منتخب تھائی پودوں کی اینٹی آکسیڈینٹ اور اینٹی اسکن ایجنگ پوٹینشل: وٹرو ایویلیویشن اور ان سلیکو ٹارگٹ پریڈیکشن حصہ 1

خلاصہ: جلد سب سے بڑا عضو ہے جو جسم کے مختلف ضروری افعال انجام دیتا ہے۔ عمر بڑھنے کے عمل کے دوران جلد کی ساخت اور افعال کی خرابی ہماری صحت اور تندرستی کو بری طرح متاثر کر سکتی ہے۔ وسیع شواہد سے پتہ چلتا ہے کہ ری ایکٹو آکسیجن پرجاتیوں کی جلد کی عمر بڑھنے میں بنیادی کردار متعلقہ انحطاطی انزائمز کو چالو کرنے کے ذریعے ادا کیا جاتا ہے۔ یہاں، 16 تھائی دواؤں کے پودوں کی پرجاتیوں کو ان کی جلد کی عمر بڑھانے کی ممکنہ خصوصیات کے لیے اسکرین کیا گیا۔ تمام نچوڑوں کی کل فینولک اور فلیوونائڈ مواد، اینٹی آکسیڈینٹ، اینٹی ایلسٹیز، اور اینٹی ٹائروسینیز کی سرگرمیوں کے ساتھ ساتھ مالیکیولر ڈاکنگ کے ذریعے ہدف کے خامروں والے مرکبات کی پابند صلاحیت کے لیے چھان بین کی گئی۔ اسکرین کیے گئے تمام پودوں میں، A. occidentale اور G. zeylanicum کے پتے مضبوط اینٹی آکسیڈنٹ اور elastase اور tyrosinase کے خلاف روک تھام کی نمائش کرتے ہیں۔ دیگر ممکنہ پودوں میں S. alata leaf اور A. catechu پھل شامل ہیں، بالترتیب نسبتاً زیادہ اینٹی ایلسٹیز اور اینٹی ٹائروسینیز سرگرمیاں۔ یہ نتائج ان پودوں سے اخذ کردہ مرکبات کی ڈاکنگ اسٹڈیز کے ساتھ بھی مطابقت رکھتے ہیں۔ روکنے والی کارروائیاں فلیوونائڈز کے مقابلے فینولکس کے ساتھ زیادہ مثبت طور پر منسلک پائی گئیں۔ ایک ساتھ مل کر، ہمارے نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ امیدوار مرکبات کے ساتھ ساتھ کچھ تھائی پودوں کو اینٹی آکسیڈنٹس کے قدرتی ذرائع اور elastase اور tyrosinase کے قوی انحیبیٹرز کے طور پر جلد کی عمر کے علاج کے لیے امید افزا اور موثر ایجنٹ کے طور پر تیار کیا جا سکتا ہے۔

سیستانچ کا گلائکوسائیڈ دل اور جگر کے بافتوں میں ایس او ڈی کی سرگرمی کو بھی بڑھا سکتا ہے، اور ہر ٹشو میں لیپوفسن اور ایم ڈی اے کے مواد کو نمایاں طور پر کم کر سکتا ہے، مختلف رد عمل آکسیجن ریڈیکلز (OH-، H₂O₂، وغیرہ) کو مؤثر طریقے سے ختم کر سکتا ہے اور DNA کو پہنچنے والے نقصان سے بچا سکتا ہے۔ OH ریڈیکلز کے ذریعے۔ Cistanche phenylethanoid glycosides میں آزاد ریڈیکلز کی مضبوطی سے نکالنے کی صلاحیت ہوتی ہے، وٹامن C سے زیادہ کم کرنے کی صلاحیت ہوتی ہے، سپرم معطلی میں SOD کی سرگرمی کو بہتر بناتی ہے، MDA کے مواد کو کم کرتی ہے، اور سپرم کی جھلی کے کام پر ایک خاص حفاظتی اثر رکھتی ہے۔ Cistanche polysaccharides D-galactose کی وجہ سے تجرباتی طور پر حساس چوہوں کے erythrocytes اور پھیپھڑوں کے ٹشوز میں SOD اور GSH-Px کی سرگرمی کو بڑھا سکتے ہیں، نیز پھیپھڑوں اور پلازما میں MDA اور کولیجن کے مواد کو کم کر سکتے ہیں، اور elastin کے مواد کو بڑھا سکتے ہیں۔ ڈی پی پی ایچ پر اچھا اثر ڈالتا ہے، سینسنٹ چوہوں میں ہائپوکسیا کے وقت کو طول دیتا ہے، سیرم میں ایس او ڈی کی سرگرمی کو بہتر بناتا ہے، اور تجرباتی طور پر سنسنی والے چوہوں میں پھیپھڑوں کے جسمانی انحطاط میں تاخیر کرتا ہے، سیلولر مورفولوجیکل انحطاط کے ساتھ، تجربات سے معلوم ہوا ہے کہ Cistanche میں اینٹی آکسیڈنٹ کی اچھی صلاحیت ہے۔ اور جلد کی بڑھتی ہوئی بیماریوں کو روکنے اور علاج کرنے کے لیے ایک دوا بننے کی صلاحیت رکھتا ہے۔ ایک ہی وقت میں، Cistanche میں echinacoside میں DPPH فری ریڈیکلز کو ختم کرنے کی قابل ذکر صلاحیت ہے اور اس میں رد عمل آکسیجن پرجاتیوں کو نکالنے اور آزاد ریڈیکل-حوصلہ افزائی کولیجن کے انحطاط کو روکنے کی صلاحیت ہے، اور تھامین فری ریڈیکل ایون کے نقصان پر بھی اچھا اثر ڈالتا ہے۔

rou cong rong فوائد پر کلک کریں۔

【مزید معلومات کے لیے:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

مطلوبہ الفاظ: فائٹومیڈیسن مخالف عمر؛ اینٹی آکسیڈینٹ مخالف elastase؛ اینٹی ٹائروسینیز؛ proanthocyanidin؛ اریکا کیٹیچو؛ Anacardium occidentale; گلوچیڈون زیلانیکم؛ سینہ التا

1. تعارف

جلد انسانی جسم کا سب سے بڑا اور پیچیدہ عضو ہے۔ جلد جسم اور بیرونی ماحول کے درمیان ایک رکاوٹ کا کام کرتی ہے، اور یہ مختلف قسم کے کام کرتی ہے [1]۔ جسم کو پانی کی کمی اور مائکروبیل انفیکشن سے بچانے کے علاوہ اس کا اہم کاسمیٹک کردار ہے [2]۔ اس کے علاوہ، یہ جسم کے دیگر حصوں، جیسے کہ مدافعتی، اعصابی، اور اینڈوکرائن سسٹمز کی مدد کے لیے کام کرتا ہے [1]۔ جوانی اور خوبصورتی کا لوگوں کے سماجی رویے اور انسانی زندگی پر مثبت اثر پڑ سکتا ہے [1,2]۔ لہذا، جلد کی ساخت اور افعال کی خرابی جو ہماری عمر کے ساتھ ہوتی ہے ہماری صحت اور تندرستی پر شدید اثر ڈال سکتی ہے [2,3]۔ پتلا پن، خشکی، لچک کی کمی، کھردری ساخت، جھریاں، اور سیاہ روغن یہ سب بڑی عمر کی جلد کی عام خصوصیات ہیں [4]۔ بہت سے محققین اس وقت ممکنہ اینٹی ایجنگ دوائیں یا کیمیکلز بنانے پر کام کر رہے ہیں، خاص طور پر وہ جلد کی عمر کے علاج کے لیے قدرتی ذرائع سے حاصل کیے گئے ہیں۔

عام طور پر، انسانی جلد کی عمر دو طریقوں سے ہوتی ہے: اندرونی طور پر (تاریخی عمر بڑھنے کے نتیجے میں) اور خارجی طور پر (ماحولیاتی عوامل سے متاثر ماحولیاتی تغیرات کے نتیجے میں) [5]۔ وسیع شواہد سے پتہ چلتا ہے کہ آکسیڈیٹیو تناؤ، رد عمل آکسیجن پرجاتیوں (ROS) کی تشکیل کے ذریعے، اندرونی اور بیرونی دونوں جلد کی عمر بڑھنے میں بنیادی کردار ادا کرتا ہے [6]۔ ROS ضروری میکرو مالیکیولز جیسے نیوکلک ایسڈز، انزیمیٹک پروٹینز، اور جھلی لپڈس کو نقصان پہنچا کر جلد کے خلیوں کو آکسیڈیٹیو نقصان پہنچاتا ہے، جس کے نتیجے میں سیلولر خرابی اور سیل کی موت ہوتی ہے [7]۔ آکسیڈیٹیو تناؤ ECM جزو کی ترکیب (مثال کے طور پر، ایلسٹن) کو دبا کر اور ECM ڈیگریڈنگ انزائمز (مثال کے طور پر، ایلسٹیس) کو چالو کرکے ایکسٹرا سیلولر میٹرکس (ECM) کے انحطاط میں بھی حصہ ڈالتا ہے، جس کے نتیجے میں جلد کی لچک ختم ہوتی ہے [2,8,9]۔ مزید برآں، ROS کیراٹینوسائٹس میں میلانوسائٹ-حوصلہ افزائی ہارمون (-MSH) کی پیداوار کو آمادہ کرکے جلد میں بے قاعدہ یا گہرے رنگوں کا سبب بن سکتا ہے، اس طرح ٹائروسینیز انزائم کو متحرک کرتا ہے اور میلانوسائٹس [10,11] میں میلانین کی ترکیب کو فروغ دیتا ہے۔ لہٰذا، ROS کو صاف کرنا اور elastase اور tyrosinase کی سرگرمیوں کو روکنا علاج یا جلد کی عمر کو روکنے میں بھی مفید ثابت ہو سکتا ہے۔

قدرتی مصنوعات اس وقت متعدد بیماریوں کے علاج کے لیے ممکنہ متبادل ادویات کے ساتھ ساتھ عمر بڑھنے اور عمر سے منسلک کمی [8,12,13] کے طور پر کافی دلچسپی لے رہی ہیں۔ اشنکٹبندیی پودے جلد کی عمر بڑھنے کے علاج میں اپنی صلاحیتوں کو تلاش کرنے میں دلچسپی رکھتے ہیں۔ جیسا کہ پہلے اطلاع دی گئی ہے، کئی اینڈین اور ہمالیائی پودوں کو مرکبات کے ذرائع کے طور پر سمجھا جاتا ہے جن کا ممکنہ استعمال اینٹی ایجنگ اجزاء کے طور پر ہوتا ہے [14,15]۔ تھائی لینڈ مختلف قسم کے اشنکٹبندیی پودوں کی کاشت کے لیے ایک مشہور جگہ ہے، جن میں سے اکثر کا وسیع پیمانے پر مطالعہ نہیں کیا گیا ہے۔ اس تحقیق کا مقصد جلد کی بڑھتی عمر کے خلاف نئے علاج تیار کرنے کے لیے ممکنہ قدرتی ذرائع تلاش کرنا تھا۔ 16 تھائی میڈیسنل پودوں کی انواع کے نچوڑ کا ان کی جلد کی عمر مخالف خصوصیات کے لیے وٹرو میں مطالعہ کیا گیا، بشمول کل فینولک اور فلیوونائڈ مواد، فری ریڈیکل سکیوینگنگ، اینٹی ایلسٹیز، اور اینٹی ٹائروسینیز سرگرمیاں۔ ہم نے مزید ارتباط کا تجزیہ بھی کیا اور ایک ان سلیکو مالیکیولر ڈاکنگ اپروچ کا بھی مظاہرہ کیا تاکہ تین سب سے زیادہ موثر پلانٹس میں السٹیز یا ٹائروسینیز انزائم کے خلاف مضبوط روک کے ساتھ فائٹو کیمیکل مرکبات کو ظاہر کیا جا سکے۔

2. نتائج

2.1 نکالنے کی پیداوار

جدول 1 سائنسی نام، استعمال شدہ حصے، ماخذ، نکالنے کا طریقہ/سالوینٹ، اور اس مطالعے میں استعمال ہونے والے تھائی پودوں کی فیصد پیداوار دکھاتا ہے۔ نچوڑ کی فیصد پیداوار 2{2}} فیصد سے لے کر 36.3 فیصد تک تھی (ٹیبل 1)۔ C. کیلنڈرز میں سب سے زیادہ نکالنے کی پیداوار (36.3 فیصد) تھی، اس کے بعد M. caldera (18.2 فیصد) اور A. occidentale (16.0 فیصد)، جبکہ H. undatus کی سب سے کم پیداوار تھی (2.{{) 13} فیصد)۔

2.2 تھائی پودوں کا کل فینولک مواد

پودوں کے نچوڑ نے 14.06 ± 1.55 سے 320.14 ± 7.95 ملی گرام گیلک ایسڈ مساوی (GAE) فی جی خشک وزن کے عرق (ٹیبل 2) کے درمیان مختلف قسم کے کل فینولک مواد کو دکھایا۔ G. zeylanicum (320.14 ± 7.95 mg GAE per g خشک وزن کے عرق) میں تمام نچوڑ میں سب سے زیادہ فینولک مواد تھا، اس کے بعد A. catechu (295.79 ± 11.97 mg GAE per g خشک وزن کے عرق) اور M. caldera (210.90.94mg ±010) GAE فی جی خشک وزن کا عرق) بالترتیب۔ C. کیلنڈرز میں سب سے کم سطح 14.06 ± 1.55 mg GAE فی جی خشک وزن کے عرق پر پائی گئی۔

2.3 تھائی پودوں کا کل فلاوونائڈ مواد

پودوں کے نچوڑوں کا کل فلاوونائڈ مواد پودوں کی انواع میں مختلف ہوتا ہے، جس میں 2.61 ± 0.42 سے 84.48 ± 18.32 mg quercetin equivalent (QE) فی جی خشک وزن کا عرق (ٹیبل 2) ہے۔ تمام نچوڑ میں سے، سب سے زیادہ فلیوونائڈ مواد M. caldera میں پایا گیا (84.48 ± 18.32 mg QE فی جی خشک وزن کے عرق)، اس کے بعد G. zeylanicum (52.54 ± 7.25 mg QE per g خشک وزن کے عرق) اور P. dulce (28۔{23}}1 ± 4.39 ملی گرام QE فی جی خشک وزن کا عرق)، بالترتیب۔ دوسری طرف، E. Americana میں سب سے کم سطح 2.61 ± 0.42 mg QE فی جی خشک وزن کے عرق پر پائی گئی۔

2.4 تھائی پودوں کی ڈی پی پی ایچ ریڈیکل اسکیوینگنگ سرگرمی

ڈی پی پی ایچ پرکھ مستحکم ڈی پی پی ایچ ریڈیکلز کو ختم کرنے کے لیے کمپاؤنڈ کی ہائیڈروجن عطیہ کرنے کی صلاحیت پر مبنی ہے [16]۔ پودوں کے نچوڑوں کی اینٹی آکسیڈینٹ صلاحیتوں کا اظہار فیصد ڈی پی پی ایچ ریڈیکل اسکیوینگنگ سرگرمی، ملی گرام وٹامن سی مساوی اینٹی آکسیڈینٹ صلاحیت (VCEAC) فی جی خشک وزن کے عرق، اور نصف زیادہ سے زیادہ روک تھام کرنے والے ارتکاز (IC50) (ٹیبل) کے طور پر ظاہر کیا گیا تھا۔ 3)۔ 0.1 mg/mL کے عرق پر، DPPH کی صفائی کی سرگرمی کا فیصد 6.40 سے 93.18 فیصد تک تھا۔ چار پودوں کے نچوڑ: جی زیلانیکم (93.18 فیصد)، ایم کیلڈیرا (90.61 فیصد)، اے اوکسیڈینٹل (89.01 فیصد)، اور اے کیٹیچو (88.12 فیصد) نے 80 فیصد سے زیادہ ڈی پی پی ایچ کی صفائی کی سرگرمی کی نمائش کی۔ اس کے برعکس، C. ternatea نے 6.40 فیصد پر سب سے کم صفائی کی سرگرمی دکھائی۔ رشتہ دار VCEAC اقدار کی بنیاد پر موازنہ کرنے پر درجہ بندی کی ترتیب ایک جیسی تھی۔ تاہم، IC50 اقدار کے مطابق، سب سے اوپر چار پودوں کے نچوڑ کی اینٹی آکسیڈینٹ صلاحیت کو درج ذیل ترتیب میں تبدیل کیا گیا: G. zeylanicum > A. catechu > A. occidentale > M. caldera. DPPH پرکھ کے حاصل کردہ نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ G. zeylanicum نے سب سے مضبوط اینٹی آکسیڈینٹ صلاحیت کا مظاہرہ کیا جس میں سب سے زیادہ فیصد سکیوینجنگ سرگرمی اور سب سے کم IC50 قدر ہے۔

2.5 تھائی پودوں کی ABTS ریڈیکل اسکیوینگنگ سرگرمی

ABTS پرکھ ایک مستحکم ABTS ریڈیکل کیشن کو بے اثر کرنے کے لیے ہائیڈروجن ایٹموں کو منتقل کرنے کی کمپاؤنڈ کی صلاحیت پر مبنی ہے۔ پودوں کے نچوڑوں کی اینٹی آکسیڈینٹ صلاحیتوں کا اظہار فیصد ABTS ریڈیکل اسکیوینگنگ سرگرمی، VCEAC کی ملی گرام فی جی خشک وزن کے عرق، اور IC50 (ٹیبل 4) کے طور پر کیا گیا تھا۔ 0.1 mg/mL کے عرق پر، ABTS کی صفائی کی سرگرمی کا فیصد 13.93 فیصد سے 99.37 فیصد تک تھا۔ پودوں کے آٹھ نچوڑ: جی زیلانیکم (99.37 فیصد)، اے کیٹیچو (99.31 فیصد)، اے اوکسیڈنٹیل (99.23 فیصد)، ایم کیلڈیرا (98.88 فیصد)، ای امریکانا (95.62 فیصد)، زیڈ آفیشینیل (94.07 فیصد) ) P. dulce (83.99 فیصد) اور H. undatus (82.16 فیصد) نے ABTS کی صفائی کی سرگرمی 80 فیصد سے زیادہ ظاہر کی۔ اس کے برعکس، C. کیلنڈرز نے 13.93 فیصد پر سب سے کم صفائی کی سرگرمی دکھائی۔ VCEAC کے مطابق، سب سے اوپر چار پودوں کے نچوڑوں کی اینٹی آکسیڈینٹ صلاحیت، اور IC50 کی قدریں اسی درجہ کی ترتیب میں درج ذیل پائی گئیں: G. ​​zeylanicum > A. catechu > A. occidentale > M. caldera۔ قابل ذکر بات یہ ہے کہ ABTS پرکھ کے نتائج نے یہ بھی ظاہر کیا کہ سب سے مضبوط اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی والا عرق G. zeylanicum leaf تھا، جیسا کہ سکیوینجنگ سرگرمی کا سب سے زیادہ فیصد اور سب سے کم IC50 قدر ہے۔

2.6۔ تھائی پودوں کی اینٹی ایلسٹیس سرگرمی

پودوں کے نچوڑوں کی ایلسٹیس انحیبیٹری سرگرمی کا اندازہ این-سوسینائل-ٹرائلانیل-پیرانائٹروانیلائڈ (SANA) کے ساتھ ذیلی ذخیرے کے طور پر ایلسٹیس انابیشن پرکھ کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا تھا۔ Epigallocatechin gallate (EGCG) (0.1 mg/mL)، جسے مثبت کنٹرول کے طور پر استعمال کیا جاتا تھا، نے 45.27 فیصد کی روک تھام کی سطح ظاہر کی۔ اقتباسات کی ایلسٹیس روکنے والی سرگرمیاں جدول 5 میں پیش کی گئی ہیں (ٹیبل S1 بھی دیکھیں)۔ نچوڑ کے 0.5 ملی گرام/ملی لیٹر پر، ایلسٹیس کی روک تھام کا فیصد 1.33 فیصد سے 88.31 فیصد تک تھا۔ A. catechu میں سب سے زیادہ 88.31 فیصد ایلسٹیز روک تھام کا اثر تھا، اس کے بعد G. zeylanicum (87.43 فیصد)، A. occidentale (84.78 فیصد) اور S. alata (73.95 فیصد) جبکہ ایس ایسپر چھال میں سب سے کم ایلسٹیز روک تھام کا اثر تھا۔ 1.33 فیصد پر اثر پس منظر میں زیادہ جذب ہونے کی وجہ سے، کچھ پودوں کے نچوڑ بغیر کسی قابل شناخت سرگرمی کے دوبارہ 0.1 ملی گرام/ملی لیٹر پر لگائے گئے۔ یہ پایا گیا کہ M. caldera, P. nigrum, Z. cassumunar، اور S. asper leaf، Z. officinale کے علاوہ، 3.46 فیصد سے لے کر 35.74 فیصد تک کم سے اعتدال پسند روک تھام کرنے والی سرگرمیاں دکھائیں۔ اس کے باوجود، C. calendars، C. asiatica، C. ternatea، E. americana، اور H. undatus کے اثرات زیادہ ارتکاز پر بھی نہیں دیکھے گئے۔

2.7۔ تھائی پودوں کی اینٹی ٹائروسینیز سرگرمی

پودوں کے نچوڑ کی ٹائروسینیز کی روک تھام کی سرگرمی کا جائزہ ڈوپاکروم طریقہ استعمال کرتے ہوئے 3،4-ڈائی ہائیڈروکسی-ایل-فینیللانائن (L-DOPA) کے بطور سبسٹریٹ کے ساتھ کیا گیا۔ کوجک ایسڈ (KA) (0۔{26}}2 mg/mL)، ایک مثبت کنٹرول، نے 68.35 فیصد کی روک تھام کی سطح ظاہر کی۔ عرقوں کی ٹائروسینیز روکنے والی سرگرمی ٹیبل 6 میں پیش کی گئی ہے (ٹیبل S2 بھی دیکھیں)۔ 1 mg/mL کے عرق پر، ٹائروسینیز کی روک تھام کی شرح 4.80 فیصد سے 91.51 فیصد تک ہوتی ہے۔ G. zeylanicum کا 91.51 فیصد پر سب سے زیادہ ٹائروسینیز روکنا اثر تھا، اس کے بعد A. occidentale (81.01 فیصد)، M. caldera (76.12 فیصد) اور A. catechu (75.38 فیصد) تھا، جب کہ P. nigrum میں ٹائروسینیز کا سب سے کم اثر تھا۔ 4.80 فیصد پر زیادہ پس منظر میں جذب ہونے کی وجہ سے بغیر کسی قابل شناخت سرگرمی کے دو پودوں کے نچوڑ کو 0.1 ملی گرام/ملی لیٹر پر دوبارہ استعمال کیا گیا، اور سرگرمیاں 3.98 فیصد (Z. casumunar) اور 21.28 فیصد (Z. officinale) پائی گئیں۔ تاہم، P. dulce نے کوئی اثر نہیں دکھایا، یہاں تک کہ بڑھتے ہوئے ارتکاز پر بھی۔

2.8۔ ارتباط کا تجزیہ

پودے کے نچوڑ [8,16,17] کے ممکنہ elastase اور tyrosinase inhibitory action کی کئی پچھلی رپورٹوں پر غور کرتے ہوئے، یہ امکان تھا کہ عرقوں میں اینٹی آکسیڈینٹ کی اعلیٰ صلاحیت ہے اور مضبوط elastase اور tyrosinase inhibitory action کا رجحان ہے۔ اس طرح اس مطالعہ میں ان تعلقات کی تصدیق کرنے کے لیے، ہم نے پیئرسن کے ارتباطی تجزیہ کو مزید انجام دیا تاکہ انزائمز دونوں کی روک تھام کی سرگرمیوں اور اینٹی آکسیڈینٹ مواد کی سطح کے ساتھ ساتھ استعمال کیے گئے عرقوں میں اینٹی آکسیڈینٹ کی صلاحیتوں کے درمیان تعلق کی تحقیقات کی جا سکیں۔ ارتباط کی مضبوطی کو ارتباط کے گتانک (r-value) کے ذریعہ اس طرح تقسیم کیا جاتا ہے: r=0.91{{10}} سے 1۔{7}} ایک بہت مضبوط ارتباط کی نشاندہی کرتا ہے، r=0.710 سے 0.900 ایک اعلی ارتباط کی نشاندہی کرتا ہے، r=0.410 سے 0.700 درمیانے تعلق کی نشاندہی کرتا ہے، r=0.210 سے 0.400 ایک چھوٹے سے تعلق کی نشاندہی کرتا ہے، اور r=0۔{21}} سے 0.200 ایک معمولی ارتباط کی نشاندہی کرتا ہے ایلسٹیس کی روک تھام کا کل فینولک مواد، ڈی پی پی ایچ، اور اے بی ٹی ایس ریڈیکل سکیوینگنگ سرگرمیوں سے اعلیٰ مثبت تعلق تھا، جیسا کہ بالترتیب اعداد 1a، c، اور d میں دکھایا گیا ہے۔ اسی طرح، ٹائروسیناز کی روک تھام نے کل فینولک مواد اور ABTS ریڈیکل سکیوینگنگ ایکٹیویٹی (فگر 2a، d) کے ساتھ بہت مضبوط مثبت تعلق ظاہر کیا، جبکہ اس نے DPPH ریڈیکل سکیوینگنگ سرگرمی (شکل 2c) سے اعلیٰ مثبت تعلق ظاہر کیا۔ تاہم، کل flavonoid مواد اعتدال پسند مثبت طور پر elastase اور tyrosinase inhibition (اعداد و شمار 1b اور 2b) دونوں سے منسلک تھا۔ ان نتائج نے یہ ظاہر کیا کہ فینولک مرکبات اور اینٹی آکسیڈینٹ سرگرمی elastase اور tyrosinase enzymes کی روک تھام میں اہم کردار ادا کر سکتی ہے۔

2.9 مالیکیولر ڈاکنگ

اس کے بعد ہم نے ایلسٹیس یا ٹائروسینیز انزائمز کے خلاف مضبوط روک تھام کے ساتھ تین سب سے موثر پودوں میں فائٹو کیمیکل مرکبات کی صلاحیتوں کا جائزہ لیا۔ مالیکیولر ڈاکنگ کا استعمال عام طور پر معلوم روکنے والوں کے مقابلے میں پروٹین ریسیپٹرز یا انزائمز کے مرکبات کے پابند وابستگی کا اندازہ لگانے کے لیے کیا جاتا ہے۔ ان وٹرو اسکریننگ اسسیس کے ہمارے نتائج کے مطابق، ہم نے پایا کہ A. occidentale سب سے زیادہ طاقتور elastase inhibitor تھا، اس کے بعد G. zeylanicum اور S. alata، IC50 اقدار کی درجہ بندی میں۔ اس طرح، ہم نے ان تینوں پودوں سے اخذ کردہ فائٹو کیمیکل مرکبات کا انتخاب کیا تاکہ ان کی ایلسٹیس کو روکنے کی صلاحیت کا اندازہ لگایا جا سکے۔ elastase (3HGP) اور مرکبات کے درمیان تعامل کے نتائج ٹیبل S4 میں بائنڈنگ انرجی، انہیبیشن کنسٹنٹ، ہائیڈروجن بانڈز کی تعداد، امینو ایسڈ کے تعامل، اور بانڈ کی لمبائی کے طور پر پیش کیے گئے ہیں۔ 3HGP اور مرکبات کے درمیان پابند توانائی −2.26 سے −11.95 kcal/mol (ٹیبل S4) تک کے اسکور دکھاتی ہے۔ EGCG، ایک مثبت کنٹرول، نے −9.69 kcal/mol پر پابند توانائی ظاہر کی۔ ڈاکنگ کے نتائج کے مطابق، پانچ مرکبات نے مثبت کنٹرول سے کم پابند توانائی ظاہر کی۔ پروانتھوسیانیڈن کے ٹیٹرمر نے سب سے کم پابند توانائی (−11.95 kcal/mol) کی نمائش کی، جس سے یہ ظاہر ہوتا ہے کہ ایلسٹیز کی روک تھام میں دیگر مرکبات کے مقابلے میں اس کا بہترین تعلق ہے، اس کے بعد amentoflavone، rutin، agathisflavone، اور kaempferol 3-O-gentiobioside ، بالترتیب −11.81، −10.12، −9.92، اور −9.73 پر پابند توانائیوں کے ساتھ۔

اس کے علاوہ، ٹائروسینیز انحبیشن کے ساتھ پودوں کے نچوڑوں کے لیے IC50 ویلیوز کا رینک آرڈر elastase inhibition سے قریب تر تھا۔ ہم نے پایا کہ G. zeylanicum میں سب سے زیادہ روک تھام کا اثر ہے، اس کے بعد A. catechu، اور A. occidentale ہے۔ لہذا، ان تینوں پودوں سے اخذ کردہ مرکبات کو ٹائروسینیز کو روکنے کی ان کی صلاحیت کی تحقیقات کے لیے منتخب کیا گیا تھا۔ ٹائروسینیز (2Y9X) اور مرکبات کے درمیان تعاملات کے نتائج ٹیبل S5 میں بائنڈنگ انرجی، انہیبیشن کنسٹنٹ، ہائیڈروجن بانڈز کی تعداد، امینو ایسڈ کے تعامل اور بانڈ کی لمبائی کے طور پر پیش کیے گئے ہیں۔ 2Y9X اور مرکبات کے درمیان پابند توانائی نے −4.56 سے −10.42 kcal/mol (ٹیبل S5) کے اسکور دکھائے۔ KA، tyrosinase کا ایک معروف روکنے والا، −4.59 kcal/mol پر پابند توانائی ظاہر کرتا ہے۔ ڈاکنگ کے نتائج کی بنیاد پر، o-coumaric acid (−10.42 kcal/mol) اور tetramer of proanthocyanidin (−10.42 kcal/mol) نے دیگر مرکبات کے مقابلے میں elastase کے خلاف سب سے کم پابند توانائی کی نمائش کی، اس کے بعد caffeic acid، ferulic acid، اور areca tannin A1 بالترتیب −10.10، −10۔{23}}، اور −9.94 پر پابند توانائیوں کے ساتھ۔ اعداد و شمار 3 اور 4 ligand کے 2D خاکوں کی نمائندگی کرتے ہیں – مثبت کنٹرول کے لیے elastase اور tyrosinase کے لیے پروٹین کے تعاملات، اور سب سے کم پابند توانائی کے ساتھ پانچ مرکبات۔

【مزید معلومات کے لیے:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】