RNA M6 A ریڈر YTHDF2 NK سیل اینٹی ٹیومر اور اینٹی وائرل امیونٹی کو کنٹرول کرتا ہے حصہ 5

NK خلیات ٹیومر سیلز اور وائرس سے متاثرہ خلیوں کو تباہ کرنے کے لیے دو اہم طریقے استعمال کرتے ہیں: (1) سائٹوٹوکسک مالیکیولز، جیسے اسپرفورین اور گرینزائمز کا اخراج، جو براہ راست ٹارگٹ سیل اپوپٹوسس یا پائروپٹوسس (Zhou et al. سائٹوکائنز (جیسے IFN-، TNF-، اور GM-CSF) اور کیموکائنز (MIP-1، MIP-1، IL-8، اور RANTES) جو کہ دیگر پیدائشی اور انکولی قوت مدافعت کے کام کو بڑھاتے ہیں۔ خلیات (Fauriatet al.، 2010؛ Reiter، 1993)۔

ٹیومر خلیات انسانی جسم میں غیر معمولی خلیات ہیں جو پھیلتے اور بے قابو ہوتے ہیں، ہمارے جسم کو بہت نقصان پہنچاتے ہیں۔ ٹیومر کے علاج کے لیے، بہت سے لوگ کیموتھراپی، ریڈیو تھراپی، اور دیگر علاج حاصل کرنے کا انتخاب کرتے ہیں۔ یہ علاج ایک خاص حد تک ٹیومر کے خلیوں کو تباہ کر سکتے ہیں، لیکن یہ ہماری صحت کو کچھ خاص نقصان بھی پہنچاتے ہیں، جیسے کہ ہماری یادداشت کو متاثر کرنا۔

کیموتھراپی فی الحال کینسر کے خلیوں کے علاج کے سب سے اہم طریقوں میں سے ایک ہے۔ یہ کینسر کے خلیوں کو مارنے اور کینسر کے خلیوں کی نشوونما اور پھیلاؤ کو روکنے کے لیے خصوصی ادویات کا استعمال کرتا ہے۔ تاہم، یہ ادویات کچھ عام خلیوں کو بھی نقصان پہنچا سکتی ہیں، خاص طور پر دماغ میں، اس لیے کچھ لوگوں کو کیموتھراپی کے دوران اپنی یادداشت میں نمایاں کمی کا سامنا کرنا پڑ سکتا ہے۔

تاہم، ہمیں اس وجہ سے علاج کو ترک نہیں کرنا چاہئے۔ سائنس اور ٹیکنالوجی کی ترقی نے ہمیں بہت سے نئے علاج فراہم کیے ہیں، جیسے کہ ٹارگٹڈ تھراپی، امیونو تھراپی وغیرہ۔ یہ علاج نہ صرف ہمارے جسم کو کیموتھراپی سے ہونے والے نقصان کو کم کر سکتے ہیں بلکہ ٹیومر کے خلیوں کو بھی مؤثر طریقے سے مار سکتے ہیں۔

اس کے علاوہ ہم اپنی یادداشت کی حفاظت کے لیے بھی کچھ اقدامات کر سکتے ہیں۔ مثال کے طور پر، ہم دماغی ورزش کر کے یاداشت کو بڑھا سکتے ہیں، جیسے کہ غور سے پڑھنا، غیر ملکی زبانیں سیکھنا، دماغی گیمز کھیلنا وغیرہ۔ اس کے علاوہ اچھی طرح سے کھانا اور اچھی نیند لینا بھی اچھی یادداشت کو برقرار رکھنے میں مدد دے سکتا ہے۔

مختصر یہ کہ ٹیومر سیلز اور یاداشت کے درمیان ایک خاص تعلق ہے لیکن ہمیں اس کی وجہ سے آسانی سے علاج ترک نہیں کرنا چاہیے۔ ہمیں اپنی جسمانی صحت اور یادداشت کی حفاظت کے لیے فعال اقدامات کرنے چاہئیں اور یقین ہے کہ ٹیکنالوجی میں ترقی ہمیں بہتر علاج فراہم کر سکتی ہے۔ آئیے ٹیومر خلیوں کے خلاف لڑیں اور اپنی صحت اور روشن مستقبل کی حفاظت کریں! یہ دیکھا جا سکتا ہے کہ ہمیں یادداشت کو بہتر بنانے کی ضرورت ہے، اور Cistanche deserticola نمایاں طور پر یادداشت کو بہتر بنا سکتا ہے، کیونکہ Cistanche deserticola میں اینٹی آکسیڈینٹ، اینٹی انفلامیٹری، اور اینٹی ایجنگ اثرات ہوتے ہیں، جو دماغ میں آکسیڈیشن اور سوزش کے رد عمل کو کم کرنے میں مدد کر سکتے ہیں، اس طرح دماغ کی حفاظت کرتا ہے۔ اعصابی نظام کی صحت. اس کے علاوہ، Cistanche deserticola اعصابی خلیوں کی نشوونما اور مرمت کو بھی فروغ دے سکتا ہے، اس طرح اعصابی نیٹ ورکس کے رابطے اور کام کو بڑھاتا ہے۔ یہ اثرات یادداشت، سیکھنے اور سوچنے کی رفتار کو بہتر بنانے میں مدد کر سکتے ہیں، اور ادراک کی خرابی اور نیوروڈیجنریٹیو بیماریوں کی نشوونما کو بھی روک سکتے ہیں۔

میموری کی طاقت بڑھانے کے لیے Know پر کلک کریں۔

اس مطالعے میں، ہم نے غیر شناختی میکانزم کا مشاہدہ کیا جس کے ذریعے YTHDF2 NK سیل اینٹی ٹیومر اور اینٹی وائرل استثنیٰ کو منظم کرتا ہے۔ ٹیومر کی ترتیب میں، YTHDF2 میلانوما میٹاسٹیسیس کو کنٹرول کرنے کے لیے NK سیلز کے ذریعے perforin، granzyme B، اور IFN- کے اخراج کو فروغ دیتا ہے، جبکہ MCMV انفیکشن کے دوران، YTHDF2 بنیادی طور پر پرفورین کو ریگولیٹ کرنے کے ذریعے MCMV کے خلاف NK سیل ثالثی اینٹی وائرل سرگرمی کو فروغ دیتا ہے۔

اس تضاد کی ایک ممکنہ وضاحت یہ ہے کہ ٹیومر یا وائرس کے ذریعے NK سیل ایکٹیویشن کو مختلف طریقوں سے منظم کیا جاتا ہے۔

ایم سی ایم وی پروٹین ایم 157، این کے سیل ریسیپٹر Ly49H (Smith et al.، 2002) کا ایک ligand، اور twointracellular adaptors، DAP10 اور DAP12 (فرانسیسی ایٹ ال، 2006؛ Orr et al.، 2006) کے ساتھ منسلک کرکے NK خلیوں کو متحرک کرتا ہے۔ تاہم، ٹیومر کے سیاق و سباق میں، NK سیل ایکٹیویشن کو مختلف NKcell ریسیپٹر ligands کے ساتھ تعامل کے ذریعے مضبوطی سے کنٹرول کیا جاتا ہے جس کا اظہار ٹیومر سیلز کے ساتھ ساتھ سائٹوکائنز، جیسے IL-15 اور TGF-، ٹیومر مائکرو ماحولیات میں (Wu et al.، 2020b)۔

اس کے علاوہ، ہم نے پایا کہ YTHDF2 Eomes کو ریگولیٹ کرکے NK سیل کی پختگی کو فروغ دیتا ہے۔ تاہم، Eomes mRNA میں نوبائنڈنگ سائٹس پائی گئیں، جو تجویز کرتی ہیں کہ YTHDF2 بالواسطہ طور پر Eomes کے اظہار کو منظم کرتا ہے۔ اس طریقہ کار کی چھان بین کے لیے مزید مطالعات کی ضمانت دی جاتی ہے جس کے ذریعے YTHDF2 Eomes اظہار کو منظم کرتا ہے۔

اس کے علاوہ، کس طرح YTHDF2 سگنلز حاصل کرتا ہے اور اس میں ثالثی کرتا ہے جو وائرس یا ٹیومر کے خلیات کے خلاف NK سیلمیمون ردعمل کو تیزی سے شکل دے سکتا ہے اس کے لیے مزید تلاش کی بھی ضرورت ہوتی ہے۔ لیوکیمیا کے مریضوں میں ایلوجینک NK سیلز کو اپنانے سے معافی مل سکتی ہے (Ruggeri et al.، 2002)۔

دیکھ بھال کرنے والے NK خلیات کو دوبارہ منسلک یا ریفریکٹری CD19+ لیمفوما اور لیوکیمیا (Liu et al., 2020) میں اہم فوائد فراہم کرتے ہوئے دکھایا گیا ہے۔ تاہم، Vivo میں NK سیلز کی محدود توسیع اور استقامت، نیز محدود NK سیل کی اسمگلنگ اور ٹیومر کی جگہوں میں دراندازی، NKcell پر مبنی تھراپی (Yilmaz et al.، 2020) کے لیے ایک بڑا چیلنج بنی ہوئی ہے۔

چونکہ کینسر کے مریض یا وائرس سے متاثرہ مریض، جیسے کہ COVID-19، عام طور پر عارضی لیمفوپینیا سے گزرتے ہیں (Grossman et al., 2015; Zhaoet al., 2020)، lymphopenia کے دوران NK خلیات کی موثر توسیع ٹیومر کی نشوونما کو کنٹرول کرنے کے لیے اہم ہے۔ وائرل انفیکشن.

ہمارے نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ YTHDF2 BMand سے NK سیل ایگریس چلاتا ہے T، B، اور NK خلیوں کی کمی والے چوہوں میں Vivo میں لیمفوپینیا کے دوران NK سیل ہومیوسٹیٹک پھیلاؤ کو فروغ دیتا ہے۔ ہمارا مطالعہ یہ بھی ظاہر کرتا ہے کہ YTHDF2 مثبت طور پر NK سیل کے اثر کے کام کو منظم کرتا ہے۔

لہذا، YTHDF2 اظہار کو NK یا CAR-NK سیلوں میں شامل کرنے سے وٹرو میں مینوفیکچرنگ، استقامت، اور ویوو میں انفیکٹر فنکشن میں اضافہ کے دوران NK سیل کی توسیع کے کثیر جہتی فوائد ہو سکتے ہیں۔ مزید برآں، YTHDF2 کی اپ گریجشن جسے ہم نے ٹیومر کی ترتیب میں اور وائرل انفیکشن کے دوران دیکھا ہے، NK یا CAR-NKcells کی بیماری کے مائیکرو ماحولیات میں گھسنے کی صلاحیت کو بڑھا سکتا ہے۔

IL-15 NK سیل کی نشوونما، ہومیوسٹاسس، بقا، اور انفیکٹر فنکشن کا ایک کلیدی ریگولیٹر ہے (Becknell and Caligiuri, 2005; Mishra et al., 2014; Yu et al., 2013)۔ ہمارے گروپ نے پہلے ایک ناول IL-15–AKT–XBP1s سگنلنگ پاتھ وے کی اطلاع دی تھی جو انسانی NK سیلز کی انفیکٹر افعال اور بقا میں تعاون کرتا ہے (Wang et al., 2019b)۔ تاہم، صحیح طریقہ کار (زبانیں) جس کے ذریعے IL-15 NK سیل کی بقا کو منظم کرتا ہے ابھی تک پوری طرح سے سمجھ میں نہیں آیا ہے۔

یہاں، ہمیں ایک اور نیا طریقہ کار ملا جس میں STAT5-YTHDF2 IL-15 inmouse NK سیلز کے نیچے ایک مثبت فیڈ بیک لوپ بناتا ہے جو بدلے میں NK سیل کے پھیلاؤ، بقا، اور اثر کرنے والے افعال کو کنٹرول کرتا ہے۔ ہماری پچھلی رپورٹ سے پتہ چلتا ہے کہ IL-15 XBP1s کی نقل نہیں کرتا ہے، اور XBP1s NK خلیات میں STAT5 کے ساتھ تعامل نہیں کرتا ہے (Wang et al., 2019b)، تجویز کرتا ہے کہ IL-15 کے ذریعے XBP1s کا ضابطہ STAT5 آزاد ہے۔ .

اس لیے NKcells، XBP1s اور YTHDF2 میں IL-15 کے دو نئے ثالثوں کی نشاندہی کی ہے، جن کے لیے XBP1s کو STAT5 کے ذریعے ریگولیٹ نہیں کیا جاتا ہے، جبکہ YTHDF2 STAT5 پر منحصر ہے۔ خصوصیت والے IL-15 سگنلنگ کی یہ پیچیدگی IL-15 کے پیچیدہ اور pleiotropic کردار سے مماثل ہوسکتی ہے، جو ٹیومر مائکرو ماحولیات اور وائرل انفیکشن (Nguyen et al. 2002؛ سانتانا کیریرویٹ ال۔، 2019)۔

پیچیدگی اس میں بھی ظاہر ہوتی ہے کہ Ythdf2 کی کمی Vivo میں RestingNK خلیوں کی بقا اور پھیلاؤ کو متاثر نہیں کرتی ہے، جبکہ YTHDF2 IL-15 orby MCMV انفیکشن کے ذریعے فعال NK خلیوں کے پھیلاؤ اور/یا بقا کو منظم کرنے میں اہم کردار ادا کرتا ہے۔ .

ہمارا مطالعہ اس تصور کی بھی حمایت کرتا ہے کہ عام طور پر YTHDF2 یا m6A ترمیمات متحرک حالت اور/یا بیماریوں کی ترتیبات میں NK سیل ڈائنامکس میں زیادہ مرکزی کردار ادا کرتی ہیں۔

اس مطالعے میں، ہم نے NKcells میں YTHDF2 کے اہداف کی نشاندہی کرنے کے لیے ملٹی اومکس حکمت عملی (RNA-seq، m6A-seq، اور RIP-seq) کا اطلاق کیا۔

ہمارے اس کھوج کے مطابق کہ Ythdf2-کی کمی NK خلیات نے خلیے کی نشوونما میں نمایاں طور پر تاخیر کی، ہمیں سیل سائیکل اور سیل ڈویژن سے متعلق جینز کی ایک بڑی تعداد ملی جو Ythdf2ΔNK NK خلیوں میں نمایاں طور پر کم ہوئی تھی، یہ تجویز کرتی ہے کہ YTHDF2 سیل سائیکل کو ریگولیٹ کرکے سیل کی نشوونما کو کنٹرول کرتا ہے۔ . قابل غور بات یہ ہے کہ سیل سائیکل کو ریگولیٹ کرنے میں m6A ترمیمات بڑے پیمانے پر شامل ہیں۔

METTL3 سیل سائیکل پاتھ وے میں جین کے ترجمے کو بڑھا کر ایکیوٹ مائیلوڈ لیوکیمیا میں سیل کی افزائش کو فروغ دیتا ہے (باربیری ایٹ ال۔، 2017؛ وو ایٹ ال۔، 2017)۔ METTL14 کو حذف کرنا شعاعی گلیل خلیات (Yoonet al., 2017) کی S-to-M مرحلے کی منتقلی کو طول دے کر بعد از پیدائش کے مراحل میں کارٹیکل نیوروجنسیس کو بڑھاتا ہے۔

ہمارے مطالعے سے مطابقت رکھتے ہوئے، یہ اطلاع دی گئی کہ ہیلا سیلز میں، YTHDF2 نہ صرف مالیکیولر فنکشن میں بلکہ سیل کے پھیلاؤ اور بقا میں بھی شامل راستوں کو نشانہ بناتا ہے (Wanget al.، 2014)۔

Fei et al. (2020) نے حال ہی میں اطلاع دی ہے کہ YTHDF2 ممکنہ طور پر HeLa خلیوں میں سیل سائیکل کے دوران mRNA انحطاط کی سہولت فراہم کر کے سیل کے پھیلاؤ کو فروغ دیتا ہے، YTHDF2 کے عالمگیر میکانزم (زبانیں) یا سیل کی بقا اور کام کو برقرار رکھنے میں اس سے منسلک m6A ترمیمات کی تجویز کرتا ہے۔ چونکہ ملٹی اومکس حکمت عملی کے تجزیے کے لیے لاکھوں سیلز کی ضرورت ہے، اس لیے ہمیں ایکس ویوو توسیع شدہ اور انتہائی پھیلاؤ والے این کے سیلز پر انحصار کرنا پڑا۔

یہ اس مشاہدے کی وضاحت کر سکتا ہے کہ YTHDF2 کے اسکرین کیے گئے اہداف بنیادی طور پر سیل سائیکل جینز ہیں، جبکہ ممکنہ اہداف جو سیل کی بقا، انفیکٹر فنکشن، اور NK خلیوں کی پختگی کو کنٹرول کرتے ہیں، نہیں دکھائے گئے تھے۔ قطع نظر، ہم سمجھتے ہیں کہ ہمارا ڈیٹا پہلا ثبوت فراہم کرتا ہے کہ YTHDF2 اہداف مدافعتی خلیوں میں، خاص طور پر NK خلیوں میں سیل سائیکل اور سیل ڈویژن کے عمل میں حصہ ڈالتے ہیں۔

آخر میں، ہم نے YTHDF2 یا m6A میتھیلیشن کا پہلے سے نامعلوم کردار NK سیلانٹیٹیمر اور اینٹی وائرل سرگرمی کے ساتھ ساتھ NK سیل ہومیوسٹاسس اور پختگی کے ایک مثبت ریگولیٹر کے طور پر دریافت کیا۔ یہ نتائج اس بات کی بصیرت فراہم کرتے ہیں کہ کس طرح NKcells m6A mRNA میتھیلیشن کے ذریعے ٹیومر میٹاسٹیسیس اور وائرل انفیکشن کے خلاف مؤثر طریقے سے سروے کرتے ہیں۔

مختصر طور پر، ڈونر کنسٹرکٹ کو ماؤس ایمبریونک اسٹیم سیلز میں الیکٹروپوریشن (ہومولوجس ری کنبینیشن) پر مخصوص ہدف جین کی مشروط تبدیلی پیدا کرنے کے لیے ڈیزائن کیا گیا تھا۔ ٹارگٹنگ کیسٹ (En2SA-IRES-LacZ-pA-hBactP-Neo-pA) فلپیس ریکومبینیشن انزائم (Flp) - شناخت کے ہدف کے دوبارہ کمبینیشن سائٹس کے ساتھ جڑی ہوئی ہے، جس سے Flp ریکومبینیس کے ساتھ ٹارگٹنگ کیسٹ کو ہٹایا جا سکتا ہے۔

Ythdf2 کے چوتھے exon کے ارد گرد loxP کا ایک جوڑا بھی متعارف کرایا جاتا ہے، جو Cre recombinase کے ذریعے Ythdf2 کے چوتھے ایکسون کو مشروط طور پر حذف کرنے کے لیے استعمال ہوتا ہے۔ floxed allele (Ythdf2fl/fl) والے چوہے ROSA26-FlpE چوہوں (اسٹاک نمبر 003946؛ TheJackson Laboratory) کے ساتھ F1offspring چوہوں کو عبور کرکے پیدا کیے گئے تھے۔ Ythdf2fl/fl چوہوں کو کسی بھی تجربے کے لیے استعمال کرنے سے پہلے کم از کم 10 نسلوں کے لیے C57BL/6 پر عبور کیا گیا۔

Ncr1-iCre چوہے Eric Vivier (Centre d'Immunologie de Marseille-Luminy, Marseille, France; NarniMancinelli et al., 2011) کی طرف سے ایک تحفہ تھے۔ Rag2-/-Il2rg-/- چوہوں کو سٹی آف ہوپ میں جانوروں کی سہولت فراہم کی گئی تھی۔ NCI B6-Ly5.1/Cr چوہے (CD45.1 چوہے) چارلس ریور لیبارٹریز سے خریدے گئے تھے۔ IL-15Tgmice ہمارے گروپ کے ذریعہ تیار کیے گئے تھے اور C57BL/6 بیک گراؤنڈ (Fehniger et al.، 2001) میں واپس آئے تھے۔ Stat5fl/fl چوہے اصل میں John J. O'Shea (National Institute of Arthritis and Musculoskeletal and Skin Diseases, Bethesda, MD; Cui et al., 2004) سے تھے۔

Stat5fl/fl Ncr1-iCre mice were generated in the laboratory of J.C. Sun (Wiedemann et al., 2020). All mice were on a C57BL/6 background for >10 نسلیں 6–12-ہفتہ پرانے نر اور مادہ چوہوں کو تجربات کے لیے استعمال کیا گیا۔ کری-منفی لیٹر میٹ WTcontrols کے بطور استعمال ہوتے تھے۔ تمام جانوروں کے تجربات کو سٹی آف ہوپ ادارہ جاتی جانوروں کی دیکھ بھال اور استعمال کمیٹی نے منظور کیا تھا۔

For more information:1950477648nn@gmail.com