یونان کوفی عربیکا پھولوں سے نکالنے والی ٹیکنالوجی اور پولی سیکرائڈز کی اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی کے بارے میں مطالعہ

خلاصہ: نکالنے کی ٹیکنالوجی کو بہتر بنانے اور مطالعہ کرنے کے لیےاینٹی آکسیڈینٹکی سرگرمیپولی سیکرائڈزکافی کے پھول (ACP) سے، الٹراسونک درجہ حرارت، الٹراسونک وقت، سیال ٹھوس کا تناسب، الٹراسونک طاقت، نمونے کے ڈوبنے کا وقت اور ایتھنول کے حجم کے فیصد کو اشارے کے طور پر پولی سیکرائیڈ نکالنے کی پیداوار کا استعمال کرتے ہوئے چھان بین کی گئی۔ پھر الٹراسونک درجہ حرارت، الٹراسونک ٹائم اور الٹراسونک پاور بنیادی طور پر اثر انداز ہونے والے عوامل کے طور پر استعمال کیے گئے، نکالنے کی ٹیکنالوجی کو رسپانس سطح کے طریقہ کار کے ذریعے بہتر بنایا گیا تھا۔اینٹی آکسیڈینٹاے سی پی کی سرگرمی کی جانچ ڈی پی پی ایچ اور اے بی ٹی ایس پلس؛ اسکیوینجنگ اثرات، اور ایف آر اے پی اسسیس کے ذریعے کی گئی۔ نتائج نے ظاہر کیا کہ الٹراسونک نکالنے کے لیے بہترین تکنیکی حالات یہ تھے: الٹراسونک درجہ حرارت 69.5 ڈگری، الٹراسونک ٹائم 93 منٹ، الٹراسونک پاور 175 ڈبلیو، سیال ٹھوس کا تناسب 10:1 mL/g، نمونے کے وسرجن کا وقت 3{{ 17}} منٹ، اور ایتھنول کا حجم فیصد 80 فیصد۔ پولی سیکرائڈز کی پیداوار 2.292 فیصد تھی۔ نتائج نے اشارہ کیا کہ DPPH کی بنیاد پر IC50 کی قدر ACP کے سکیوینگنگ اثر 3.844 mg·mL−1 تھی، ABTS plus · scavenging activity 0.921 mmol Trolox/g ACP تھی۔ FRAP پرکھ کے ذریعہ ACP کی FRAP قدریں 0.0565 mmol Fe2 پلس /g ACP تھی، جس سے ظاہر ہوتا ہے کہ ACP کمزور تھا۔اینٹی آکسیڈینٹسرگرمی یہ مطالعہ کافی کی ضمنی مصنوعات کے جامع استعمال اور ترقی کے لیے ایک نظریاتی بنیاد فراہم کرے گا۔

مطلوبہ الفاظ:کافی کے پھولپولی سیکرائڈ؛ نکالنا؛اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی

کافیRubiaceae (Coffea) جینس کا ایک پودا ہے، جو بنیادی طور پر جنوبی امریکہ، وسطی امریکہ، افریقہ اور ایشیا جیسے ممالک میں تقسیم ہوتا ہے، اور دنیا کے 80 سے زائد ممالک میں اگایا جاتا ہے [1]۔ "چائنیز میٹیریا میڈیکا" کے مطابق کافی میں تروتازہ، ڈائیوریٹک اور معدہ کے اثرات ہوتے ہیں اور یہ بنیادی طور پر ذہنی تھکاوٹ اور بھوک کی کمی کے لیے استعمال ہوتی ہے۔ یہ اکثر تروتازہ، پیشاب آور اور معدے کی دوا کے طور پر استعمال ہوتا ہے۔ جدید تحقیق سے ثابت ہوا ہے کہ کافی میں مختلف قسم کے فعال اجزا ہوتے ہیں جیسے کہ الکلائیڈز، فینولک ایسڈز، فلیوونائڈز اور ٹیرپینز جو کہ مختلف فارماسولوجیکل سرگرمیاں جیسے جگر کی حفاظت، نیورو پروٹیکشن،اینٹی آکسیڈینٹ، اور اینٹی ذیابیطس [2-3]۔ میرے ملک کاکافیکاشت پر چھوٹے دانوں کی کافی کا غلبہ ہے، اور اس کا 99 فیصد سے زیادہ حصہ یونان میں تقسیم کیا جاتا ہے۔ یوننان چھوٹے اناج کی کافی میں کیفین، کلوروجینک ایسڈ، ٹریگونیلائن اور دیگر اجزاء کے علاوہ اس میں ایسکاروسائیڈز بھی ہوتے ہیں۔

I~II[4]، paniculoside VI[4]، cofaryloside I[4]، villanovane I[4]، caffarolides A~H[5]، caffruenol AB[6]، caffruones AD[6] اور caffruolide AB[7] اور کچھ نئے terpenoids. ان میں، caffarolides C, D اور F کی تصدیق کی گئی ہے کہ وٹرو میں پلیٹلیٹ جمع کرنے کی ایک خاص سرگرمی ہے [5]؛ caffruenol AB اور caffruolide AB میں 264.7 میکروفیجز میں lipopolysaccharide-induced NO کی پیداوار کو روکنے کا اثر ہوتا ہے [7]۔ کافی کے گہرائی سے مطالعہ کے ساتھ، کافی کی اضافی قیمت میں اضافہ جاری ہے. حالیہ برسوں میں، کافی کی ضمنی مصنوعات فینولک ایسڈز، فلیوونائڈز، ٹیرپینز، الکلائیڈز اور دیگر حیاتیاتی مادوں سے بھرپور ہیں۔

فعال اجزاء، جو فعال اجزاء جیسے قدرتی اور پائیدار ذرائع کے طور پر استعمال کیا جا سکتا ہےاینٹی آکسیڈینٹجگر کی حفاظت اور اعصابی تحفظ، نے کافی کی ضمنی مصنوعات کی تحقیق کو محققین [8−10] کی طرف سے زیادہ سے زیادہ فکر مند بنا دیا ہے۔ کیمپا وغیرہ۔ رپورٹ کیا کہ کافی کی پتیوں میں فینولک مرکبات ہوتے ہیں [11]؛ چن نے کافی کے پتوں میں موجود الکلائیڈز، فلیوونائڈز، فینولک ایسڈز، ٹیرپینز وغیرہ کے بھرپور کیمیائی اجزاء اور ان کی فارماسولوجیکل سرگرمیوں جیسے اینٹی آکسیڈینٹ، اینٹی سوزش اور اینٹی بیکٹیریل کا جائزہ لیا۔ [12]، اور کافی کی پتی کی پروسیسنگ کے طریقوں اور اس کی کیمیائی ساخت اور سرگرمی پر پتیوں کی عمر کے اثرات کا مطالعہ کیا [13]۔

اس کے علاوہ، Fu Xiaoping et al. [14−15] نے پایا کہ یونان کے چھوٹے کافی کے چھلکے کے خام عرق کا انسانی نال کی رگ کے انڈوتھیلیل خلیوں کو نقصان پہنچانے پر ایک خاص حفاظتی اور بحالی کا اثر ہوتا ہے، اور اس کی صلاحیت بھی ہوتی ہے۔اینٹی آکسیڈینٹاثرات، اور پتہ چلا کہ اہم پھول سائانیڈن سائینائیڈن-3-گلوکوسائیڈ اور سائانیڈن-3-رٹینوسائیڈ ہیں۔

کافی کے پھولوں کو اکثر کافی اگانے والی صنعت میں ایک اہم ضمنی مصنوعات کے طور پر ضائع کر دیا جاتا ہے۔ تاہم، موجودہ مطالعات سے پتہ چلا ہے کہ کافی کے پھول کیمیائی اجزاء سے بھرپور ہوتے ہیں۔ Stashenko et al. [16] نے کافی کے چھوٹے پھولوں میں غیر مستحکم اور نیم غیر مستحکم اجزاء کا تجزیہ کرنے کے لیے GC-MS کا استعمال کیا، اور نتائج نے n-pentadecane کے مواد کے ساتھ کل 150 مرکبات کا تعین کیا۔ سب سے زیادہ، geraniol کے بعد. اس کے علاوہ، Nguyen et al. [17] نے کافی کے پھولوں میں فعال اجزاء کا مطالعہ کیا اور پایا کہ کافی کے پھولوں میں فینولک مرکبات کی مقدار زیادہ ہوتی ہے، اس لیے کافی کے پھولوں کو قدرتی غذا حاصل کرنے کے لیے خام مال کے طور پر استعمال کیا جا سکتا ہے۔اینٹی آکسیڈینٹفعال اجزاء. اس کے علاوہ کافی کے پھولوں میں کیفین اور ٹریگونلین بھی ہوتے ہیں۔ کیفین نیوروڈیجینریٹیو بیماریوں کے کم خطرے سے وابستہ ہے [18-19]

Trigonelline ذیابیطس اور گردے کو پہنچنے والے نقصان کو روک سکتا ہے، اور نیوروڈیجنریٹیو بیماریوں کے علاج میں بھی اثر رکھتا ہے [20-21]۔ Pinheiro et al. [22] نے HPLC کے ذریعے خشک کرنے اور نکالنے کے مختلف طریقوں کے تحت کافی کے پھولوں میں چار فعال اجزاء trigonelline، chlorogenic acid، gallic acid اور caffeine کے مواد کا تجزیہ کیا، جن میں کیفین اور trigonelline کا مواد سب سے زیادہ تھا۔ اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی کا اندازہ ABTS اور DPPH تجربات سے کیا گیا، جس نے اس بات کی تصدیق کی کہ کافی کے پھول میں اینٹی آکسیڈنٹ سرگرمی ہوتی ہے اور اسے چائے کے مشروبات بنانے کے لیے ممکنہ خام مال کے طور پر استعمال کیا جا سکتا ہے۔ فی الحال، کافی کے پھولوں کے بارے میں کچھ تحقیقی رپورٹس موجود ہیں، لیکن موجودہ رپورٹس سے یہ دیکھا جا سکتا ہے کہ کافی کے پھولوں میں بائیو ایکٹیو مرکبات کے ممکنہ ذریعہ کے طور پر استعمال کے وسیع امکانات ہیں۔

پولی سیکرائیڈزمیکرومولیکولر مرکبات ہیں جو 10 سے زیادہ مونوساکرائڈز پر مشتمل ہیں جو گلائکوسیڈک بانڈز سے منسلک ہیں، اور یہ جانوروں، پودوں اور مائکروجنزموں میں بڑے پیمانے پر پائے جاتے ہیں۔ پولی سیکرائڈز ساختی طور پر پیچیدہ ہیں، مختلف شکلوں اور رشتہ دار مالیکیولر ماسز کے ساتھ ساتھ انٹراچین اور انٹرچین ہائیڈروجن بانڈز کے ثانوی ڈھانچے کے ساتھ۔ جدید مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ پولی سیکرائڈز میں فارماسولوجیکل سرگرمیاں ہوتی ہیں جیسے اینٹی آکسیڈینٹ [23-24]، اینٹی ایجنگ [25]، مدافعتی ضابطہ [26]، سوزش مخالف [27]، اور اینٹی ٹیومر [28]۔ پولی سیکرائڈز کی حیاتیاتی سرگرمی کا تعلق اس کی پاکیزگی، کیمیائی ساخت، حل پذیری وغیرہ سے ہے۔ حالیہ برسوں میں، پولی سیکرائڈز کی حیاتیاتی سرگرمی قدرتی ادویات کی تحقیق کا مرکز بن گئی ہے، اور یہ نئی دوائیں دریافت کرنے اور فعال کھانوں کو تیار کرنے کا ایک ذریعہ بھی ہے۔ . لہذا، پولی سیکرائڈز ادویات اور خوراک کے میدان میں ایک اہم کردار ادا کرتے ہیں. میرے ملک کا یونان کافی کے پودے لگانے کے لیے اہم پیداواری علاقہ ہے، اور کافی کے پھولوں کی ممکنہ نشوونما کی قدر ہے، لیکن یونان کافی کے پھولوں کی نشوونما پر بہت کم تحقیقیں ہوئی ہیں، اور کافی کے پھولوں کی ممکنہ قدر کو ٹیپ نہیں کیا گیا ہے۔ لہذا، یہ مقالہ یونان کے چھوٹے اناج والی کافی کے پھولوں کو اس کے فعال پولی سیکرائڈز پر تحقیق کرنے کے لیے تحقیقی مقصد کے طور پر لے جاتا ہے، جس کا مقصد یونان کی چھوٹی اناج والی کافی کی جامع استعمال کی قدر کو گہرائی سے دریافت کرنا ہے۔

اس مقالے میں،پولی سیکرائیڈپولی سیکرائیڈ نکالنے کے عمل کو بہتر بنانے اور باؤشن شہر، یونان صوبے سے جمع کیے گئے کافی کے پھولوں کی اینٹی آکسیڈینٹ صلاحیت کو جانچنے کے اشاریہ کے طور پر پیداوار کا استعمال کیا گیا تاکہ حیاتیاتی طور پر فعال پولی سیکرائڈز کی مزید ترقی کے لیے بنیادی ڈیٹا فراہم کیا جا سکے۔ اور یونان کی چھوٹی اناج کی کافی کا مطالعہ کرنے اور اس کی اضافی قدر کو بہتر بنانے کے لیے حوالہ فراہم کریں۔

1 مواد اور طریقے

1.1 مواد اور آلات

کافیپھول باؤشان شہر، صوبہ یونان؛ اینہائیڈروس الکحل تیانجن کیمیکل ریجنٹ کمپنی لمیٹڈ؛ اینتھرون پیوریٹی 98۔{1}} فیصد، سائنو فارم کیمیکل ریجنٹ کمپنی، لمیٹڈ؛ مرتکز سلفیورک ایسڈ، ہائیڈروکلورک ایسڈ چونگ کینگ چوانڈونگ کیمیکل کمپنی، لمیٹڈ؛ 1،1-ڈفینائل-2- Trinitrophenylhydrazine (DPPH)، 2,2'-Diaza-bis-3-ethylbenzothiazoline{{10}}sulfonic acid (ABTS), 2, 4،6-Tripyridyltriazine (TPTZ)، روٹین پیوریٹی 98۔{18}} فیصد، Shanghai Ruiyong Biotechnology Co., Ltd.; پانی میں گھلنشیل وٹامن ای طہارت 98.0 فیصد , Hefei Bomei بائیو ٹیکنالوجی کمپنی لمیٹڈ؛ فیرک کلورائڈ ہیکساہائیڈریٹ تجزیاتی طور پر خالص، مغربی

لانگ سائنس کمپنی، لمیٹڈ؛ پوٹاشیم پرسلفیٹ تجزیاتی گریڈ، تیانجن داماؤ کیمیکل ریجنٹ فیکٹری؛ PBS بفر، سوڈیم ایسیٹیٹ بفر Xiamen Haibiao Technology Co., Ltd.

Rich in کے بارے میں مزید معلومات جاننے کے لیے یہاں کلک کریں۔پولی سیکرائیڈ

Cistanche فوری کافی پروڈکٹ

FA2104N الیکٹرانک بیلنس، 722-سپیکٹرو فوٹومیٹر شنگھائی چنگھوا ٹیکنالوجی کمپنی، لمیٹڈ؛ KQ-250DB الٹراسونک آلہ، SHZ-D (Ⅲ) گردش کرنے والا واٹر ویکیوم پمپ گونگی یوہوا انسٹرومنٹ کمپنی، لمیٹڈ؛ Xuman 1000Y ملٹی فنکشنل گرائنڈر Yongkang City Boou Hardware Products Co., Ltd.; 800 الیکٹرک سینٹری فیوج جنتان فوہوا انسٹرومنٹ کمپنی لمیٹڈ؛ VFD-3000 ویکیوم فریز ڈرائر بیجنگ بو یکانگ تجرباتی آلات کمپنی، لمیٹڈ

1.2 تجرباتی طریقہ

1.2.1 کافی کے پھول کو نکالناپولی سیکرائڈزZheng Tingting et al کے طریقہ کار کو دیکھیں۔ [29] ترامیم کے ساتھ۔ صوبہ یونان کے باؤشان شہر سے اکٹھے کیے گئے کافی کے پھولوں کو کمرے کے درجہ حرارت پر سائے میں خشک کیا جاتا تھا، اسے پلورائزر کے ساتھ پلورائز کیا جاتا تھا اور استعمال کے لیے ایک 80-جالی کی چھلنی سے گزارا جاتا تھا۔ وزن 20 گرام کافی پھول پاؤڈر، 20.0 ملی لیٹر خالص پانی ڈالیں، 30 منٹ تک بھگو دیں،

الٹراسونک 100 ڈبلیو پر 30 منٹ کے لیے 40 ڈگری پر، کمرے کے درجہ حرارت پر ٹھنڈا ہوا، اور فلٹریٹ کو ویکیوم فلٹریشن کے بعد برقرار رکھا گیا۔ ایتھنول کو فلٹریٹ میں 80 فیصد کے ارتکاز میں بارش کے لیے شامل کیا گیا اور اسے 12 گھنٹے تک کھڑا رہنے دیا گیا۔ 10 منٹ کے لیے 4000 r/min پر سنٹرفیوگریشن کے بعد، سپرنیٹنٹ کو ضائع کر دیا گیا، اور precipitate کو پانی میں تحلیل کر دیا گیا اور خام پولی سیکرائیڈ حاصل کرنے کے لیے −80 ڈگری پر لائو فلائز کیا گیا۔

5 mg·mL−1 کافی فلاور پولی سیکرائیڈ محلول تیار کریں اور ایک طرف رکھ دیں۔

1.2.2 پولی سیکرائڈ معیاری وکر کی تیاری اور کافی کے پھولوں میں پولی سیکرائڈ مواد کا تعین گلوکوز کا معیاری وکر اینتھرون-سلفورک ایسڈ طریقہ [30] کے حوالے سے تیار کیا گیا تھا۔ تیار کریں 0۔{8}}, 25۔{10}, 50۔{16}}, 100۔{23} }، 150.0، اور 200.0 ug/mL گلوکوز معیاری حل، بالترتیب۔ مندرجہ بالا گلوکوز کے معیاری محلول میں سے 1.00 ملی لیٹر کو مختلف ارتکاز کے ساتھ درست طریقے سے پائپیٹ کریں، 1.00 ملی لیٹر خالص پانی ڈالیں، اور اسے 25 ملی لیٹر کی روکی ہوئی ٹیسٹ ٹیوب میں رکھیں۔ 2.1 mg·mL−1 anthrone-sulfuric acid محلول میں 5.0 mL شامل کریں، اچھی طرح ہلائیں، برف کے پانی کے غسل میں ٹھنڈا کریں، ابلتے ہوئے پانی کے غسل میں 7 منٹ تک گرم کریں، اور برف کے پانی کے غسل میں کمرے کے درجہ حرارت پر جلدی سے ٹھنڈا کریں۔ ڈیونائزڈ پانی کو خالی کنٹرول کے طور پر استعمال کرنا،

جاذبیت A کو رنگین طور پر 625 nm پر ماپا گیا۔ اینہائیڈروس گلوکوز کے مواد کو abscissa کے طور پر لینا (0۔ }}}0.0، 150.0، 200.0 ug)، اور جاذب کی قدر بطور آرڈینیٹ، ایک معیاری منحنی خطوط کھینچیں، اور معیاری وکر کی مساوات یہ ہے: Y=0.0051X−0.0092 ( R2=0.9970) (جہاں: Y جذب کی قدر ہے، X گلوکوز کی مقدار ہے، ug)۔

اوپر تیار کردہ 5 ملی گرام/ملی لیٹر کافی فلاور پولی سیکرائیڈ محلول کے ایک مخصوص حجم کو 25 ملی لیٹر ٹیسٹ ٹیوب میں ایک سٹاپر کے ساتھ ٹھیک سے پائپیٹ کریں، اور 200 ملی لیٹر تک بنانے کے لیے خالص پانی ڈالیں۔ 2.1 mg·mL−1 anthrone-sulfuric acid محلول کا 50 mL شامل کریں، اچھی طرح ہلائیں، برف کے پانی کے غسل میں ٹھنڈا کریں، ابلتے ہوئے پانی کے غسل میں 7 منٹ تک گرم کریں، اور کمرے کے درجہ حرارت پر جلدی سے ٹھنڈا کریں۔ برف کے پانی کا غسل۔ جاذبیت A کو رنگین طور پر 625 nm پر ڈیونائزڈ پانی کو خالی کنٹرول کے طور پر استعمال کرتے ہوئے ماپا گیا۔ کافی کے پھول پولی سیکرائڈ کی پیداوار کا حساب گلوکوز کے معیاری وکر مساوات کے مطابق کیا گیا تھا، اور ہر نمونے کو 3 بار دہرایا گیا تھا۔ نتائج کو اوسط قدر کے طور پر ظاہر کیا گیا تھا، اور حساب کتاب کا فارمولا اس طرح تھا:

کافی کے پھول پولی سیکرائیڈ کی پیداوار (فیصد) =X×m1×10−35×V×ms×100

فارمولے میں: X کافی فلاور پولی سیکرائڈ محلول کے V حجم میں پولی سیکرائیڈ مواد ہے، ug؛ V پولی سیکرائیڈ محلول کا ماپا ہوا حجم ہے، mL؛ 5 تیار شدہ کافی پھول پولی سیکرائیڈ محلول کا ارتکاز ہے، 5 mg·mL−1؛ m1 منجمد خشک کافی کا پھول ہے پولی سیکرائیڈ کا کل ماس، جی؛ ms کافی پھول کے نمونے کا ماس ہے، جی۔

1.2.3 ایک فیکٹر تجربہ

کافی پھول پولی سیکرائڈ کے الٹراسونک کی مدد سے نکالنے کے عمل میں، پولی سیکرائڈ کی پیداوار کو متاثر کرنے والے اہم عوامل میں بنیادی طور پر الٹراسونک درجہ حرارت، الٹراسونک وقت، مائع مواد کا تناسب، الٹراسونک طاقت، بھیگنے کا وقت اور الکحل کی بارش کا ارتکاز شامل ہیں۔ الٹراسونک درجہ حرارت کی پانچ سطحیں منتخب کی گئیں: 40، 50، 60، 70، اور 80 ڈگری؛ الٹراسونک وقت کی پانچ سطحیں منتخب کی گئیں: 30، 60، 90، 120، اور 150 منٹ؛ : 1, 30: 1 mL/g پانچ سطح؛ الٹراسونک پاور 100، 125، 150، 175، 200 ڈبلیو کے پانچ درجے منتخب کرتی ہے۔ وسرجن کا وقت 30، 60، 90، 120، 150 منٹ کے پانچ درجے منتخب کرتا ہے۔ ایتھنول کا ارتکاز بالترتیب پانچ سطحوں 75 فیصد، 80 فیصد، 85 فیصد، 90 فیصد، 95 فیصد پانچ سطحوں کا انتخاب کرتا ہے۔ پیرامیٹرز میں سے ایک کے لیے فلٹر کرتے وقت

، دوسرے عوامل ہیں: الٹراسونک درجہ حرارت 40 ڈگری، الٹراسونک وقت 30 منٹ،

مائع سے مادی تناسب 10:1 ایم ایل/ جی، الٹراسونک پاور 100 ڈبلیو، بھیگنے کا وقت 30 منٹ

اور 80 فیصد کی الکحل ترسیب حراستی.

1.2.4 رسپانس سطح کی اصلاح کا تجربہ Box-Benhnken تجرباتی ڈیزائن کے اصول کے مطابق، کافی کے پھول پولی سیکرائیڈ کی پیداوار کے ساتھ ردعمل متغیر کے طور پر، تین عوامل جو کافی کے پھول پولی سیکرائیڈ کی پیداوار پر سب سے زیادہ اثر ڈالتے ہیں، واحد عنصر سے منتخب کیے گئے تھے۔ ٹیسٹ کے نتائج، جیسا کہ جدول 1 میں دکھایا گیا ہے۔ الٹراسونک درجہ حرارت کی اصلاح کافی فلاور پولی سیکرائڈ کی پیداوار کے ساتھ انڈیکس ڈگری، الٹراسونک ٹائم اور الٹراسونک پاور کے طور پر۔

1.2.5 اینٹی آکسیڈینٹ صلاحیت کا ٹیسٹ

1.2.5.1 DPPH فری ریڈیکل سکیوینجنگ تجربات ڈی پی پی ایچ فری ریڈیکل سکیوینگنگ تجربات کئے گئے جیسا کہ ریف میں بیان کیا گیا ہے۔ [31]۔ 0 کا 3.9 ملی لیٹر لیں۔ رد عمل کمرے کے درجہ حرارت پر اندھیرے میں 30 منٹ کے لئے کیا گیا تھا، اور جاذب کی قدروں کو 515 nm پر ماپا گیا تھا۔ rutin کو مثبت کنٹرول کے طور پر استعمال کرتے ہوئے، DPPH فری ریڈیکل اسکیوینجنگ کی شرح کا حساب اس طرح کیا گیا: I فیصد =[(A0–As)/A0]×100 (جس میں: جیسا کہ نمونے کے حل کا جذب ہے؛ A0 ہے نمونے کے بغیر حل کی جذب)، اور اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی کو 50 فیصد روکنا شرح (IC50) کے طور پر ظاہر کیا جاتا ہے۔

1.2.5.2 ABTS پلس فری ریڈیکل سکیوینگنگ تجربہ

ریف میں بیان کردہ طریقہ کار کا استعمال کرتے ہوئے ABTS پلس ریڈیکل اسکیوینگنگ تجربات کیے گئے۔ [32]۔ 2 ملی لیٹر پولی سیکرائیڈ محلول لیں اور اسے بالترتیب 2 ملی لیٹر ABTS کے علاوہ فری ریڈیکل محلول میں شامل کریں، یکساں اختلاط کے بعد، کمرے کے درجہ حرارت پر 6 منٹ تک رد عمل کریں، اور UV جذب کو 734 nm پر پیمائش کریں، اور rutin مثبت کنٹرول ہے۔ اے بی ٹی ایس پلس فری ریڈیکل سکیوینگنگ کی صلاحیت کا حساب کا فارمولا درج ذیل ہے: I( فیصد)=[(A0–As)/A0]×10{ {12}} (جہاں نمونے کے محلول کی جاذبیت ہے؛ A0 نمونے کے بغیر محلول کی جاذبیت ہے) معیاری منحنی خطوط کا تعین مختلف ارتکاز (I فیصد =0.0247C −0.0046, R2=0.9937), ABTS مخالف

آکسیڈیٹیو سرگرمی کو mmol Trolox/g کے طور پر ظاہر کیا جاتا ہے۔

1.2.5.3 FRAP طریقہ

Ref میں بیان کردہ طریقہ۔ FRAP اینٹی آکسیڈینٹ صلاحیت کے تعین کے لیے استعمال کیا گیا تھا۔ 5۔{2}} ایم ایل ٹی پی ٹی زیڈ، 5۔

mmol/L, pH 3.6) FRAP ورکنگ سلوشن تیار کرنے کے لیے؛ 100 μL نمونہ 300 μL پانی اور 3.0 mL FRAP ورکنگ سلوشن کے ساتھ ملایا گیا، 30 منٹ کے لیے 37 ڈگری پر پانی کے غسل میں رکھا گیا؛ جذب 595 nm پر ماپا گیا۔ معیاری منحنی خطوط (A=0.572C0.008, R2=0.9974) کے طور پر FeSO4 کے ساتھ ایک معیاری وکر تیار کیا گیا تھا، اور معیاری وکر کے مطابق، rutin کو مثبت کنٹرول کے طور پر استعمال کیا گیا تھا۔

mmol FeSO4/g پولی سیکرائیڈ میں کم کرنے والی طاقت کا حساب لگائیں۔

1.3 ڈیٹا پروسیسنگ

تمام تجربات تین بار دہرائے گئے اور اوسط قدر لی گئی۔ ڈیزائن ایکسپرٹ 8۔{1}}.6 سافٹ ویئر جوابی سطح کے تجربات کے ڈیزائن اور تجزیہ کے لیے استعمال کیا گیا تھا۔

2 نتائج اور تجزیہ

2.1 سنگل فیکٹر تجرباتی نتائج

واحد عنصر کے تجربے کے نتائج تصویر میں دکھائے گئے ہیں۔ کافی فلاور پولی سیکرائیڈ کی پیداوار پر الٹراسونک درجہ حرارت کا اثر: الٹراسونک درجہ حرارت 40-80 ڈگری تھا، اور پولی سیکرائڈ کی پیداوار 1.0048 فیصد -1 تھی۔7982 فیصد . 40-70 ڈگری کی حد میں، کافی پھول پولی سیکرائیڈ کی پیداوار الٹراسونک درجہ حرارت کے بڑھنے کے ساتھ آہستہ آہستہ بڑھ گئی، زیادہ سے زیادہ 70 ڈگری تک پہنچ گئی، اور 70 ڈگری کے بعد کم ہونا شروع ہوئی۔ یہ اعلی درجہ حرارت کے حالات میں کافی پھول پولی سیکرائڈز کے ڈھانچے کی تباہی کی وجہ سے پولی سیکرائڈ کی پیداوار میں کمی کی وجہ سے ہو سکتا ہے، جو اسی طرح ادب میں رپورٹ کیا گیا ہے [29,34−35]۔ سونیکیشن کا درجہ حرارت 70 ڈگری منتخب کیا گیا تھا۔

کافی پھول پولی سیکرائڈ کی پیداوار پر الٹراسونک وقت کا اثر: الٹراسونک وقت 30-150 منٹ تھا، پولی سیکرائڈ کی پیداوار 1.0369 فیصد -1.5853 فیصد تھی، الٹراسونک وقت کے اضافے کے ساتھ پولی سیکرائڈ کی پیداوار میں اضافہ ہوا، اور 90 منٹ پر زیادہ سے زیادہ تک پہنچ گیا، سونیکیشن کے وقت میں اضافے کے ساتھ پیداوار کم ہونا شروع ہوئی۔ اس کی وجہ یہ ہے کہ قلیل مدتی الٹراسونک نکالنا پولی سیکرائڈز کی مکمل تحلیل کے لیے سازگار نہیں ہے، جب کہ طویل عرصے تک الٹراسونک نکالنے سے پولی سیکرائیڈز کو کم کر دے گا اور پیداوار میں کمی آئے گی، جس کی اطلاع ادب میں بھی دی گئی ہے [29,34−35]۔ لہذا، سونیکیشن کا وقت 90 منٹ کا انتخاب کیا گیا تھا۔

کافی پھول پولی سیکرائڈ کی پیداوار پر مائع-ٹھوس تناسب کا اثر: پولی سیکرائڈ کی پیداوار پر ٹھوس-مائع تناسب کا اثر چھوٹا ہے۔ پولی سیکرائیڈ کی پیداوار مائع سے ٹھوس تناسب میں اضافے کے ساتھ بڑھی، اور 25:1 ملی لیٹر/ جی پر زیادہ سے زیادہ تک پہنچ گئی۔ 25:1 mL/g کے بعد، مائع سے ٹھوس تناسب میں اضافے کے ساتھ پیداوار میں کمی واقع ہوئی۔ کم سالوینٹ پولی سیکرائڈ کی ناکافی تحلیل کا باعث بنے گا، جس کے نتیجے میں پولی سیکرائیڈ کی کم پیداوار ہوگی۔ زیادہ سالوینٹ پولی سیکرائڈ کو تحلیل کردے گا اور اسے باہر نکالنا مشکل ہو جائے گا، اور اسی وقت، سالوینٹ کے ذریعے الٹراسونک تابکاری کے جذب ہونے کی وجہ سے پیداوار کم ہو جائے گی۔ 29,34−35] میں بھی ایسی ہی رپورٹیں ہیں۔ اس بات کو مدنظر رکھتے ہوئے کہ مائع سے مادی تناسب کا پیداوار پر بہت کم اثر پڑتا ہے، ری ایجنٹس کی مقدار کو بچانے کے لیے، مائع سے مادی تناسب کو 10:1 mL/g کے طور پر منتخب کیا گیا تھا۔

کافی پھول پولی سیکرائڈ کی پیداوار پر الٹراسونک پاور کا اثر: الٹراسونک پاور کو 100-200 W کے طور پر منتخب کیا گیا تھا، اور پولی سیکرائڈ کی پیداوار 1.1185 فیصد -1.8583 فیصد تھی۔ W کے بعد، الٹراسونک طاقت کے اضافے کے ساتھ پیداوار میں کمی آئی۔ الٹراسونک طاقت میں اضافہ سیلوینٹ میں پولی سیکرائڈز کو تحلیل کرنے کے لیے سیلز اور ٹشوز کو مؤثر طریقے سے تباہ کر سکتا ہے، اس لیے الٹراسونک پاور میں اضافہ پولی سیکرائڈز کی بارش کے لیے فائدہ مند ہے۔ تاہم، بڑی الٹراسونک لہروں سے پیدا ہونے والا فریگمنٹیشن اثر اور تھرمل اثر بھی کافی کے پھولوں میں نجاست کی تحلیل میں اضافہ کرے گا۔ ، تھرمل اثر پولی سیکرائڈ کے اجزاء کو تباہ کردے گا اور پولی سیکرائڈ کی پیداوار کو کم کرنے کا سبب بنے گا، جس کی اطلاع ادب میں بھی ملتی ہے [36-37]۔ لہذا، الٹراسونک پاور کو 175 ڈبلیو منتخب کیا گیا تھا۔

کافی پھول پولی سیکرائڈ کی پیداوار پر بھیگنے کے وقت کا اثر: پولی سیکرائڈ کی پیداوار پر بھیگنے کے وقت کا اثر چھوٹا تھا، بھگونے کا وقت 30-150 منٹ تھا، اور پولی سیکرائڈ کی پیداوار 1.1827 فیصد -1 تھی۔ 4609 فیصد 30-90 منٹ کی حد میں، پولی سیکرائیڈ کی پیداوار میں بھیگنے کے وقت کے اضافے کے ساتھ اضافہ ہوا، اور 90 منٹ پر زیادہ سے زیادہ تک پہنچ گیا۔ 90 منٹ کے بعد، بھیگنے کے وقت میں اضافے کے ساتھ، پیداوار میں قدرے کمی واقع ہوئی اور ہموار ہونے کا رجحان رہا۔ بھیگنے کے وقت کو طول دینا الٹراسونیکیشن کے دوران پولی سیکرائڈز کی بارش کو آسان بنا سکتا ہے اور توانائی کی کھپت کو کم کر سکتا ہے۔ لیکن زیادہ دیر تک بھگونے سے زیادہ پیداوار حاصل نہیں ہو سکتی، اور زیادہ دیر تک بھگونے سے دیگر اجزا بھی خارج ہوتے ہیں اور پولی سیکرائیڈ کی پیداوار متاثر ہوتی ہے۔ یہ اسی طرح ہے جو [38] میں رپورٹ کیا گیا ہے۔ اس بات پر غور کرتے ہوئے کہ بھیگنے کے وقت کا اثر چھوٹا ہے، وقت بچانے کے لیے، بھیگنے کا وقت 30 منٹ کے طور پر منتخب کیا گیا تھا۔

کافی کے پھول پولی سیکرائڈ کی پیداوار پر الکحل کی بارش کے ارتکاز کا اثر: الکحل کی بارش کے ارتکاز کا پولی سیکرائڈ کی پیداوار پر بہت کم اثر پڑتا ہے، الکحل کی بارش کا ارتکاز 75 فیصد ~ 95 فیصد ہے، پولی سیکرائڈ کی پیداوار 0.9703 فیصد ~1.2806 فیصد ہے۔ پولی سیکرائڈ کی پیداوار ایتھنول کے ارتکاز میں اضافے کے ساتھ بڑھی، اور زیادہ سے زیادہ 85 فیصد تک پہنچ گئی۔ 85 فیصد کے بعد، ایتھنول کے ارتکاز میں اضافے کے ساتھ پیداوار میں کمی واقع ہوئی۔ پانی نکالنا اور الکحل کی ترسیب الکحل میں حل نہ ہونے والے پولی سیکرائیڈ کا استعمال ہے تاکہ اسے باہر نکالا جا سکے۔ جب ایتھنول کی مقدار میں اضافہ ہوتا ہے تو، پولی سیکرائیڈ ایتھنول میں ناقابل حل ہوتا ہے اور باہر نکل جاتا ہے، اور پیداوار بڑھ جاتی ہے۔ جب الکحل کی بارش کا ارتکاز 85 فیصد سے زیادہ ہو جائے تو پولی سیکرائیڈ کی پیداوار کو بہتر نہیں کیا جا سکتا، لیکن ریجنٹس ضائع ہو جاتے ہیں۔ یہ اسی طرح ہے جو [38] میں رپورٹ کیا گیا ہے۔ آپریشن کو آسان بنانے کے لیے، یہ کاغذ بارش کے لیے الکحل کے ارتکاز کو ایڈجسٹ کرنے کے لیے براہ راست ایتھنول شامل کرنے کا طریقہ اپناتا ہے۔ ایک ہی وقت میں، چونکہ 80 فیصد اور 85 فیصد پولی سیکرائیڈ کی پیداوار زیادہ مختلف نہیں ہے، اس لیے یہ ری ایجنٹس کو بچا سکتا ہے اور فضلہ کو کم کر سکتا ہے۔ لہذا، الکحل کی بارش کی حراستی کو 80 فیصد منتخب کیا گیا تھا۔

2.2 رسپانس سطح کے ٹیسٹ کے نتائج

2.2.1 رسپانس سطح کے ٹیسٹ کے نتائج الٹراسونک درجہ حرارت، الٹراسونک ٹائم اور الٹراسونک پاور کا بہت زیادہ اثر ہوتا ہے۔ لہذا، مندرجہ بالا واحد عنصر کے تجربات کی بنیاد پر، جوابی سطح کے طریقہ کار کو الٹراسونک درجہ حرارت، الٹراسونک ٹائم اور الٹراسونک پاور کی تین شرائط کے لیے بہتر بنایا گیا ہے۔ نتائج ٹیبل 2 میں دکھائے گئے ہیں۔

پولی سیکرائیڈ کی پیداوار (Y) کو رسپانس انڈیکس کے طور پر لے کر، الٹراسونک درجہ حرارت، الٹراسونک ٹائم اور الٹراسونک پاور کے تین عوامل کے ساتھ ایک ریگریشن ماڈل قائم کیا گیا تھا، اور چوکور ریگریشن مساوات حاصل کی گئی تھی:

Y{{0}.29−0۔{6}}67A جمع 0۔{10}54B−0۔ 019C جمع 0.34AB جمع 0.083AC جمع 0.011BC−0.40A2

−0.19B2−0.27C2

2.2.2 فرق کی اہمیت کا امتحان

ٹیسٹ کے نتائج ٹیبل 3 میں دکھائے گئے ہیں۔

جدول 3 میں تغیرات کے تجزیہ کے نتائج کے مطابق، کل ماڈل اہم تھا (P<0.0001), and the model reached a very significant level, indicating that the difference between different factors was significant; according to the absolute value of the linear coefficient of the regression equation, it can be seen that each factor has a significant effect on the total polysaccharide yield. The order of influence is: A>B>C, that is, ultrasonic temperature> ultrasonic time> ultrasonic power. Lack of fit item P=0.5764>0.05، فٹ آئٹم ٹیسٹ کی کمی اہم نہیں ہے، جس سے ظاہر ہوتا ہے کہ نامعلوم عوامل کا ٹیسٹ کے نتائج پر بہت کم اثر ہوتا ہے، اور بقایا آئٹم بنیادی طور پر بے ترتیب غلطیوں کی وجہ سے ہوتا ہے، جس سے یہ ظاہر ہوتا ہے کہ ماڈل کا انتخاب مناسب اور درست ہے۔ . اے بی کا اثر نمایاں تھا (پی<0.05), and the influence of A2, B2, and C2 was extremely significant (P<0.01). In the whole model, the adjustment coefficient R2Adj=0.9277 in the model, indicating that 92.77% of the response value changes can be carried out through the model. Explanation, the coefficient of determination R2 = 0.9684, indicating that the model is highly reliable, and the model fits well with the experiment, and this model can be used for analysis and prediction [39−42].

2.2.3 ردعمل کی سطحیں اور شکلیں

کافی کے پھول پولی سیکرائیڈ کی پیداوار پر مختلف عوامل کے تعامل کا ردعمل کی سطح کا خاکہ شکل 2 میں دکھایا گیا ہے۔ الٹراسونک درجہ حرارت اور الٹراسونک وقت کے درمیان تعامل نے ظاہر کیا کہ دونوں کے درمیان تعامل اہم تھا۔ جب الٹراسونک درجہ حرارت میں کوئی تبدیلی نہیں آئی، کافی کے پھول پولی سیکرائڈز کی پیداوار پہلے بڑھی اور پھر الٹراسونک وقت کے اضافے کے ساتھ کم ہو گئی۔ جب الٹراسونک وقت میں کوئی تبدیلی نہیں آئی، کافی پھول پولی سیکرائڈ کی پیداوار پہلے بڑھی اور پھر الٹراسونک درجہ حرارت میں اضافے کے ساتھ کم ہوئی۔ الٹراسونک درجہ حرارت اور الٹراسونک طاقت کے درمیان تعامل سے، یہ دیکھا جا سکتا ہے کہ جب الٹراسونک درجہ حرارت مستقل رہتا ہے، کافی پھول پولی سیکرائیڈ کی پیداوار پہلے بڑھ جاتی ہے اور پھر الٹراسونک طاقت کے بڑھنے سے کم ہوتی ہے۔ جب الٹراسونک پاور میں کوئی تبدیلی نہیں ہوتی ہے، کافی پھول پولی سیکرائیڈ کی پیداوار الٹراسونک لہر کے ساتھ بڑھ جاتی ہے۔ درجہ حرارت میں اضافہ پہلے بڑھتا ہے اور پھر کم ہوتا ہے۔ الٹراسونک ٹائم اور الٹراسونک پاور کے درمیان تعامل سے، یہ دیکھا جا سکتا ہے کہ جب الٹراسونک ٹائم مستقل ہوتا ہے، کافی فلاور پولی سیکرائیڈ کی پیداوار پہلے بڑھ جاتی ہے اور پھر الٹراسونک پاور کے بڑھنے سے کم ہوتی ہے۔ جب الٹراسونک طاقت مستقل ہوتی ہے، کافی پھول پولی سیکرائڈ کی پیداوار الٹراسونک طاقت کے اضافے کے ساتھ بڑھ جاتی ہے۔ وقت کا اضافہ پہلے بڑھتا ہے اور پھر گھٹتا ہے۔

لہذا، پولی سیکرائڈ کی پیداوار کو جانچ کے معیار کے طور پر استعمال کرتے ہوئے، الٹراسونک ٹائم، الٹراسونک درجہ حرارت اور الٹراسونک پاور کی تین شرائط کے لیے رسپانس سطح کے طریقہ کار کی اصلاح کے نتائج یہ ہیں: الٹراسونک درجہ حرارت 69.56 ڈگری، الٹراسونک ٹائم 92.99 منٹ اور الٹراسونک پاور، W.417 پیش گوئی کی گئی ہے کہ اس حالت میں 2.290 فیصد۔ اصل صورتحال کے مطابق، الٹراسونک درجہ حرارت 69.5 ڈگری، 93 کا الٹراسونک وقت۔ 4 متوازی ٹیسٹوں کے لیے 1 mL/g اور 80 فیصد ایتھنول کا ارتکاز منتخب کیا گیا۔

اوسط پیداوار 2.292 فیصد ±0.061 فیصد تھی۔ یہ بنیادی طور پر ٹیسٹ کے ذریعے حاصل کردہ نظریاتی قدر کے قریب ہے، جس سے یہ ظاہر ہوتا ہے کہ پیش گوئی کی گئی قدر اور حقیقی قدر کے درمیان ایک اچھا فٹ ہے، اس لیے اس مطالعے میں رسپانس کی سطح سے حاصل کردہ اصلاحی عمل کے پیرامیٹرز درست اور قابل اعتماد ہیں [43]۔

2.3 اینٹی آکسیڈینٹ صلاحیت کے تجرباتی نتائج

ڈی پی پی ایچ ٹیسٹ پودوں کی اینٹی آکسیڈینٹ صلاحیت کے لیے ایک موثر اور حساس تشخیصی ماڈل ہے۔ آزمائشی نمونے کی فری ریڈیکل اسکیوینگنگ صلاحیت اس کی ممکنہ پروٹون عطیہ کرنے کی صلاحیت سے متعلق ہے۔ ABTS ٹیسٹ بڑے پیمانے پر پودوں کے نمونوں کی اینٹی آکسیڈینٹ صلاحیت کا اندازہ لگانے کے لیے استعمال کیا جاتا ہے، جو FRAP طریقہ میں لیپوفیلک اور ہائیڈرو فیلک اجزاء کی اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی کو جانچ سکتا ہے۔ قدرتی مصنوعات کی کمی کی صلاحیت کا اندازہ Fe3 پلس -TPTZ کو Fe2 پلس -TPTZ [44−45] سے کم کرکے لگایا گیا۔ کافی فلاور پولی سیکرائڈز کے اینٹی آکسیڈیٹیو تجربات کے نتائج ٹیبل 4 میں دکھائے گئے ہیں۔ کافی فلاور پولی سیکرائڈز میں DPPH فری ریڈیکلز اور ABTS پلس فری ریڈیکلز کے خلاف کچھ اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمیاں ہوتی ہیں، لیکن ان کی اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی روٹین سے کم ہوتی ہے۔

3 نتیجہ

اس تجربے میں، یونان کے چھوٹے اناج کافی کے پھول کو خام مال کے طور پر استعمال کیا گیا تھا، اورپولی سیکرائیڈیونان چھوٹے اناج کےکافیالٹراساؤنڈ کے ذریعے پھول نکالا گیا۔ یہ پایا گیا کہ الٹراسونک وقت، الٹراسونک درجہ حرارت اور الٹراسونک طاقت کافی پھول پولی سیکرائڈز کے نکالنے پر اہم اثرات رکھتے ہیں۔ اس کے بعد، الٹراسونک ٹائم، الٹراسونک درجہ حرارت اور الٹراسونک پاور کو رسپانس کی سطح کے ذریعے بہتر بنایا گیا، اور کافی فلاور پولی سیکرائیڈ کے عمل کے بہترین حالات کا تعین اس طرح کیا گیا: الٹراسونک درجہ حرارت 69.5 ڈگری، الٹراسونک ٹائم 93 منٹ، الٹراسونک پاور 175 ڈبلیو، مائعات 10:1 mL/g، بھیگنے کا وقت 30 منٹ تھا، اور ایتھنول کا ارتکاز 80 فیصد تھا۔ اس حالت کے تحت، پولی سیکرائیڈ کی پیداوار 2.292 فیصد ±0.061 فیصد تھی۔ یہ طریقہ کافی کے پھول کی پیداوار کو مؤثر طریقے سے بہتر بنا سکتا ہے۔پولی سیکرائیڈ، نکالنے کے وقت کو کم کرتے ہوئے اور استعمال شدہ ایتھنول کی مقدار کو کم کرتے ہوئے۔ اینٹی آکسیڈینٹ تجربات کے نتائج سے معلوم ہوا کہ کافی کے پھول پولی سیکرائڈز میں اینٹی آکسیڈینٹ کی کمزوری کی صلاحیت دکھائی دیتی ہے۔ یہ مطالعہ کافی کے پھول کی مزید علیحدگی اور پاکیزگی کے لیے ایک حوالہ فراہم کرے گا۔پولی سیکرائیڈاور اس کی سرگرمی اور کام پر تحقیق، اور کافی کی مزید ترقی اور استعمال کے لیے نظریاتی بنیاد اور معاونت بھی فراہم کرے گی۔

سپورٹ:

wallence.suen@wecistanche.com 0015292862950