Cistanche Tubulosa کے تنوں سے کل Glycosides ڈپریشن جیسے طرز عمل کو کم کرتے ہیں: Phytochemicals اور گٹ مائکروبیٹا کا دو طرفہ تعامل

مزید معلومات کے لیے:ali.ma@wecistanche.com

لی فین، وغیرہ

خلاصہ

پس منظر: روایتی چینی طب میں کثرت سے استعمال ہونے والی کڈنی یانگ ٹونیفائینگ جڑی بوٹی کے طور پر، اس کے خشک رسیلی تنوںCistanchetubulosa(Schenk) Wight (CT) کو ڈپریشن کے علاج میں موثر ثابت کیا گیا ہے۔ تاہم، antidepressant اجزاء اور ان کا بنیادی طریقہ کار واضح نہیں ہے۔

مقصد: CT کے فعال اجزاء کو دریافت کرنا(Cistanchetubulosa)ڈپریشن کے ساتھ ساتھ ممکنہ میکانزم کے خلاف۔ مطالعہ کے ڈیزائن اور طریقے: برتاؤ سے متعلق مایوسی کے ٹیسٹ پولی سیکرائڈز، اولیگوساکرائڈز، اور CT سے الگ کیے گئے مختلف گلائکوسائیڈ سے افزودہ فرکشنز کی اینٹی ڈپریسنٹ سرگرمیوں کا جائزہ لینے کے لیے استعمال کیے گئے، ساتھ ہی ساتھ عام گٹ مائیکرو بائیوٹا میٹابولائٹس بشمول 3-ہائیڈروکسی فینیل پروپیون ({2}) }}HPP) اور ہائیڈروکسی ٹائروسول (HT)۔ مزید برآں، دائمی غیر متوقع ہلکے تناؤ (CUMS) ماڈلز پر بائیو ایکٹیو فریکشنز اور میٹابولائٹس کے اثرات کو متعدد فارماکوڈینامکس اور بائیو کیمیکل تجزیوں کے ساتھ دریافت کیا گیا۔ کالونک ہسٹولوجی اور آنتوں کی رکاوٹ میں تبدیلیاں داغ اور امیونو ہسٹو کیمیکل تجزیہ کے ذریعہ دیکھی گئیں۔ گٹ مائکروبیل خصوصیات اور ٹرپٹوفن کینورینائن میٹابولزم کو بالترتیب 16S rRNA سیکوینسنگ اور ویسٹرن بلوٹنگ کا استعمال کرتے ہوئے دریافت کیا گیا۔

نتائج: کلglycosides(TG) مختلف الگ الگ حصوں کے مقابلے میں ڈپریشن جیسے طرز عمل کو ڈرامائی طور پر کم کرتا ہے، ہائپوتھلامک-پٹیوٹری-ایڈرینل (HPA) محور کی ہائپر ایکٹیویشن پر فینی لیتھانائڈ اور iridoid glycosides کے synergistic اثرات کی عکاسی کرتا ہے، شدید neuro-، اور peripheral inflammations، میں 5-ہائیڈرو آکسیٹریپٹامائن (5-HT) اور ہپپوکیمپس میں دماغ سے ماخوذ نیوروٹروفک عنصر۔ اس کے علاوہ، TG(کل گلائکوسائیڈز)بڑی آنت اور آنتوں کی رکاوٹ میں کم درجے کی سوزش کو کم کیا، اور کئی بیکٹیریل جنیرا کی کثرت HPA کے محور اور CUMS چوہوں میں سوزش کے ساتھ بہت زیادہ تعلق رکھتی ہے۔ مستقل طور پر، بڑی آنت میں indoleamine 2، 3-dioxygenase 1 (IDO1) کا اظہار TG کے بعد نمایاں طور پر کم ہو گیا تھا۔(کل گلائکوسائیڈز)انتظامیہ، ٹرپٹوفن کینورینائن میٹابولزم کو دبانے کے ساتھ۔ دوسری طرف، ایچ ٹی نے ایچ پی اے ایکسس فنکشن، پرو انفلامیٹری سائٹوکائن ریلیز، اور ٹرپٹوفن کینورینائن میٹابولزم کو بہتر بنا کر ایک واضح اینٹی ڈپریسنٹ اثر بھی دکھایا، جبکہ یہ ٹی جی کی طرح ڈس آرڈر گٹ مائکروبیوٹا کو بڑے پیمانے پر ایڈجسٹ کرنے میں ناکام رہا۔ حیرت انگیز طور پر، فلوکسٹیٹین، ٹی جی اور ایچ ٹی سے برتر، ہائپوتھیلمک-پیٹیوٹری-گوناڈل محور اور غیر معمولی سائیکلک نیوکلیوٹائڈ میٹابولزم کی خرابی کو مزید بہتر بنا سکتے ہیں۔

مطلوبہ الفاظ: Cistanchetubulosa, کل گلائکوسائیڈز, hydroxytyrosol, ڈپریشن, گٹ microbiota

ڈیزرٹیکولا ما پروڈکٹ کے لیے کلک کریں۔

تعارف

ڈپریشن ایک دائمی، بار بار چلنے والا، اور ممکنہ طور پر جان لیوا ذہنی عارضہ ہے جو دنیا بھر کی 20 فیصد آبادی کو متاثر کرتا ہے (Nabavi et al., 2017)۔ فی الحال، اگرچہ متعدد اینٹی ڈپریسنٹس کی منظوری دی گئی ہے، لیکن ضمنی اثرات سے متعلق ہیں۔ خاص طور پر، سلیکٹیو سیروٹونن ری اپٹیک انحیبیٹرز (SSRIs) کے ساتھ طویل مدتی علاج جیسے کہ فلوکسیٹائن، ڈپریشن کے لیے اہم فارماسولوجیکل ایجنٹ، بڑھے ہوئے مسائل جیسے دائمی جنسی خرابی (Bijlsma et al.، 2014)؛ اس نے قدرتی جڑی بوٹیوں سے نوول اینٹی ڈپریسنٹس کی دریافت کی طرف توجہ مبذول کرائی ہے (Wang et al., 2019)۔ روایتی چینی طب (TCM) تھیوری میں، گردے یانگ کی کمی کے نتیجے میں کارکردگی کی خصوصیت ڈپریشن کی طبی علامات کی طرح ہوتی ہے جیسے کہ ڈپریشن میں احساس کم ہونا، دلچسپی میں کمی، اور جذباتیت (یانگ ایٹ ال۔، 2020)، خیالات کو فروغ دینا۔ کڈنی یانگ کو ٹونیفائی کر کے ڈپریشن جیسے رویوں کو دور کرنے کے لیے۔ اتفاق سے، بہت سی کڈنی یانگ ٹونیفائینگ جڑی بوٹیاں جنسی فعل کو بہتر بنانے کا فائدہ رکھتی ہیں (Wu et al., 2015)۔ اس طرح کے مطالعہ ہمیں کی ممکنہ درخواست پر توجہ دیتے ہیںسیستانچسہربا، جو TCM میں کڈنی یانگ ٹونیفائنگ جڑی بوٹیوں کا کثرت سے استعمال کیا جاتا ہے اور یہ مردانہ جنسی کمزوری کے علاج میں موثر ہے (Wang et al., 2020)، antidepressant ترقیات کے لحاظ سے۔سیستانچسہربا، سرکاری طور پر کے خشک رسیلی تنوں کے طور پر ریکارڈ کیا گیا ہے۔Cistanchetubulosa(Schrenk) وائٹ (CT) اورCistanchedeserticola(YC Ma) چینی فارماکوپیا (Wang et al., 2017) میں، 15 ویں صدی سے چین اور دیگر مشرقی ایشیائی ممالک میں گردے یانگ کی کمی، نامردی اور خواتین کے بانجھ پن جیسے حالات کے علاج کے لیے استعمال کیا جا رہا ہے۔ جدید فارماسولوجیکل اسٹڈیز اس بات کی نشاندہی کرتی ہیں۔سیستانچسہربا میں متعدد حیاتیاتی سرگرمیاں ہیں، جیسے کہ قوت مدافعت میں اضافہ، نیورو پروٹیکشن، اینٹی آکسیڈینٹ، اینٹی ایجنگ، اور تھکاوٹ کے اثرات (وانگ ایٹ ال۔، 2017)۔ کی نیورو پروٹیکٹو خصوصیاتسیستانچسہربا علم سے متعلقہ بیماریوں جیسے کہ فالج، ڈپریشن، اور الزائمر کی بیماری میں اس کے علاج کی صلاحیت تجویز کرتا ہے (وانگ ایٹ ال۔، 2020)۔ ہمارے پچھلے مطالعہ میں، ہم نے پایا کہ CT(Cistanchetubulosa)ایکسٹریکٹ نے دائمی غیر متوقع ہلکے تناؤ (CUMS) چوہوں کے افسردگی جیسے طرز عمل کو ختم کیا (Li et al.، 2018)۔ آج تک، CT کا کیمیائی تجزیہ(Cistanchetubulosa)ظاہر ہوا کہ اس کی اہم تشکیلات میں فینی لیتھانائیڈ گلائکوسائیڈز، آئریڈائڈ گلائکوسائیڈز، پولی سیکرائڈز، اور اولیگوساکرائڈز (جیانگ اور ٹو، 2009) شامل ہیں، تاہم، اس کے اینٹی ڈپریسنٹ اثر میں غالب کردار ادا کرنے والے مرکب کی قسم ابھی تک واضح نہیں ہے۔

متعدد مطالعات نے اس بات کی تصدیق کی ہے کہ گٹ کا جسمانی عمل (خاص طور پر کامنسل مائکرو بائیوٹا) ڈپریشن کی نشوونما میں اہم کردار ادا کرتا ہے اور یہ نیورو اینڈوکرائن، خود مختار اعصابی نظام اور مدافعتی نظام کو منظم کر سکتا ہے (یانگ ایٹ ال۔، 2020)۔ مزید برآں، ٹرپٹوفن میٹابولزم، گٹ مائیکرو بائیوٹا، اور ڈپریشن کو جوڑنے والے تعلقات نے آہستہ آہستہ زیادہ توجہ مبذول کرائی ہے۔ تبدیل شدہ گٹ مائیکرو بائیوٹا ٹرپٹوفن کینورینائن پاتھ وے کو چالو کر سکتا ہے، جو بعد میں پیریفرل اور دماغی ٹرپٹوفن کی دستیابی کو کم کرتا ہے، جس کے نتیجے میں 5-HT کی کمی ہوتی ہے (Agus et al.، 2018)۔ ہمارے پچھلے مطالعہ سے پتہ چلتا ہے کہ CT میں phenylethanoid glycosides(Cistanchetubulosa)عام طور پر کم جیو دستیابی کا استعمال کرتے ہیں، اور گٹ مائکرو بائیوٹا (Li et al.، 2016) کے ذریعے جلدی سے 3-hydroxyphenylpropionic acid (3-HPP) اور hydroxytyrosol (HT) میں میٹابولائز کیا جا سکتا ہے۔ اس کے علاوہ، CT(Cistanchetubulosa)CUMS چوہوں (Li et al. اس طرح کی تحقیق کی بنیاد پر، ہم نے اندازہ لگایا کہ فائٹو کیمیکلز اور گٹ مائیکرو بائیوٹا کا دو طرفہ تعامل CT کے مخصوص بایو ایکٹیو اجزاء کے اینٹی ڈپریسنٹ اثرات کو کنٹرول کر سکتا ہے۔(Cistanchetubulosa). خاص طور پر، مرکبات گٹ مائکرو بائیوٹا کے ذریعے معدے میں قابل جذب میٹابولائٹس (جیسے 3-HPP اور HT) میں تبدیل ہو سکتے ہیں، اور اس کے بعد، اینٹی ڈپریسنٹ اثرات مرتب کرتے ہیں۔ اس کے نتیجے میں، بایو ایکٹیو جزو کی حوصلہ افزائی گٹ مائیکرو بائیوٹا ساختی تبدیلیاں بیک وقت اینٹی ڈپریسنٹ سرگرمی میں اہم کردار ادا کر سکتی ہیں۔

اس کے ساتھ ساتھ اپنے مطالعے میں، ہم نے پولی سیکرائڈز، اولیگوساکرائیڈز، اور CT سے الگ کیے گئے متنوع گلائکوسائیڈز سے افزودہ فرکشنز کی اینٹی ڈپریسنٹ سرگرمیوں کا اندازہ لگانے کے لیے رویے سے متعلق مایوسی کے ٹیسٹ کا استعمال کیا۔(Cistanchetubulosa)پانی کا نچوڑ (CTE)، اور گٹ مائکرو بائیوٹا کے ذریعے مخصوص میٹابولائٹس (بشمول 3-HPP اور HT)، جس کی مزید تصدیق ہم نے ایک سے زیادہ فارماکوڈائنامکس اور بائیو کیمیکل تجزیہ کے ساتھ دائمی غیر متوقع ہلکے دباؤ (CUMS) ماڈل میں کی۔ اس کے بعد، ہم نے تفتیش کی کہ آیا ڈپریشن کے خلاف اس کا طریقہ کار فائٹو کیمیکلز اور گٹ مائکروبیٹا کے دو طرفہ تعامل سے متعلق تھا۔

مواد اور طریقے

مواد

کیمیائی تجزیہ کے لیے استعمال ہونے والے تمام معیارات ڈارسٹ (سیچوان، چین) سے خریدے گئے تھے۔ 3-HPP، HT، fluoxetine، اور imipramine علاء الدین (شنگھائی، چین) سے خریدے گئے تھے۔ بی سی اے پروٹین کی مقداری کٹ بوسٹر (ووہان، چین) سے خریدی گئی تھی۔ نانجنگ جیانچینگ (نانجنگ، چین) نے 5-HT، BDNF، ٹیومر نیکروسس فیکٹر الفا (TNF-)، انٹرلییوکن-1بیٹا (IL-1)، اور انٹرفیرون-گاما (IFN-) فراہم کیا ) انزائم سے منسلک امیونوسوربینٹ پرکھ (ELISA) کٹس۔ Corticosterone (CORT)، adrenocorticotropic ہارمون (ACTH)، اور corticotrophin-releasing hormone (CRH) ELISA کٹس ملٹی سائنسز (Hangzhou، China) سے خریدی گئیں۔ سائکلک اڈینوسین مونو فاسفیٹ (سی اے ایم پی)، سائکلک گوانوسین مونو فاسفیٹ (سی جی ایم پی)، ٹیسٹوسٹیرون (ٹی)، اور گوناڈوٹروپن جاری کرنے والے ہارمون (جی این آر ایچ) ایلیسا کٹس کو اینزائم سے منسلک بائیو ٹیکنالوجی (شنگھائی، چین) سے خریدا گیا تھا۔ Tryptophan اور kynurenine ELISA کٹس سمال مالیکیول اینٹی باڈیز (بورڈو، فرانس) سے حاصل کی گئیں۔ پرائمری/سیکنڈری اینٹی باڈیز بشمول زونولا occludens 1 (ZO-1)، indoleamine 2، 3-dioxygenase 1 (IDO1) -actin، اور HRP بکری اینٹی خرگوش IgG (H plus L) Proteintech سے خریدے گئے تھے۔ (ووہان، چین)۔ تجزیاتی گریڈ یا اعلی پاکیزگی کے دیگر تمام ریجنٹس تجارتی سپلائرز سے حاصل کیے گئے تھے۔

CTE سے الگ الگ مختلف حصوں کی تیاری(Cistanchetubulosa اقتباس)

سی ٹی(Cistanchetubulosa)نومبر 2015 میں ہیٹیان، سنکیانگ، چین میں جمع کیا گیا تھا، اور پروفیسر ژاؤبو لی نے تصدیق کی تھی۔ واؤچر کا نمونہ (20151108) شنگھائی جیاؤ ٹونگ یونیورسٹی کے اسکول آف فارمیسی میں جمع کرایا گیا تھا۔

CTE حاصل کرنے کے لیے پسے ہوئے نمونوں کو 80~90 ◦C پر 2 گھنٹے کے لیے آست پانی (1:10، w/v) کے ساتھ تین بار نکالا گیا۔(Cistanchetubulosa اقتباس)(پیداوار 57.1 فیصد تھی)۔ CTE کو آست پانی میں تحلیل کیا گیا اور پھر آہستہ آہستہ ایتھنول (1:4، v/v) کے ساتھ ہلایا گیا اور 24 گھنٹے کے لیے 4 ◦C پر رکھا گیا۔ اس کے بعد، 20 منٹ کے لیے 4000 rpm پر سنٹرفیوگریشن کے ذریعے precipitate اور supernatant کو جمع کیا گیا۔ کل پولی سیکرائڈز (TP؛ پیداوار 5.7 فیصد تھی) 80 فیصد ایتھنول کے ساتھ دھو کر، اور جمع شدہ پریزیٹیٹ سے تین بار Savage reagent کے ساتھ deproteinization کے ذریعے حاصل کی گئیں۔ باقی سپرنٹنٹ کو پھر D101 مائیکرو پورس رال کالم پر کرومیٹوگراف کیا گیا اور اسے ڈسٹل واٹر اور 40 فیصد ایتھنول سے نکالا گیا۔ آلودہ پانی اور 40 فیصد ایتھنول کے حصوں میں کل oligosaccharides (TO؛ پیداوار 35.1 فیصد تھی) اورکلglycosides(TG؛ پیداوار بالترتیب 12.1 فیصد تھی)۔ ٹی جی(کل گلائکوسائیڈز)مزید آست پانی اور 5 فیصد، 10 فیصد، اور 40 فیصد ایتھنول D101 مائیکرو پورس رال کے ذریعے دوبارہ نکالا گیا، اور 5 فیصد اور 40 فیصد ایتھنول کے ایلوٹڈ فریکشن کل iridoid glycosides تھے (TG-IrG؛ پیداوار 2.7 فیصد تھی اور) کل phenylethanoid glycosides (TG-PhG؛ پیداوار بالترتیب 8.7 فیصد تھی)۔

کیمیائی تجزیہ

سب سے پہلے، CTE سے الگ الگ مختلف حصوں کے اہم کیمیائی اجزاء(Cistanchetubulosa اقتباس)UPLC-QTOF-MS کی خصوصیت تھی۔ دوسرا، کل کاربوہائیڈریٹس اور گلائکوسائیڈز کے متعلقہ مواد کا تعین UV-Vis طریقہ سے کیا گیا تھا۔ تیسرا، اہم اجزاء (ایچناکوسائیڈ، ورباسکوسائیڈ، ورباسکوسائیڈ، 8- ایپیلوگینک ایسڈ، اور ٹینیپوسائیڈ ایسڈ) کو ایک توثیق شدہ HPLC طریقہ سے مقدار میں طے کیا گیا۔ تفصیلی پیرامیٹرز اور طریقہ کار کی توثیق کو ضمنی مواد میں دکھایا گیا ہے۔

جانوروں کے تجربات

جانوروں کے مخصوص تجرباتی نظام الاوقات تصویر 1 میں دکھائے گئے ہیں۔ تمام تجرباتی جانوروں کو شنگھائی جیاؤ ٹونگ یونیورسٹی (شنگھائی، چین) کے لیبارٹری اینیمل سنٹر میں تجربات سے 1 ہفتہ پہلے رکھا گیا تھا اور کمرے کے درجہ حرارت پر کنٹرول کیا گیا تھا (25 ± 2۔ ◦C؛ 55 ± 10 فیصد رشتہ دار نمی) 12:12 گھنٹے کے ہلکے تاریک چکر کے ساتھ۔ یہ تحقیق SJTU کے لیبارٹری جانوروں کی دیکھ بھال اور استعمال کے رہنما خطوط کے مطابق کی گئی تھی۔ جانوروں کی سہولیات اور پروٹوکول کو SJTU کی جانوروں کی اخلاقیات کمیٹی (نمبر A2019008) نے منظور کیا تھا۔

ایک سو پچاس نر ICR چوہے (وزن 18-20 گرام، 6 ہفتے پرانے) کو شنگھائی سلیک بائیو ٹیکنالوجی کمپنی (شنگھائی، چین) سے خریدا گیا اور تصادفی طور پر 10 گروپس (n=15/گروپ) میں تقسیم کیا گیا۔ ہر گروپ میں رویے سے متعلق مایوسی والے چوہوں کے لیے مضامین اور خوراکیں ٹیبل 1 میں دکھائی گئی ہیں۔ CTE کی خوراکیں(Cistanchetubulosa اقتباس) اور اس کے الگ کیے گئے حصوں کا حساب درج ذیل فارمولے سے کیا گیا: خوراک=4.55 g/kg.d.bw × پیداوار، جس کا تعین جسم کی سطح کے رقبے کی بنیاد پر تین انسانی مساوی خوراک کے حساب سے کیا گیا تھا۔ مثبت دوائی امیپرامین اور گٹ مائیکرو بائیوٹا میٹابولائٹس (3-HPP اور HT) کی خوراکیں پچھلے مطالعات کے مطابق ترتیب دی گئی تھیں (Gupte et al., 2016; Pablos et al., 2019)۔ 7 دنوں تک روزانہ ایک بار انٹرا گیسٹرک ایڈمنسٹریشن کے بعد، بالترتیب 8ویں، 9ویں اور 10ویں دن اوپن فیلڈ ٹیسٹ (OFT)، ٹیل سسپنشن ٹیسٹ (TST)، اور جبری سوئمنگ ٹیسٹ (FST) کیا گیا۔ رویے کے ٹیسٹ کے مخصوص طریقے ضمنی مواد میں بیان کیے گئے ہیں۔

شنگھائی سلیک لیبارٹری اینیمل کمپنی (شنگھائی، چین) سے 72 نر Sprague-Dawley چوہے (وزن 160–180 g، 6 ہفتے پرانے) خریدے گئے تھے۔ رسمی تجربات سے پہلے، تمام چوہوں کو متعلقہ تربیت کے بعد سوکروز ترجیحی ٹیسٹ (SPT) کا نشانہ بنایا گیا تھا۔ چوہوں کو ان کی سوکروز کی ترجیح کے مطابق 8 گروپس (n=9/گروپ) میں تقسیم کیا گیا تھا (ضمنی شکل S1)۔ ہر گروپ میں چوہوں کے لیے مضامین اور خوراکیں جدول 1 میں دکھائی گئی ہیں۔ خوراکیں ماؤس اور چوہوں کے درمیان تبادلوں کے گتانک کے مطابق ترتیب دی گئی تھیں جن کی بنیاد رویے سے متعلق مایوسی والے چوہوں میں ان کی مؤثر خوراک کی بنیاد پر کی گئی تھی۔ اور مثبت کنٹرول والی دوائی فلوکسیٹائن کی خوراک پچھلے مطالعہ (Hou et al.، 2017) کے مطابق تھی۔ کنٹرول گروپ کے علاوہ تمام گروپوں کو دائمی غیر متوقع ہلکے تناؤ (CUMS) کا ایک سلسلہ ملا۔ تناؤ کا اطلاق 4 ہفتوں تک مسلسل اور تصادفی طور پر کیا گیا تھا (تفصیلات کے لیے ضمنی جدول S1 دیکھیں)۔ کنٹرول چوہوں کے لیے خوراک اور پانی آزادانہ طور پر دستیاب تھے، جو رویے کے ٹیسٹ کے علاوہ کسی دوسرے کمرے میں بغیر کسی رکاوٹ کے رہے۔ مضامین کو 4 ہفتوں کے دوران CUMS طریقہ کار سے 1 گھنٹہ پہلے intragastrically کا انتظام کیا گیا تھا۔ 28 دنوں کے مسلسل تناؤ اور منشیات کی انتظامیہ کے بعد، OFT، SPT، اور FST بالترتیب 29، 31 اور 33 ویں دن انجام دیے گئے۔ رویے کے تجربات کے مخصوص طریقے ضمنی مواد میں دکھائے گئے ہیں۔

نمونہ جمع کرنا اور بائیو کیمیکل تجزیہ

رویے کے ٹیسٹ کے بعد، روزہ دار چوہوں کو پینٹوباربیٹل سوڈیم سے بے ہوشی کی گئی، اور سیرم کے نمونے حاصل کرنے کے لیے پورا خون جمع کیا گیا۔ نمکین کے ساتھ دل کے پرفیوژن کے بعد، ہپپوکیمپس، بڑی آنت، اور سیکل مواد کو جمع کرکے -80 ◦C میں محفوظ کیا گیا۔ ڈسٹل کالونک سیگمنٹس کو ہٹا دیا گیا اور 4 فیصد پیرافارمیلڈہائڈ میں طے کیا گیا۔ سیرم میں CORT، CRH، ACTH، TNF-، IL-1، IFN-، cAMP، cGMP، T، GnRH، ٹرپٹوفن، اور کینورینائن کی سطحیں، 5-HT، BDNF، اور TNF- ہپپوکیمپس میں، اور بڑی آنت میں TNF- اور IFN- کو متعلقہ ELISA کٹس کے ساتھ فراہم کردہ ہدایات کے مطابق ماپا گیا۔

ہسٹولوجی، امیونو ہسٹو کیمسٹری، اور ویسٹرن بلوٹنگ پرکھ

بڑی آنت کے بافتوں میں پیتھولوجیکل تبدیلیوں کا مشاہدہ کرنے کے لیے ہیماتوکسیلین اور eosin (H&E) اور Alcian blue-periodic acid-Schiff (AB-PAS) سٹیننگ کا استعمال کیا گیا تھا۔ اس کے علاوہ، نوآبادیاتی اپکلا خلیوں میں ZO-1 پروٹین کے اظہار کا مشاہدہ کرنے کے لیے ان حصوں کے امیونو ہسٹو کیمسٹری کے جائزے کیے گئے تھے (ڈنگ ایٹ ال۔، 2020)۔ بڑی آنت اور ہپپوکیمپس میں IDO1 پروٹین کے اظہار کا تعین کرنے کے لیے نمونے کی تیاری اور ویسٹرن بلوٹنگ پرکھ سے متعلق تفصیلات بھی ضمنی مواد میں بیان کی گئی ہیں۔

گٹ مائکرو بائیوٹا کا ساختی پروفائل تجزیہ

16S rRNA ہائی تھرو پٹ سیکوینسنگ میجر بائیو کمپنی لمیٹڈ (شنگھائی، چین) نے کی تھی اور تفصیلی طریقہ اور ڈیٹا پروسیسنگ کو ضمنی مواد میں دکھایا گیا ہے۔

شماریاتی تجزیہ

اعداد و شمار کو وسط (SEM) کی اوسط ± معیاری غلطی کے طور پر ظاہر کیا جاتا ہے۔ SPSS 200 سافٹ ویئر کا استعمال کرتے ہوئے متعدد گروپس کا موازنہ کرنے کے لیے تغیر (ANOVA) کا یک طرفہ تجزیہ استعمال کیا گیا۔ p <0.05 پر="" ایک="" فرق="" کو="" اہم="" سمجھا="" جاتا="" تھا۔="" گٹ="" جرثوموں="" اور="" بعض="" ڈپریشن="" سے="" متعلقہ="" جسمانی="" عوامل="" کے="" درمیان="" ارتباط="" کا="" تجزیہ="" ہیٹ="" میپ="" کے="" تجزیہ="" کی="" بنیاد="" پر="" سپیئر="" مین="" کے="" ارتباط="" کے="" گتانک="" کا="" استعمال="" کرتے="" ہوئے="" کیا="">

نتائج

CTE سے الگ الگ مختلف حصوں کا کیمیائی تجزیہ(Cistanchetubulosa اقتباس)

بنیادی اجزاء کو UPLC-QTOF-MS (ضمنی جدول S2 اور Fig. S2) کا استعمال کرتے ہوئے خصوصیت دی گئی تھی، اور کل 21 اجزاء کی نشاندہی کی گئی تھی، جن میں phenylethanoid glycosides کے 16 اجزاء، CTE میں phenolic glycosides کے 2 اجزاء شامل تھے۔(Cistanchetubulosa اقتباس)، TG، اور TG-PhG؛ اور CTE میں iridoid glycosides کے 3 اجزاء(Cistanchetubulosa اقتباس)، TG، اور TG-IrG۔ مجموعی طور پر، TP اور TO میں کل کاربوہائیڈریٹ کے متعلقہ مواد بالترتیب 60.3 فیصد اور 80.8 فیصد تھے۔ کے متعلقہ موادکلglycosidesٹی جی میں 87.7 فیصد تھے۔ اسی کے مطابق، فینی لیتھانائیڈ اور ایریڈائڈ گلائکوسائیڈز بالترتیب TG-PhG اور TG-IrG کا 53.4 فیصد 86.7 فیصد ہیں۔ echinacoside، verbascoside کے مشمولات verbascoside، 8- epiloganic acid، اور teniposide acid ہر ایک حصے میں جدول 2 میں دکھایا گیا ہے، اور HPLC کرومیٹوگرام اور طریقہ کی توثیق کا ڈیٹا ضمنی جدول S3 اور تصویر S3 میں درج ہے۔

CTE سے الگ الگ مختلف حصوں کے اثرات(Cistanchetubulosa اقتباس)اور چوہوں میں رویے سے متعلق مایوسی کے ٹیسٹ پر گٹ مائکرو بائیوٹا کے ذریعے مخصوص میٹابولائٹس

جیسا کہ تصویر 2 میں دکھایا گیا ہے، کنٹرول گروپ کے مقابلے میں، 7 دنوں کے امیپرمائن (مثبت کنٹرول) انتظامیہ کا نشانہ بننے والے چوہوں نے FST اور TST دونوں میں حرکت پذیری کے اوقات میں نمایاں کمی ظاہر کی اور OFT میں طے کیے گئے کل فاصلے پر کوئی خاص اثر نہیں دکھایا۔ . اسی طرح کی تبدیلیاں CTE میں بھی دیکھی گئیں۔(Cistanchetubulosa اقتباس)، TG، اور HT گروپس، جو اس بات کی نشاندہی کرتے ہیں کہ CTE، TG(کل گلائکوسائیڈز)، اور HT نے اینٹی ڈپریسنٹ سرگرمی کا استعمال کیا اور اثرات جوش سے متعلق نہیں تھے۔ لہذا، TG(کل گلائکوسائیڈز)اور HT بالترتیب گٹ مائکرو بائیوٹا کے ذریعہ CTE اور عام میٹابولائٹس سے الگ ہونے والا غالب بایو ایکٹیو حصہ تھا۔ دلچسپ بات یہ ہے کہ کنٹرولز کے مقابلے TG-PhG اور TG-IrG انتظامیہ کے بعد، یا TG-PhG ایڈمنسٹریشن کے بعد TST میں FST میں حرکت پذیری کے اوقات میں کوئی خاص تبدیلی نہیں دکھائی گئی، جس سے ظاہر ہوتا ہے کہ phenylethanoid اور iridoid glycosides کی موجودگی ہو سکتی ہے۔ CTE کی antidepressant سرگرمی میں ضروری ہو۔

CUMS چوہوں پر مختلف گلائکوسائیڈ افزودہ فرکشنز اور HT کے فارماکوڈینامک اثرات اور حیاتیاتی کیمیائی تبدیلیاں

جیسا کہ جدول 3 میں دکھایا گیا ہے، CUMS پیراڈائم کے 28 دنوں کے تابع چوہوں نے SPT میں سوکروز کی ترجیح میں نمایاں کمی (p < 0001)="" ظاہر="" کی،="" کل="" فاصلہ="" طے="" کیا،="" اور="" oft="" میں="" پالنے="" کی="" تعداد،="" نیز="" کنٹرولز="" کے="" مقابلے="" fst="" میں="" کل="" عدم="" استحکام="" کے="" وقت="" میں="" نمایاں="" اضافہ="" (p=""><0.01)، جو="" کہ="" cums="" چوہوں="" میں="" ڈپریشن="" جیسے="" فینوٹائپس="" کو="" شامل="" کرنے="" کی="" تجویز="" کرتا="" ہے۔="" flx="" (مثبت="" کنٹرول)="" گروپ="" میں="" افسردہ="" کارکردگی="" کو="" الٹ="" دیا="" گیا۔="" اسی="" طرح،="" cte،="" tg،="" tg-phg،="" tg-irg،="" اور="" ht="" علاج="" کے="" نتیجے="" میں="" cums="" چوہوں="" میں="" سوکروز="" کی="" ترجیح="" کو="" معمول="" کی="" سطح="" پر="" بحال="" کیا="" گیا،="" جو="" 102.7="" فیصد،="" 94.1="" فیصد،="" 89.8="" فیصد،="" 91.9="" فیصد،="" اور="" 94.3="" فیصد="" تھے۔="" بالترتیب="" کنٹرول="" کرتا="" ہے۔="" fst="" میں="" مستقل="" طور="" پر،="" cte="" اور="" tg="" گروپوں="" نے="" سب="" سے="" زیادہ="" واضح="" اثرات="" دکھائے،="" اور="" کنٹرول="" گروپ="" کے="" غیر="" متحرک="" اوقات="" بالترتیب="" 103.3="" فیصد="" اور="" 93.4="" فیصد="" تک="" پہنچ="" گئے،="" جب="" کہ="" tg-phg،="" tg-irg،="" اور="" ht="" گروپوں="" کے="" عدم="" استحکام="" کے="" اوقات۔="" صرف="" 62.1="" فیصد،="" 73.2="" فیصد،="" اور="" کنٹرول="" گروپ="" کے="" 69.9="" فیصد="" تک="" پہنچ="" گئے۔="" اسی="" طرح="" کے="" نمایاں="" اضافہ="" (p=""><0.05) cte="" کے="" بعد="" oft="" میں="" طے="" شدہ="" کل="" فاصلہ="" اور="" پالنے="" کی="" تعداد="" میں="" دیکھا="">(Cistanchetubulosa اقتباس)، TG، اور HT انتظامیہ، اور TG-PhG اور TG-IrG کے علاج کا رجحان CUMS چوہوں میں پالنے کی تعداد پر نظر ثانی کی طرف ہے۔ نتائج نے اشارہ کیا کہ TG غالب بایو ایکٹیو اینٹی ڈپریسنٹ حصہ تھا جو CTE سے الگ تھا، اور phenylethanoid اور iridoid glycosides اس کے antidepressant اثر کو بڑھانے میں ناگزیر تھے۔ مزید یہ کہ ایچ ٹی کو Vivo میں TG کے فعال میٹابولائٹس میں سے ایک ہونے کا مظاہرہ کیا گیا تھا۔

مستقل طور پر، CUMS میں مبتلا ہونے سے CORT، CRF، ACTH، TNF-، IL-1، اور IFN- کی سطح میں سیرم اور TNF- کی سطح میں چوہوں کے ہپپوکیمپس میں کنٹرول گروپ کے مقابلے میں نمایاں اضافہ ہوا (p< 0.05),="" resulting="" in="" significant="" reductions="" (p="" <="" 0.05)="" in="" the="" levels="" of="" hippocampal="" 5-ht="" and="" bdnf="" (fig.="" 3).="" except="" for="" a="" non-significant="" difference="" in="" the="" level="" of="" hippocampal="" bdnf="" between="" flx="" and="" cums="" groups,="" the="" above-mentioned="" alterations="" in="" cums="" rats="" could="" be="" significantly="" reversed="" (p="" <="" 0.05)="" after="" administration="" of="" fluoxetine,="" cte="">(Cistanchetubulosa اقتباس)، TG، اور HT، یہ بتاتا ہے کہ CTE، TG(کل گلائکوسائیڈز)، اور HT نے HPA محور کی ہائپر ایکٹیویشن، شدید پردیی اور اعصابی سوزش، اور {{0}}HT اور BDNF میں کمیوں پر بہتر اثرات دکھائے۔ اسی طرح، TG-IrG اور TG PhG علاج نے سیرم CORT، TNF-، IFN-، اور hippocampal TNF- کی سطح کو نمایاں طور پر کم کیا، اور CUMS چوہوں میں ہپپوکیمپل 5-HT کی سطح میں اضافہ کیا (p < {{8}="" }۔{14}}5)۔="" cums="" گروپ="" کے="" مقابلے="" tg-irg="" گروپ="" میں="" سیرم="" crf="" اور="" acth="" کی="" سطحوں="" میں="" نمایاں="" کمی="" (p="">< 0.05)="" بھی="" دیکھی="" گئی۔="" دلچسپ="" بات="" یہ="" ہے="" کہ="" tg-phg="" اور="" tg-irg="" گروپس="" میں="" سیرم="" cort،="" tnf-،="" acth،="" اور="" crf="" کی="" سطحیں="" tg="" گروپ="" (p=""><0.05) کے="" مقابلے="" میں="" نمایاں="" طور="" پر="" زیادہ="" تھیں،="" اور="" ہپپوکیمپل="" 5-ht="" کی="" سطح="" اور="" bdnf="" نے="" مخالف="" اظہار="" پیٹرن="" (p=""><0.05) کی="" نمائش="" کی۔="" ان="" نتائج="" نے="" ظاہر="" کیا="" کہ="" hpa="" محور="" کی="" ہائپر="" ایکٹیویٹی="" پر="" tg-phg="" اور="" tg-irg="" کے="" اثرات،="" پردیی="" اور="" اعصابی="" سوزش،="" اور="" 5-ht="" کی="" کمی="" واضح="" طور="" پر="" tg="" سے="" کمتر="" تھی،="" جس="" سے="" ظاہر="" ہوتا="" ہے="" کہ="" phenylethanoid="" اور="" iridoid="" glycosides="" کا="" استعمال="" ہو="" سکتا="" ہے۔="" مذکورہ="" بالا="" متعدد="" پہلوؤں="" پر="" ہم="" آہنگی="" کے="">

TG اور HT CUMS چوہوں میں HPG محور اور سائکلک نیوکلیوٹائڈ میٹابولزم کو منظم کرتے ہیں۔

ٹی، جی این آر ایچ، سی اے ایم پی، اور سی جی ایم پی کی سطح اور سی اے ایم پی اور سی جی ایم پی (سی اے ایم پی/ سی جی ایم پی) کے تناسب کو CUMS سے مشروط سیرم میں ماپا گیا، اور نتائج ٹیبل 4 میں دکھائے گئے ہیں۔ T، GnRH، cAMP، اور سیرم میں CAMP/cGMP میں نمایاں کمی واقع ہوئی تھی، اور کنٹرولز کے مقابلے CUMS گروپ میں cGMP کی سطح میں نمایاں اضافہ ہوا تھا (p < 0.05)،="" جس="" سے="" یہ="" ظاہر="" ہوتا="" ہے="" کہ="" cums="" کا="" نشانہ="" بننے="" کے="" نتیجے="" میں="" hpg="" محور="" کو="" دبانا="" پڑا۔="" اور="" سائکلک="" نیوکلیوٹائڈ="" میٹابولزم="" کی="" خرابی="" cums="" گروپ="" کے="" مقابلے="" میں،="" flx="" گروپ="" میں="" کوئی="" خاص="" تبدیلیاں="" نہیں="" ہوئیں۔="" حیرت="" انگیز="" طور="" پر،="" tg="" کے="">(کل گلائکوسائیڈز)اور ایچ ٹی کے علاج میں، سیرم T، GnRH، cAMP، اور cAMP/cGMP کی سطحوں میں نمایاں اضافہ (p < {{0}}.05)="" ظاہر="" کیا="" گیا="" تھا،="" جبکہ="" سیرم="" cgmp="" کی="" سطح="" کو="" نمایاں="" طور="" پر="" کم="" کیا="" گیا="" تھا="" (p=""><0.05)۔ ان="" نتائج="" نے="" اشارہ="" کیا="" کہ="">(کل گلائکوسائیڈز)اور HT نے HPG محور اور سائکلک نیوکلیوٹائڈ میٹابولزم کو منظم کیا، جو فلوکسٹیٹین کے مثبت کنٹرول سے واضح طور پر برتر تھا۔

ٹی جی اور ایچ ٹی بڑی آنت میں کم درجے کی سوزش کو کم کرتے ہیں اور CUMS چوہوں میں آنتوں کی رکاوٹ

نوآبادیاتی مورفولوجیکل نقصان کا اندازہ لگانے کے لیے H&E سٹیننگ کا استعمال کیا گیا تھا، اور تجرباتی گروپس (تصویر 4a) کے درمیان بڑی آنت میں کوئی خاص فرق نہیں دیکھا گیا۔ مزید برآں، بڑی آنت میں سوزش اور آنتوں میں رکاوٹ پر TG اور HT کے اثرات کا بھی تجزیہ کیا گیا (تصویر 4b-d)۔ کنٹرول گروپ کے افراد کے مقابلے میں، CUMS گروپ میں گوبلٹ سیلز کی تعداد اور بلغم کی پرت کی موٹائی کو کم کیا گیا تھا۔ مستقل طور پر، ZO-1 کے پروٹین ایکسپریشن، اور بڑی آنت میں IFN- اور TNF- کی سطحوں میں نمایاں کمی واقع ہوئی تھی (p < 0.05)="" اور="" بڑھ="" گئی="" تھی="" (p=""><0.05 )،="" بالترتیب،="" یہ="" تجویز="" کرتا="" ہے="" کہ="" اگرچہ="" کوئی="" واضح="" ہسٹولوجیکل="" نقصان="" نہیں="" پہنچا="" تھا،="" لیکن="" cums="" کا="" نشانہ="" بننے="" کے="" نتیجے="" میں="" بڑی="" آنت="" اور="" آنتوں="" کی="" رکاوٹ="" میں="" کم="" درجے="" کی="" سوزش="" ہوتی="" ہے۔="" fluoxetine="" کے="" بعد،="">(کل گلائکوسائیڈز), اور HT علاج، گوبلٹ سیلز کی تعداد اور بلغم کی پرت کی موٹائی میں اضافہ کیا گیا، اور کالونک IFN- اور TNF- کی سطحوں کو نمایاں طور پر کم کیا گیا (p < 0۔{4}}5)۔="" اس="" کے="" علاوہ،="" tg="" اور="" ht="" نے="" zo-1="" کے="" پروٹین="" ایکسپریشن="" میں="" نمایاں="" اضافہ="" کیا="" (p=""><0.05) کنٹرول="" گروپ="" کی="" طرح="" کی="" سطح="" تک۔="" ان="" نتائج="" سے="" پتہ="" چلتا="" ہے="" کہ="">(کل گلائکوسائیڈز)اور HT بڑی آنت میں کم درجے کی سوزش اور CUMS چوہوں میں آنتوں کی رکاوٹ کو دور کر سکتا ہے۔

گٹ مائکرو بائیوٹا کمپوزیشن پر ٹی جی اور ایچ ٹی کے اثرات

نااہل ترتیبوں کو ہٹانے کے بعد، کل 1,874,721 مؤثر ریڈز حاصل کیے گئے۔ الفا تنوع (تصویر 5a) اور بیٹا تنوع (تصویر 5b) کے نتائج سے ظاہر ہوتا ہے کہ اگرچہ سیکل مواد میں گٹ مائکرو بائیوٹا کی بھرپوریت (چاو) اور تنوع (شینن) میں فرق نہیں تھا، لیکن گٹ مائکروبیوٹا کی مجموعی ساخت پرنسپل کوآرڈینیٹ تجزیہ (PCoA) پلاٹ نے کنٹرول اور CUMS گروپوں کے درمیان نمایاں فرق کی نشاندہی کی۔ اس کے علاوہ، TG(کل گلائکوسائیڈز)اور ایچ ٹی کے علاج نے CUMS چوہوں کی بیکٹیریائی کثرت کو نمایاں طور پر بڑھایا اور CUMS چوہوں کے مقابلے میں PcoA پلاٹ میں نمایاں فرق پیدا کیا، جو کنٹرولز کے ساتھ واضح مماثلت دکھاتے ہیں، خاص طور پر جب TG(کل گلائکوسائیڈز)پرکھا گیا تھا.

مائکرو بائیوٹا میں ٹیکسونومک تبدیلیوں نے مزید تصدیق کی کہ ٹی جی(کل گلائکوسائیڈز)گٹ مائکرو بائیوٹا کی ساخت پر ڈرامائی ریگولیٹری اثر ڈالا۔ ٹی جی کے بعد(کل گلائکوسائیڈز)انتظامیہ کے مطابق، CUMS چوہوں میں زیادہ تر تبدیل شدہ ٹیکسا کی کثرت کو کنٹرول گروپ کی طرح کی سطح پر تبدیل کر دیا گیا تھا۔ نمایاں کمی (14.2 فیصد، p < 0.05)="" اور="" افزودگی="" (53.6="" فیصد،="">< 0.05)="" in="" the="" abundances="" of="" the="" phylum="" firmicutes="" and="" bacteroidetes="" were="" observed="" in="" the="" tg="">(کل گلائکوسائیڈز)بالترتیب CUMS گروپ (تصویر 5c) کے مقابلے میں گروپ۔ مستقل طور پر، خاندانی سطح پر (ضمنی جدول S4)، TG نے CUMS گروپ کے مقابلے میں Ruminococcaceae (phylum Firmicutes) اور Peptococcaceae (phylum Firmicutes) کی کثرت میں بالترتیب 33.9 فیصد اور 82.9 فیصد کمی کی۔ {{10}}5)۔ اس کے برعکس، خاندان Erysipelotrichaceae (phylum Firmicutes، 78.4 فیصد، p <0.05) اور="" muribaculaceae="" (phylum="" bacteroidetes،="" 77.3="" فیصد،="" p=""><0.05) کی="" کثرت="" میں="" اہم="" افزودگی="" tg="" گروپ="" میں="" موجود="" تھی۔="" جینس="" کی="" سطح="" (تصویر="" 5d)="" پر="" مستقل="" طور="" پر،="" anaerotruncus،="" harryflintia،="" ruminiclostri="" dium_9،="" غیر="" درجہ="" بند_f_ruminococcaceae="" (خاندان="" کے="" rumino-coccaceae="" کے="" ارکان)،="" اور="" peptococcus="" (فیملی="" peptococcaceae="" کا="" ایک="" رکن)="" نمایاں="" طور="" پر="" کم="" ہوا="" تھا="" جبکہ="" norank_f_erysipelotrichaceae،="" allo="" baculum،="" dubosiella="" (erysipelotrichaceae="" خاندان="" کے="" ارکان)="" اور="" norank_f{{24}="" muribaculaceae="" (فیملی="" muribaculaceae="" کا="" ایک="" رکن)="" نے="" tg="" گروپ="" میں="" cums="" گروپ="" کے="" مقابلے="" زیادہ="" کثرت="" ظاہر="" کی="">< 0.05).="" in="" addition,="" tg="" decreased="" the="" abundances="" of="" tyzzerella_3,="" acetatifactor,="" and="" norank_f_lachnospiraceae="" assigned="" to="" the="" family="" lachnospiraceae="" (p="" <="" 0.05),="" although="" the="" abundance="" of="" the="" family="" lachnospiraceae="" was="" similar="" across="" all="" experimental="" groups.="" unlike="" tg,="" ht="" decreased="" the="" abundances="" of="" partially="" altered="" taxa="" induced="" by="" cums,="" including="" the="" family="" ruminococcaceae,="" 3="" genera="" (anaerotruncus,="" harryflintia,="" and="" ruminiclostridium_9)="" assigned="" to="" the="" family="" ruminococcaceae="" and="" 2="" genera="" (tyzzerella_3,="" acetatifactor)="" assigned="" to="" the="" family="" lachnospiraceae.="" additionally,="" converse="" variations="" were="" observed="" in="" the="" abundances="" of="" ruminococcaceae_ucg_013="" and="" streptococcus="" in="" the="" ht="" group.="" these="" results="" indicated="" that="" tg="" and="" ht="" exerted="" clear="" differences="" in="" the="" regulation="" of="" gut="" microbiota="" composition,="" and="" the="" effect="" of="" tg="" was="" superior="" to="" that="" of="" tg="" especially="" in="" altering="" the="" genera="" assigned="" to="" the="" family="" erysipelotrichaceae,="" peptococcaceae,="" and="">

TG سے متاثر تبدیل شدہ مائکروبیل جنیرا کا ارتباطی تجزیہ(کل گلائکوسائیڈز)اور HT، HPA محور سے متعلق ہارمونز، پرو سوزش والی سائٹوکائنز، 5-HT، اور BDNF

ٹی جی سے متاثر گٹ مائکرو بائیوٹا کمپوزیشن میں تبدیلیوں کے درمیان وابستگیوں کو واضح کرنے کے لیے(کل گلائکوسائیڈز)اور ایچ ٹی، اور ڈپریشن سے متعلقہ خصائص، سپیئر مین کے ارتباط کا تجزیہ کیا گیا۔ جیسا کہ تصویر 6 میں دکھایا گیا ہے، ہپپوکیمپس میں 5-HT اور BDNF کی سطحیں صرف نمایاں طور پر norank_f_Muribaculaceae کے ساتھ منسلک تھیں۔ دوسری صورت میں، تبدیل شدہ مائکروبیل جینرا اور HPA محور سے متعلق ہارمونز کے درمیان واضح ارتباط کی نشاندہی کی جا سکتی ہے۔ خاص طور پر، Dubosiella، norank_f_Muribaculaceae، norank_f_ Erysipelotrichacea، اور Peptococcus مضبوطی سے HPA محور کے فعل سے متعلق تھے۔ سیرم CORT، CRF، اور ACTH کا Dubosiella، norank_f_Muribaculaceae، اور norank_f_Erysipelotrichacea، اور Peptococcus کے ساتھ مثبت تعلق تھا۔ مزید برآں، Dubosiella اور norank_f_ Erysipelotrichacea نے colonic IFN- اور hippocampal TNF- کے ساتھ منفی تعلق ظاہر کیا، جبکہ اسی طرح کے تعلقات Allobaculum، Harryfinita، اور سیرم اور ہپپوکیمپل TNF میں موجود تھے، ساتھ ساتھ _f_Lachnospiracea، اور سیرم IFN- اور TNF-۔ اس کے برعکس، Peptococcus مثبت طور پر کالونک TNF- اور سیرم TNF- سے وابستہ تھا۔ اسی طرح، norank_f_Muribaculaceae کا سیرم IFN- اور TNF- سے مثبت تعلق تھا۔ ان نتائج نے اشارہ کیا کہ تبدیل شدہ مائکروبیل جنیرا، خاص طور پر خاندان سے تعلق رکھنے والی کچھ نسلیں Erysipelotrichaceae، Peptococcaceae، اور Muribaculaceae، جو خاص طور پر TG سے متاثر تھیں، نے HPA کے محور سے متعلق ہارمونز اور سوزش کے حامی سائٹوکائنز کے ساتھ مضبوط وابستگی ظاہر کی۔ HPA محور کے فنکشن اور سوزش کو ریگولیٹ کرنے میں گٹ مائکرو بائیوٹا کا۔

ٹی جی(کل گلائکوسائیڈز)اور HT CUMS چوہوں میں tryptophan-kynurenine میٹابولزم کو روکتا ہے۔

ٹی جی کے اثرات(کل گلائکوسائیڈز)اور چوہوں کے سیرم میں ٹرپٹوفن اور کینورینائن کی سطح پر ایچ ٹی کے ساتھ ساتھ بڑی آنت اور ہپپوکیمپس میں IDO1 کے اظہار کا تعین کیا گیا تھا۔ جیسا کہ تصویر 7 اور تصویر 8 میں دکھایا گیا ہے، کنٹرول گروپ کے مقابلے میں، سیرم میں ٹرپٹوفن کی سطح CUMS گروپ میں نمایاں طور پر کم ہوئی تھی، اس کے برعکس کینورینائن کی بڑھتی ہوئی سطح اور کینورینائن سے ٹریپٹوفن تناسب (Kyn /Trp) اور بڑی آنت اور ہپپوکیمپس میں IDO1 پروٹین کا اظہار۔ CUMS گروپ کے مقابلے میں، FLX گروپ میں سیرم Kyn/Trp نمایاں طور پر کم ہو گیا تھا (p< 0.05).="" tg="">(کل گلائکوسائیڈز)اور HT علاج کے نتیجے میں CUMS چوہوں میں سیرم ٹرپٹوفن کی سطح میں نمایاں اضافہ ہوا (p < {{0}}۔{5}}5)،="" اور="" سیرم="" کینورینائن="" اور="" kyn/trp="" کی="" سطح="" میں="" کمی="" (p=""><0.05)۔ اس="" کے="" علاوہ،="" tg="" نے="" cums="" چوہوں="" (p=""><0.05) کی="" بڑی="" آنت="" میں="" ido1="" پروٹین="" کے="" اظہار="" کو="" نمایاں="" طور="" پر="" روکا،="" جبکہ="" ہپپوکیمپس="" میں="" ido1="" پروٹین="" کے="" اظہار="" میں="" ایک="" غیر="" اہم="" فرق="" cums="" اور="" tg="" گروپوں="" کے="" درمیان="" دیکھا="" گیا۔="" تاہم،="" بڑی="" آنت="" اور="" ہپپوکیمپس="" میں="" ido1="" پروٹین="" کے="" اظہار="" پر="" ht="" کا="" اثر="" tg="" کے="" برعکس="" تھا،="" جس="" سے="" یہ="" ظاہر="" ہوتا="" ہے="" کہ="" tg="" اور="" ht="" نے="" بالترتیب="" cums="" چوہوں="" کی="" بڑی="" آنت="" اور="" ہپپوکیمپس="" میں="" ido1="" کے="" اظہار="" کو="" کم="" کر="" کے="" ٹرپٹوفن="" کینورینائن="" میٹابولزم="" کو="" روکا="" ہے۔="">

بحث

اس مطالعہ میں، دو مختلف جانوروں کے ماڈلز کو CT میں بائیو ایکٹیو مرکبات کی اسکریننگ کے لیے استعمال کیا گیا تھا۔(Cistanchetubulosa)جو پہلی بار ڈپریشن جیسے طرز عمل کو کم کرتا ہے۔ TP اور TO ممکنہ طور پر CTE میں غیر موثر اجزاء تھے، جبکہ TG(کل گلائکوسائیڈز)ڈپریشن کے علاج میں سب سے زیادہ صلاحیت کا مظاہرہ کیا۔ CT پر پچھلے مطالعات(Cistanchetubulosa)، اس کے ساتھ ساتھCistancheپودوں نے، زیادہ تر سب سے زیادہ مواد کے ساتھ phenylethanoid glycosides کی حیاتیاتی سرگرمیوں پر توجہ مرکوز کی ہے اور iridoid glycosides اور دیگر کم وافر اجزاء کی اہمیت کو نظر انداز کیا ہے۔ دلچسپ بات یہ ہے کہ ہمارے مطالعے سے پتہ چلتا ہے کہ فینی لیتھانائیڈ اور ایریڈائڈ گلائکوسائیڈز نے HPA محور کی ہائپر ایکٹیویٹی، شدید پردیی اور عصبی سوزش، اور ہپپوکیمپل 5-HT اور BDNF میں کمیوں پر ہم آہنگی کے اثرات دکھائے، جو فائدہ مند اینٹی ڈپریس کی اہم وجہ ہو سکتی ہے۔ ٹی جی کا اثر(کل گلائکوسائیڈز). یہ نتائج مزید جڑی بوٹیوں کی دوائیوں کی کثیر اجزاء اور کثیر اہدافی خصوصیات کی تجویز کرتے ہیں اور ہمیں یاد دلاتے ہیں کہ نچلی سطح کے اجزاء حتیٰ کہ ٹریس اجزاء بھی فارماسولوجیکل اثرات میں کلیدی کردار ادا کر سکتے ہیں۔

دائمی تناؤ HPA محور کی ہائپر ایکٹیویٹی کو اکساتا ہے، جو ڈپریشن کے آغاز کو فروغ دیتا ہے، ساتھ ہی GnRH کی کمی اور/یا پٹیوٹری حساسیت GnRH (Kirby et al.، 2009) کے ذریعے HPG محور کو دباتا ہے۔ دریں اثنا، cAMP اور cGMP اہم درمیانی مرکز ہیں جو اپنے جسمانی اثرات کو بروئے کار لانے کے لیے بہت سے نیورو ٹرانسمیٹر اور ہارمونز پر انحصار کرتے ہیں (Siawrys et al.، 2002)۔ حالیہ مطالعات نے مستقل طور پر دکھایا ہے کہ گردے یانگ کی کمی کی موجودگی کا گہرا تعلق ہائپوتھیلمس-پٹیوٹری-ٹارگٹ گلینڈ ایکسس (Zhang et al.، 2019) کی خرابی سے ہے۔ گردے یانگ کی کمی کے سنڈروم میں، سیرم سی اے ایم پی اور سی اے ایم پی/سی جی ایم پی کی سطح میں نمایاں کمی بھی دیکھی گئی ہے۔ اس مطالعہ میں، ہم نے پایا کہ TG(کل گلائکوسائیڈز)سیرم CORT، CRF، اور ACTH کی سطح کو روک سکتا ہے، اور CUMS چوہوں میں سیرم T اور GnRH کے مواد کو بڑھا سکتا ہے، جو TG انتظامیہ کے بعد HPA اور HPG محور کی خرابی کی بحالی کی نشاندہی کرتا ہے۔ اس کے علاوہ، TG(کل گلائکوسائیڈز)CUMS کا نشانہ بننے والے چوہوں میں سیرم cAMP/cGMP کی سطح میں نمایاں کمی کو تبدیل کر دیا۔ اس طرح، CT کا ممکنہ بنیادی میکانزم(Cistanchetubulosa) ڈپریشن اور گردے یانگ کی کمی کے علاج میں جزوی طور پر مماثلت ہوسکتی ہے اور مزید دریافت کرنے کے لائق ہے۔ مزید یہ کہ جنسی خواہش اور طرز عمل کی پیداوار ایک پیچیدہ اعصابی اضطراری عمل ہے۔ جنسی ہارمون مرکزی جنسی جوش کے بڑے ذرائع ہیں اور جنسی ہارمونز کی کمی جنسی خواہش یا جنسی کمزوری کا سبب بن سکتی ہے (Holloway and Wylie, 2015)۔ خاص طور پر، ضرورت سے زیادہ 5-HT GnRH کے اخراج کو روکتا ہے، جو SSRIs کے ساتھ طویل مدتی علاج کے بعد دائمی جنسی کمزوری کے ہونے کی ایک غالب وجہ ہے (پرساد ایٹ ال۔، 2015)۔ ہمارے مطالعے میں، فلوکسٹیٹین (SSRIs کا نمائندہ) HPG محور کی خرابی میں غیر موثر تھا۔ تاہم، اگرچہ TG(کل گلائکوسائیڈز)ہپپوکیمپس میں 5-HT کی سطح کو نمایاں طور پر بہتر بنایا، سیرم T اور GnRH کی سطحوں میں بھی اسی طرح کی تبدیلیاں دیکھی گئیں، اس طرح HPG محور کے دباو کو بہتر بنایا گیا۔ یہ نتائج CT کے الگ فائدے کو ظاہر کرتے ہیں۔(Cistanchetubulosa) ڈپریشن کے علاج میں، اور ان اثرات کے لیے ذمہ دار اندرونی میکانزم کا مزید مطالعہ کرنے کی ضرورت ہے۔

بڑھتے ہوئے شواہد سے پتہ چلتا ہے کہ کم حیاتیاتی دستیابی کے ساتھ قدرتی مرکبات کا استعمال کرتے ہوئے دائمی بیماریوں کے علاج کے لیے گٹ ایک ممکنہ ہدف ہے (Zhou et al., 2020)۔ حالیہ تحقیق (Wei et al., 2019) نے اشارہ کیا ہے کہ CUMS کا علاج fecal microbiome میں تبدیلی اور آنتوں میں رکاوٹ پیدا کرتا ہے، جو بڑی آنت کے میوکوسا میں بیکٹیریا کے حملے کو آسان بناتا ہے اور بڑی آنت میں اشتعال انگیز ردعمل کو بڑھاتا ہے۔ اس رپورٹ سے مطابقت رکھتے ہوئے، ہمارے نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ CUMS کی نمائش کے 4 ہفتوں نے چوہے کی بڑی آنت میں گوبلٹ سیل نمبر اور بلغم کی پرت کی موٹائی کی ایک وسیع کمی کی حوصلہ افزائی کی، ساتھ ہی ساتھ آنتوں میں رکاوٹ کی رکاوٹ کا آغاز بھی جس کی نمائندگی گٹ پارگمیتا میں اضافہ سے ہوتی ہے، جس کا تعین کیا گیا تھا۔ ZO-1 پروٹین کی پیمائش۔ اس کے علاوہ، بڑی آنت میں سوزش کے حامی عوامل (جیسے TNF- اور IFN-) کے بڑھتے ہوئے تاثرات دیکھے گئے۔ اس کے مطابق، ان نتائج نے اشارہ کیا کہ اگرچہ کوئی واضح ہسٹولوجیکل نقصان نہیں ہوا تھا، CUMS علاج نے بڑی آنت کی سوزش اور آنتوں کی رکاوٹ میں خلل شروع کیا۔ پچھلے مطالعات میں بتایا گیا ہے کہ CT نے چوہوں میں DSS-حوصلہ افزائی کولائٹس کو روکنے میں بہتر افادیت کا مظاہرہ کیا (Jia et al.، 2014)۔ متضاد، TG(کل گلائکوسائیڈز)CUMS چوہوں کی بڑی آنت میں کم درجے کی سوزش اور آنتوں کی رکاوٹ کو دور کرنے کے لیے بھی دکھایا گیا تھا، جو بڑی آنت کی سوزش سے متعلقہ بیماریوں کے طبی علاج کے لیے اس کی صلاحیت کو واضح کرتا ہے۔

وسیع مطالعات نے یہ بھی ثابت کیا ہے کہ کامنسل گٹ مائکرو بائیوٹا، HPA محور، اور سوزش کو جوڑنے والا تعلق پیچیدہ ہے اور ڈپریشن کی نشوونما میں اہم کردار ادا کرتا ہے (Misiak, et al., 2020)۔ گٹ مائکرو بائیوٹا کی ساخت میں تبدیلی سائٹوکائنز کی بہتر رہائی اور چھوٹے بائیو ایکٹیو مالیکیولز کی ترکیب میں حصہ ڈال سکتی ہے (Du et al., 2020)۔ بعض سائٹوکائنز (جیسے TNF-) خون کے دماغ کی رکاوٹ سے گزر سکتی ہیں اور HPA محور (Misiak et al., 2020) کے طاقتور متحرک ہیں۔ بدلے میں، HPA محور کی ہائپر ایکٹیویشن گٹ مائکرو بائیوٹا ڈیسبیوسس، بڑی آنت میں دائمی سوزش، اور آنتوں کی پارگمیتا کو تبدیل کر سکتی ہے (Misiak et al.، 2020)۔ سابقہ ​​مطالعات سے ہم آہنگ، گٹ مائیکرو بائیوٹا کی TG میڈیکیٹڈ ترمیم ڈپریشن پر اس کے بہتر اثرات کے لیے ممکنہ طور پر ذمہ دار ہے۔ ہم نے مشاہدہ کیا کہ TG(کل گلائکوسائیڈز)CUMS کے تابع چوہوں میں مختلف سطحوں پر مائکروبیل ٹیکا کی کثرت کو کنٹرولز کی طرح کی سطح پر تبدیل کر دیا۔ خاص طور پر، پیپٹوکوکاسائی، ایریسیپیلوٹریچاسی، اور مریباکولاسی خاندان سے تعلق رکھنے والے اہم تبدیل شدہ نسل کو ایچ پی اے کے محور اور سوزش کے ساتھ بہت زیادہ تعلق پایا گیا۔ ہمارے نتائج سے مطابقت رکھتے ہوئے، فیملی Peptococcaceae، Erysipelotrichaceae، اور Muribaculaceae کو بلغمی رکاوٹ کی سالمیت اور سوزش کی موجودگی کو برقرار رکھنے میں اہم کردار ادا کرنے کی اطلاع دی گئی ہے (کنکوش، 2015؛ بورٹن ایٹ ال۔، 2017؛ Zhang al2020)۔ لہذا، ہم نے قیاس کیا کہ TG خاندان Erysipelotrichacea، Peptococcaceae، اور Muribaculaceae کو تفویض کردہ کچھ نسلوں کی کثرت کو معتدل کر سکتا ہے، جو بعد میں بڑی آنت میں کم درجے کی سوزش، HPA محور کی ہائپر ایکٹیویٹی، اور muribaculacea کی رکاوٹ کو کم کر سکتا ہے۔ دلچسپ بات یہ ہے کہ ہمارے مطالعے میں، صرف ایک جینس کا نام نہ ہی ank_f_Muribaculaceae کا ہپپوکیمپس میں 5-HT اور BDNF کے ساتھ تعلق تھا۔ تعلقات کا مخصوص طریقہ کار ابھی تک واضح نہیں ہے اور اسے مزید جانچنے کی ضرورت ہے۔ دوسری صورت میں، نتائج یہ بھی بتاتے ہیں کہ TG کی وجہ سے تبدیل شدہ نسل کی اکثریت کے لیے ہپپوکیمپس میں 5-HT کی سطح کو براہ راست متاثر کرنا انتہائی مشکل ہے۔ یہ بتانے کے لیے کہ کس طرح گٹ مائیکرو بائیوٹا کمپوزیشن میں تبدیلیاں ہپپوکیمپل 5-ٹی جی کے علاج کے بعد ایچ ٹی کی سطح پر اثر انداز ہوتی ہیں، ٹرپٹوفن میٹابولزم، HPA محور، سوزش والی سائٹوکائنز، اور 5-HT سے جڑنے والے پیچیدہ تعلقات نے ہماری توجہ حاصل کی۔ ٹرپٹوفان انسانوں کے لیے ایک ضروری امینو ایسڈ ہے اور پروٹین کی ترکیب میں 1 فیصد سے کم استعمال ہوتا ہے، جس کی اکثریت (90 فیصد سے زیادہ) IDO1 اور ٹرپٹوفان 2،3-ڈائی آکسیجنیس 2 (TDO2) کے ذریعے کینورینائنز میں تبدیل ہوتی ہے، اور تقریباً 5 فیصد سیروٹونن پاتھ وے کے نیچے ٹرپٹوفن ہائیڈروکسیلیس (Duan, et al. 2018) کے ذریعے کارفرما ہے۔ دماغ میں 5-HT کی سطح زیادہ تر پیریفرل ٹرپٹوفن کی دستیابی پر منحصر ہے، بشرطیکہ ٹرپٹوفن کو نیوٹرل امینو ایسڈ ٹرانسپورٹرز (Duan et al.، 2018) کے ذریعے دماغ میں منتقل کیا جاتا ہے۔ IDO1، kynurenine پاتھ وے کے پہلے مرحلے میں شرح کو محدود کرنے والا انزائم، بنیادی طور پر IFN-، اور دیگر پرو سوزش والی سائٹوکائنز، جیسے IL-1 اور TNF- (کینیڈی ایٹ ال۔ جو ہمارے مطالعے میں گٹ مائکرو بائیوٹا سے وابستہ دکھائے گئے تھے۔ جیسا کہ رپورٹ کیا گیا ہے، زیادہ ٹرپٹوفن کائنورین پاتھ وے کے ذریعے میٹابولائز ہوتا ہے، اس طرح مسابقتی طور پر ٹرپٹوفن کی تبدیلی کو 5-HT میں کم کر دیتا ہے، اور عام طور پر ڈپریشن میں پائے جانے والے 5-HT سے جوڑتا ہے (O'Mahony et al., 2015)۔ اس طرح، کم ٹرپٹوفن لیول اور زیادہ Kyn/Trp عام ہیں اور ڈپریشن کے موڈ کے بڑھتے ہوئے خطرے کے ساتھ موافق ہیں۔ TG ایڈمنسٹریشن کے بعد، بڑی آنت میں IDO1 کے زیادہ اظہار کو روک دیا گیا، جس کے نتیجے میں سیرم ٹرپٹوفن کی سطح میں اضافہ ہوا اور سیرم Kyn/Trp میں کمی واقع ہوئی، جس سے گٹ مائکرو بائیوٹا اور ہپپوکیمپس 5-HT لیول کے درمیان ممکنہ تعلق کا انکشاف ہوا جو TG سے متاثر ہوا۔ دریں اثنا، BDNF، ایک نیوروٹروفین خاندان کا رکن، سیل کی تفریق، نیورونل بقا، Synapse کی تشکیل، اور افسردگی میں نیوروپلاسٹیٹی کے عمل کے لیے ضروری ہے (Greenberg et al.، 2009)۔ حالیہ مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ BDNF آنتوں کے میوکوسل بیریئر فنکشن اور گٹ مائکرو بائیوٹا (مقصود اور پتھر، 2016) کے ساتھ قریب سے وابستہ پایا گیا ہے۔ اس کے ساتھ ساتھ، گٹ مائکرو بائیوٹا میں ہونے والی تبدیلیوں میں BDNF اظہار کی سطح کو بڑھانے کی صلاحیت کے حامل ہونے کی اطلاع دی گئی ہے اور اس طرح ڈپریشن جیسے طرز عمل کی نشوونما کو متاثر کرتی ہے (Du et al.، 2020)۔ تاہم، 5-HT تغیرات کی طرح، ہمارے مطالعے میں TG کی وجہ سے زیادہ تر تبدیل شدہ نسل کے لیے ہپپوکیمپس میں BDNF کی سطح کو براہ راست متاثر کرنا انتہائی ناممکن تھا، اور اندرونی مالیکیولر کنکشن اور میکانزم کو مزید جانچ کی ضرورت ہے۔

اس کے برعکس، HT، TG کا ایک گٹ مائکروبیٹا میٹابولائٹ(کل گلائکوسائیڈز)، نے موجودہ مطالعے میں ایک اینٹی ڈپریسنٹ اثر کا بھی مظاہرہ کیا ، جو اس کی فائدہ مند نیورو پروٹیکٹو سرگرمی (Hu et al.، 2014) کے مطابق ہے۔ تشویش کی بات یہ ہے کہ HT سوزش کی حامی سائٹوکائنز، HPA اور HPG محور سے متعلق ہارمونز، اور ہپپوکیمپل 5- HT کی ارتکاز کو CUMS چوہوں میں کنٹرول کی سطح تک بھی اعتدال کر سکتا ہے، جبکہ زیادہ تر تبدیل شدہ مائکروبیل جنرا متاثر ہوتا ہے۔ بذریعہ ایچ ٹی کا مذکورہ جسمانی اشاریہ جات کے ساتھ کمزور ارتباط تھا، جو تجویز کرتا ہے کہ گٹ مائکرو بائیوٹا ایچ ٹی کی اینٹی ڈپریسنٹ سرگرمی کا ہدف نہیں ہو سکتا۔ مزید برآں، HT نے ہپپوکیمپس میں IDO1 کے اوور ایکسپریشن کو دبایا لیکن بڑی آنت میں نہیں، اس کے ساتھ سیرم ٹرپٹوفن کی سطح میں اضافہ ہوا۔ TG کے درمیان واضح اختلافات کی موجودگی(کل گلائکوسائیڈز)اور HT خون کے دھارے میں HT کے بہترین جذب ہونے اور HT کی خون دماغی رکاوٹ کو عبور کرنے کی صلاحیت کی وجہ سے ہو سکتا ہے (Robles-Almazan et al., 2018)، جو یہ بھی ظاہر کرتا ہے کہ گٹ مائکروبیٹا کی مضبوط میٹابولک صلاحیت ہے۔ خاص طور پر TG کی اینٹی ڈپریسنٹ سرگرمی میں اس کے جسمانی افعال کے علاوہ اہم ہے۔ لہٰذا، ہم نے ابتدائی طور پر ثابت کیا ہے کہ فائٹو کیمیکلز اور گٹ مائکرو بائیوٹا کا دو طرفہ تعامل TG انتظامیہ کے ساتھ ڈپریشن کے علاج میں اہم کردار ادا کرتا ہے (جیسا کہ تصویر 9 میں دکھایا گیا ہے)۔

نتیجہ

خلاصہ میں، TG(کل گلائکوسائیڈز)بنیادی طور پر CT کی antidepressant سرگرمی کا ذمہ دار تھا۔(Cistanchetubulosa), HPA محور کی ہائپر ایکٹیویشن پر phenylethanoid اور iridoid glycosides کے synergistic اثرات کی عکاسی کرتا ہے، شدید پردیی اور اعصابی سوزش، اور ہپپوکیمپس میں 5-HT اور BDNF میں کمی۔ مزید برآں، TG کے antidepressant اثر کا ممکنہ مالیکیولر میکانزم(کل گلائکوسائیڈز)فائٹو کیمیکلز اور گٹ مائکرو بائیوٹا کے دو طرفہ تعامل کے ذریعے حاصل کیا گیا تھا۔ اس کے علاوہ، دبائے ہوئے HPG محور کی بہتری اور TG کے ذریعے سائکلک نیوکلیوٹائڈ اسامانیتا(کل گلائکوسائیڈز)اور HT، جو SSRIs کے ساتھ علاج کے ذریعے ریگولیٹ نہیں ہوتے تھے جن کی نمائندگی fluoxetine سے ہوتی ہے، نے ڈپریشن کے علاج میں CT کے الگ فائدے کی نشاندہی کی۔ اس طرح کے ماڈلز CT کا استعمال کرتے ہوئے ڈپریشن کے علاج کے لیے ایک امید افزا حکمت عملی کی نمائندگی کرتے ہیں۔(Cistanchetubulosa) اور اسی طرح کی روایتی جڑی بوٹیوں کی ادویات۔

مصنف کی شراکتیں۔

XL، YP، اور LF نے تجربات کو ڈیزائن کیا اور ڈیٹا کا تجزیہ کیا۔ LF اور JW نے تجربہ کیا اور ڈیٹا کا تجزیہ کیا۔ ایل ایف اور ایکس ایل نے مسودہ تیار کیا۔ PM نے جانوروں کے تجربے اور نمونے کی جانچ میں حصہ لیا، اور LZ نے گٹ مائکروبیٹا کی ساخت کے تجزیہ میں حصہ لیا۔ تمام ڈیٹا اندرون ملک تیار کیا گیا تھا، اور کوئی پیپر مل استعمال نہیں کی گئی تھی۔ تمام مصنفین سالمیت اور درستگی کو یقینی بناتے ہوئے کام کے تمام پہلوؤں کے لیے جوابدہ ہونے پر متفق ہیں۔

مسابقتی دلچسپی کا اعلان

مصنفین اعلان کرتے ہیں کہ مفادات کا کوئی تنازعہ نہیں ہے۔

اعترافات

اس کام کو نیشنل کی ریسرچ اینڈ ڈویلپمنٹ پروجیکٹ (2017YFC1702400) کے گرانٹس سے تعاون حاصل تھا۔

اضافی مواد

اس مضمون سے منسلک اضافی مواد، آن لائن ورژن میں، doi:10.1016/j.phymed.2021.153471 پر پایا جا سکتا ہے۔

منجانب:'کل گلائکوسائیڈز کے تنوں سےCistanchetubulosaڈپریشن جیسے طرز عمل کو ختم کریں: فائٹو کیمیکلز اور گٹ مائکرو بائیوٹا کا دو طرفہ تعامللی فین، وغیرہ

---Phytomedicine 83 (2021) 153471/ https://doi.org/10.1016/j.phymed.2021.153471