AAVs کے ساتھ Vivo جین تھراپی کی موجودہ کلینیکل ایپلی کیشنز حصہ 1

موروثی بیماریاں جینوں میں تبدیلی کی وجہ سے ہوتی ہیں، اور 7 سے زیادہ،000 نایاب بیماریاں 30 ملین سے زیادہ امریکیوں کو متاثر کرتی ہیں۔

جینیاتی بیماریاں جینیاتی تبدیلیوں کی وجہ سے پیدا ہونے والی بیماریاں ہیں، جیسے پیدائشی بہرا پن، دماغی تنزلی وغیرہ۔ ان بیماریوں کی موجودگی کا تعین جینیاتی عوامل سے ہوتا ہے، اور یادداشت ایک اہم علمی صلاحیت ہے جسے ہمیں اپنی روزمرہ کی زندگی میں استعمال کرنا چاہیے۔

تاہم، ضروری نہیں کہ جینیاتی بیماریاں یادداشت کو نقصان پہنچائیں۔ بہت سے مطالعات سے معلوم ہوا ہے کہ اگرچہ بعض جینیاتی امراض اور یادداشت کے درمیان ایک خاص تعلق ہوتا ہے، لیکن بہت سے جینیاتی عوامل کچھ لوگوں کی یادداشت پر کوئی اثر نہیں ڈالتے۔

مثال کے طور پر، مطالعے سے پتہ چلتا ہے کہ کچھ لوگ الزائمر کی بیماری کے جین کو لے سکتے ہیں، لیکن وہ اب بھی اپنے بعد کے سالوں میں معمول کی یادداشت اور علمی صلاحیتوں کو برقرار رکھنے کے قابل ہو سکتے ہیں۔ اگرچہ ان لوگوں کو الزائمر کا مرض لاحق ہونے کا خطرہ ہوتا ہے لیکن ضروری نہیں کہ وہ اس بیماری سے متاثر ہوں۔

اس کے علاوہ، بہت سے جینیاتی عوامل کسی شخص کی یادداشت پر مثبت اثر ڈال سکتے ہیں۔ مثال کے طور پر، کچھ مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ مایوپیا جین والے کچھ لوگ جامد اشیاء کے مقام کو بہتر طور پر یاد رکھ سکتے ہیں۔ ان لوگوں میں خاص علمی صلاحیتیں ہوتی ہیں، جن کا تعلق ان کے مایوپیا جین سے ہو سکتا ہے۔

اس کے علاوہ، کچھ لوگ کچھ جین کی تبدیلیاں لے سکتے ہیں جو لوگوں کے لیے چیزوں کو یاد رکھنے اور دیکھنا آسان بنا دیتے ہیں۔ یہ جینیاتی عوامل ان لوگوں کو زیادہ عمدہ علمی صلاحیتیں دیتے ہیں۔

لہٰذا، اگرچہ موروثی بیماریوں اور یادداشت کے درمیان ایک خاص تعلق ہے، ہمیں اس تعلق کو مثبت طور پر دیکھنا چاہیے۔ یادداشت ایک اہم علمی صلاحیت ہے، اور اسے مناسب تربیت سے بہتر بنایا جا سکتا ہے۔ شاید ہم موروثی بیماریوں کو اپنی یادداشت کو بہتر بنانے، مشکلات پر قابو پانے اور اپنی علمی صلاحیتوں کو بڑھانے کے لیے ایک چیلنج سمجھ سکتے ہیں۔ یہ دیکھا جا سکتا ہے کہ ہمیں اپنی یادداشت کو بہتر بنانے کی ضرورت ہے، اور Cistanche ہماری یادداشت کو نمایاں طور پر بہتر بنا سکتا ہے کیونکہ Cistanche ایک روایتی چینی دوا ہے جس میں بہت سے منفرد اثرات ہیں، جن میں سے ایک یادداشت کو بہتر بنانا ہے۔ Cistanche کی افادیت اس میں شامل مختلف فعال اجزاء سے آتی ہے، بشمول tannic acid، polysaccharides، flavonoid glycosides، وغیرہ۔ یہ اجزاء دماغ کی صحت کو کئی طریقوں سے فروغ دے سکتے ہیں۔

شارٹ ٹرم میموری کو بہتر بنانے کا طریقہ جانیں پر کلک کریں۔

30 سال سے زیادہ عرصے سے، سیکڑوں محققین نے یہ بات برقرار رکھی ہے کہ جینیاتی تبدیلیاں وراثت میں ملنے والی بہت سی انسانی بیماریوں کے لیے موثر علاج فراہم کریں گی، جو ایک ہی علاج سے پائیدار اور ممکنہ طور پر علاج معالجے کے فوائد فراہم کرتی ہیں۔

یہ جائزہ صرف اڈینو سے وابستہ وائرس (AAV) کا استعمال کرتے ہوئے جین تھراپی تک محدود ہے کیونکہ اس ویکٹر کے ذریعے فراہم کردہ جین مریض کے جینوم میں ضم نہیں ہوتا ہے اور اس کی مدافعتی صلاحیت کم ہوتی ہے۔

اب کمرشلائزیشن کے لیے منظور شدہ پانچ علاج ہیں اور فی الحال دستیاب ہیں، یعنی Luxturna، Zolgensma، the twochimeric antigen receptor T cell (CAR-T) علاج (یسکارٹا اور کیمریا)، اور سٹرمویلیس (گیمریٹرو وائرس جو اڈینوسین ڈیمینیز-شدید مشترکہ امیونوڈ کے لیے منظور شدہ ہیں۔ یورپ میں)۔ درجنوں دیگر علاج انڈر کلینیکل ٹرائلز ہیں۔

جائزہ مضمون Vivo جین ٹرانسفر کے ذریعے تھراپی کے شعبے کا ایک وسیع جائزہ پیش کرتا ہے۔ ہم اعصابی عوارض کے لیے جینی تھراپی کا جائزہ لیتے ہیں (ریڑھ کی ہڈی کی پٹھوں کی ایٹروفی [SMA]؛ Duchenne muscular dystrophy [DMD]؛ X-linked myotubular myopathy [XLMTM]؛ اور مرکزی اعصابی نظام کی بیماریاں، بشمول الزائمر کی بیماری، پارکنسنز کی بیماری، کیناوین کی بیماری، ایلومیٹک بیماری۔ امینو ایسڈ decarboxylase[AADC] کی کمی، اور وشال محوری نیوروپتی)، آنکھ کی خرابی (لیبر پیدائشی اماروسس، عمر سے متعلق میکولر ڈیجنریشن [AMD]، کورائیڈریمیا، ایکرومیٹوپسیا، ریٹینائٹس اسپگمنٹوسا، اور ایکس سے منسلک ریٹینو فلو، اسٹوریج ڈس آرڈر)۔ عوارض

موروثی بیماریاں جینز میں تبدیلی کی وجہ سے ہوتی ہیں۔ 7،000 سے زیادہ نایاب بیماریاں ہیں جو 30 ملین امریکیوں کو متاثر کرتی ہیں، یعنی تقریباً 10% آبادی۔ نیشنل آرگنائزیشن فار ریری ڈس آرڈرز کے مطابق، دنیا بھر میں کئی سو ملین مریض ہیں۔ مریضوں میں سے دو تہائی بچے ہیں۔ فی الحال، ان مریضوں میں سے 95 فیصد سے زیادہ کے لیے کوئی مؤثر علاج موجود نہیں ہے۔

جینیاتی بیماریوں کے لیے منظور شدہ چند دوائیوں پر مبنی علاج علامات کا بہترین انتظام یا ترمیم کرتے ہیں۔ تاہم، وہ بیماری کی بنیادی جینیاتی وجہ پر توجہ نہیں دیتے۔

اس طرح، ان دوائیوں کو زندگی بھر کے لیے استعمال کیا جانا چاہیے۔ سینکڑوں محققین نے اپنی زندگیاں اس کے حصول کے لیے وقف کر دی ہیں جو ابتدائی طور پر ایک ناممکن خواب کے طور پر ظاہر ہوا: موروثی بیماریوں کے لیے جین تھراپیز کی ترقی، یعنی، ایک وقتی علاج معالجے میں کسی فرد کے متاثرہ جین میں تبدیلی۔ مریض کی پوری زندگی کے لیے علامات کو کم یا ختم کر دیتا ہے۔

یہ خواب اب ایک حقیقت ہے: جین تھراپی موجودہ لاعلاج موروثی بیماریوں کے نقطہ نظر کو بہت بہتر بناتی ہے! یہ جائزہ صرف اڈینو سے وابستہ وائرس (AAV) کا استعمال کرتے ہوئے جین تھراپی تک محدود ہے کیونکہ اس ویکٹر کے ذریعے فراہم کردہ جین مریض کے جینوم میں ضم نہیں ہوتا ہے۔

Glybera کو امریکی فوڈ اینڈ ڈرگ ایڈمنسٹریشن (FDA) نے اکتوبر 2012 میں اس سنگ میل کو حاصل کرنے کے لیے پہلی AAV ثالثی جین تھراپی کے طور پر منظوری دی تھی۔ گلیبیرا نے موروثی لیپوپروٹین لپیسڈیفیسینسی (LPLD) کو درست کیا، جو لبلبے کی سوزش، پیٹ میں بار بار درد، اور پھٹنے والے چربی سے بھرے دھبوں کے طور پر ظاہر ہوتا ہے جو بہت زیادہ ٹرائگلیسرائیڈ کی سطح کے نتیجے میں ہوتے ہیں۔

تاہم، بیماری کی نایابیت (1 فی ملین)، مریض پر لاگت، اور کمپنی کی طرف سے علاج کی تیاری کو برقرار رکھنے کے اخراجات نے تجارتی طور پر جین کی ترسیل کو جاری رکھنا بہت مشکل بنا دیا۔ جین تھراپی کی یہ شکل 2018 کے بعد مزید دستیاب نہیں تھی، اس وقت دنیا میں صرف 31 افراد کا علاج کیا گیا تھا۔

کمرشلائزیشن کے لیے اب منظور شدہ پانچ علاج ہیں اور فی الحال دستیاب ہیں، یعنی Luxturna، Zolgensma، دو chimeric antigen ریسیپٹر T سیل (CAR-T) علاج (یسکارٹا اور کیمریا)، اور اسٹریمویلس (گیمریٹرو وائرس جو اڈینوسین ڈیمینیس-شدید مشترکہ امیونڈی کے لیے منظور شدہ ہیں۔ یورپ میں۔

جائزہ آرٹیکل ان ویوو جین ٹرانسفر کے ذریعے تھراپی کے شعبے کا ایک وسیع جائزہ پیش کرتا ہے، جو کہ جین سے درست شدہ خلیات کی پیوند کاری کے بجائے جسم میں جین تھراپی ویکٹر کی براہ راست انتظامیہ پر مبنی ہے۔

اس کے ساتھ، ہم اعصابی عوارض کے لیے ویوو جین تھراپی کا جائزہ لیں گے (ریڑھ کی ہڈی کے مسکل ایٹروفی [SMA]؛ Duchenne muscular dystrophy [DMD]؛ X-linked myotubular myopathy [XLMTM]؛ اور مرکزی اعصابی نظام [CNS] کی بیماریاں، بشمول الزائمر کی بیماری [AD] ، پارکنسنز کی بیماری [PD]، کینوان کی بیماری [CD]، خوشبودار L-amino acid decarboxylase [AADC] کی کمی، اور giant axonal neuropathy [GAN])، آنکھ کے امراض (Leber congenital amaurosis [LCA]، عمر سے متعلق میکولر انحطاط [AMD] ]، choroideremia، achromatopsia[ACHM]، retinitis pigmentosa، اور X-linked retinoschisis [XLRS])، خون بہنے کی خرابی ہیموفیلیا، اور lysosomal اسٹوریج کی خرابی (LSDs)۔

ان شعبوں میں سے ہر ایک میں، پیش رفت شاندار ہے، کلینیکل ٹرائلز جاری ہیں، اور بعض صورتوں میں، علاج کو ریگولیٹری ایجنسیوں کی طرف سے منظور کیا جاتا ہے اور تجارتی بنا دیا جاتا ہے۔

اعصابی عوارض میں کلینیکل جین تھراپی

کلینیکل جین تھراپی اپنی مختلف شکلوں میں تیزی سے ترقی کر رہی ہے، جو امید کی جھلک پیش کر رہی ہے کہ نایاب عوارض کی وسیع تر کمیونٹی طویل عرصے سے منتظر ہے۔ نیورومسکلر بیماریوں کے لیے جین کی منتقلی کے لیے سب سے زیادہ امید افزا وائرل ویکٹر AAV ہے، جس میں بہترین حفاظتی پروفائل اور ترجمے میں کارکردگی ہے۔

ہم یہاں تین امید افزا طبی AAV جین تھراپی طریقوں کا جائزہ لیتے ہیں جو شدید اور کمزور اعصابی امراض کے مریضوں کے لیے وعدہ ظاہر کرتے ہیں۔

ایس ایم اے

SMA ایک تباہ کن نیوروڈیجینریٹیو بیماری ہے جو موٹر نیوران کے مسلسل نقصان کے نتیجے میں ہوتی ہے۔

یہ آٹوسومل ریسیسیو ڈس آرڈر بقا کے موٹر نیوران SMN1 جین میں تبدیلی کے نتیجے میں ہوتا ہے جس میں تقریباً 1:10،000 زندہ پیدائش کے واقعات ہوتے ہیں، جن میں سے 60% میں ایس ایم اے کی قسم 1.2,3 ہوتی ہے انسانی SMN جین ایک الٹی ڈپلیکیشن آنکروموزوم ہے۔ .2

SMN1 telomeric اور انتہائی homologousSMN2 ہے، جو سینٹرومیرک پوزیشن میں پڑا ہے۔ 1,4 SMN2 جین کی ایک ایکسون 7-پوائنٹ میوٹیشن کے نتیجے میں exon splicing اور فائنل ٹرانسکرپٹ سے اخراج ہوتا ہے، جس کے نتیجے میں ایک غیر مستحکم انحطاط پذیر پروٹین ہوتا ہے۔5

ایک مکمل طوالت کا فنکشنل SMN پروٹین بنیادی طور پر SMN1 کی ذمہ داری ہے جس میں SMN2.6 کی ایک چھوٹی سی شراکت ہے SMN1 کی غیر موجودگی میں، SMN2 کاپی نمبر کلینکل فینو ٹائپ کا بڑا عامل ہے۔7

SMN2 کی 2 کاپیاں والے متاثرہ شیر خوار بچوں میں شدید قسم 1 (SMA1) پیدا ہونے کا امکان ہوتا ہے، جس کی خصوصیت تیزی سے ترقی پذیر کمزوری، آزادانہ طور پر بیٹھنے میں ناکامی، موت کی طرف بڑھنے کے ساتھ سانس کی کمی، یا 2.8 سال کی عمر سے پہلے مستقل وینٹیلیشن ہونا، انسانی آزمائشوں کی تیاری میں ایک بڑا قدم تھا۔ یہ ظاہر کرتے ہوئے کہ AAV9 دماغی خلیات اور ریڑھ کی ہڈی کے اعصابی خلیوں تک پہنچ گیا ہے۔

It was confirmed in SMA murine models that systemically delivered self-complementary AAV9 (scAAV9) crossed the blood-brain barrier and achieved high levels of neuronal transduction.9,10 Preclinical studies, delivering scAAV9-SMN to SMA pups, demonstrated positive effects on survival, growth, and neuromuscular transmission.11,12 Two key observations from these studies worth noting were both time of intervention and dose-response effects on survival. Early treatment at postnatal day 2 extended the lifespan from 15 days to >250 دن۔11

تحقیقاتی نئی دوا (IND) ایک کھلے لیبل کے لیے فراہم کی گئی، 13 مئی 2014 سے شروع ہونے والی کلینکل جین تھراپی کی خوراک سے متعلق آزمائش۔ n=3؛ 6.7 1013 mg/kg) اور زیادہ (n=6; 3.3 1014 mg/kg) خوراک کی منظوری دی گئی۔13انرولمنٹ میں علامتی SMA1 شیر خوار بچے شامل ہیں جن کی 2 SMN2 کاپیاں ہیں اور 6 ماہ کی عمر سے پہلے علامات کا آغاز مستقل وینٹیلیشن کی غیر موجودگی میں. مقدمے کی سماعت کے آغاز پر، پریڈیسولون کو پروٹوکول میں شامل نہیں کیا گیا تھا۔

پہلے مریض کو SMN جین کی ترسیل کے 9ویں دن، سیرم کیمسٹریوں نے الانائن امینوٹرانسفریز (ALT) میں 16 > نارمل اضافہ دکھایا۔ ان نتائج کی بنیاد پر، پروٹوکول کی ترامیم ایف ڈی اے کو جمع کرائی گئیں اور جن میں پریڈیسون، 1 ملی گرام/کلوگرام یومیہ جین کی ترسیل سے 24 گھنٹے پہلے شروع کی گئی اور حفاظتی اقدام کے طور پر، اعلی خوراک کے لیے وائرل بوجھ کو 3.3 1014 vg سے کم کر دیا گیا۔ /kg سے 2.0 1014vg/kg۔

اسے اب ایک "علاج کی خوراک" سمجھا جاتا ہے اور دوسرے جین تھراپی کے کلینیکل ٹرائلز کو اپنایا جاتا ہے۔ SMA جین تھراپی کے ٹرائل کے نتائج شاید اندراج شدہ 15 SMA مضامین کی توقعات سے زیادہ تھے (کم خوراک n=3؛ زیادہ خوراک n=12) .

مطالعہ کے اختتام پر (دسمبر 2017)، تمام شیر خوار بچے زندہ تھے، اور علاج کی خوراک کے ساتھ علاج کیے گئے تمام 12 مریض مستقل وینٹی لیشن سے پاک تھے۔ اور 3 ماہ میں 15.4 پوائنٹس۔

علاج کی خوراک میں، 11 بغیر مدد کے بیٹھ گئے، 9 گھوم گئے، 11 زبانی طور پر کھلائے اور بول سکے، اور 2 آزادانہ طور پر اٹھے۔ 13 شکل 1 سے ظاہر ہوتا ہے کہ قدرتی تاریخ کے مقابلے SMA مریضوں کے لیے 24 ماہ کے لیے CHOP-INTEND اسکور ہیں۔ یہ موٹر سنگ میل SMA1 شیرخوار بچوں میں بے مثال ہیں اور موٹر نیوران کی مضبوط وسیع پیمانے پر منتقلی کا واضح اشارہ تھے۔

ایک اہم طبی مشاہدہ جس میں ممتاز مریضوں کا علاج معالجہ کی خوراکوں سے علاج کیا گیا وہ تھا سانس اور زبانی موٹر کی مہارتوں کا تحفظ اور بحالی۔ افادیت ابتدائی علاج اور اعلی CHOP-INTEND.15 کے ساتھ منسلک ہے۔

7.9 ماہ کی عمر میں علاج کرنے والے واحد مریض نے تھراپی کا جواب نہیں دیا۔ ایلیویٹڈ سیرم امینوٹرانسفریز 4 مریضوں میں دیکھے گئے اور کورٹیکوسٹیرائڈز کے ذریعے ان کو کم کیا گیا۔

اپریل 2018 میں، Novartis نے AveXis کے حصول کے لیے ایک معاہدہ کیا اور مطالعہ میں شامل 15 مضامین کی پیروی جاری رکھی۔ مئی 2019 میں، onasemnogene abeparvovec (Zolgensma) نے پہلی بار نظامی طور پر فراہم کی گئی AAV جین تھراپی کے طور پر FDA کی منظوری حاصل کی۔ منظوری کے بعد، قابل ذکر واقعات میں START ٹرائل میں اندراج شدہ مضامین کی مسلسل طویل مدتی نگرانی شامل ہے۔

31 دسمبر 2019 کو کٹے ہوئے آخری اعداد و شمار میں، پہلے ٹرائلٹ میں زیر علاج 12 مریضوں میں سے 11 علاج کی خوراک مستقل وینٹیلیشن کی ضرورت کے بغیر زندہ رہے۔ نئے سنگ میل کی دستاویز کی گئی، اور CHOP-INTENDscore میں 24.5 پوائنٹس کا اضافہ ہوا۔

دو اضافی مریضوں نے مدد کے ساتھ کھڑے ہونے کا سنگ میل حاصل کیا۔ ڈیٹا کٹ کے وقت، علاج کی خوراک حاصل کرنے والے سب سے پرانے مریض کی عمر 5.6 سال تھی، اب جین کی منتقلی کے بعد 5.2 سال ہو چکے ہیں۔

ابتدائی مداخلت کے اثرات کا مزید جائزہ لینے کے لیے، SMN2 کی 2 یا 3 کاپیوں کے ساتھ پری علامتی نوزائیدہ بچوں (%6 ہفتے کی عمر) کا ایک نیا ملٹی سینٹر اسٹڈی شروع ہو گیا ہے (SPR1NT)۔

Treatment at a mean age of 20 days shows improvement in CHOP-INTEND scores >18 ماہ تک بقا کے ساتھ تمام مضامین میں 50 (شکل 2)۔ 2019 میں، SMA کو تجویز کردہ یونیفارم اسکریننگ پینل (RUSP) میں شامل کیا گیا، اور متعدد ریاستوں نے پیدائش کے بعد پہلے چند ہفتوں کے اندر نوزائیدہ بچوں کے لیے دستیاب اس پالیسی سازی جین تھراپی کو اپنایا ہے۔

اوہائیو میں، 5 presymptomatic مریضوں کا علاج onasemnogeneabeparvovec کے ساتھ کیا گیا ہے، جن کی عمر اب 12 ماہ ہے۔ SMA کے مریضوں کے لیے مستقبل روشن نظر آتا ہے۔ SMA ٹائپ 1 جین تھراپی کی کامیابی SMA کے مریضوں کو R6 ماہ تک بڑھا دی گئی۔<5 years with three copies of SMN2, and eligibility required the ability to sit independently in the absence of walking without support. 

scAAV.CB.SMN کی تین خوراکیں اندرونی طور پر دی جانی تھیں۔ کم اور درمیانی خوراک والے گروہوں نے اندراج مکمل کر لیا، لیکن ایف ڈی اے کی طرف سے زیادہ خوراک کو جزوی طور پر روک دیا گیا۔

یہ ایک AveXis کی رپورٹ شدہ preclinical مطالعہ کے جواب میں تھا جو غیر انسانی پرائمیٹس (NHPs) کو انٹراتھیکل ویکٹر حاصل کرتے ہیں۔ انہوں نے ڈورسل روٹ گینگلیا (DRG) مونو نیوکلیئر سیل کی سوزش کی بنیاد رکھی، بعض اوقات اس کے ساتھ نیورونل سیل باڈی انحطاط یا نقصان ہوتا ہے۔ تھیہولڈ نے انٹراوینس زولجینسما کے کلینیکل ٹرائلز کو متاثر نہیں کیا۔ ولسن لیب 18 کے حالیہ مطالعے کچھ مزید بصیرت فراہم کرتے ہیں۔

NHPs میں subarachnoid اسپیس میں AAV ویکٹر کے انفیوژن پر، DRG میں پیتھالوجی تقریباً تمام جانوروں میں ایک مستقل دریافت ہے۔ اسی طرح کے نتائج دیکھے گئے ہیں، یہاں تک کہ کچھ مطالعات میں جب زیادہ خوراکیں نظامی طور پر دی جاتی ہیں۔ تاہم، ان NHPs میں، علاج معالجے کے ٹرانسجینز کا استعمال کرتے ہوئے کسی بھی کلینکل سیکویلا کی غیر موجودگی قابل ذکر ہے۔

اس طرح، خطرے سے فائدہ اٹھانے کے تناظر میں، طبی SMA بیماری13 میں جین ڈیلیوری کا ردعمل DRG میں نظر آنے والے سوزشی دراندازی کے بارے میں خدشات سے زیادہ ہے۔

جین کی پیداوار، ڈسٹروفین، ایک لازمی سائٹوسکیلیٹل پروٹین ہے، جو کنکال اور ہموار پٹھوں کے خلیوں دونوں کے سارکولیما میں کانٹریکٹائل ایکٹین فلیمینٹس کو لنگر انداز کرتی ہے۔

پوری بیماری کے دوران، ڈسٹروفین کے نقصان کے نتیجے میں جھلی کی نزاکت، نیکروسس اور تخلیق نو کے چکر، دوبارہ پیدا کرنے کی صلاحیت میں کمی، اور فبروسس کے ذریعے پٹھوں کی تبدیلی ہوتی ہے۔ دوسری یا تیسری دہائی میں موت

مسلز کریٹائن کناز (CK) کی بلندی پیدائش کے وقت جاری ڈسٹروفک پیتھالوجی کی نشاندہی کرتی ہے۔ 22 CK غیر معمولی مریضوں میں کمی کرتا ہے کیونکہ کنکال کے پٹھوں کی جگہ فائبروسس ہوتی ہے۔

ڈی ایم ڈی جین کا بڑا سائز اسے بے ساختہ تبدیلیوں کے لیے حساس بناتا ہے۔ واقعات 1:5،000 مردانہ پیدائش ہیں۔ 22,23 فنکشنل ڈیسٹروفین کی مختلف مقدار کی پیداوار کا نتیجہ مخصوص اتپریورتنوں کے نتیجے میں ہوتا ہے جو exon-skipping کے لیے موزوں ہوتا ہے۔ آبادی اور فنکشن کا تحفظ محدود ہے۔ جین ریپلیسمنٹ تھراپی ممکنہ طور پر ڈی ایم ڈی مریضوں کے وسیع تر گروپ کو نشانہ بنانے کے لیے ایک بہتر حکمت عملی ہے۔

ایک بڑی رکاوٹ AAV ویکٹرز میں بڑے DMD جین کو محدود کرنے میں ہے۔<5 kb. To circumvent this challenge, designs for miniaturizing the dystrophin gene have been developed. 

ڈی ایم ڈی کے ممکنہ علاج کے طور پر ڈسٹروفین کے کٹے ہوئے ورژن کو اپنانا ایک بیکرمسکلر ڈسٹروفی کے مریض پر مبنی ہے جو اپنے ڈی ایم ڈی جین کے تقریباً نصف کے حذف ہونے کے باوجود سات دہائیوں تک ایمبولیٹری رہا۔

فی الحال، مختلف AAV سیرو ٹائپس کا استعمال کرتے ہوئے مختلف تعداد میں اسپیکٹرن ریپیٹس (SRs) اور قلابے اور ڈیلیوری کو شامل کرنے والی ٹرانسجینز بیک وقت سیسٹیمیٹک جین تھراپی ٹرائلز (ٹیبل 1) میں حفاظت اور افادیت کے جائزے سے گزر رہی ہیں جو Sarepta Therapeutics، Pfizer، Biosummarized، اور Solids ذیل میں فراہم کیے گئے ہیں۔ .Sarepta Therapeutics نے حال ہی میں NationwideChildren's Hospital (ClinicalTrials.gov: NCT03375164) میں کئے گئے اپنے فیز 1/2اوپن-لیبل، سیفٹی، اور رواداری کے ٹرائل کے نتائج کی اطلاع دی ہے۔ exons 18 اور 58، R12 ہفتوں کے لیے prednisolone لینے والے، جنہوں نے rAAVrh74 حاصل کیا۔

MHCK7.micro-dystrophin (SRP-9001) delivered through an extremity vein. Subjects with AAVrh74 total binding antibody titers >1:400 کو خارج کر دیا گیا تھا۔ پروٹوکول میں روزانہ prednisone کی ایک خوراک، 1 mg/kg، جین کی ترسیل سے 1 دن پہلے شروع ہوتی ہے، اور 30 ​​دن (یا ضرورت پڑنے پر اس سے زیادہ) جاری رہتی ہے۔ SRP9001، 2.0 1014 mg/kg کی ایک واحد خوراک دی گئی۔ AAVrh74 سیروٹائپ ٹشو مخصوص MHCK7 پروموٹر کے ساتھ a-myosinenhancer کے ساتھ مل کر کنکال اور کارڈیک پٹھوں دونوں میں اظہار کی اعلی سطح کی پیش گوئی کرتا ہے۔

مائیکرو ڈسٹروفین ٹرانسجن میں SRs 13 ہوتا ہے جو سارکولیما سے منسلک ہوتا ہے جس کی وجہ سے سارکولیمل بائنڈنگ اور قوت کی پیداوار میں بہتری آتی ہے، نیز SR 24 اور قلابے 1، 2 اور 4.28 12 ہفتوں میں، ایک گیسٹروکنیمیئس پٹھوں کی بایپسی جس میں مائیکرو-بیس لائن کا موازنہ کیا جاتا ہے۔ 81.2% پٹھوں کے ریشوں کا ڈسٹروفین اظہار، اوسط شدت 96% کے ساتھ۔

ویسٹرن بلاٹ (WB) نے چربی یا فائبروسس کے لیے ایڈجسٹمنٹ کے بغیر 74.3% اور ایڈجسٹمنٹ کے ساتھ 95.8% کا مطلب ظاہر کیا۔ 1 سال میں نارتھ سٹار ایمبولیٹری اسیسمنٹ (NSAA) میں 5.5 پوائنٹس کے اوسط سے فنکشنل بہتری کے ساتھ تمام مضامین (حد 46%85) میں سیرم سی کے کی کمی رہی۔

4 سیڑھیاں چڑھنے اور 100 دوڑ/چلنے کے وقت میں بھی بہتری آئی۔ ہسٹولوجیکل نتائج سے پتہ چلا کہ مرکزی نیوکلیشن اور رِنگ مائیوفائبرز کی عدم موجودگی اور بیس لائن کے مقابلے میں پٹھوں کے بعد کے علاج میں کولیجن مواد کی فیصد میں کمی (مطلب 26.7% ± 8.4%)۔

منفی واقعہ (AE) پروفائل کم سے کم تھا۔ تین مریضوں میں g-glutamyltransferase کی عارضی بلندی تھی جو corticosteroids کے ساتھ حل ہوئی۔ کل 18 واقعات کو علاج سے متعلق سمجھا گیا۔ سب سے زیادہ عام الٹی تھی (50%)۔

الٹی کی وجہ واضح نہیں ہے لیکن AAV استثنیٰ سے کوئی تعلق نہیں ہے۔ حفاظت اور افادیت کی پروفائل نے طویل مدتی فالو اپ اور جاری فیز 2 کی حوصلہ افزائی کی، بے ترتیب، پلیسبو کے زیر کنٹرول، 96-ہفتے کے توسیعی مطالعہ کو بڑے نمونے کے ساتھ (ClinicalTrials.gov: NCT03769116)۔

Pfizer فارماسیوٹیکل کمپنی نے 15 مئی 2020 کو امریکن سوسائٹی آف جین اینڈ سیل تھراپی (ASGCT) کی حالیہ میٹنگ میں PF-06939926 کے جاری حفاظتی اور رواداری کے ٹرائل کے نتائج فراہم کیے ہیں۔ rAAV9.mini-dystrophin 9 DMD لڑکوں کو پہنچایا گیا، جن کی عمر 6.2 سے 12.8 تھی؛ سبھی روزانہ گلوکوکورٹیکائیڈز لے رہے تھے، بغیر پہلے سے موجود AAV9 اینٹی باڈیز کے۔

خوراک کے بڑھتے ہوئے شیڈول میں شامل ہے 1.0 1014 mg/kg (n=3) یا 3.0 1014 mg/kg (n=6)۔ بیس لائن پر پٹھوں کی بایپسی مائع کرومیٹوگرافی-ماس اسپیکٹومیٹری (LCMS): 2 ماہ 20% اور 12 ماہ میں 24% (n=3) کا استعمال کرتے ہوئے منی ڈسٹروفین ٹونارمل کا موازنہ۔

زیادہ خوراک پر، اظہار بالترتیب 2 اور 12 مہینوں میں 35% (n=6) اور 52% (n=3) تھا۔ امیونو فلوروسینس (IF) کے نتائج 12 ماہ میں معمولی کمی کے ساتھ اعلی اور کم خوراکوں پر جانچے گئے نمونوں کے لیے ایک ہی حد میں تھے۔ 1 سال میں 3 مضامین کے لیے NSAA نے بیس لائن سے 3.5 پوائنٹس کا اوسط اضافہ دکھایا۔

MRIat کی طرف سے 12 مہینوں میں تخمینہ شدہ چکنائی کا حصہ زیادہ خوراک (n=3) پر 8% کی کمی کو ظاہر کرتا ہے اور کم خوراک پر کوئی تبدیلی نہیں کی گئی تھی۔ AE پروفائل زیادہ پیچیدہ تھا۔

40% سے زیادہ شرکاء نے قے، متلی، بھوک میں کمی اور پائریکسیا کا تجربہ کیا۔ گردے کی شدید چوٹ کی اطلاع کی وجہ سے جس میں atypical hemolytic uremic syndrome (aHUS) کی طرح شامل ہے جس میں تکمیلی ایکٹیویشن کی ضرورت ہوتی ہے جس کے لیے ہیموڈیلیزیز اور ایکولیزم کو ابتدائی طور پر روکا جاتا ہے۔ پروٹوکول ترامیم کو فعال کریں (جون 2019)۔

ایک اور موضوع میں، تھرومبوسائٹوپینیا کے ساتھ اے ایچ یو ایس جیسی تکمیلی ایکٹیویشن پلیٹلیٹ ٹرانسفیوژن اور ایکولیزماب کی ضرورت ہے۔ Pfizer نے ClinicalTrials.gov: NCT04281485 میں رجسٹرڈ 99 مضامین (C3391003) پر مشتمل ایک منصوبہ بند مرحلہ 3، بے ترتیب، ملٹی سینٹر، ڈبل بلائنڈ، پلیسبو کنٹرول ٹرائل کا اعلان کیا ہے۔

For more information:1950477648nn@gmail.com