خلاصہ

پس منظر:ڈرمل ایکسٹرا سیلولر میٹرکس (ECM)، بنیادی طور پر کولیجن کی درست تفریق اور مقدار کے لیے امیجنگ اور امیج پروسیسنگ تکنیکوں کی کمی ہے۔ اس مطالعے کا مقصد ہسٹو کیمیکل امیجنگ، ریفلیکٹنس کنفوکل مائیکروسکوپی (RCM)، اور اٹامک فورس مائیکروسکوپی (AFM) کا استعمال کرتے ہوئے میکرو-، مائیکرو-، اور نینو اسکیل پر کولیجن کی دوبارہ تشکیل کو تصور کرنے اور مقدار درست کرنے کے لیے ایک جامع امیجنگ اور امیج پروسیسنگ اپروچ تیار کرنا اور اس کا مظاہرہ کرنا ہے۔ بالترتیب

سیستانچ کا گلائکوسائیڈ دل اور جگر کے بافتوں میں ایس او ڈی کی سرگرمی کو بھی بڑھا سکتا ہے، اور ہر ٹشو میں لیپوفسن اور ایم ڈی اے کے مواد کو نمایاں طور پر کم کر سکتا ہے، مختلف رد عمل آکسیجن ریڈیکلز (OH-، H₂O₂، وغیرہ) کو مؤثر طریقے سے ختم کر سکتا ہے اور DNA کو پہنچنے والے نقصان سے بچا سکتا ہے۔ OH ریڈیکلز کے ذریعے۔ Cistanche phenylethanoid glycosides میں آزاد ریڈیکلز کو صاف کرنے کی مضبوط صلاحیت ہوتی ہے، وٹامن C سے زیادہ کم کرنے کی صلاحیت، سپرم معطلی میں SOD کی سرگرمی کو بہتر بناتی ہے، MDA کے مواد کو کم کرتی ہے، اور سپرم کی جھلی کے کام پر ایک خاص حفاظتی اثر رکھتی ہے۔ Cistanche polysaccharides D-galactose کی وجہ سے تجرباتی طور پر حساس چوہوں کے erythrocytes اور پھیپھڑوں کے ٹشوز میں SOD اور GSH-Px کی سرگرمی کو بڑھا سکتے ہیں، نیز پھیپھڑوں اور پلازما میں MDA اور کولیجن کے مواد کو کم کر سکتے ہیں، اور elastin کے مواد کو بڑھا سکتے ہیں۔ ڈی پی پی ایچ پر اچھا اثر ڈالتا ہے، سینسنٹ چوہوں میں ہائپوکسیا کے وقت کو طول دیتا ہے، سیرم میں ایس او ڈی کی سرگرمی کو بہتر بناتا ہے، اور تجرباتی طور پر سنسنی والے چوہوں میں پھیپھڑوں کے جسمانی انحطاط میں تاخیر کرتا ہے، سیلولر مورفولوجیکل انحطاط کے ساتھ، تجربات سے پتہ چلتا ہے کہ Cistanche میں اینٹی آکسیڈنٹ کی اچھی صلاحیت ہے۔ اور جلد کی بڑھتی ہوئی بیماریوں کو روکنے اور علاج کرنے کے لیے ایک دوا بننے کی صلاحیت رکھتا ہے۔ ایک ہی وقت میں، Cistanche میں echinacoside میں DPPH فری ریڈیکلز کو ختم کرنے کی قابل ذکر صلاحیت ہے اور یہ ری ایکٹو آکسیجن پرجاتیوں کو نکالنے اور آزاد ریڈیکل-حوصلہ افزائی کولیجن کے انحطاط کو روکنے کی صلاحیت رکھتا ہے، اور یہ تھامین فری ریڈیکل ایون کے نقصان پر بھی اچھا مرمتی اثر رکھتا ہے۔

Antioxidant Cistanche استعمال کرنے کے طریقہ پر کلک کریں۔

【مزید معلومات کے لیے:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

مواد اور طریقے:تصور کے ثبوت کے لیے، ایک کمرشل اینٹی ایجنگ پروڈکٹ جو کولیجن نو سنتھیسز اور ری آرگنائزیشن کو آمادہ کرنے کے لیے جانا جاتا ہے، اس کا تجربہ دو عمر کی خواتین سے انسانی جلد کے بائیوپسی پر کیا گیا۔

نتائج:علاج نہ ہونے والی جلد کی نسبت، کولیجن فائبرز (RCM) اور fibrils (AFM) طویل اور علاج کے بعد منسلک تھے۔ علاج کے بعد کولیجن اور ایلسٹن (ہسٹو کیمیکل امیجنگ اور ELISA) کا مواد شماریاتی طور پر بہتر ہوا۔

نتیجہ:اپنے نتائج کی بنیاد پر، ہم یہ نتیجہ اخذ کر سکتے ہیں: (1) AFM، RCM، اور ہسٹو کیمیکل امیجنگ جلد میں موجود دیگر ECM اجزاء سے کولیجن کو درست طریقے سے امتیاز کر سکتی ہے اور (2) تصویری پروسیسنگ کے طریقے مقدار کو قابل بنا سکتے ہیں اور اس کے بعد کولیجن کی دوبارہ تشکیل میں چھوٹی بہتری حاصل کر سکتے ہیں۔ علاج (تصور کے ثبوت کے طور پر کولیجن آرگنائزر ٹیکنالوجی کے ساتھ تجارتی کاسمیٹک مصنوعات)۔ رپورٹ کردہ مجموعی امیجنگ اپروچ کے سائنس دانوں اور ماہر امراض جلد کے لیے جلد کی تحقیق اور تشخیص میں فوری، حقیقی وقت اور درست فیصلے کرنے کے لیے براہ راست طبی اثرات ہیں۔

مطلوبہ الفاظ

اینٹی ایجنگ، اٹامک فورس مائکروسکوپی، کولیجن ری آرگنائزیشن، ڈرمل ریموڈلنگ، ایکسٹرا سیلولر میٹرکس، ریفلیکشن کنفوکل مائیکروسکوپی (ویواسکوپ)

1. تعارف

جلد اور دیگر اعضاء کی معمول کی نشوونما اور ہومیوسٹاسس کے لیے ڈرمل ایکسٹرا سیلولر میٹرکس (ECM) کی کنٹرول شدہ دوبارہ تشکیل ضروری ہے۔ جلد کی عمر بڑھنے، 1 زخم کی شفا یابی، اور کچھ مہلک امراض بشمول کینسر اور فبروسس کی پیتھوفیسولوجی میں ECM کو دوبارہ تشکیل دینا نمایاں ہے۔ ECM کو دوبارہ بنانے کا حقیقی وقت کا تصور، بنیادی طور پر کولیجن جو کہ ڈرمل ECM کا سب سے زیادہ پرچر ساختی جزو ہے۔ اگرچہ ترقی کے مراحل میں ہے، کولیجن اور اس کی تنظیم کو دیکھنے کے لیے کچھ ناول غیر حملہ آور ریئل ٹائم کلینیکل امیجنگ تکنیک ہیں ملٹی فوٹون مائیکروسکوپی ود سیکنڈ ہارمونک جنریشن (MPM-SHG)، 3 ریفلیکٹنس کنفوکل مائیکروسکوپی (RCM)، 4 آپٹیکل کوہرنس ٹوموگرافی۔ (OCT)، 5,6 Lindfield Confocal Optical Coherence Tomography (LC-OCT) RCM اور OCT، 7 میگنیٹک ریزوننس امیجنگ (MRI)، 8 اور الٹراساؤنڈ امیجنگ کے امتزاج پر مبنی۔ ان میں سے، RCM، MPM، اور LC-OCT CE سے تصدیق شدہ جلد کی تصویر کشی کے آلات ہیں۔ تاہم، ان سب میں، RCM تکنیک (Vivascope® 1500 اور 3000 from Lucid, Inc. USA) واحد FDA سے منظور شدہ کلینیکل ڈرمیٹولوجی تشخیصی تکنیک ہے (510(k)# K080788)، جس کا احاطہ بھی زیادہ تر بیمہوں میں ہوتا ہے۔ جلد کے گھاووں کی تشخیص کے لیے USA۔ 10 یہ جلد کے کینسر کی تشخیص اور ان کے علاج اور نگرانی کے لیے کلاسیکی بایپسی اور ہسٹوپیتھولوجی تکنیکوں کا ایک غیر حملہ آور اور سرمایہ کاری مؤثر متبادل ہے۔ AFM)، 11 الیکٹران مائکروسکوپی، 11،12 ہسٹو کیمیکل امیجنگ فلوروسینس مائکروسکوپی کا استعمال کرتے ہوئے، 13 پولرائزڈ لائٹ مائکروسکوپی، 14 کنفوکل لیزر سکیننگ مائیکروسکوپی (CLSM)، 15,16 ملٹی موڈل کنفوکل ریفلیکشن اور فلوروسینس مائیکروسکوپی، 17 اور چھوٹے زاویہ X8 ہیں اچھی طرح سے جانا جاتا ہے.

مذکورہ بالا کلینکل امیجنگ تکنیکوں کے استعمال کو محدود کرنے والے بڑے انتباہات میں سے ایک یہ ہے کہ اس کے لیے تکلیف دہ دستی تشخیص کی ضرورت ہوتی ہے کیونکہ جلد کے ڈھانچے کی سیاہ اور سفید تصویروں کا درست تجزیہ کرنے کے لیے موضوع کی مہارت اور تجربہ ایک شرط ہے۔ خودکار تجزیہ کرنے کے لیے الگورتھم اور سافٹ ویئر کو تیار کرنے اور درست کرنے کے لیے امیج پروسیسنگ کے شعبے میں درکار ہے، 5 ڈیجیٹل طور پر داغدار تصاویر کی تشریح کرنے میں آسان، 16,17 پیدا کرتا ہے اور بیماری کے بڑھنے اور علاج کی نگرانی کے لیے مقداری معلومات نکالتا ہے، بشمول ہمارے سیاق و سباق میں کولیجن تنظیم تحقیق.3,6,12–14 یہ غیر ماہر امراض جلد اور ماہر امراض جلد کو تیز اور زیادہ اعتماد کے ساتھ فیصلے کرنے کے قابل بنائے گا کیونکہ فیصلے بے ترتیب تصاویر کے بڑے نمونے کے سائز سے کیے جائیں گے۔ کچھ بنیادی مطالعات RCM اور MPM کے استعمال کو ظاہر کرنے کے لیے کیے گئے ہیں تاکہ عمر سے متعلقہ جلد کی تبدیلیوں (بشمول کولیجن آرگنائزیشن) کو نوجوان بمقابلہ بوڑھے یا تصویر والے مضامین میں سمجھا جا سکے۔ علاج میں بہتری کو حاصل کرنے کے لیے ان امیجنگ تکنیکوں میں سے، جس میں مقداری معلومات حاصل کرنے کے لیے جدید ترین تصویری پروسیسنگ کی ضرورت ہوتی ہے۔ 3,13,16

اس مطالعے کا مقصد ڈرمل ریموڈلنگ (بنیادی طور پر کولیجن) میں بہتری کو تصور کرنے اور ان کی مقدار درست کرنے کے لیے ایک جامع امیجنگ اور امیج پروسیسنگ کے نقطہ نظر کو تیار کرنا اور اس کا مظاہرہ کرنا ہے۔ تصور کے ثبوت کے لیے، کولیجن آرگنائزر ٹیکنالوجی کے ساتھ طبی طور پر ثابت شدہ کمرشل اینٹی ایجنگ کاسمیٹک پروڈکٹ کا استعمال علاج سے پہلے اور بعد میں کولیجن میں معمولی تبدیلیوں کو درست کرنے کے لیے امیج پروسیسنگ کے استعمال کی فزیبلٹی کا جائزہ لینے کے لیے کیا گیا تھا۔

2. مواد اور طریقہ

2.1 جلد کی بایپسی اور ان کا علاج

اس تحقیق میں استعمال ہونے والی جلد کی بایپسی پیٹ کی پلاسٹک سرجری کا بچا ہوا مواد تھا جو دو عطیہ دہندگان سے ان کی رضامندی کے بعد حاصل کیا گیا تھا (کلینکس کی جانب سے برقرار رکھی گئی رضامندی)۔ ڈونر # 1 (62 سال) اور ڈونر # 2 (52 سال) دونوں خواتین اور فٹز پیٹرک جلد کی قسم II تھیں۔ بایپسیوں کو معیاری ثقافتی حالات کے تحت برقرار رکھا گیا تھا اور روزانہ ٹیسٹ پروڈکٹ یا کنٹرول (غیر علاج شدہ یا پلیسبو) کے ساتھ 6 دن تک علاج کیا جاتا تھا، اور امیجنگ اور ELISA کے لیے 7 دن کو کاٹا جاتا تھا۔ ڈونر # 1 کی بایپسی ELISA، RCM، اور AFM کے لیے استعمال کی گئی تھیں، جبکہ ڈونر # 2 کی بایپسی ہسٹو کیمیکل امیجنگ کے لیے استعمال کی گئی تھیں۔

2.2 RCM اور AFM امیجنگ

ڈونر # 1 کی جلد کی بایپسی 7 دن کو کٹائی گئی تھی، اور بغیر کسی سیکشن اور داغ کے براہ راست تصویر بنائی گئی تھی۔ AFM (Bruker, Multimode 8 AFM) اور RCM (Vivascope® 1500) کو ٹیسٹ پروڈکٹ کے ساتھ علاج کیے جانے والے جلد میں کولیجن کی ہائی ریزولوشن نینو اور مائیکرو پیمانہ تصاویر حاصل کرنے کے لیے استعمال کیا گیا تھا، اور ان کا بطور کنٹرول علاج نہیں کیا گیا تھا۔ تمام تجربات کے لیے، AFM ایک چھوٹے کینٹیلیور (PPP-FMR- 20، Nanosensors) سے لیس تھا: موسم بہار کا مستقل، k=0.5–9.5 N/m، گونج کی فریکوئنسی، f {{13} }–115 kHz ہوا میں اور اسے کمرے کے درجہ حرارت پر ٹیپنگ موڈ میں چلایا گیا۔ جلد کے نمونے بعد میں مقناطیسی ڈسک (1 ملی میٹر × 1 ملی میٹر) پر لگائے گئے تھے اور اسٹیج پر رکھے گئے تھے۔ سیکشننگ سے بچنے کے لیے اے ایف ایم کی تصاویر جلد کے بایپسی کے پس منظر/سائیڈ ویو کے ذریعے حاصل کی گئیں۔ آر سی ایم امیجنگ کے لیے، کولیجن کی اعلیٰ معیار کی تصاویر حاصل کرنے کے لیے اوپر سے (اسٹریٹم کارنیم سائیڈ) اور نیچے (ڈرمیس سائیڈ) سے علاج شدہ اور غیر علاج شدہ بایپسیوں سے سات بے ترتیب تصاویر حاصل کی گئیں۔ RCM امیجز پر کارروائی کی گئی اور ان کا تجزیہ کیا گیا ConfoScan® کا استعمال کرتے ہوئے کولیجن ٹیکسچر کے لیے وسط فریگمنٹیشن انڈیکس کی اطلاع دینے کے لیے۔ فریگمنٹیشن انڈیکس کی وضاحت اشیاء کے رقبے سے کی جاتی ہے جو کولیجن کی ساخت کے لیے خام امیجز پر کارروائی کرنے کے بعد حاصل کردہ اشیاء کی تعداد سے تقسیم ہوتی ہے۔ تصویر S1 کولیجن فریگمنٹیشن انڈیکس (CFI) پر مقداری اقدار حاصل کرنے کے لیے ConfoScan® کا استعمال کرتے ہوئے تصویری پروسیسنگ کو دکھاتا ہے۔

2.3 ہسٹو کیمیکل امیجنگ

فوٹو بوڑھی جلد کے علاج پر اینٹی ایجنگ پروڈکٹ کے اثر کو جانچنے کے لیے (تصویر سے خراب کولیجن اور ایلسٹن کی بازیابی)، ڈونر #2 کی بایپسیوں کو UV کی نقلی خوراک (6 J/cm2 کے ساتھ 96 فیصد UVA) کے سامنے لایا گیا۔ )۔ تجربات میں جانچے گئے نمونے اور حالات یہ تھے: (A) منفی کنٹرول (علاج نہیں کیا گیا، کوئی UV، اور کوئی ٹیسٹ پروڈکٹ نہیں)، (B) مثبت کنٹرول (جلد UV سے بے نقاب، لیکن کوئی ٹیسٹ پروڈکٹ نہیں)، اور (C) علاج کیا گیا ( جلد UV سے متاثر ہوتی ہے، جس کے بعد ٹیسٹ پروڈکٹ کے ساتھ روزانہ علاج ہوتا ہے)۔ جلد کی بایپسی کی کٹائی 7 ویں دن کی گئی، سیکشن کیا گیا، کولیجن (پکوسیریئس سٹیننگ) اور ایلسٹن (امیونوسٹیننگ) کے لیے داغدار، اور امیج بنایا گیا۔ پیپلیری ڈرمس میں کولیجن اور ایلسٹن کے مواد کے بارے میں مقداری معلومات حاصل کرنے کے لیے ملکیتی تصویری تجزیہ الگورتھم کا استعمال کرتے ہوئے تصاویر پر کارروائی اور تجزیہ کیا گیا۔ مختصراً، کولیجن اور ایلسٹن کے مشمولات کے بارے میں مقداری معلومات حاصل کرنے کے تجزیاتی عمل میں RGB امیجز کو LAB کلر اسپیس میں تبدیل کرنا، کولیجن اور ایلسٹن کی واضح تصاویر حاصل کرنے کے لیے پس منظر کو فلٹر کرنا، اور پھر پیپلری ڈرمس میں کولیجن اور ایلسٹن کے مواد کو معمول پر لانا شامل ہے۔ ایک ہی علاقہ یا کئی پکسلز۔ ہر حالت کے لیے چھ بایپسی یا جلد کے نمونے تھے اور ہر نمونے سے دو حصے یا تصاویر، جس کے نتیجے میں اعداد و شمار کی جانچ کے لیے N=12 تصاویر اور ڈیٹا پوائنٹس تھے۔ تصویر S2 کولیجن کے مواد پر مقداری قدریں حاصل کرنے کے لیے امیج پروسیسنگ کے طریقہ کار کو ظاہر کرتا ہے۔

2.4 ایلیسا

دن 7 کو ٹشو کی کٹائی کے بعد، چھوٹی بایپسی حاصل کرنے کے لیے 4 ملی میٹر قطر کا پنچ استعمال کیا گیا اور ∼25 ملی گرام/بایپسی کے ساتھ دو بایپسی منتخب کی گئیں۔ پنچ شدہ بایپسیز (50 ملی گرام کل وزن) کو 0.1 فیصد ٹریٹن اور پروٹیز انحیبیٹر کاک ٹیل پر مشتمل لیسیز بفر میں ملایا گیا، جس کے بعد مکمل طور پر لیس کرنے کے لیے مکینیکل اور الٹراسونک خصوصیات کے ساتھ ایک خودکار ڈوئل پروسیسنگ ہوموجینائزر کا استعمال کرتے ہوئے ٹشو کی ہم آہنگی کی گئی۔ ٹشو. لائزڈ ٹشو کو سینٹرفیوج کیا گیا، سپرنٹنٹ کو اکٹھا کیا گیا، دو حصوں میں تقسیم کیا گیا، اور استعمال ہونے تک −80◦C پر محفوظ کیا گیا۔ وزن (50 ملی گرام) سے متعلق نارملائزیشن کے علاوہ، نمونوں کو سپرنٹنٹ میں کل پروٹین کے مواد پر بھی معمول بنایا گیا تھا۔ سپرنٹنٹ کا تجزیہ Pro-Collagen 1، Elastin، Alpha-Smooth Muscle actin (A-SMA)، Tenascin-X، اور Hyaluronic ایسڈ کے لیے تجارتی ELISA کٹس کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا۔ اعدادوشمار N=6 ڈیٹا پوائنٹس (3 بایپسیز × 2 ایلی کوٹس) پر انجام دیے گئے۔

3 نتائج

ہسٹو کیمیکل امیجنگ (شکل 1) نے کولیجن اور ایلسٹن کی تقسیم اور مقدار پر میکروسکوپک معلومات فراہم کیں۔ UV کے ساتھ جلد کی بایپسی کے علاج کے بعد کولیجن اور ایلسٹن فائبر بنڈلز کے سرخ رنگ میں واضح کمی دیکھی گئی۔

جدول 1 علاج کی تین حالتوں میں کولیجن اور ایلسٹن مواد کی مقداری اقدار کو ظاہر کرتا ہے۔ ان اقدار نے ہمیں کولیجن اور ایلسٹن کے مواد میں بہتری کی پیمائش کرنے اور شماریاتی موازنہ کرنے کے قابل بنایا۔ UV کی نمائش کے بعد کولیجن (−23 فیصد بمقابلہ علاج نہ کیا گیا) اور ایلسٹن (−30 فیصد بمقابلہ علاج نہ کیا گیا) مواد میں کمی نمایاں تھی (شکل 2)۔ 6 دن تک ٹیسٹ پروڈکٹ کے ساتھ علاج کے بعد، UV سے ظاہر ہونے والی جلد کی بایپسی کولیجن (جمع 18 فیصد بمقابلہ UV علاج) اور ایلسٹن (پلس 46 فیصد بمقابلہ UV علاج) کو بحال کرنے میں کامیاب ہوگئیں۔ اگرچہ ہسٹو کیمیکل امیجز میں کولیجن کی تنظیم واضح نہیں ہے (کیونکہ جلد میں کولیجن زیادہ مقدار میں ہوتا ہے اور کثافت سے بھرا ہوتا ہے)، ایپیڈرمس کی طرف دوڑتے ہوئے ایلسٹن ریشوں کی خصوصیت کی سیدھ میں مقامی (شکل 1A) اور UV سے تباہ شدہ جلد میں مشاہدہ کیا جاتا ہے۔ ٹیسٹ پروڈکٹ کے ساتھ علاج (شکل 1C)۔

ELISA (شکل 3) بائیو مارکر کی سطحوں کا موازنہ کرتا ہے جس کا اظہار جلد کی بایپسی کے ذریعہ ٹیسٹ پروڈکٹ یا پلیسبو کے ساتھ کیا جاتا ہے (جس میں فعال اجزاء کی کاک ٹیل نہیں ہے جو ڈرمل دوبارہ بنانے کے لئے جانا جاتا ہے)۔ پلیسبو کے مقابلے میں، ایلسٹن اور کولیجن کی سطحوں میں 2–3 گنا اضافہ ہوا، خاص طور پر قسم 1 پرو کولیجن (ٹیسٹ پروڈکٹ بمقابلہ پلیسبو)۔ اگرچہ اہم نہیں، ہائیلورونک ایسڈ اور ٹیناسین-X میں نمایاں اضافہ (P < 0.1) بھی دیکھا گیا۔

RCM جلد میں کولیجن ریشوں (کولیجن فائبروں کا بنڈل) کی تنظیم کو کامیابی کے ساتھ ظاہر کرنے میں کامیاب رہا (شکل 4)۔ اس کی کنفوکل اور کوارٹر ویو پلیٹ آپٹیکل خصوصیات کی وجہ سے، یہ تکنیک جلد کو سیکشن کیے بغیر اور داغ لگائے بغیر کولیجن (بائرفرنجنس کے ساتھ مضبوط اینڈوجینس کنٹراسٹ ایجنٹ) کو دوسرے میٹرکس سے کامیابی کے ساتھ امتیاز کرنے میں کامیاب رہی۔ چھوٹا بکھرا ہوا کولیجن اور اس کا جھکا ہوا انتظام (عمر رسیدہ/تصویر کی عمر کی جلد میں خراب اور ناقص ترتیب شدہ کولیجن کی خصوصیت) جلد کی غیر علاج شدہ بایپسی میں دیکھی جاتی ہے۔ ٹیسٹ پروڈکٹ کے ساتھ 6 دن تک علاج کرنے کے بعد، اس 62- سالہ خواتین کی جلد کی بایپسی (عطیہ کنندہ #1) میں کولیجن ریشوں کا انتظام غیر علاج شدہ، کولیجن ریشوں سے نسبتاً زیادہ منظم نظر آتا ہے جن کی لمبائی 100 µm سے زیادہ ہوتی ہے۔ ایک دوسرے کے متوازی. اگرچہ اس کے برعکس خراب ہے، ہم فبرو بلوسٹس کی شکل اور سائز کا مشاہدہ کر سکتے ہیں (شکل 4 میں تیر کے ذریعے نمایاں کیا گیا ہے)، علاج شدہ جلد بمقابلہ علاج نہ ہونے والی جلد میں باقاعدہ شکلوں کے ساتھ بڑے اور پھیلے ہوئے فائبرو بلاسٹس۔ شکل 4C میں روشن گول خلیات خاص دلچسپی کے حامل ہیں۔ وہ مستول خلیات یا سوزش کے خلیات ہو سکتے ہیں۔ یہ واضح نہیں ہے کہ آیا یہ سوزش والے خلیے جلد کی عام صحت کے حالات کے نمائندے ہیں یا کیا ان کا اظہار لیزر سر پر نمایاں قوت کے جواب میں کیا گیا ہے تاکہ کولیجن کی اعلیٰ معیار کی تصاویر کے لیے لیزر سر اور جلد کے درمیان بہتر رابطہ حاصل کرنے کی کوشش کی جا سکے۔ ریشے

جدول 2 علاج شدہ بمقابلہ علاج نہ ہونے والی جلد کی سات بے ترتیب تصاویر کے ConfoScan® تجزیہ کے ذریعے طے شدہ وسط فریگمنٹیشن انڈیکس کو ظاہر کرتا ہے۔ کولیجن کا مطلب ہے علاج شدہ بمقابلہ غیر علاج شدہ گروپ کا فریگمنٹیشن انڈیکس 0 تھا۔{3}}بالترتیب 32 اور 0.064 تھا۔ فریگمنٹیشن انڈیکس میں کمی کولیجن کی تنظیم میں بہتری کی نشاندہی کرتی ہے۔

کولیجن کے انتظامات پر گہری نظر ڈالنے کے لیے، نانوسکل (شکل 5) میں کولیجن کے انتظام کو دیکھنے کے لیے اے ایف ایم کی تصاویر حاصل کی گئیں۔ ہم نینو میٹر موٹائی کے انفرادی کولیجن فائبرز (جو کولیجن فائبر بناتے ہیں) دیکھ سکتے ہیں۔ مزید، ہم کولیجن فائبرز (D ∼ 68 nm) کی خصوصیت کے ٹراورس بینڈنگ پیٹرن کو بھی دیکھ سکتے ہیں، جو ادب کے ساتھ سیدھ میں ہے، 11 اور اس بات کی توثیق کرتا ہے کہ AFM کولیجن کو دوسرے ECM ریشوں سے امتیاز کرنے کے قابل تھا۔ RCM کے ساتھ اتفاق رائے میں، علاج شدہ بمقابلہ علاج نہ ہونے والی جلد کے لیے AFM کے تحت کولیجن فائبرز کی نسبتاً متوازی تنظیم بھی دیکھی گئی۔

4. بحث

اس تحقیق میں، ہم نے انسانی جلد کے بائیوپسیوں میں کولیجن میں تبدیلیوں کو دیکھنے کے لیے تین امیجنگ تکنیکوں کو استعمال کرنے کی صلاحیت کی کھوج کی جس کا علاج ایک تجارتی اینٹی ایجنگ پروڈکٹ کے ساتھ کیا جاتا ہے جس میں کچھ بینچ مارک مصنوعی پیپٹائڈز ہوتے ہیں جو کولیجن کو دوبارہ بنانے کے لیے جانا جاتا ہے۔ ہسٹو کیمیکل امیجنگ اور آر سی ایم امیجنگ تکنیکوں کو امیج پروسیسنگ کے ساتھ جوڑا گیا تھا تاکہ کولیجن کے مواد اور فریگمنٹیشن کے بارے میں نیم مقداری معلومات حاصل کی جا سکیں تاکہ اینٹی ایجنگ پروڈکٹ کے ساتھ علاج کے بعد کولیجن میں بہتری حاصل کی جا سکے۔

دلچسپ بات یہ ہے کہ ہمارے مطالعے نے ٹیسٹ پروڈکٹ کے ساتھ علاج کے بعد کولیجن اور ایلسٹن کی سطح میں نمایاں اضافے کی اطلاع دینے کے لیے ہسٹو کیمیکل امیجنگ اور ELISA کے درمیان بہت مضبوط تعلق ظاہر کیا۔ ٹائپ 1 پرو کولیجن نئے ترکیب شدہ کولیجن کا مارکر ہے، اور میٹرکسائل® (سیڈرما/کروڈا) کے جواب میں فائبرو بلاسٹس کے ذریعے اس کا زیادہ اظہار بڑھاپے کے خلاف اثر کے لیے ایک اچھی خصوصیت والا طریقہ کار ہے۔ 23,24 میں بھی نمایاں اضافہ ہوا A-SMA کے اظہار میں، myofibroblasts کے لیے منفرد مارکر، جو خاص طور پر مختلف فبروبلاسٹ خلیات ہیں۔ فائبروبلاسٹ ثالثی ای سی ایم سنکچن اور دوبارہ تشکیل دینے میں A-SMA کے کردار کو اچھی طرح سے سمجھا جاتا ہے، 25 اور A-SMA اظہار اور فبروبلاسٹ سنکچن کی سرگرمی کے درمیان براہ راست تعلق بتایا جاتا ہے۔26 ہائیلورونک ایسڈ میں اضافہ، اگرچہ غیر اہم ہے، بنیادی طور پر ہو سکتا ہے۔ ہائیلورونک ایسڈ کی موجودگی کو اینٹی ایجنگ پروڈکٹ میں موئسچرائزنگ جزو کے طور پر منسوب کیا جاتا ہے۔ TNSX ایک ناول ECM پروٹین ہے جو کہ جلد کی جلد میں کولیجن فائبرلز کے درمیان یا اس کی سطح پر مقامی ہوتا ہے 1 یا دیگر کولیجن اور ECM بائیو مالیکیولز کے ساتھ ساتھ۔ 28,29 TNSX میں خوراک پر منحصر اضافہ SKINectura™ (Lucas Meyer Cosmetics) کے جواب میں، جو اینٹی ایجنگ ٹیسٹ پروڈکٹ میں ایک فعال جزو ہے، رپورٹ کیا گیا ہے (بین الاقوامی پیٹنٹ ایپلی کیشن# PCT /IB2017/056370)۔ لہذا، یہ قیاس کیا جا سکتا ہے کہ ٹیسٹ پروڈکٹ میں Matrixyl® (Sederma/Croda) اور SKINectura™ (Lucas Meyer Cosmetics) تازہ ترکیب شدہ کولیجن، پروکولجن قسم 1 کی ترکیب اور سیدھ میں سہولت فراہم کرنے کے لیے مل کر کام کرتے ہیں۔ کولیجن اور ایلسٹن میں نمایاں کمی۔ UV علاج کے بعد (تصویر سے متاثرہ جلد کا ماڈل)، اس کے بعد ان کی مرمت کے بعد اینٹی ایجنگ پروڈکٹ کے ساتھ علاج کے بعد (مقامی جلد کی سطح جو UV سے بے نقاب نہیں ہوتی) ہسٹو کیمیکل امیجنگ (پولرائزڈ مائکروسکوپی) اور امیج پروسیسنگ تکنیک کی صلاحیت کی نشاندہی کرتی ہے۔ ECM اجزاء کے مواد میں چھوٹی تبدیلیوں کی پیمائش کریں (اعداد و شمار 1 اور 2)۔ نئے خریدے گئے تھنڈر لائیکا فلوروسینس امیجنگ سسٹم کا استعمال کرتے ہوئے کولیجن اور ایلسٹن آرگنائزیشن (امیونو فلوروسینس لیبلنگ کے بعد) کی تصویر کشی کرنے کی بھرپور کوششیں کی گئیں۔ تاہم، قرارداد کافی زیادہ نہیں تھی، اور اس وجہ سے تنظیم کے بارے میں قابل اعتماد طور پر کچھ بھی نہیں کہا جا سکتا تھا. فلوروسینس پر مبنی CLSM امیجنگ روایتی وائڈ فیلڈ فلوروسینس امیجنگ سے زیادہ ریزولوشن پیش کرتی ہے تاکہ کولیجن اور ایلسٹن تنظیم کے واضح تصور کی اجازت دی جا سکے۔ روایتی وائڈ فیلڈ فلوروسینس امیجنگ ثانوی فلوروسینس کے غلبے اور نمونوں کی موٹائی سے محدود ہے، جو CLSM کے لیے تشویش کا باعث نہیں ہے۔

ہم RCM (شکل 4) کا استعمال کرتے ہوئے کولیجن تنظیم کو دیکھنے کے قابل تھے۔ RCM CLSM کے مقابلے میں ایک بہتر انتخاب ہے کیونکہ (1) RCM کوئی لیبل یا سٹیننگ استعمال نہیں کرتا ہے (fluorescence-CLSM کے برعکس جس میں امیونو فلوروسینس لیبلنگ کی ضرورت ہوتی ہے) لیبلز کی وجہ سے غیر یقینی یا غیر مخصوصیت کے امکانات کو دور کرتا ہے، اور (2) RCM ایک وسیع پیمانے پر استعمال ہوتا ہے۔ کولیجن کے لئے کلینیکل ڈرمل امیجنگ تکنیک کا استعمال کیا گیا۔ اینٹی ایجنگ پروڈکٹ کے ساتھ علاج کے بعد کولیجن فائبر، لمبے اور پتلے ریشوں کی ساخت میں بہتری (بمقابلہ علاج نہ ہونے والی جلد میں گھنے اور چھوٹے ٹوٹے ہوئے کولیجن ریشے) ساختی سطح پر اس کے عمل کے انداز کی نشاندہی کرتی ہے۔ RCM ریزولوشن اتنا زیادہ تھا کہ جلد کی کولیجن کی ترکیب کے کارخانے، فبروبلاسٹ خلیوں کو بھی پکڑ سکے۔ فائبرو بلاسٹس کے گرد لپٹے ہوئے کولیجن ریشے نئے ترکیب شدہ کولیجن ریشے ہو سکتے ہیں کیونکہ یہ ارد گرد کے کولیجن ریشوں اور ان کے بنڈلوں کے مقابلے قطر میں پتلے ہوتے ہیں (شکل 4)۔ بے ترتیب RCM تصاویر کے ConfoScan® تجزیہ کی بنیاد پر، ہم یہ نتیجہ اخذ کر سکتے ہیں کہ علاج نہ ہونے والی جلد میں علاج شدہ جلد کے مقابلے بکھرے ہوئے کولیجن کا انڈیکس بہت زیادہ ہوتا ہے۔ اگرچہ RCM امیجز میں ہم ٹیسٹ پروڈکٹ کے ساتھ علاج کے بعد کولیجن ریشوں کی متوازی سیدھ کو دیکھ سکتے ہیں، لیکن اس کا نتیجہ اس وقت تک نہیں نکالا جا سکتا جب تک کہ isotropy/anisotropy تناسب کی گنتی نہ کی جائے، جو اس تحقیق کے دائرہ کار سے باہر تھا۔ تاہم، نانوسکل کی سطح پر AFM الٹرا ہائی ریزولوشن سنگل فبرلز کی سطح پر کولیجن سیدھ کے ثبوت کو ظاہر کرتا ہے۔ کولیجن ریشوں کی متوازی سیدھ پر RCM اور AFM امیجز کے درمیان مثبت ارتباط کی بنیاد پر (غیر علاج شدہ بمقابلہ علاج کیا گیا)، اس بات کا قوی امکان ہے کہ اینٹی ایجنگ پروڈکٹ میں دعوی کردہ کولیجن ری آرگنائزیشن پراپرٹی ہے۔ مستقبل کی تحقیق کے لیے، ٹیسٹ پروڈکٹ کے ساتھ علاج سے پہلے اور بعد میں وقت کے ساتھ ساتھ ایک ہی جگہ (کولیجن ریشوں) کی نگرانی کے لیے مطالعہ کیا جانا چاہیے تاکہ یہ معلوم کیا جا سکے کہ آیا یہ موجودہ کولیجن کی سیدھ ہے یا نئے ترکیب شدہ کولیجن ریشوں کی زیادہ منسلک. تاہم، اس طرح کے طول بلد مطالعہ کے لیے RCM اور AFM آلات کے انضمام کی ضرورت ہوگی تاکہ لائیو ٹشو امیجنگ کی قابلیت اور ٹائم لیپس امیجنگ کو کولیجن ری ماڈلنگ میں حقیقی وقت کی تبدیلیوں کو حاصل کیا جا سکے۔

5. نتائج

تصور کے اس ثبوت کے مطالعہ سے ہمارے تحقیقی نتائج کی بنیاد پر، ہم یہ نتیجہ اخذ کر سکتے ہیں کہ AFM، RCM، اور ہسٹو کیمیکل امیجنگ تکنیک بالترتیب نینو، مائیکرو، اور میکرو پیمانے پر کولیجن تنظیم میں تبدیلیوں کی نگرانی کرنے کے قابل ہیں۔ AFM اور RCM امیجز ٹیسٹ پروڈکٹ کے ساتھ علاج کے بعد نینو اور مائیکرو اسکیل پر کولیجن الائنمنٹ کا ثبوت دکھاتی ہیں۔ ملکیتی امیج پروسیسنگ اپروچز کا استعمال کرتے ہوئے بے ترتیب RCM اور ہسٹو کیمیکل امیجز کا تجزیہ مزید اس بات کی نشاندہی کرتا ہے کہ ٹیسٹ پروڈکٹ کے ساتھ علاج کے بعد جلد میں کولیجن فریگمنٹیشن کم اور علاج نہ کیے جانے والے مقابلے میں کولیجن کی کثافت زیادہ ہوتی ہے۔ اگرچہ امیج پروسیسنگ الگورتھم 3,5,6,12–14,16,17 کو تیار کرنے اور درست کرنے میں کچھ کوششیں کی گئی ہیں اس سمت میں مزید تحقیق کی ضرورت ہے تاکہ ڈیٹا پر مبنی پری کلینیکل اور کلینیکل ریسرچ اور تشخیصی فیصلوں کو حاصل کیا جاسکے۔ طاقتور اور مضبوط امیج پروسیسنگ الگورتھم اور سافٹ ویئر کے ساتھ مل کر ہائی ریزولوشن اور اعلی مواد کی امیجنگ تکنیکوں کو لاگو کرنے کا ہمارا مجموعی نقطہ نظر اس سمت میں ایک قدم ہے۔

اگرچہ اس تحقیق کا دائرہ کار ایکس ویوو ہیومن سکن بایپسی پر اینٹی ایجنگ ٹیسٹ پراڈکٹ کے جواب میں کولیجن آرگنائزیشن کی تحقیقات تک محدود تھا، لیکن ان امیجنگ تکنیکوں میں ECM دوبارہ تشکیل دینے کی نگرانی اور مقدار درست کرنے کے مضمرات ہیں، جو کہ عام ترقی کی علامت ہے۔ زخموں کی شفا یابی کے ساتھ ساتھ جان لیوا حالات جیسے فبروسس اور کینسر جو کہ بے قابو ECM ریموڈلنگ سے پیدا ہوتے ہیں کی پیتھوفیسولوجی میں ایک اہم نشان ہے۔

مفادات میں تضاد

مصنفین نے اعلان کیا ہے کہ کسی بھی مفاد کے تصادم کو تحقیق کی غیر جانبداری پر تعصب کے طور پر نہیں سمجھا جا سکتا۔

حوالہ جات

1. Shin JW، Kwon SH، Choi JY، Na JI، Choi HR، Park KC۔ ڈرمل ایجنگ اور اینٹی ایجنگ اپروچ کے مالیکیولر میکانزم۔ Int J Mol Sci. 2019؛ 20(9):2126۔

2. Cox TR، Erler JT. ایکسٹرا سیلولر میٹرکس کی دوبارہ تشکیل اور ہومیوسٹاسس: فبروٹک بیماریوں اور کینسر کے مضمرات۔ ڈس ماڈل میچ۔ 2011؛4(2):165–78

3. Pittet JC, Freis O, Vazquez-Duchene MD, Perie G, Pauly G. ملٹی فوٹون ٹوموگرافی کے ذریعے انسانی ڈرمس ان-ویوو میں ایلسٹن/کولیجن کے مواد کی گہرائی اور عمر بڑھنے کے ساتھ ارتباط کے ساتھ تشخیص۔ کاسمیٹکس۔ 2014؛1(3):211–21

4. Longo C, Casari A, Beretti F, Cesinaro AM, Pellacani G. جلد کی عمر بڑھنے: کنفوکل مائیکروسکوپی کا استعمال کرتے ہوئے ایپیڈرمل اور ڈرمل تبدیلیوں کا مائکروسکوپک جائزہ۔ جے ایم اکیڈ ڈرمیٹول۔ 2013؛68(3):e73–82۔

5. Yamazaki K, Li E, Miyazawa A, Kobayashi M. ملٹی کنٹراسٹ جونز میٹرکس آپٹیکل کوہرنس ٹوموگرافی کے ساتھ آنکھوں کے کونے والے علاقوں میں متعدد آپٹیکل خصوصیات اور جھریوں کی شکل کی گہرائی سے حل شدہ تحقیقات۔ سکن ریس ٹیکنالوجی۔ 2020؛27(3):435–443۔

6. یو اے پی، چینگ جے، لی اے، سریواستو آر، لیو جے، وونگ ڈی ڈبلیو کے، وغیرہ۔ Vivo 3D ہائی ڈیفینیشن آپٹیکل کوہرنس ٹوموگرافی سکن سسٹم میں خودکار۔ سالانہ انٹر کانفرنس IEEE Eng Med Biol Soc. 2016؛ 2016:3895–8

7. Ruini C, Schuh S, Sattler E, Welzel J. Line-field confocal optical coherence tomography- dermatology میں عملی ایپلی کیشنز اور امیجنگ کے قائم کردہ طریقوں کے ساتھ موازنہ۔ سکن ریس ٹیکنالوجی۔ 2021؛ 27:340-52۔

8. Tal S,Maresky HS, Bryan T, Ziv E, Klein D, Persitz A, et al.MRI چہرے کے کاسمیٹک انجیکشن ایبل فلرز کا پتہ لگانے میں۔ ہیڈ فیس میڈ۔ 2016؛ 12(1):27۔

9. منڈاوا اے، راووری PR، کوناتھن آر. جلد کے گھاووں کی ہائی ریزولوشن الٹراساؤنڈ امیجنگ۔ انڈین جے ریڈیو امیجنگ۔ 2013؛23(3):269–7۔

10. Edwards SJ، Mavranesouli I، Osei-Assibey G، Marceniuk G، Wakefield V، Karner C. Vivascope 1500 اور 3000 جلد کے زخموں کا پتہ لگانے اور ان کی نگرانی کرنے والے نظام: ایک منظم جائزہ اور معاشی تشخیص۔ ہیلتھ ٹیکنالوجی کا اندازہ۔ 2016؛ 20(58):1–260۔

11. Ushiki T. کولیجن ریشے، جالی دار ریشے، لچکدار ریشے۔ مورفولوجیکل نقطہ نظر سے ایک جامع تفہیم۔ آرک ہسٹول سائٹول۔ 2002؛65(2):109–26

12. Starborg T, Kalson NS., Lu Y, Mironov A, Cootes T, Holmes D, et al. کولیجن فائبرل سائز اور تین جہتی تنظیم کا تعین کرنے کے لیے ٹرانسمیشن الیکٹران مائکروسکوپی اور 3view(R) کا استعمال۔ نیٹ پروٹوک۔ 2013؛ 8(7):1433–48۔

13. Wegner KA، Keikhosravi A، Eliceiri AW، Vezina CM۔ ٹشو سیکشنز میں کولیجن کی مقداری تشخیص کے لیے امیونو ہسٹو کیمسٹری کے ساتھ پیکوسیریس ریڈ ملٹی پلیکس کا فلوروسینس۔ جے ہسٹوکیم سائٹوکیم۔ 2017؛65(8):479–90۔

14. چنگور اے، ٹران-خانہ این، میتھوٹ ایس، گارون ایم، ہرٹیگ ایم بی، شیو ایم ایس، وغیرہ۔ کارٹلیج کی مرمت میں کولیجن تنظیم کی درست اور قابل اعتماد درجہ بندی کے لیے پولرائزڈ لائٹ مائکروسکوپی طریقہ۔ اوسٹیوآرتھر کارٹل۔ 2011؛19(1):126–35۔

15. Bernstein EF، Chen YQ، Kopp JB، Fisher L، Brown DB، Hahn PJ، et al. طویل مدتی سورج کی نمائش پیپلیری ڈرمس کے کولیجن کو تبدیل کرتی ہے۔ شمالی تجزیہ، امیونو ہسٹو کیمیکل سٹیننگ، اور کنفوکل لیزر اسکیننگ مائیکروسکوپی کے ذریعہ سورج سے محفوظ اور فوٹو ایجڈ جلد کا موازنہ۔ جے ایم اکیڈ ڈرمیٹول۔ 1996؛34(2 pt 1):209–18۔

16. Schuurmann M, Stecher MM, Paasch U, Simon JC, Grunewald S. Ex-vivo confocal لیزر اسکیننگ مائکروسکوپی کے لیے ڈیجیٹل سٹیننگ کی تشخیص۔ JEADV. 2020؛34(7):1496–9۔

17. Gareau DS. ہسٹوپیتھولوجی کی تقلید کے لئے ڈیجیٹل طور پر داغدار ملٹی موڈل کنفوکل موزیک کی فزیبلٹی۔ J Biomed Opt. 2009;14(3):034050۔

18. Zhang Y، Ingham B، Cheong S، Ariotti N، Tilley RD، Naffa R، et al. ریئل ٹائم Synchrotron چھوٹے زاویہ ایکس رے چمڑے کی پروسیسنگ کے دوران کولیجن کی ساخت کے بکھرے ہوئے مطالعہ. Ind Eng Chem Res. 2018؛57(1):63–9۔

19. تصویر سے معلومات تک: ڈرمیٹولوجی اور کٹینیئس بائیولوجی میں امیج پروسیسنگ۔ میں: ہیمبلن، ایم، اے وی سی، پی، گپتا، جی، ایڈیٹرز۔ ڈرمیٹولوجی میں امیجنگ، 1st ایڈ. اکیڈمک پریس: ایمسٹرڈیم، نیدرلینڈ؛ 2016. صفحہ 519–35۔

20. شنائیڈر ایس ایل، کوہلی اول، حمزوی آئی ایچ، کونسل ایم ایل، روسی اے ایم، اوزوگ ڈی ایم۔ ڈرمیٹولوجی میں ابھرتی ہوئی امیجنگ ٹیکنالوجیز، حصہ II: درخواستیں اور حدود۔ جے ایم اکیڈ ڈرمیٹول۔ 2019؛80(4):1121–31۔

21. Guida S, Pellacani G, Ciardo S, Longo C. عمر بڑھنے والی جلد اور جلد کے کینسر کی عکاسی مائیکروسکوپی امیجنگ۔ ڈرمیٹول پراک کا تصور۔ 2021;11(3):2021068۔

22. Wang H, Shyr T, Fevola MJ, Cula GO, Stamatas GN. انسانی جلد میں ڈرمل میٹرکس کی عمر سے متعلق مورفولوجیکل تبدیلیوں کو ملٹی فوٹون مائکروسکوپی کے ذریعہ ویوو میں دستاویز کیا گیا تھا۔ J Biomed Opt. 2018؛23(3):1–4۔

23. Jones RR، Castelletto V، Connon CJ، Hamley IW. انسانی فبرو بلاسٹس پر پیپٹائڈ ایمفیفائل C16-KTTKS کا کولیجن محرک اثر۔ مول فارم۔ 2013؛10(3):1063–9۔

24. گوروہی ایف، مائبچ ایچ آئی۔ عمر رسیدہ جلد کو روکنے یا علاج کرنے میں ٹاپیکل پیپٹائڈس کا کردار۔ انٹ جے کاسمیٹ سائنس۔ 2009؛31(5):327–45۔

25. شنڈے اے وی، ہیومیرس سی، فرنگوگینس این جی۔ فائبروبلاسٹ ثالثی میٹرکس سنکچن اور دوبارہ تشکیل دینے میں ایک ہموار پٹھوں کے ایکٹین کا کردار۔ بائیوکیم بایوفیس ایکٹا۔ 2017؛ 1863(1):298–309۔

26. ہنز بی، کولیٹا جی، ٹوماسیک جے جے، گبیانی جی، چاپونیر سی۔ الفا ہموار پٹھوں کے ایکٹین اظہار فائبروبلاسٹ کے سنکچن کی سرگرمی کو بڑھا دیتا ہے۔ مول بائیول سیل۔ 2001؛12(9):2730–41۔

27. Valcourt U, Alcaraz LB, Exposito JY, Lethias C, Bartholin L. Tenascin-X: Beyond the architectural function. سیل Adh Migr 2015؛9(1–2):154–65۔

28. Egging D, van den Berkmortel F, Taylor G, Bristow G, Schalkwijk J. ڈرمل ایکسٹرا سیلولر میٹرکس مالیکیولز کے ساتھ انسانی tenascin-X ڈومینز کے تعاملات۔ آرک ڈرمیٹول ریس۔ 2007؛ 298(8):389–96۔

29. مینامیتانی ٹی، اکوٹا ٹی، سائتو وائی، ٹیکبے جی، ساتو ایم، ساوا ایچ، وغیرہ۔ ٹیناسین-X اور قسم VI کولیجن کے ذریعہ کولیجن فبریلوجینیسیس کی ماڈیولیشن۔ Exp Cell Res. 2004؛298(1):305–15

امدادی معلومات

اضافی معاون معلومات ناشر کی ویب سائٹ پر مضمون کے آن لائن ورژن میں مل سکتی ہیں۔

【مزید معلومات کے لیے:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】