حصہ 2: ایکٹیوسائیڈ C-Fos انڈکشن اور NF-KB پاتھ وے کو روک کر اور ROS کی پیداوار کو کم کر کے RANKL-ثالثی آسٹیو کلاسٹوجینیسیس کو دباتا ہے۔
Mar 05, 2022
رابطہ: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 ای میل:audrey.hu@wecistanche.com
Seung-Youp Lee1,2., Keun-Soo Lee3.¤, Sea Hyun Yi2., Sung-Ho Kook, Jeong-Chae Lee22,3*
براہ کرم حصہ 1 پر واپس یہاں کلک کریں۔
ایکٹیوسائیڈمیکروفیجز کے ذریعہ ہڈیوں کے ریزورپشن کو روکتا ہے ایکٹیوسائیڈ نے خوراک پر منحصر انداز میں RANKL کی ثالثی ہڈیوں کے ریزورپشن کو بھی روکا، جیسا کہ ان وٹرو ماڈل سسٹم (تصویر 3A) سے ماپا جاتا ہے۔ جب BMMs کو 1 mM ایکٹیوسائیڈ (تصویر 3B) کے ساتھ انکیوبیٹ کیا گیا تھا تو ہڈیوں کی ریزورپشن کو نمایاں طور پر روکا گیا تھا۔ ایک 10 ایم ایم ایکٹیوسائیڈ ٹریٹمنٹ نے بی ایم ایمز کے ذریعہ RANKL-حوصلہ افزائی گڑھے کی تشکیل کو تقریبا مکمل طور پر کم کردیا۔ اسی طرح، ایکٹیوسائیڈ نے RANKL-حوصلہ افزائی RAW264.7 خلیات (تصویر S2A اور B) میں ہڈیوں کی ریزورپشن کو کم کیا۔ ایکٹیوسائیڈ کی ہڈیوں کے ریزورپشن کو روکنے کی صلاحیت کا انحصار RANKL محرک سے متعلق علاج کے وقت پر ہے۔ ایکٹیوسائیڈ (10 ایم ایم) نے RANKL محرک کے 4 دن بعد BMMs میں گڑھے کی تشکیل کو کم نہیں کیا، جبکہ اس نے تشکیل پانے والے آسٹیو کلاسٹس کی تعداد کو دبا دیا (تصویر 3C)۔ یہ مختلف نتیجہ جزوی طور پر RANKL محرک کی تشکیل (تصویر 3D) کے 4 دن کے بعد پہلے سے بننے والے گڑھے کے علاقے کی وجہ سے تھا۔
ایکٹیوسائیڈابتدائی RANKL سگنلنگ پاتھ ویز کو نیچے ریگولیٹ کرتا ہے۔
RANKL 3 معروف MAPKs اور NF-kB کو آسٹیو کلاس کے پیشرو میں ایکٹیویشن کی ترغیب دیتا ہے، اور یہ ایکٹیویشن ابتدائی آسٹیو کلاس تفریق کے لیے ضروری ہے۔ ممکنہ میکانزم کو سمجھنے کے لیے جس کے ذریعےایکٹیوسائیڈosteoclastogenesis کو روکتا ہے، ہم نے اس کے اثر کی تحقیقات کی۔ایکٹیوسائیڈمیکروفیجز میں MAPKs اور NF-kB ایکٹیویشن پر۔ BMMs اور RAW264.7 خلیوں کو 2 گھنٹے کے لیے 10 mM ایکٹیوسائیڈ کے ساتھ پہلے سے علاج کیا گیا اور پھر 30 منٹ کے لیے 100 ng/ml RANKL کے ساتھ حوصلہ افزائی کی گئی۔ MAPK فاسفوریلیشن کی جانچ مغربی بلوٹنگ اور امیونومیٹرک تجزیہ کے ذریعہ کی گئی۔ RANKL نے BMMs (تصویر 4A) اور RAW264.7 خلیات (تصویر 4B) میں p38، ERK، اور JNK کے فاسفوریلیشن کی حوصلہ افزائی کی۔ ایکٹیوسائیڈ نے p-p38، p-ERK، اور p-JNK میں ان RANKL کی حوصلہ افزائی میں اضافے کو روکا۔ اس نتیجہ کی تائید امیونومیٹرک تجزیہ سے ہوئی، جو کہ 10 ایم ایم ایکٹیوسائیڈ کے ساتھ پہلے سے علاج نے ان میکروفیجز (تصویر 4C) میں فاسفوریلیٹڈ MAPKs کی سطح کو نمایاں طور پر روک دیا۔ RANKL علاج نے NF-kB کے DNA-بائنڈنگ میں اضافہ کیا، جبکہ ایکٹیوسائیڈ نے NF-kB-DNA بائنڈنگ (تصویر 5A) کی RANKL-حوصلہ افزائی ایکٹیویشن کو روک دیا۔ یہ روکنا RAW264.7 خلیوں کے مقابلے BMMs میں زیادہ نمایاں تھا۔ ایکٹیوسائیڈ نے BMMs اور RAW264.7 خلیات (تصویر 5B اور C) میں RANKL-حوصلہ افزائی p65 اور IkBa فاسفوریلیشن کو بھی کم کیا۔ 10 ایم ایم ایکٹیوسائیڈ کو شامل کرنے سے BMMs میں IkBa کی تنزلی اور ایکٹیویشن دونوں کو تقریباً مکمل طور پر روک دیا گیا (تصویر 5B)۔ مزید اس بات کی تصدیق کرنے کے لیے کہ NF-kB ایکٹیویشن ایکٹیوسائیڈ کے عمل میں شامل ہے، kB پروموٹر-لوسیفریز کنسٹرکٹس کو عارضی طور پر RAW264.7 خلیوں میں منتقل کیا گیا تھا۔ 100 ng/ml RANKL کے ساتھ انکیوبیٹڈ سیلز میں 3-گنا زیادہ kB پروموٹر سرگرمی تھی، جو 10 mM ایکٹیوسائیڈ (تصویر 5D) سے نمایاں طور پر کم ہوئی تھی۔
ایکٹیوسائیڈسوزش والی سائٹوکائنز کی پیداوار کو دباتا ہے اور RANKL-Stimulated Macrophages میں TNF-a، c-Fos، اور NFATc1 کا اظہار TNF-a، IL-1b، اور IL-6 آسٹیو کلاس کی تشکیل میں اہم ہیں اور فنکشن، جو RANKL- محرک میکروفیجز میں NF-kB سگنلنگ کے ذریعے ثالثی کرتا ہے۔ RANKL نے ان سائٹوکائنز کی پیداوار کو متحرک کیا، اور یہ پیداوار BMMs (تصویر 6A) میں 10 ایم ایم ایکٹیوسائیڈ پریٹریٹمنٹ سے واضح طور پر کم ہوئی۔ اسی طرح، ایکٹیوسائیڈ نے RAW264.7 میکروفیجز (تصویر S3) میں IL-6 کے علاوہ، سائٹوکائنز کی RANKL کی حوصلہ افزائی کی پیداوار کو کم کیا۔ osteoclastogenesis میں ایکٹیوسائیڈ ایکشن کے مالیکیولر میکانزم کو سمجھنے کے لیے، ہم نے TNF-a، c-Fos، اور NFATc1 اظہار پر ایکٹیوسائیڈ کے اثر کا مزید جائزہ لیا۔ RANKL نے BMMs اور RAW264.7 خلیات (تصویر 6B اور C) میں ان عوامل کے mRNA اظہار کو اپ ریگولیٹ کیا۔ 10 ایم ایم ایکٹیوسائیڈ کے ساتھ پہلے سے علاج نے دونوں میں ان عوامل کے RANKL-حوصلہ افزائی اظہار کو نمایاں طور پر روک دیا۔
BMMs اور RAW264.7 سیل۔ ایکٹیوسائیڈ پریٹریٹمنٹ نے بھی RANKL- حوصلہ افزائی BMMs (تصویر 6D) میں c-Fos اور NFATc1 کی پروٹین کی سطح کو سختی سے کم کیا۔ یہ نتائج تجویز کرتے ہیں کہ ایکٹیوسائیڈ RANKL کو جین اور پروٹین کی سطح پر آسٹیو کلاس کی تشکیل کے ثالثوں کو آمادہ کرنے والے ثالثوں کو نیچے کو منظم کرتا ہے۔
CISTANCHE اقتباس: ایکٹیوسائیڈ
ایکٹیوسائیڈ خوراک پر منحصر انداز میں BMMs میں انٹرا سیلولر ROS جنریشن کو کم کرتا ہے۔
چونکہ یہ معلوم ہے کہ انٹرا سیلولر ROS پروڈکشن کا تعلق RANKL- stimulated osteoclastogenesis کے ساتھ ہے، اس لیے ہم نے تفتیش کی کہ آیا ایکٹیوسائیڈ ROS کی پیداوار کو روکتا ہے RANKL- ثالثی آسٹیوکلاسٹ تفریق کے دوران سیل پارگمیبل، آکسیڈیشن حساس ڈائی، DCFH-DA کا استعمال کرتے ہوئے۔ فلو سائٹومیٹری تجزیہ سے پتہ چلتا ہے کہ BMMs میں DCF کے لیے مخصوص اوسط فلوروسینس سگنل کو RANKL کے ساتھ محرک کے بعد بظاہر دائیں طرف منتقل کیا گیا تھا، ان کا علاج نہ کیے جانے والے کنٹرول سیلز (تصویر 7A) کے مقابلے میں۔ یہ تبدیلی اس معاملے سے ملتی جلتی تھی کہ RAW264.7 میکروفیجز RANKL محرک کے بعد دیکھے گئے تھے (ڈیٹا نہیں دکھایا گیا)۔ ایکٹیوسائیڈ کے ساتھ BMMs کا علاج خوراک پر منحصر انداز میں DCF کے سگنل کی شدت کو کم کرتا ہے۔ 10 ایم ایم ایکٹیوسائیڈ کے ساتھ پری ٹریٹمنٹ نے آسٹیو کلاس تفریق کے دوران پیدا ہونے والے انٹرا سیلولر ROS کی سطح کو غیر علاج شدہ کنٹرول لیول (تصویر 7B) تک تقریباً مکمل طور پر کم کر دیا۔
اورل ایکٹیوسائیڈ ایڈمنسٹریشن آسٹیوپوروٹک بائیو کیمیکل مارکروں کی تبدیلی اور اوورییکٹومائزڈ چوہوں میں ہڈیوں کے نقصان کو روکتی ہے۔
ہڈیوں کے نقصان پر ایکٹیوسائیڈ کے اثر کو دریافت کرنے کے لیے، ہم نے اوورییکٹومی کے ذریعے آسٹیوپوروٹک جانوروں کا ماڈل تیار کیا۔ تجرباتی مدت کے دوران OVX اور شام چوہوں کے درمیان جسمانی وزن میں کوئی خاص فرق نہیں تھا (ڈیٹا نہیں دکھایا گیا)۔ OVX گروپ میں IL-1b اور IL-6 کی سیرم کی سطح شام گروپ (تصویر 8) کے مقابلے میں نمایاں طور پر زیادہ تھی۔ ان سوزش والی سائٹوکائنز میں اوورییکٹومی کی حوصلہ افزائی میں اضافے کو زبانی ایکٹیوسائیڈ ایڈمنسٹریشن (AC گروپ) نے کم کیا تھا۔ OVX گروپ میں ہڈیوں کے ٹرن اوور مارکروں جیسے ALP، کیلشیم، TRAP5b، اور OC کے سیرم کی سطح میں نمایاں اضافہ ہوا ہے۔ ان آسٹیوپوروٹک مارکروں میں سے، OVX چوہوں میں کیلشیم، TRAP5b، اور OC کی بڑھتی ہوئی سطحوں کو بظاہر ایکٹیوسائیڈ علاج سے روکا گیا تھا، جبکہ ALP کے سیرم کی سطح کو علاج سے تبدیل نہیں کیا گیا تھا۔ دائیں فیمورل شافٹ کے وسط تک اوسط زیادہ سے زیادہ فریکچر بوجھ OVX گروپ میں شام گروپ (تصویر 9A) کے مقابلے میں نمایاں طور پر کم تھا۔ ایکٹیوسائیڈ علاج نے زیادہ سے زیادہ فریکچر کو شام گروپ تک بڑھا دیا۔ جب آپٹک مائیکروسکوپی کے ذریعے فیمر کی کارٹیکل ہڈی کو الگ کیا گیا اور مشاہدہ کیا گیا تو، OVX گروپ میں دکھائے گئے آسٹیوپوروٹک خصوصیات AC چوہوں (تصویر 9B) میں تقریباً مکمل طور پر غائب ہو چکی تھیں۔ OVX- حوصلہ افزائی آسٹیوپوروسس ماڈل پر ایکٹیوسائیڈ کے اثر کی تصدیق کرنے کے لیے، BMD اور بون مورفولوجک پیرامیٹرز کا لائٹ پروکسیمل فیمر کے ٹریبیکولر میں مائیکرو-CT کے ذریعے تجزیہ کیا گیا۔ جیسا کہ تصویر 9C میں دکھایا گیا ہے، OVX چوہوں میں فیمورل ٹریبیکولر فن تعمیر میں تبدیلی پائی گئی، جبکہ یہ تبدیلی ایکٹیوسائیڈ کے علاج سے کم ہوئی۔ مائیکرو-CT تجزیہ کے نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ BMD، ہڈیوں کی مضبوطی کا ایک پیمانہ، OVX چوہوں (تصویر 9D) میں ڈرامائی طور پر کم ہو گیا تھا۔ شام گروپ کے مقابلے میں، OVX چوہوں نے BV/TV، Tb میں بھی نمایاں تبدیلیاں دکھائیں۔ ایس پی، اور ٹی بی. N، لیکن Tb.Th میں نہیں۔ OVX چوہوں کے زبانی ایکٹیوسائیڈ علاج نے BMD کے ساتھ ساتھ BV/TV اور Tb.N میں تبدیلی کو نمایاں طور پر روکا۔
ایکٹیوسائیڈ بون میرو سیلز میں آسٹیوبلاسٹوجینس کو متاثر نہیں کرتا ہے۔
ہڈیوں کے گودے کے خلیوں کا استعمال کرتے ہوئے آسٹیو بلوسٹک تفریق پر ایکٹیوسائیڈ کے کردار کی مزید تفتیش کی گئی۔ جیسا کہ تصویر 10A میں دکھایا گیا ہے، ڈی اے جی کے علاج نے الزارین سرخ داغ والے خلیوں کی تعداد میں اضافہ کیا اور اسے 10 ایم ایم ایکٹیوسائیڈ پریٹریٹمنٹ سے تبدیل نہیں کیا گیا۔ موجود ڈائی کی مقدار نے اشارہ کیا کہ مشترکہ ایکٹیوسائیڈ اورڈی اے جی کے علاج سے معدنیات میں کوئی تبدیلی نہیں آئی (تصویر 10 بی)۔ اسی طرح، ہڈیوں سے متعلق مخصوص مارکروں کے انٹرا سیلولر کیلشیم مواد (تصویر 10C) اور mRNA کی سطح (تصویر 10D) میں DAG کی حوصلہ افزائی میں اضافہ، جیسے Runx2، Osterix، BSP، اور OC، ایکٹیوسائیڈ کے ساتھ پریٹریٹمنٹ سے متاثر نہیں ہوا۔
cistanche acteoside کا اثر
بحث
ہڈیوں کی دوبارہ تشکیل کو آسٹیو بلوسٹس کے ذریعہ ہڈیوں کی تشکیل اور آسٹیو کلاسٹس کے ذریعہ ہڈیوں کی بحالی کے درمیان توازن کے ذریعہ مضبوطی سے منظم کیا جاتا ہے۔ طویل اور ضرورت سے زیادہ ہڈیوں کی ریزورپشن کنکال کے ٹرن اوور کے عدم توازن کا سبب بنتی ہے، جس کے نتیجے میں ہڈیوں کو دوبارہ پیدا کرنے والی بیماریاں ہوتی ہیں۔ osteoclastogenesis پر ایکٹیوسائیڈ کے اثرات کو دریافت کرنے کے لیے، ہم نے دو میکروفیجز، پرائمری کلچرڈ BMMs اور RAW264.7 سیلز کا استعمال کیا۔
ان خلیوں کو RANKL کے ساتھ متحرک کیا گیا تھا تاکہ ایکٹیوسائیڈ کی موجودگی اور غیر موجودگی میں آسٹیو کلاسٹس میں فرق کیا جا سکے۔ ہم نے پہلی بار دکھایا کہ ایکٹیوسائیڈ آسٹیو کلاس تفریق اور تشکیل کو روکتا ہے۔ خود ایکٹیوسائیڈ کی جانچ کی گئی ارتکاز میں ترقی اور تفریق دونوں حالتوں میں بنیادی کلچرڈ میکروفیجز کی عملداری میں کمی کا سبب نہیں بنی۔
ایکٹیوسائڈ کے علاج نے بالغ آسٹیو کلاسٹس کی ریزورپشن سرگرمی کو بھی کم کیا۔ یہ نتائج تجویز کرتے ہیں کہ ایکٹیوسائیڈ میکروفیجز اور آسٹیو کلاسک ریسورپشن سرگرمی سے آسٹیو کلاسٹک تشکیل کو دباتا ہے۔ ہمارے ثقافتی نظام کے نتائج، جس میں آسٹیو بلوسٹس یا سٹرومل خلیے شامل نہیں تھے، یہ بھی تجویز کرتے ہیں کہ ایکٹیوسائیڈ آسٹیو کلاس کے پیشروؤں پر براہ راست عمل کرتے ہوئے آسٹیوکلاسٹ کی تشکیل کو روکتا ہے۔
RANKL MAPKs کو فعال کرتا ہے بشمول p38، ERK، اور JNK۔ یہ تین کنیز ابتدائی آسٹیو کلاسٹک تفریق میں شامل ہیں اور اس طرح ان کی روک تھام فارماسولوجیکل طور پر یا غالب-منفی JNK ٹرانسفیکشن کے ساتھ RANKL کی حوصلہ افزائی آسٹیو کلاسٹوجینیسیس کو دبا دیتی ہے [29]۔ ہمارے نتائج سے یہ بات سامنے آئی کہ ایکٹیوسائیڈ پریٹریٹمنٹ نے ان تمام کنیزوں کو روکا، جو MAPKs کے غیر مخصوص ڈاون ریگولیشن کی نشاندہی کرتا ہے۔ یہ نتیجہ پچھلی رپورٹ سے جزوی طور پر مختلف تھا کہ EGCG، گرین ٹی میں بڑے سوزش آمیز کمپاؤنڈ، خاص طور پر RANKL-حوصلہ افزائی BMMs [7] میں ERK یا p38 ایکٹیویشن کو متاثر کیے بغیر JNK ایکٹیویشن کو کم کرتا ہے۔ پیونول، ایک چینی جڑی بوٹی سے ماخوذ ایک اینٹی سوزش مرکب، بھی ERK اور p38 کو روکتا ہے، لیکن JNK نہیں، RANKL-حوصلہ افزائی RAW264.7 خلیوں میں فاسفوریلیشن [30]۔ اس کے برعکس، سلیبنن، ہڈیوں میں ایک نوول روکنے والا، پی 38، ERK، اور JNK کی RANKL حوصلہ افزائی ایکٹیویشن کو کم کرتا ہے [31]۔ ان نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ RANKL کے ذریعہ MAPK ایکٹیویشن پر اینٹی ریسورپٹیو مرکبات کے اثرات کمپاؤنڈ پر منحصر ہیں ، حالانکہ تینوں MAPKs ابتدائی آسٹیو کلاسٹوجینس میں شامل ہیں۔
اس مشاہدے پر غور کرتے ہوئے کہ ایکٹیوسائیڈ نے p-JNK کو کم کیا۔
RANKL-حوصلہ افزائی BMMs میں سطح، یہاں تک کہ 1 mM پر، p38 MAPK یا ERK کی بجائے JNK کی رکاوٹ خلیوں میں ایکٹیوسائیڈ ثالثی اینٹی آسٹیو کلاسٹوجینیسیس میں زیادہ مخصوص واقعہ دکھائی دیتی ہے۔ اگرچہ ایک ہی ارتکاز میں ایکٹیوسائیڈ نے بی ایم ایم میں آسٹیو کلاسٹس کی تعداد کو کم نہیں کیا، لیکن ایکٹیوسائیڈ علاج سے گڑھے کی تشکیل میں نمایاں کمی واقع ہوئی۔ ہم نے یہ بھی پایا کہ SP600125 کے ساتھ پہلے سے علاج، جو کہ JNK کے لیے مخصوص ایک فارماسولوجیکل روکنا ہے، نے ڈرامائی طور پر آسٹیو کلاسٹس کی تشکیل کو روکا (ڈیٹا نہیں دکھایا گیا)۔ اجتماعی طور پر، یہ نتائج بتاتے ہیں کہ JNK کی ثالثی سگنلنگ کا RANKL کے ذریعے حوصلہ افزائی کی گئی آسٹیو کلاسٹوجینس کے ایکٹیوسائیڈ میڈیٹڈ دبانے سے گہرا تعلق ہے۔
NF-kB سگنلنگ سیلولر واقعات کو منظم کرتا ہے، بشمول apoptosis، سیل سائیکل کی ترقی، سیل آسنجن، cytokine کی پیداوار، اور macrophages [32] میں بقا۔ آسٹیوکلاسٹ کی نشوونما کے لیے بھی NF-kB سگنلنگ کی ضرورت ہے، جس کا مظاہرہ NF-kB-ناک آؤٹ چوہوں میں آسٹیوپیٹروسس کی ظاہری شکل سے ہوا ہے [33,34]۔ لہذا، NF-kB کو روکنا اینٹی ریزورپٹیو ایجنٹوں کے لیے آسٹیو کلاس کی سرگرمی کو کم کرنے اور آسٹیوپوروسس کے علاج کے لیے ایک مؤثر ہدف ہونے کی تجویز ہے۔ NF-kB ذیلی خاندانی پروٹین کی ترجمہ کے بعد کی ترمیم NF-kB سرگرمی کو ماڈیول کرنے میں اہم ہے۔ خاص طور پر، p65 subunit اور IkB kinase کا فاسفوریلیشن NF-kB کے لیے osteoclastogenesis [7] کو دلانے کے لیے اہم ہے۔ ہمارے موجودہ نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ RANKL محرک نے BMMs اور RAW264.7 دونوں خلیوں میں NF-kB کی DNA بائنڈنگ سرگرمی اور p65 subunit اور IkBa کی فاسفوریلیشن میں اضافہ کیا۔ ایکٹیوسائیڈ کے ساتھ پہلے سے علاج نے ان RANKL کی حوصلہ افزائی میں اضافہ کو روک دیا، جس کے نتیجے میں NF-kB کی سرگرمی کو کم کیا گیا۔ اس کے نتیجے میں، یہ نتائج بتاتے ہیں کہ، MAPKs کے علاوہ، NF-kB سگنلنگ RANKL- محرک میکروفیجز سے آسٹیو کلاس تفریق اور تشکیل کو روکنے میں ایکٹیوسائیڈ کا بنیادی ہدف ہے۔
NF-kB سگنلنگ کے علاوہ، c-Fos/c-Jun/NFATc1 راستہ آسٹیوکلاسٹ کی نشوونما میں کلیدی کردار ادا کرتا ہے، اس طرح ان میں سے کسی بھی پروٹین کی کمی آسٹیوکلاسٹوجنیسیس کو روک سکتی ہے [35,36]۔ اس مطالعے میں، ہم نے پایا کہ ایکٹیوسائیڈ نے ایم آر این اے اور پروٹین کی سطح پر RANKL-حوصلہ افزائی c- Fos اور NFATc1 اظہار کو روکا۔ JNK c-Jun کا ایک upstream kinase ہے، جو RANKL [29] کے جواب میں NFATc1 اظہار اور osteoclastogenesis کے لیے ضروری ہے۔
ردی روکنے والے کے ساتھ TheJNK/c-Jun کے راستے کو مسدود کرنے سے RANKL کی حوصلہ افزائی آسٹیو کلاس کی تشکیل اور c-Fos اور NFATc1 اظہار میں کمی آئی [7]۔ ہمارے نتائج اور پچھلے نتائج بتاتے ہیں کہ ایکٹیوسائیڈ کے ذریعہ JNK-ثالثی سگنلنگ کو روکنا RANKL-ثالثی c-Fos اور NFATc1 کو روکنے کے ساتھ قریب سے وابستہ ہے۔اظہار، جو میکروفیجز میں آسٹیو کلاس تفریق کو دباتا ہے۔ BMMs اور RAW264.7 خلیوں پر ایکٹیوسائیڈ کے اثرات میں فرق کم از کم جزوی طور پر JNK کی روک تھام کی حساسیت میں فرق کی وجہ سے ہے۔
TNF-a RANKL-RANK سگنلنگ [37] سے آزاد آسٹیوکلاسٹوجنیسیس کو آمادہ کر سکتا ہے۔ IL-1 ایسٹروجن کی کمی یا سوزش کی وجہ سے پیتھولوجیکل ہڈیوں کی تباہی کا ایک طاقتور ثالث ہے [7]۔ قسم I IL-1 رسیپٹر یا IL-1 سگنلنگ میں خلل ڈالنا اوورییکٹومی [38] یا ریمیٹائڈ گٹھیا [39] کی وجہ سے ہڈیوں کے نقصان کو ریورس کر سکتا ہے۔ اس مطالعے نے میکروفیجز میں TNF-a، IL- 1b، اور IL-6 جیسی سوزش والی سائٹوکائنز کی پیداوار کو کم کرنے کے لیے ایکٹیوسائیڈ کی صلاحیت کو ظاہر کیا۔ سوچا جاتا ہے کہ ایکٹیوسائیڈ p38 کناز اور ERK سگنلنگ کو دبا کر سوزش والی سائٹوکائن کی پیداوار کو روکتا ہے، کیونکہ ERK1/2، p38 MAPK، یا دونوں کو چالو کرنا میکروفیجز [40,41] میں ان سائٹوکائنز کی lipopolysaccharide کی حوصلہ افزائی کے لیے ضروری ہے۔ Luteolin، ایک سوزش آمیز مرکب، p38 MAPK ایکٹیویشن [42] کو روک کر سوزش کے ثالثوں کی پیداوار کو دبانے کی بھی اطلاع ملی ہے۔ اس مطالعے میں، ہم نے یہ بھی پایا کہ اوورییکٹومائزڈ چوہوں میں ایکٹیوسائیڈ نے ہڈیوں کے نقصان کو کم کیا، جیسا کہ دائیں فیمر کے مڈ شافٹ میں زیادہ سے زیادہ فریکچر فورس کی بحالی اور آسٹیوپوروٹک کارٹیکل ہڈی کے غائب ہونے کا ثبوت ہے۔ اورل ایکٹیوسائیڈ ایڈمنسٹریشن نے سیرم IL-1b اور IL-6 کی سطحوں میں ovariectomized-Induced in-creases کو نیچے ریگولیٹ کیا، لیکن ALP کو نہیں۔ OVX میں کیلشیم، TRAP اور OC کی بڑھتی ہوئی سیرم کی سطح کو ایکٹیوسائیڈ کے ساتھ زبانی علاج سے بھی روکا گیا، یہ تجویز کرتا ہے کہ ایکٹیوسائیڈ ہڈیوں کی تشکیل کے ساتھ ساتھ ریزورپشن کے لیے مخصوص بائیو مارکر کی تبدیلی کو کم کرتا ہے۔ چونکہ آسٹیوپوروسس کی خصوصیت کم بڑے پیمانے پر کثافت اور بگڑتی ہوئی ٹریبیکولر ہڈی مائکرو آرکیٹیکچر ہے، OVX کی حوصلہ افزائی ٹریبیکولر ہڈیوں کا نقصان اور مورفومیٹرک پیرامیٹر کی تبدیلی کو زبانی ایکٹیوسائیڈ انتظامیہ کے ذریعہ نمایاں طور پر روک دیا گیا تھا۔ یہ نتائج بتاتے ہیں کہ ایکٹیوسائیڈ کو غیر متوازن آسٹیو کلاس ایکٹیویشن کو الٹ کر آسٹیوپوروسس کے علاج کے لیے ایک اینٹی ریزورپٹیو ایجنٹ کے طور پر استعمال کیا جا سکتا ہے۔ تاہم، اوسٹیو بلوسٹس ہڈیوں کی نئی تشکیل کے لیے ذمہ دار بنیادی عنصر ہیں۔ اس طرح ہڈیوں کی تشکیل کو بڑھانے کے لیے آسٹیو بلاسٹ کے پھیلاؤ یا تفریق کو بڑھانے کے قابل ایک ایجنٹ کی ضرورت ہے [30]۔ اس کے برعکس، ہم نے پایا کہ ایکٹیوسائیڈ نے ڈی اے جی سے علاج شدہ بون میرو خلیوں میں آسٹیو بلاسٹ تفریق یا معدنیات کو متاثر نہیں کیا۔ ایک ساتھ لے کر، ہمارے نتائج بتاتے ہیں کہ ایکٹیوسائیڈ کا اینٹی ریزورپشن اثر ہوتا ہے لیکن یہ ہڈیوں کی تشکیل کو براہ راست متاثر نہیں کرتا ہے۔ Vivo اور in Vitro میں ہڈیوں کے مخصوص پیرامیٹرز کا تجزیہ کرنے کے لیے مزید تفصیلی تجربات کی ضرورت ہے تاکہ یہ واضح کیا جا سکے کہ آیا ایکٹیوسائیڈ آسٹیو بلاسٹوجنیسیس کو فائدہ پہنچاتا ہے یا نہیں۔
موجودہ مطالعہ MAPKs اور متعدد نقلی عوامل جیسے NF-kB، c-Fos، اور NFATc1 کو دبا کر آسٹیو کلاس تفریق اور ہڈیوں کے ریزورپشن پر ایکٹیوسائیڈ کے روکنے والے اثر کو اجاگر کرتا ہے۔ اعداد و شمار دو ممکنہ طریقہ کار بتاتے ہیں جن کے ذریعے ایکٹیوسائیڈ کو یہ فوائد حاصل ہوتے ہیں۔
CISTANCHE ECHINACOSIDE اور ACTIOSIDE آسٹیوپوروسس کا علاج کر سکتے ہیں
حوالہ جات
1. RhoJ, Takami M, Choi Y (2004) Osteoimmunology: مدافعتی اور کنکال کے نظام کے تعامل۔ مالیکیولز اور سیلز 17:1-9۔
2. Del Fattore A، Capannolo M، Rucci N (2010) Bone and bone marrow: ایک ہی عضو۔ آرکائیوز آف بائیو کیمسٹری بائیو فزکس 503: 28–34۔
3. Rachner TD, Khosla S, Hofbauer LC (2011) آسٹیوپوروسس: اب اور مستقبل۔ لینسیٹ 377: 1276–1287۔
4. اسٹرج جے، کیلی ایم پی، ویکس مین جے (2011) پروسٹیٹ کینسر میں ہڈیوں کا میٹاسٹیسیس: ابھرتی ہوئی علاج کی حکمت عملی۔ فطرت کا جائزہ کلینیکل آنکولوجی 8: 357–368۔
5. گولٹزمین ڈی (2002) دریافتیں، منشیات، اور کنکال کے عوارض۔ نیچر ریویو ڈرگ ڈسکوری 1: 784–796۔
6. روڈن جی اے، مارٹن ٹی جے (2002) ہڈیوں کی بیماریوں کے علاج کے طریقے۔ سائنس 289: 1508–1514۔
7. لی جے ایچ، جن ایچ، شم ایچ ای، کم ایچ این، ہا ایچ، وغیرہ۔ (2010) Epigallocatechin-3- gallate osteoclastogenesis کو روکتا ہے c-Fos اظہار کو کم کرکے اور جوہری عنصر-kappaB سگنل کو دبا کر۔ مالیکیولر فارماکولوجی 77:17–25۔
8. کم ایچ این، لی جے ایچ، جن ڈبلیو جے، کو ایس، جنگ کے، وغیرہ۔ (2012) MS-275، ایک بینزامائڈ ہسٹون ڈیسیٹیلیز انحیبیٹر، سی-فوس اظہار کو کم کر کے اوسٹیو کلاسٹوجینیسیس کو روکتا ہے اور چوہوں میں ہڈیوں کے نقصان کو دباتا ہے۔ یورپی جرنل آف فارماکولوجی 691: 69–76۔
9. Kim T, Ha H, Shim KS, Cho WK, MaJY (2013) اوورییکٹومائزڈ چوہا ماڈل میں Yijung-tang کا اینٹی آسٹیوپوروٹک اثر آسٹیو کلاس تفریق کی روک تھام کے ذریعے ثالثی کیا گیا۔ جرنل آف ایتھنوفارماکولوجی 146: 83–89۔
10. Nakanishi A, Litsuka N, Tsukamoto J (2013) مچھلی کا تیل اوورییکٹومائزڈ چوہوں میں M-CSF, PU.1, MITF اور RANK کے کم اظہار کے ذریعے آسٹیو کلاسٹوجینیسیس کو روک کر ہڈیوں کی بحالی کو دباتا ہے۔ مالیکیولر میڈیسن رپورٹس 7: 1896–1903۔
11. Bar-Shavit Z (2007) The osteoclast: a multinucleated, hematopoietic-origin, bone-resorbing osteoimmune cell۔ جرنل آف سیلولر بائیو کیمسٹری 102: 1130–1139۔
12. تاکاہاشی N، Maeda K، Ishihara A، Uehara S، Kobayashi Y (2011) RANKL اور Wnt سگنلز کے ذریعے osteoclastogenesis کا ریگولیٹری میکانزم۔ بایو سائنس میں فرنٹیئرز 16:21–30۔
