Cistanche Tubulosa سے پولی سیکرائیڈ کے پانی کے اخراج کی علیحدگی اور مدافعتی صلاحیت پر مطالعہ

مزید معلومات کے لیے:ali.ma@wecistanche.com

Ailadan·Maimaitiaili1,LI Yang1,YAO Jun1,YUAN Jie2

(1۔ سکول آف فارمیسی، سنکیانگ میڈیکل یونیورسٹی، ارومچی 830011، چین؛ 2۔ ہوبو کا کولیج، سنکیانگ میڈیکل یونیورسٹی، سنکیانگ کلیمائی 834000، چین）

خلاصہ مقصد:کے پانی کے عرق کو الگ تھلگ کرنے کے لیےCistanche tubulosa سے polysaccharides، اور وٹرو میں ان کی مدافعتی صلاحیت کی تحقیقات کرنا۔ طریقے: AB{{{{30}}}} میکروپورس جذب رال کا استعمال C. tubulosa polysaccharide کو رنگین کرنے کے لیے کیا گیا تھا۔ رنگ سازی کے عمل کو ایک آرتھوگونل ٹیسٹ کے ذریعے بہتر بنایا گیا تھا جس میں برقرار رکھنے کی شرح اور پولی سیکرائیڈ کی رنگین کاری کی شرح کو جامع سکور کے طور پر استعمال کیا گیا تھا، اور جذب کی شرح، رنگ کاری کا وقت، نمونے کے ارتکاز کو عوامل کے طور پر استعمال کیا گیا تھا۔ تصدیقی ٹیسٹ کرائے گئے۔ DEAE-650ایم آئن ایکسچینج کالم کا استعمال ڈی کلرائزڈ C. tubulosa polysaccharide کے پانی کے عرق کو الگ کرنے کے لیے کیا گیا تھا۔ CCK-8 پرکھ کا استعمال پولی سیکرائیڈ کے مختلف ارتکاز کے اثرات کا پتہ لگانے کے لیے کیا گیا تھا（6۔ NO,IL-6 اور TNF- کے اجراء پر پولی سیکرائیڈ (12.5,25,50 ug/mL) کے کم، درمیانے اور زیادہ ارتکاز کے اثرات کا پتہ لگانے کے لیے Griess طریقہ اور ELISA پرکھ کو اپنایا گیا تھا۔ LPS کی حوصلہ افزائی RAW264.7 خلیوں میں۔ نتائج: AB-8 macroporous adsorption resin کے بہترین decolorization کے عمل میں، جذب کے بہاؤ کی شرح 1.2 BV/h تھی، رنگ کاری کا وقت 9 h تھا، اور نمونے کا ارتکاز 25 mg/mL تھا۔ تصدیقی ٹیسٹ کے 3 بار کے جامع اسکور بالترتیب 63.43％،63.29％ اور 63.34％ تھے، اوسطاً 63.35％（RSD＝0.11％） .n. ایک غیر جانبدار پولی سیکرائیڈ（CTZ） اور 5 ایسڈ پولی سیکرائیڈ（CT1,CT2,CT3,CT4,CT5） کو C. cistanche کے پولی سیکرائیڈ سے الگ تھلگ کیا گیا تھا، مواد 299.2,168 تھے۔ 11.2 ملی گرام فی گرام کنٹرول گروپ کے ساتھ مقابلے میں،6۔ RAW264.7 خلیات کا （P＜{{80}.05）، جبکہ 6.25-100 ug/mL CT1,CT3 اور 50 ug/mL CTC RAW264 کے پھیلاؤ کی شرح کو کم کر سکتا ہے۔ 7 خلیات (پی ~ 0.05)۔ LPS گروپ کے مقابلے میں، NO کی رہائی میں CTC، CT2، CT3 اور CT5، CTZ کم ارتکاز والے گروپ (P＜0.05) کے کم، درمیانے اور زیادہ ارتکاز والے گروپوں میں نمایاں کمی واقع ہوئی، جبکہ CT1 کے اعلیٰ ارتکاز والے گروپوں میں نمایاں اضافہ ہوا۔ اور CT4 （P＜0.05）۔ IL-6 کی رہائی （سوائے CT1 ہائی ارتکاز گروپ اور CT5 کم ارتکاز گروپ کے） اور TNF- （سوائے CT1 درمیانے ارتکاز گروپ کے） کم، درمیانے اور زیادہ ارتکاز والے گروپوں میں نمایاں طور پر کم ہوئے（P＜0.05 ) نتیجہ: میکرو پورس جذب رال کی مرضی کے مطابق ڈیکلورائزیشن ٹیکنالوجی مطالعہ میں مستحکم اور قابل عمل ہے۔ C. tubulosa polysaccharides کے پانی کے نچوڑ سے ایک غیر جانبدار پولی سیکرائیڈ اور 5 تیزابی پولی سیکرائیڈ کو الگ کیا جا سکتا ہے، جن میں سے CT2 پولی سیکرائیڈ میں سوزش کی مضبوط صلاحیت ہے۔

مطلوبہ الفاظ:Cistanche tubulosa polysaccharide؛ رنگین کاری؛ علیحدگی؛ مدافعتی صلاحیت

Cistanche tubulosaایک خشک، مانسل تنا ہے جس کے پتے ہیں۔Cistanche tubulosa (Schenk) WightLidanaceae خاندان کا۔ جدید مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ Cistanche Tubula میں phenethyl الکحل گلائکوسائیڈز، iridoid glycosides، lignans، polysaccharides، alkaloids اور دیگر حیاتیاتی طور پر فعال مادے ہوتے ہیں، جن میں افروڈیزیاک، جلاب، جگر سے حفاظتی اور بڑھاپے کے خلاف خصوصیات ہیں۔ ، تھکاوٹ کے خلاف قوت مدافعت میں اضافہ، اور نوٹروپک اثرات [1-4]، گردے یانگ کی کمی، جوہر اور خون کی کمی، نامردی اور بانجھ پن، کمر اور گھٹنوں کی کمزوری، پٹھوں کی کمزوری اور ہڈیاں، خشک آنتیں، اور قبض [5]۔

Cistanche جڑی بوٹیوں کی مصنوعات پر کلک کریں۔

کا پانی کا عرقCistanche tubulosa polysaccharideبھورا پیلا ہے. ہمارے ریسرچ گروپ کے پچھلے تجربے سے پتہ چلا کہ اس کے علاوہCistanche tubulosa پولی سیکرائیڈ، پانی کے عرق میں غیر ہدف والے اجزا بھی ہوتے ہیں جیسے پانی میں حل پذیر روغن اور پروٹین۔ یہ پولی سیکرائڈز کو الگ کرنے اور صاف کرنے میں معاون ہے۔ حیاتیاتی سرگرمی کی تحقیق نے بڑی مشکلات پیدا کی ہیں۔ روایتی آرگینک سالوینٹس ڈی کلورائزیشن ٹریٹمنٹ خام نچوڑ میں ہدف والے جزو کے کیمیائی ڈھانچے کو تباہ کر دے گا، اور انسان کی فارماسولوجیکل سرگرمی کو کم کر دے گا، اور انسانی جسم کے لیے نقصان دہ اجزاء کا تعارف [6]۔ میکروپورس جذب رال چینی ادویات کے نچوڑ میں پولی سیکرائڈز کو رنگین کرنے کے لئے ایک عام مواد ہے۔ یہ مستحکم جسمانی اور کیمیائی خصوصیات کے ساتھ ایک سرمایہ کاری مؤثر پولیمر جذب کرنے والا مواد ہے۔ اسے اس کے منتخب جذب اور روغن کے اجزاء کے لیے چھلنی کارکردگی کے ذریعے نشانہ بنایا جا سکتا ہے۔ روایتی چینی ادویات کے نچوڑوں میں روغن کو دور کرنے کے لیے، اس کے علاوہ، اسے اچار اور الکلی دھونے کے ذریعے دوبارہ پیدا کیا جا سکتا ہے، اس لیے اسے بڑے پیمانے پر استعمال کیا جاتا ہے [7]۔ یہ مطالعہ Cistanche Tubula polysaccharide کے پانی کے عرق کو رنگین کرنے کے لیے میکروپورس جذب کرنے والی رال کا استعمال کرنے کا ارادہ رکھتا ہے، اور decolorization کے حالات کو بہتر بنانے کے لیے orthogonal تجربات کا استعمال کرتا ہے۔ اقتباس کو رنگین کرنے کے بعد، پولی سیکرائیڈ کے گروپ کی مختلف نوعیت کے مطابق، اسے استعمال کرنے کی منصوبہ بندی کی گئی ہے، آئن ایکسچینج کالم کرومیٹوگرافی کا طریقہ پولی سیکرائیڈ میں غیر جانبدار اور تیزابی پولی سیکرائیڈ اجزاء کو مزید الگ کرتا ہے۔Cistanche tubulosa.

مطالعات نے یہ دکھایا ہے۔cistanche پلانٹپولی سیکرائڈز کے مدافعتی اثرات ہوتے ہیں اور وہ قدرتی امیونو موڈولیٹر ہیں جو تکمیلی نظام اور مدافعتی خلیات جیسے T/B لیمفوسائٹس، میکروفیجز، قدرتی قاتل (NK) خلیات کو چالو کر سکتے ہیں، اور مختلف قسم کے سائٹوکائنز کے اخراج کو بھی فروغ دے سکتے ہیں، اور اینٹی باڈیز کی پیداوار کو بھی فروغ دے سکتے ہیں۔ وغیرہ۔ [8-11]۔ Lipopolysaccharide (LPS) میکروفیجز کے اشتعال انگیز سگنل کے راستے کو چالو کر سکتا ہے، نائٹرک آکسائیڈ (NO)، اور پرو سوزش والی سائٹوکائنز جیسے کہ انٹرلییوکن 6 (IL-6) اور ٹیومر نیکروسس فیکٹر الفا (TNF-) کو متحرک کر سکتا ہے۔ ترکیب اور رہائی، اس طرح جسم میں اشتعال انگیز رد عمل کا ایک سلسلہ شروع ہوتا ہے [12]۔ یہ مطالعہ LPS سے حوصلہ افزائی شدہ ماؤس RAW264.7 میکروفیج سوزش ماڈل قائم کرنے کا ارادہ رکھتا ہے، میکروفیج کے پھیلاؤ پر Cistanche Tubula polysaccharide کے اثرات، سوزشی عنصر کی رطوبت، اور NO کی پیداوار، اور جسم کی مدافعتی سرگرمی پر اس کے اثرات کا ابتدائی جائزہ۔ اس کا مقصد اینٹی سوزش فعال مادہ کی بنیاد کے گہرائی سے مطالعہ کے لیے ایک نظریاتی بنیاد فراہم کرنا ہے۔Cistanche tubulosaپولی سیکرائڈ اور اس کے پولی سیکرائڈ وسائل کی ترقی۔

ابتدائی مطالعات سے پتہ چلا ہے کہ جب Cistanche cistanche میں polysaccharides کو پانی سے نکالا جاتا ہے، تو پانی میں گھلنشیل زیادہ مادے ایک ساتھ تحلیل ہو جاتے ہیں، جو کہ کی پاکیزگی کو متاثر کرتے ہیں۔cistanche cistanche polysaccharides. لہذا، ان کی مزید علیحدگی اور تطہیر پولی سیکرائڈ مواد کی بنیاد اور حیاتیاتی سرگرمی کے مطالعہ کی بنیاد رکھ سکتی ہے۔ میکرو پورس جذب رال طریقہ ایک عام طور پر استعمال ہونے والی رنگین بنانے کا طریقہ ہے [17-19]۔ چونکہ یہ ابھی تک میں روغن کی ساخت کے بارے میں واضح نہیں ہے۔Cistanche tubulosa، لہذا تحقیقی گروپ نے مختلف قطبین کے میکرو پورس ادسورپشن رال سے انتہائی موزوں میکرو پورس جذب رال AB-8 کو اسکرین کرنے کے لیے جامد جذب کے تجربات کا استعمال کیا۔ Cistanche deserticola کے پولی سیکرائیڈ میں برقرار رکھنے کی اچھی صلاحیت ہے۔ بہتر رنگ کاری کے اثر کو حاصل کرنے کے لیے، یہ تحقیق پچھلی تحقیق پر مبنی ہے اور رنگ کاری کے عمل کا تعین کرنے کے لیے استعمال کیے گئے آرتھوگونل تجربات (واشنگ دی ڈیسورپشن فلو ریٹ، ڈی کلرائزیشن ٹائم، اور نمونے کے بڑے پیمانے پر ارتکاز) کو بہتر بنایا گیا ہے۔ نتیجتاً، Cistanche tubulosa کے پولی سیکرائیڈ کے لیے بہترین decolorization کا طریقہ 1.2 BV/h کے اخراج کے بہاؤ کی شرح، 9 گھنٹہ کا رنگ کاری کا وقت، اور 25 mg/mL کا نمونہ ماس ارتکاز تھا۔ تصدیقی تجربات کے نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ رنگ کاری کا طریقہ قابل عمل ہے۔

قدرتی پولی سیکرائڈز کی پاکیزگی اور قسم اہم عوامل ہیں جو اس کی سرگرمی کو متاثر کرتے ہیں۔ لہذا، پولی سیکرائڈز کے الگ تھلگ اور صاف کرنے کے طریقوں پر متعلقہ تحقیق اب بھی قدرتی فعال پولی سیکرائڈز کے تحقیقی کام کا مرکز ہے۔ پولی سیکرائڈز کی علیحدگی کے لیے عام طور پر استعمال کیے جانے والے طریقوں میں ورن، جیل کرومیٹوگرافی، اینون ایکسچینج کرومیٹوگرافی، میکروپورس رال کالم کرومیٹوگرافی، اور الٹرا فلٹریشن [20] شامل ہیں۔ monosaccharides کے مختلف مرکبات کی وجہ سے، polysaccharides مختلف چارج خصوصیات ہیں. انہیں غیر جانبدار پولی سیکرائڈز اور ایسڈ پولی سیکرائڈز میں تقسیم کیا جاسکتا ہے۔ غیر جانبدار پولی سیکرائڈز دو یا دو سے زیادہ مختلف شوگر پر مبنی مونومر پر مشتمل پولیمر ہیں جن میں نامیاتی تیزاب نہیں ہوتے ہیں۔ ایسڈک پولی سیکرائڈز مرکب اور ساخت کے لحاظ سے غیر جانبدار پولی سیکرائڈز سے زیادہ پیچیدہ ہیں، سوائے دو سے زیادہ شوگر پر مبنی مونومر کے۔ ، اس کے علاوہ یورونک ایسڈ مونو باڈی [21] پر مشتمل ہے۔ اینون ایکسچینج کالم کرومیٹوگرافی پولی سیکرائڈز کے انچارج میں فرق کو غیر جانبدار پولی سیکرائڈز کو تیزابی پولی سیکرائڈز سے الگ کرنے کے لیے استعمال کرتی ہے [22]۔ اس وجہ سے، اس مطالعہ نے Cistanche Tubula polysaccharides کو الگ کرنے کے لیے DEAE-650M آئن ایکسچینج کالم کرومیٹوگرافی کالم کا استعمال کیا، اور کل 1 نیوٹرل پولی سیکرائیڈ اور 5 ایسڈ پولی سیکرائیڈ کو الگ کیا گیا۔ میکروفیجز مدافعتی صلاحیت والے خلیات ہیں جو روگجنک مائکروجنزموں کو لپیٹ کر اور مار کر قوت مدافعت کو منظم کرسکتے ہیں۔ مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ جب انسانی جسم کو پیتھولوجیکل یا مکینیکل نقصان سے تحریک ملتی ہے، تو منشیات کی مداخلت LPS کے ذریعے پیدا ہونے والے میکروفیجز کی phagocytic صلاحیت کو بڑھانے کے لیے میکروفیجز کو چالو کر سکتی ہے، اس طرح NO کی پیداوار کو روکتی ہے اور IL{{ جیسے سوزشی خلیوں کی ایک سیریز کو روکتی ہے۔ 9}} اور TNF- فیکٹر سراو، اس طرح میزبان کو پیتھوجینز سے بچاتا ہے [23]۔ اس مقصد کے لیے، اس مطالعے نے RAW264.7 خلیوں کے پھیلاؤ کی شرح پر مختلف Cistanche tubulosa polysaccharides کے اثرات کے ساتھ ساتھ NO، IL-6، اور TNF- کو جاری کرنے کے لیے LPS سے حوصلہ افزائی میکروفیجز پر اثرات کا تجربہ کیا۔ نتیجے کے طور پر، 12.5، 25، اور 50 ug/mL کی بڑے پیمانے پر ارتکاز کی حد کے اندر، اس نے نہ صرف RAW264.7 خلیوں کے پھیلاؤ کو فروغ دیا بلکہ RAW264.7 خلیوں کے پھیلاؤ کو بھی نمایاں طور پر روک دیا۔

دیCistanche tubulosa کے polysaccharideRAW264.7 سیلز میں LPS کی طرف سے NO جاری کرنے کے لیے، IL-6 اور TNF- CT2 ہیں۔ متعلقہ مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ مونوساکرائڈ کی ساخت اور پولی سیکرائڈز کا مالیکیولر وزن اس کے اثرات کو متاثر کرے گا۔immunomodulatoryسرگرمی Monosaccharides جیسے galactose، arabinose، mannose، اور گلوکوز مثبت طور پر پولی سیکرائڈز کی مدافعتی سرگرمی کے ساتھ منسلک ہوتے ہیں [24]۔ بڑے مالیکیولر وزن والے پولی سیکرائڈز میں زیادہ متعدد انتہائی بار بار چلنے والی گرہوں کی ساخت ہوسکتی ہے، پلازما جھلی کی سطح کے رسیپٹرز کو کثیر جہتی اور خاص طور پر کراس جوڑ سکتی ہے۔immunomodulatory میں اضافہاثر [25]۔ لہذا، اس تحقیق میں تیزابی پولی سیکرائیڈ CT2 کی مونوساکرائیڈ مرکب میں خاص مونوساکرائڈز یا ایک سے زیادہ مونوساکرائڈز شامل ہو سکتے ہیں جو مثبت طور پر مدافعتی سرگرمی سے متعلق ہیں، اور مالیکیولر وزن نیوٹرل پولی سیکرائڈز اور دیگر تیزابی پولی سیکرائیڈز سے زیادہ ہو سکتا ہے، لیکن تصدیق کے لیے مزید تحقیق کی ضرورت ہے۔ . خلاصہ یہ کہ اس تحقیق میں آپٹمائزڈ میکرو پورس جذب رال کی رنگت کا عمل مستحکم اور قابل عمل ہے۔ Cistanche cistanche cistanche کے پانی کے نچوڑ سے 1 غیر جانبدار پولی سیکرائڈ اور 5 ایسڈ پولی سیکرائڈز کو الگ کیا جا سکتا ہے، جن میں سے ایسڈ پولی سیکرائڈ CT2 کی امیونولوجیکل سرگرمی مضبوط ہے۔ یہ مطالعہ Cistanche Tubula polysaccharides کی ترقی اور استعمال کے لیے تجرباتی بنیاد رکھ سکتا ہے۔