT) - ثالثی deoxyuridine triphosphate (dUTP) نک اینڈ لیبلنگ (TUNEL) پرکھ سے کیا گیا۔

چترا 6A مطالعہ کیے گئے گروپس (NG، STZ، STZ-AG، اور STZ-SME) کے ریٹنا میں اپوپٹوس کی تقسیم کی نمائندہ تصاویر دکھاتا ہے۔ شکل 6B GCL، INL، اور ONL میں TUNEL کے داغ کے لیے IOD کا ایک باکس اور وسوسے والا پلاٹ دکھاتا ہے۔ STZ-SME اور STZ-AG میں، STZ(p) کے مقابلے تمام تہوں میں اپوپٹوس نمایاں طور پر کم ہو گیا<0.01). stz-ag="" had="" a="" more="" significant="" decrease="" in="" apoptosis="" compared="" to=""><0.01).in the="" three="" retinal="" layers="" of="" ng,="" the="" tunel="" staining="" is="" lower="" than="" those="" treated="" with="" stz=""><0.01). in="" onl,="" stz-ag="" and="" ng="" did="" not="" show="" significant="" differences.="" the="" data="" (mean="" ±="" sd)="" are="" included="" in="" figure="">

4. بحث

یہ مطالعہ ذیابیطس کے چوہوں کی ریٹنا تہوں میں پالک میتھانولک ایکسٹریکٹ (SME) کے فائدہ مند اثرات کی اطلاع دیتا ہے جو اس کے اینٹی ایڈوانسڈ گلائیکیشن اینڈ پروڈکٹس (AGEs)، اینٹی آکسیڈینٹ، اور اینٹی سوزش خصوصیات سے متعلق ہے۔ ایس ایم ای کو پروٹین گلائی کیشن کو کم کرنے، گلائکوسلیٹڈ ہیموگلوبن، فروکٹوسامین، اور زیبرا فش میں الڈوز ریڈکٹیس کو حوصلہ افزائی شدہ ذیابیطس کے ساتھ کم کرنے کے لیے دکھایا گیا ہے، جو کہ ایک اینٹی گلائی کیشن سرگرمی تجویز کرتا ہے [11]۔ بوائین سیرم البومین (BSA) کا استعمال کرتے ہوئے ہمارے ان وٹرو تجربات نے یہ ظاہر کیا کہ SME نے AGEs، fructosamine، اور carbonyl گروپوں کی تشکیل کو کم کیا، اور BSA میں کم تھیول گروپس کی کمی کو کم کیا، یا تو شکر یا میتھائلگلائکسل (MGO) کو کم کرنے کے ساتھ تیار کیا گیا۔ یہ نتائج بتاتے ہیں کہ ایس ایم ای ایک میکانزم اینٹی آکسیڈینٹ کے ذریعہ پروٹین گلائیشن کو روک سکتا ہے، جو ایم جی او کی تشکیل میں بھی مداخلت کر سکتا ہے۔ ایم جی او کو دکھایا گیا ہے جو وٹرو [43] میں پروٹین پر کاربوکسی میتھیل لائسین (سی ایم ایل) کی پیداوار کا سبب بنتا ہے۔ CML کی بڑھتی ہوئی سطح کو دکھایا گیا ہے، جو ذیابیطس کی پیچیدگیوں میں ثالث ہے [44,45].

لہذا، موجودہ کام کا جائزہ لیا گیا ہے کہ کیا SME علاج streptozotocin-induced diabetic rats (STZ) کے ریٹنا میں CML جمع ہونے سے روکتا ہے، جو کہ ممکنہ AGEs ریسیپٹر (RAGE) ایکٹیویشن سے شروع ہونے والے آکسیڈیٹیو اور پرو اشتعال انگیز ردعمل سے وابستہ ہے۔ نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ ایس ایم ای کے ساتھ علاج سے گینگلیئن سیل پرت (GCL)، اندرونی جوہری تہہ (INL)، اور بیرونی ایٹمی تہہ (ONL) میں CML داغدار ہونے میں کمی آئی ہے۔ اگرچہ SMEs نے aminoguanidine (AG) کے مقابلے INL اور ONL میں CML کی اعلی سطح پیش کی اور GCL میں فرق کے بغیر، نتائج بتاتے ہیں کہ SME علاج ذیابیطس کے ریٹنا میں اس AGE کی پیداوار کو روک سکتا ہے۔ مزید برآں، یہ دیکھا گیا کہ ذیابیطس کے ریٹنا کی تہوں میں CML میں اضافہ RAGE داغدار ہونے کی سطح میں اضافے کے متوازی تھا۔

RAGE اپ ریگولیشن اور AGE جمع ریٹینل نقصان سے وابستہ ہیں۔ CML-RAGE تعامل کے نتائج میں سے ایک رد عمل آکسیجن پرجاتیوں (ROS) کی نسل ہے، جو بدلے میں، سوزش کے حامی جینوں کی حد سے زیادہ اظہار کو اکساتا ہے [46]۔ ہمارے نتائج میں، ایس ایم ای کے ساتھ علاج کیے جانے والے ذیابیطس ریٹیناس نے CML اور RAGE کے ضم ہونے (CML/RAGE) میں کمی ظاہر کی، بنیادی طور پر GCL اور INL تہوں میں، یہ تجویز کرتا ہے کہ CML/RAGE میں کمی آکسیڈیٹیو تناؤ کے راستوں کے بہاو کو ایکٹیویشن کو کم کر سکتی ہے۔ اور اشتعال انگیز ردعمل جو RAGE ایکٹیویشن [46] کے لیے بیان کیے گئے ہیں۔

AGEs-RAGE کے ذریعہ پیدا ہونے والے آکسیڈیٹیو تناؤ کو NADPH آکسیڈیز انزائمز کو چالو کرکے ثالثی کیا جاتا ہے، جو سپر آکسائیڈ ایون کے پروڈیوسر ہیں اور ذیابیطس کے ریٹنا خلیوں میں بڑھتے ہیں [46,47]۔ NADPH آکسیڈیسس، Nox1/Nox4، ROS، سوزش، اور ریٹنا نیووسکولرائزیشن [48] میں اضافہ کرتے ہیں۔ مزید برآں، پیدا ہونے والا سپر آکسائیڈ نائٹرک آکسائیڈ (NO) کے ساتھ رد عمل ظاہر کرتا ہے، پیروکسی نائٹریٹ پیدا کرتا ہے، جو ایک اور آزاد ریڈیکل ہے جو ذیابیطس کے ریٹنا کو نقصان پہنچاتا ہے [49,50]۔ ذیابیطس ریٹینا میں بلند NO کی سطح inducible nitric oxide synthase (iNOS) کی بڑھتی ہوئی سرگرمی سے ثالثی کی جاتی ہے، جس کی وجہ سے سیلولر کیپلیریوں کی کثافت میں اضافہ ہوتا ہے، اور ریٹنا گاڑھا ہونا، گلیوسس، اور بلند نائٹریٹ/نائٹریٹ لیولز [51]۔ یہاں، نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ ایس ایم ای کے علاج نے STZ کے مقابلے GCL، INL، اور ONL میں Nox4 امیونوسٹیننگ کو کم کیا۔ مزید برآں، AG کے مقابلے میں، SME نے تین ریٹنا تہوں میں Nox4 داغدار ہونے میں زیادہ نمایاں کمی پیش کی۔

آئی این او ایس سٹیننگ لیول کے بارے میں، ایس ایم ای گروپ میں ایس ٹی زیڈ کے مقابلے تین ریٹنا لیورز میں کمی واقع ہوئی۔ جب AG میں iNOS کے داغ کا STZ کے ساتھ موازنہ کیا گیا تو نتائج نے GCL، INL اور ONL تہوں میں SME کے مقابلے میں زیادہ نمایاں کمی ظاہر کی، جس سے یہ ظاہر ہوتا ہے کہ AG iNOS کا ایک قوی روک تھام کرنے والا ہے جیسا کہ ذیابیطس ریٹینوپیتھی (DR) میں بتایا گیا ہے۔ 29]۔

3-نائٹروٹیروسین کے لیے امیونوسٹیننگ سے متعلق، SME نے STZ کے مقابلے تینوں تہوں میں اس مارکر کو کم کیا۔ دوسری طرف، لپڈ پیرو آکسائڈریشن اور AGEs کی تشکیل DR [13] میں قریب سے جڑی ہوئی ہے۔ CML بھی ریٹنا میں وافر مقدار میں پائے جانے والے polyunsaturated fatty acids (PUFAs)[52] کے آکسیکرن سے تیار ہوتا ہے۔ PUFAs کے آکسیکرن رد عمل رد عمل کاربونیئل پرجاتیوں کی تشکیل کا باعث بنتے ہیں جیسے malondialdehyde (MDA) جو بعد میں cysteine، histidine اور lysine کی باقیات کے ساتھ رد عمل ظاہر کرتے ہیں، نسبتاً مستحکم نشہ پیدا کرتے ہیں [53]۔ ہمارے نتائج یہ ظاہر کرتے ہیں کہ پلس کی تہوں میں سی ایم ایل داغدار ہوتا ہے۔ایس ایم ای کے علاج سے ذیابیطس کے ریٹنا میں کمی واقع ہوئی، جو لپڈ پیرو آکسیڈیشن میں کمی کے مطابق ہے۔

ذیابیطس ریٹینا میں AGE-RAGE تعامل ایک ایسی حالت ہے جو سوزش کے عوامل کی پیداوار کو بڑھاتی ہے جو بدلے میں، ریٹنا کے انحطاط میں حصہ لیتی ہے۔ یہ تعامل جوہری NF-kB کو چالو کرنے کا باعث بنتا ہے، جو سوزش کے حامی عوامل، جیسے iNOS اور ویسکولر اینڈوتھیلیل گروتھ فیکٹر (VEGF) 54] کی حد سے زیادہ اظہار کو اکساتا ہے۔ VEGF ایک طاقتور mitogenic ایکٹیویٹر ہے اور DR میں انجیوجینیسیس کا مرکزی آرکیسٹریٹر ہے۔ Nox4 آکسیڈیٹیو تناؤ اور ہائپرگلیسیمیا [55] کے حالات میں VEGF اظہار کو بھی منظم کرتا ہے۔ اس طرح، AGE-RAGE تعامل کو مسدود کرنا DR کے روگجنن میں VEGF اظہار کو کم کرنے میں اہم ہوسکتا ہے۔

دوسری طرف، glial fibrillary acidic protein (GFAP) ایک پروٹین ہے جو ریٹنا کے گلیل سیلز (گینگلیئن سیلز)، ایسٹروسائٹس، مولر سیلز اور مائیکروگلیہ میں موجود ہے اور اس کا اضافہ ریٹینا میں نیورل گلیوسس کی تشکیل کی طرف اشارہ کرتا ہے [56]۔ لہذا، NF-kB کا جوہری نقل مکانی اور VEGF اور GFAP کا زیادہ اظہار DR [13] کے روگجنن سے متعلق سوزش کے حامی عوامل ہیں۔ یہ عوامل AGEs اور AGEs-RAGE تعامل [4557,58] کی تشکیل کے نتیجے میں پیدا ہوتے ہیں۔ یہاں، یہ دکھایا گیا کہ ایس ایم ای کے علاج سے نیوکلیئر NF-kB، VEGF، اور gliosis میں کمی کے علاوہ ذیابیطس retinas کی تہوں میں ضم ہونے والے CML-RAGE میں کمی واقع ہوئی۔ یہ نتائج بتاتے ہیں کہ SMEs CML-RAGE تعامل کو روک کر اشتعال انگیز ردعمل کو کم کر سکتے ہیں۔

S100 کیلشیم بائنڈنگ پروٹین B(S100B) کے داغ لگا کر بھی اشتعال انگیز ردعمل کا اندازہ کیا گیا۔ S100B ایک پروٹین ہے جو آکسیڈیٹیو تناؤ کو بڑھاتا ہے اور DR [58,59] میں سوزش کے ردعمل اور نیوروڈیجنریشن کو متحرک کرتا ہے۔ نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ S100B داغ ایس ٹی زیڈ میں تین ریٹنا تہوں میں تقسیم کیا گیا تھا۔ یہ اطلاع دی گئی ہے کہ INL میں، Müller glial خلیات پائے جاتے ہیں [58]، جن کا تعلق gliosis حساسیت سے ہو سکتا ہے۔ STZ اور AG کے مقابلے SME علاج کے ساتھ INL میں S100B داغ کو کم کیا گیا تھا، یہ تجویز کرتا ہے کہ اس تہہ میں SME سوزش کے ردعمل کو روکتا ہے۔ .

نارموگلیسیمک چوہوں میں، ONL میں S100B کی سطح STZ گروپوں کی نسبت زیادہ تھی۔ ممکنہ طور پر، نارموگلیسیمک چوہوں میں، S100B لیولز فوٹو ریسیپٹرز میں جھلی سے منسلک گانیلیٹ سائکلیز پر مبنی سگنلنگ پاتھ وے کے ضابطے میں حصہ لے سکتے ہیں [60]۔ ذیابیطس والے گروپوں میں، S100B کی سطح میں کمی فوٹو ریسیپٹر سیل میں فوٹو ٹرانسڈکشن کا نقصان پیدا کر سکتی ہے، جو سی جی ایم پی کو دوسرے میسنجر کے طور پر استعمال کرتا ہے تاکہ پلازما جھلی میں کیشن چینلز کی چالکتا میں تبدیلیوں کے لیے روشنی کے جذب کو جوڑ سکے۔ اس طرح، SMEs اپنی اینٹی آکسیڈیٹیو خصوصیات [62] کے ذریعہ S100B پروٹین کی سطح کو کم کرسکتے ہیں۔ تاہم، مختلف ریٹنا تہوں میں S100B کے فنکشن اور تعامل کو نمایاں کرنے کے لیے مزید مطالعات کی ضرورت ہے۔ذیابیطس mellitus (DM) میں، کئی قسم کے ریٹنا خلیوں میں سیل کی موت دیکھی گئی ہے، جیسے گینگلیون سیل، گلیل سیل (Müller سیل اور astrocytes)، اور microglia [63]۔ AGEs/RAGE بڑھتے ہوئے آکسیڈیٹیو تناؤ یا سوزش کے حامی سائٹوکائنز کے ایکٹیویشن کے ذریعے ثالثی ریٹنا نیورونل خلیوں میں اپوپٹوس کو آمادہ کر سکتے ہیں|64]۔ اس مطالعہ میں، نتائج ثابت کرتے ہیں کہ GCL، INL، اور ONL میں، apoptosis کو SME کے ذریعے کم کیا گیا تھا۔

5. نتائج

اس مطالعے سے پتہ چلتا ہے کہ ایس ایم ای کے استعمال نے اسٹریپٹوزوٹوسن انڈسڈ ذیابیطس چوہوں (STZ) کی ریٹنا تہوں میں ذیابیطس کی وجہ سے پیتھولوجیکل پروفائل کو بہتر کیا ہے۔ مرکبات)، AGEs کی تشکیل اور BSA میں کم thiol گروپوں کی کمی کو روکتا ہے۔ ذیابیطس ریٹنا میں، SME علاج نے CML کی تشکیل، CML-RAGE تعامل، اور سوزش کے حامی ردعمل (VEGF، GFAP، S100B، اور RAGE) کو چالو کیا۔ مزید برآں، ایس ایم ای کی حوصلہ افزائی نے آکسیڈیٹیو اسٹریس مارکر (iNOS، Nox4، اور NT) اور اپوپٹوسس میں کمی کی۔ آخر میں، نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ ایس ایم ایز کا STZ کے ریٹنا انحطاط پر حفاظتی اثر پڑتا ہے۔

یہ مضمون Antioxidants 2021, 10, 717 سے لیا گیا ہے۔ https://doi.org/10.3390/antiox10050717 https://www.mdpi.com/journal/antioxidants