خلاصہ:

حالیہ مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ پلمبگین میں سوزش، اینٹی الرجک، اینٹی بیکٹیریل، اور کینسر کے خلاف سرگرمیاں ہیں۔ تاہم، یہ ابھی تک نہیں دکھایا گیا ہے کہ آیا پلمبگین ہائپر پیگمنٹیشن کو روکنے کے لیے الفا میلانوسائٹ محرک ہارمون (-MSH) کی حوصلہ افزائی میلانین ترکیب کو دباتا ہے۔ اس مطالعہ میں، ہم نے یہ ظاہر کیا کہ پلمبگین B16F10 ماؤس میلانوما خلیوں میں -MSH- محرک میلانین ترکیب کو نمایاں طور پر دباتا ہے۔ میلانین کی ترکیب پر پلمبگین کے روکے ہوئے طریقہ کار کو سمجھنے کے لیے، ہم نے سیلولر یا سیل فری ٹائروسینیز ایکٹیویٹی اسسیس کیے اور میلانوجینیسیس سے متعلق جین ایکسپریشن کا تجزیہ کیا۔ ہم نے یہ ظاہر کیا کہ پلمبگین میلانوجینیسیس سے وابستہ ٹرانسکرپشنی مشینری سے آزاد ٹائروسینیز سرگرمی کو براہ راست دباتا ہے، جس میں مائیکرو فیتھلمیا سے وابستہ ٹرانسکرپشن فیکٹر (MITF)، ٹائروسینیز (TYR)، اور ٹائروسینیز سے متعلق پروٹین 1 (TYRP1) شامل ہیں۔ ہم نے یہ بھی چھان بین کی کہ آیا پلمبگین عام انسانی کیراٹینوسائٹس (HaCaT) اور لینس اپیتھیلیل سیل (B3) کے لیے زہریلا تھا جو جلد کی دیکھ بھال کرنے والے کاسمیٹکس کے استعمال سے زخمی ہو سکتے ہیں۔ حیرت کی بات یہ ہے کہ کم پلمبگین ارتکاز (0.5–1 µM) مؤثر طریقے سے میلانین کی ترکیب اور ٹائروسینیز کی سرگرمی کو روکتا ہے لیکن کیراٹینوسائٹس، لینس اپیتھیلیل سیلز، اور B16F10 ماؤس میلانوما سیلز میں زہریلے پن کا سبب نہیں بنتا، یہ تجویز کرتا ہے کہ پلمبگین کا استعمال جلد کے لیے محفوظ ہے۔ ایک ساتھ مل کر، یہ نتائج بتاتے ہیں کہ رنگت پر پلمبگین کا روکنے والا اثر اسے جلد کی سفیدی کے لیے استعمال ہونے والی جلد کی دیکھ بھال کے کاسمیٹک فارمولیشنز میں استعمال کے لیے ایک قابل قبول اور محفوظ جزو بنا سکتا ہے۔

متعلقہ مطالعات کے مطابق،cistancheایک عام جڑی بوٹی ہے جسے "معجزہ جڑی بوٹی جو زندگی کو طول دیتی ہے" کے نام سے جانا جاتا ہے۔ اس کا بنیادی جزو ہے۔cistanoside، جس کے مختلف اثرات ہوتے ہیں جیسےاینٹی آکسیڈینٹ, غیر سوزشی، اورمدافعتی فنکشن کو فروغ دینا. cistanche اور کے درمیان میکانزمجلد کی سفیدیcistanche کے اینٹی آکسیڈینٹ اثر میں مضمر ہے۔glycosides. انسانی جلد میں میلانین ٹائروسین کے آکسیکرن کے ذریعے پیدا ہوتا ہے۔ٹائروسینیز، اور آکسیڈیشن ردعمل میں آکسیجن کی شرکت کی ضرورت ہوتی ہے، لہذا جسم میں آکسیجن فری ریڈیکلز میلانین کی پیداوار کو متاثر کرنے والا ایک اہم عنصر بن جاتے ہیں۔ Cistanche میں cistanoside ہوتا ہے، جو کہ ایک اینٹی آکسیڈنٹ ہے اور جسم میں آزاد ریڈیکلز کی پیداوار کو کم کر سکتا ہے، اس طرحمیلانین کی پیداوار کو روکتا ہے۔.

Cistanche Tubulosa Supplement پر کلک کریں۔

مزید معلومات کے لیے:

david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

مطلوبہ الفاظ:پلمبگین melanogenesis؛ رنگت ٹائروسینیز

1. تعارف

میلانین epidermal melanocytes میں ترکیب شدہ روغن کے ایک گروپ پر مشتمل ہوتا ہے جو بالائے بنفشی (UV) تابکاری کے نقصان سے جلد کی حفاظت میں اہم کردار ادا کرتا ہے [1]۔ غیر معمولی میلانوجینیسس، یا تو میلانین کی پیداوار میں اضافہ یا کمی، جلد کی کئی بیماریوں سے قریبی تعلق رکھتا ہے جن میں میلانوما اور پگمنٹیشن عوارض، جیسے کلوزما اور فریکلز [2,3]۔ میلانین کی بایو سنتھیسس متعدد محرکات سے شروع ہوتی ہے جس میں UV شعاع ریزی، سوزش والی سائٹوکائنز، اور ہارمونل سگنلنگ شامل ہیں۔ خاص طور پر، -میلانوسائٹ محرک ہارمون (-MSH) جو UV-بے نقاب کیراٹینوسائٹس سے جاری ہوتا ہے، epidermal melanocytes میں CAMP-PKA-CREB (سائیکلک اڈینوسین مونو فاسفیٹ-پروٹین کناز ای سی اے ایم اے) کو فعال کر کے میلانن بائیو سنتھیسز کو متحرک کر سکتا ہے۔ . متحرک CAMP-PKA-CREB محور mRNA انکوڈنگ مائکروفتھلمیا سے وابستہ ٹرانسکرپشن فیکٹر (MITF) میں اضافہ کا باعث بنتا ہے۔ MITF ٹائروسینیز (TYR)، ٹائروسینیز سے متعلقہ پروٹین 2 (TYRP1)، اور tyrosinase سے متعلق پروٹین 2 (TYRP2) کے جین اظہار کو میلانوسائٹس [3,4] میں MSH محرک پر بڑھاتا ہے۔ اس کے علاوہ، بہت سے سگنلنگ راستے جو سیل کی نمو کو کنٹرول کرتے ہیں، بشمول mitogen-activated protein kinases (MAPKs)، extracellular Response kinase (ERK)، اور AKT، MITF استحکام اور سرگرمی کو منظم کرکے میلانوجینیسیس کے لیے ضروری ہیں [5]۔

اینزائم ٹائروسینیز، ایک ملٹی فنکشنل تانبے پر مشتمل آکسیڈیز، میلانین بائیو سنتھیسز میں ان ری ایکشنز کو کیٹلائز کر کے ایک اہم کردار ادا کرتا ہے جس میں L-ٹائروسین کو ہائیڈرو آکسیلیٹ کیا جاتا ہے L-dihydroxyphenylalanine (L-DOPA) اور L-DOPA کو آکسیڈائز کیا جاتا ہے o-quinoneone (L-DOPA) ) [5,6]۔ اس لیے، کچھ ٹائروسینیز انحیبیٹرز میلانین بائیو سنتھیسز کو بھی روکتے ہیں، اور ان میں ریسویراٹرول، آربوٹین، اور ہونوکیول شامل ہیں، جو سب جلد کو سفید کرنے والے کاسمیٹک ایپلی کیشنز میں استعمال ہوتے رہے ہیں [7]۔

Plumbagin ایک سادہ ہائیڈروکسیل-naphthoquinone ہے، جو سب سے پہلے پودوں کی Plumbago genus کی جڑوں سے نکالا گیا تھا اور اس میں قابل ذکر دواؤں کی خصوصیات کو دکھایا گیا ہے [8]۔ پلمبگین کی اینٹی سوزش، اینٹی کینسر، اینٹی الرجک اور اینٹی بیکٹیریل سرگرمیوں کی اطلاع دی گئی ہے [8,9]۔ درحقیقت، یہ اطلاع دی گئی ہے کہ پلمبگین نیوٹروفیل ایکٹیویشن، انجیوجینیسیس، اور کولیجنیس اظہار کو ٹوپوسومیریس-II کو دبا کر روکتا ہے، جو کہ رمیٹی سندشوت کے علاج میں ایک ممکنہ دوا کے طور پر پلمبگین کے استعمال کی تجویز کرتا ہے [10]۔ اس کے علاوہ، متعدد رپورٹس سے پتہ چلتا ہے کہ پلمبگین کینسر کی متعدد اقسام میں کینسر مخالف سرگرمی کو ظاہر کرتا ہے، بشمول چھاتی [11]، پروسٹیٹ [12]، ڈمبگرنتی [13]، پھیپھڑوں [14]، جلد کا کارسنوما [15]، اور جگر کا کینسر۔ [16]۔ اگرچہ یہ واضح ہوتا جا رہا ہے کہ plumbagin مختلف انسانی بیماریوں کے علاج میں ایک علاج کی مداخلت کے طور پر کارآمد ثابت ہو سکتا ہے، لیکن hyperpigmentation سے منسلک melanogenesis پر plumbagin کے روکنے والے اثر کی کبھی اطلاع نہیں دی گئی۔

موجودہ مطالعہ میں، ہم نے -MSH کی طرف سے حوصلہ افزائی کی melanogenesis پر plumbagin کے روکنے والے اثرات کا اندازہ کیا. یہاں ہم یہ ظاہر کرتے ہیں کہ پلمبگین نمایاں طور پر B16F10 ماؤس میلانوما خلیوں میں -MSH-حوصلہ افزائی میلانین بائیو سنتھیس کو ٹائروسینیز سرگرمی کو روک کر دباتا ہے لیکن یہ میلانوجینیسیس سے وابستہ MITF- ثالثی جین اظہار کو نہیں روکتا ہے۔

2. نتائج

2.1 B16F10 ماؤس میلانوما سیلز میں پلمبگین کی کیمیائی ساخت اور سائٹوٹوکسک اثرات

پلمبگین کے اینٹی میلانوجینک اثرات کا مطالعہ کرنے سے پہلے، ہم نے سب سے پہلے میلانین پیدا کرنے والے B16F10 ماؤس میلانوما خلیوں میں اس کے زہریلے پن کا اندازہ کیا۔ پلمبگین کی کیمیائی ساخت کو شکل 1A میں دکھایا گیا ہے۔ ہمارے سائٹوٹوکسیٹی پرکھ کے نتائج جس میں 5 µM سے کم پلمبگین کی تعداد نے B16F10 خلیوں میں سیل کی عملداری کو متاثر نہیں کیا وہ شکل 1B میں دکھائے گئے ہیں۔

2.2 پلمبگین B16F10 ماؤس میلانوما سیلز میں ایم ایس ایچ کی حوصلہ افزائی میلانین کی ترکیب کو دباتا ہے

اس کے بعد ہم نے B16F10 خلیوں میں میلانوسائٹ محرک ہارمون (-MSH) کی حوصلہ افزائی میلانین ترکیب پر پلمبگین کے روکنے والے اثرات کی تحقیقات کی۔ ہم نے یہ ظاہر کیا کہ پلمبگین B16F10 خلیات (شکل 2A) کے مہذب میڈیم میں -MSH-حوصلہ افزائی میلانین جمع کو مضبوطی سے دباتا ہے۔ -MSH-حوصلہ افزائی میلانین ترکیب پر پلمبگین کے روکنے والے اثر کی تصدیق کرنے کے لیے، ہم نے -MSH-حوصلہ افزائی B16F10 خلیوں میں پلمبگین کی عدم موجودگی یا موجودگی میں ایکسٹرا سیلولر یا انٹرا سیلولر میلانین مواد کا تعین کیا۔ اعداد و شمار 2B اور C ظاہر کرتے ہیں کہ پلمبگین ایکسٹرا سیلولر اور انٹرا سیلولر میلانین مواد کو نمایاں طور پر کم کرتا ہے۔

2.3 Plumbagin ریگولیٹ نہیں کرتا - MSH- حوصلہ افزائی میلانوجینیسیس جین ایکسپریشن اور سگنل کی نقل و حمل کاسکیڈز

چونکہ مائکروفتھلمیا سے وابستہ ٹرانسکرپشن عنصر (MITF) ایک ضروری ٹرانسکرپشن عنصر ہے جو میلانوجینیسیس سے وابستہ جین اظہار کو -MSH-PKA-CREB محور کے ذریعے منظم کرتا ہے، ہم نے تحقیقات کی کہ آیا پلمبگین میلانوجینیسیس سے وابستہ MITF- ثالثی جین اظہار کو منظم کر سکتا ہے۔ سب سے پہلے، ہم نے -MSH محرک کے تحت MITF، ٹائروسینیز (TYR)، اور ٹائروسینیز سے متعلق پروٹین 1 (TYRP1) کے لیے زیادہ سے زیادہ میلانوجینیسیس جین ایکسپریشن کا ٹائم پوائنٹ طے کیا۔ ایم آئی ٹی ایف کو 2 گھنٹے کے لئے ایم ایس ایچ کے علاج کے بعد مضبوطی سے اپ گریڈ کیا جاتا ہے (شکل 3A)۔ TYR اور TYRP1 کو ڈرامائی طور پر 48 گھنٹے -MSH علاج (شکل 3A) کے بعد بڑھا دیا گیا تھا۔ MITF اور tyrosinase پروٹین کی سطح میں -MSH علاج کے جواب میں اضافہ ہوا اور پلمبگین ٹریٹمنٹ (شکل 3B) سے دبایا نہیں گیا۔ مستقل طور پر، پلمبگین نے MITF، TYR، اور TYRP1 mRNA کی سطح کو -MSH محرک کے بعد نہیں روکا، یہ تجویز کرتا ہے کہ Plumbagin B16F10 خلیات (شکل 3C) میں میلانوجینیسیس جین اظہار سے متعلق ٹرانسکرپشنی مشینری کو منظم نہیں کرتا ہے۔ چونکہ AKT، ERK1/2، اور CREB کی فاسفوریلیشن اور ایکٹیویشن (بڑے سگنل ٹرانزیکشن کاسکیڈز جو میلانوجینیسیس کو منظم کرتے ہیں) میلانوجینیسیس [3] کے لیے درکار ہیں، ہم نے مزید تفتیش کی کہ آیا پلمبگین ان میلانوجینیسیس سے وابستہ سگنل کی نقل و حمل کے راستوں کو منظم کرتا ہے۔ ہمارے نتائج، جو کہ شکل 3D میں بیان کیے گئے ہیں، ظاہر کرتے ہیں کہ Plumbagin AKT، ERK1/2، یا CREB سگنلنگ کو MSH علاج کے بعد تبدیل نہیں کرتا ہے۔

2.4 پلمبگین ٹائروسینیز کی سرگرمی کو روکتا ہے۔

چونکہ بالواسطہ یا بالواسطہ ٹائروسینیز روکنے والی قدرتی مصنوعات جلد کو سفید کرنے والی کاسمیٹکس کی نشوونما کے لیے کارآمد ثابت ہو سکتی ہیں، اس کے بعد ہم نے ٹائروسینیز انزائم کی سرگرمی پر پلمبگین کے روکنے والے اثر کی چھان بین کی۔ اس مطالعہ میں، ہم نے یہ ظاہر کیا کہ پلمبگین B16F10 خلیات (شکل 4A) میں -MSH-حوصلہ افزائی سیلولر ٹائروسینیز انزیمیٹک سرگرمی کو نمایاں طور پر دباتا ہے۔ یہ سمجھنے کے لیے کہ آیا پلمبگین ٹائروسینیز کی سرگرمی کو براہ راست یا بالواسطہ روکتا ہے، سیل فری ٹائروسینیز کی سرگرمی کی پیمائش کی گئی۔ Plumbagin مشروم سے ماخوذ ٹائروسینیز کی L-DOPA آکسیڈیشن سرگرمی کو بھی سختی سے روکتا ہے، یہ تجویز کرتا ہے کہ پلمبگین ٹائروسینیز کی سرگرمی کو براہ راست روک کر میلانوجینیسیس کو دباتا ہے (شکل 4B)۔ اس کے علاوہ، 1،1-ڈفینائل-2-پکریل ہائیڈرزائل (DPPH) پرکھ کا استعمال کرتے ہوئے ریڈیکل اسکیوینگنگ سرگرمیوں میں نمایاں بلندی کو وٹامن سی اور پلمبگین کے ساتھ علاج کیے گئے نمونوں میں 0.1 تک کی تعداد میں دیکھا گیا۔ 5 ملی گرام / ایم ایل تک۔ نتیجتاً، 5 ملی گرام/ملی لیٹر پلمبگین نے 0.1 ملی گرام/ملی لیٹر وٹامن سی (شکل 4C) کی بنیاد پر صفائی کی سرگرمی پر اسی طرح کا اثر ظاہر کیا۔

2.5 Plumbagin عام کیراٹینوسائٹس اور لینس اپیٹیلیل سیل میں زہریلا نہیں ہے

چونکہ جلد کی کریم جیسی کاسمیٹکس بیرونی استعمال کے لیے ہیں اور سائٹوٹوکسیٹی جلد کے مسائل کا سبب بن سکتی ہے، اس لیے ہم نے مزید تفتیش کی کہ آیا پلمبگین نارمل کیراٹینوسائٹس (HaCaT) اور لینس کے اپکلا خلیات (B3) کے لیے زہریلا ہے اور کیا یہ جلد کی سفیدی کی نشوونما کے لیے مفید ہو سکتا ہے۔ کاسمیٹکس نتیجتاً، ہم نے پایا کہ کم پلمبگین ارتکاز (1–5 µM) HaCaT اور B3 خلیات میں زہریلے پن کا سبب نہیں بنتا، لیکن میلانین کی ترکیب (شکل 5A) کی روک تھام میں موثر ہے۔ مزید برآں، پلمبگین نے ڈی این اے کو پہنچنے والے نقصان سے متعلق H2AX کو آمادہ نہیں کیا اور HaCaT اور B3 خلیات (شکل 5B) میں سیلولر اپوپٹوس سے متعلقہ پولی (ADP-ribose) پولیمریز (PARP) اور کیسپیس{10} پروٹینوں کو کم نہیں کیا، جو تجویز کرتا ہے کہ پلمبگین جلد کو سفید کرنے والی مصنوعات میں بغیر کسی جلد کے زہریلے پن کی نمائش کے لیے قابل قبول ہو۔

3. بحث

پلمبگین ایک پودے سے ماخوذ ثانوی میٹابولائٹ ہے اور کئی حیاتیاتی افعال کو ظاہر کرتا ہے، بشمول اینٹی سوزش، اینٹی کینسر، اینٹی الرجک، اور اینٹی بیکٹیریل سرگرمیاں [8,9]۔ تاہم، یہ معلوم نہیں ہوسکا کہ آیا پلمبگین کا ہائپر پیگمنٹیشن اور میلانوما سے منسلک میلانوجینیسیس پر روکنے والا اثر تھا۔ اس مطالعہ میں، ہم نے یہ ظاہر کیا کہ پلمبگین B16F10 میلانوما خلیوں میں میلانوجینیسس کو مضبوطی سے دباتا ہے، اور یہ کام پلمبگین کی سوزش، اینٹی الرجک، اینٹی بیکٹیریل، اور اینٹی میلانوجینیسیس سرگرمیوں پر مبنی جلد کی دیکھ بھال کرنے والے کاسمیٹکس تیار کرنے کا موقع فراہم کر سکتا ہے۔

چونکہ melanogenesis کی اپ گریجولیشن اکثر مہلک میلانوما میں دیکھی جاتی ہے جس میں خون میں ٹائروسینیز کی سطح کے ساتھ ساتھ ٹیومر کے ٹشوز بھی زیادہ ظاہر ہوتے ہیں، یہ ظاہر ہے کہ میلانوجینیسیس مہلک میلانوماس کی کیموتھریپی کے لیے ممکنہ ہدف ہے [1]۔ موجودہ مطالعے میں، ہم نے پایا کہ پلمبگین میلانوجینیسیس (شکل 6) سے وابستہ ٹرانسکرپشنی مشینری سے آزاد ٹائروسینیز سرگرمی کو براہ راست دباتا ہے۔ لہذا، ہمارے نتائج بتاتے ہیں کہ پلمبگین مہلک میلانوما کے انتظام کے لیے حفاظتی اور علاج کی حکمت عملی کا ممکنہ جزو ہو سکتا ہے۔ درحقیقت، میلانوما تھراپی پر پلمبگین کے اینٹی میلانوما، کیموسینسیٹائزنگ، اور ریڈیو سینسیٹائزنگ اثرات کی اطلاع دی گئی ہے [17-21]۔

پلمبگین کے انسداد کینسر اور سوزش کے اثرات سے متعلق پچھلے مطالعات میں، تقریباً 5–10 µM پلمبگین (اس مطالعے میں استعمال ہونے والے ارتکاز سے زیادہ) کو وٹرو ماڈلز میں استعمال کیا گیا ہے [17,22 23]۔ لہذا، ہم نے پھیلاؤ والے خلیوں میں پلمبگین کے زہریلے اثر کی چھان بین کی، بشمول نارمل keratinocytes (HaCaT) اور لینس اپیتھیلیل سیل (B3)، جنہیں جلد کی دیکھ بھال کرنے والے کاسمیٹکس سے نقصان پہنچ سکتا ہے۔ ہمارے نتائج نے ثابت کیا کہ کم ارتکاز، تقریباً 0.5–1 µM پلمبگین، عام کیریٹینوسائٹس اور لینس اپیتھیلیل سیلز کے لیے زہریلے نہیں ہیں، لیکن ٹائروسینیز کی سرگرمی اور میلانین کی ترکیب کو کم کرنے کے لیے کافی موثر ہیں۔ اس کے علاوہ، ہم نے یہ بھی پایا کہ پلمبگین 1 mM arbutin یا 0.2 mM کوجک ایسڈ سے زیادہ مؤثر طریقے سے میلانوجینیسیس کو دباتا ہے، جو کہ جلد کو سفید کرنے کے لیے مشہور ہے۔ یہ نتائج بتاتے ہیں کہ پلمبگین جلد کو سفید کرنے والی کاسمیٹکس تیار کرنے کے جزو کے طور پر استعمال کے لیے محفوظ ہے۔

4. مواد اور طریقے

4.1 ریجنٹس اور اینٹی باڈیز

4.2 سیل کلچر اور سیل وائبلٹی پرکھ

4.3 امیونوبلوٹنگ

مہذب خلیوں کو 1 فیصد IGEPAL (octylphenoxypolyethoxyethanol)، 150 mM NaCl، 50 mM Tris-HCl (pH 7.9)، 10 mM NaF، اور lysis بفر میں ایک پروٹیز انحیبیٹر کاک ٹیل کا استعمال کرتے ہوئے لیس کیا گیا۔ پروٹین کے نمونوں کو سوڈیم ڈوڈیسائل سلفیٹ-پولیاکریلامائڈ جیل الیکٹروفورسس (SDS-PAGE) کے ذریعے الگ کیا گیا تھا، اور اس کے بعد الگ کیے گئے پروٹین کو پولی وینیلائیڈین ڈیفلوورائیڈ (PVDF) جھلی (ملی پور، بلریکا، MA، USA) میں منتقل کیا گیا تھا۔ جھلیوں کو راتوں رات پرائمری اینٹی باڈیز (1:1000) کے ساتھ 4 ◦C پر انکیوبیٹ کیا جاتا تھا، اور پھر کمرے کے درجہ حرارت پر 1 گھنٹے کے لیے HRP-conjugated سیکنڈری اینٹی باڈیز (1:10,000) کے ساتھ انکیوبیٹ کیا جاتا تھا۔ ای سی ایل پرائم کٹ (جی ای ہیلتھ کیئر، پٹسبرگ، پی اے، یو ایس اے) کا استعمال کرتے ہوئے پروٹین کا تصور کیا گیا۔

4.4 انٹرا سیلولر اور ایکسٹرا سیلولر میلانین مواد کی پیمائش

میلانین کے مواد کا تعین کیا گیا تھا اور معمولی ترمیم کے ساتھ پہلے بیان کردہ طریقہ کا استعمال کرتے ہوئے مقدار درست کی گئی تھی [2,24]۔ میلانین مواد کے تجزیہ کے لیے، B16F10 خلیات کو فینول ریڈ فری DMEM میں کلچر کیا گیا جس میں 10 فیصد فیٹل بووائن سیرم تھا۔ B16F10 خلیوں کو 3 یا 4 دن تک پلمبگین کی عدم موجودگی یا موجودگی میں -MSH علاج کے ساتھ کلچر کیا گیا تھا۔ مہذب خلیوں یا میڈیا کی کٹائی کی گئی اور چھرے 1N NaOH میں تحلیل کیے گئے جس میں 10 فیصد DMSO 80 ◦C پر 1 گھنٹے کے لیے تھا۔ میلانین کے مواد کو 475 nm (OD475) پر جاذب ریڈر کا استعمال کرتے ہوئے ماپا گیا تھا، اور میلانین کے مواد کو پھر سیلولر پروٹین کی حراستی میں معمول بنایا گیا تھا۔

4.5 RNA تنہائی اور مقداری RT-PCR

4.6 سیلولر ٹائروسینیز ایکٹیویٹی پرکھ

سیلولر ٹائروسینیز کی سرگرمی کا تعین ترمیم کے ساتھ پہلے بیان کردہ طریقہ کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا تھا [25,26]۔ کلچرڈ B16F10 سیلز کو پلمبگین کی غیر موجودگی یا موجودگی میں -MSH کے ساتھ انکیوبیٹ کیا گیا تھا، اور سیلز کو پھر دھویا گیا تھا اور PBS کے ساتھ لیس کیا گیا تھا جس میں 1 فیصد سوڈیم ڈیوکسیکولیٹ اور 0.5 فیصد ٹریٹن ایکس تھا{{8} } پروٹین کے ارتکاز کا تعین کرنے کے بعد، 50 µg پروٹین کو 2.0 mM L-DOPA اور 0.1 M PBS (pH 6.8) کے ساتھ 1 h کے لیے 37 ◦C پر انکیوبیٹ کیا گیا۔ L-DOPA کے آکسیکرن کو جاذب ریڈر کا استعمال کرتے ہوئے 475 nm (OD475) پر ماپا گیا۔ سرگرمی کو درج ذیل فارمولے کا استعمال کرتے ہوئے ماپا گیا: ٹائروسینیز سرگرمی ( فیصد )=(نمونہ کا OD475/ OD475 کنٹرول) × 100۔

4.7 سیل فری ٹائروسینیز ایکٹیویٹی پرکھ

4.8 ڈی پی پی ایچ ریڈیکل اسکیوینگنگ ایکٹیویٹی پرکھ

4.9 شماریاتی تجزیہ

5. نتائج

حوالہ جات

1. ریلی، PA میلانوجینیسیس اور میلانوما۔ پگمنٹ سیل ریس۔ 2003، 16، 548–552۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

2. بی اے، جے ایس؛ ہان، ایم؛ Yao, C.; چنگ، جے ایچ چیٹوسن ERK کو چالو کرنے کے ذریعے B16F10 ماؤس میلانوما خلیوں میں IBMX-حوصلہ افزائی میلانوجینیسیس کو روکتا ہے۔ کیم بائول تعامل 2016، 245، 66–71۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

3. D'Mello, SA; فنلے، جی جے؛ بگولی، BC؛ Askarian-Amiri، ME melanogenesis میں سگنلنگ پاتھ ویز۔ انٹر جے مول سائنس 2016. [کراس ریف] [پب میڈ]

4. کم، ایچ جے؛ Yonezawa, T.; ترویا، ٹی. وو، جے ٹی؛ چا، بی وائی نوبیلیٹن، ایک پولی ایتھوکسی فللاوونائڈ، انسانی میلانوسائٹس میں اینڈوتھیلین-1 کے علاوہ ایس سی ایف کی حوصلہ افزائی پگمنٹیشن کو کم کرتا ہے۔ فوٹو کیم۔ فوٹو بائیول۔ 2015، 91، 379–386۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

5. کانگ، ایس جے؛ چوئی، بی آر؛ لی، ای کے؛ کم، ایس ایچ؛ Yi, HY; پارک، HR؛ گانا، CH؛ لی، وائی جے؛ Ku, SK B16F10 میلانوما خلیوں میں میلانوجینیسیس پر خشک انار کے ارتکاز پاؤڈر کا روک تھام کا اثر؛ p38 اور PKA سگنلنگ پاتھ ویز کی شمولیت۔ انٹر جے مول سائنس 2015، 16، 24219–24242۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

6. کم، جے ڈبلیو؛ کم، HI؛ کم، جے ایچ؛ کوون، او سی؛ بیٹا، ES؛ لی، سی ایس؛ پارک، گینوڈرمینونڈیول کے وائی جے ایفیکٹس، میڈیسنل مشروم گانوڈرما لوسیڈم سے ایک نیا میلانوجینیسیس روکنا۔ انٹر جے مول سائنس 2016، 17، 1798۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

7. تساؤ، وائی ٹی؛ ہوانگ، YF؛ Kuo, CY; لن، وائی سی؛ چیانگ، ڈبلیو سی؛ وانگ، ڈبلیو کے؛ Hsu, CW; لی، CH Hinokitiol B16F10 ماؤس میلانوما خلیوں میں AKT/mTOR سگنلنگ کے ذریعے میلانوجینیسیس کو روکتا ہے۔ انٹر جے مول سائنس 2016، 17، 248۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

8. پادھیے، ایس. ڈنڈاوتے، پی. یوسفی، ایم. احمد، اے. سرکار، پلمبگین اور اس کے اینالاگ کی دواؤں کی خصوصیات پر FH تناظر۔ میڈ. Res. Rev. 2012, 32, 1131–1158. [کراس ریف] [پب میڈ]

9. گپتا، ایس سی؛ کم، جے ایچ؛ پرساد، ایس. اگروال، بی بی ریگولیشن آف بقا، پھیلاؤ، یلغار، انجیوجینیسیس، اور ٹیومر سیلز کے میٹاسٹیسیس نیوٹراسیوٹیکلز کے ذریعے سوزش کے راستوں کی ماڈیولیشن کے ذریعے۔ کینسر میٹاسٹیسیس Rev. 2010, 29, 405–434. [کراس ریف] [پب میڈ]

10. جیکسن، جے کے؛ ہیگو، ٹی. ہنٹر، ڈبلیو ایل؛ برٹ، HM Topoisomerase inhibitors بطور اینٹی آرتھرٹک ایجنٹ۔ انفلفلم۔ Res. 2008، 57، 126–134۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

11. احمد، الف. بنرجی، ایس. وانگ، زیڈ؛ کانگ، ڈی. سرکار، انسانی چھاتی کے کینسر کے خلیات کی FH Plumbagin-حوصلہ افزائی اپوپٹوس NF-κB اور Bcl-2 کے غیر فعال ہونے سے ثالثی کی جاتی ہے۔ جے سیل بائیو کیم۔ 2008، 105، 1461–1471۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

12. عزیز، MH؛ Dreckschmidt, NE; ورما، اے کے پلمبگین، ایک دواؤں سے ماخوذ نیفتھوکوئنون، ہارمون ریفریکٹری پروسٹیٹ کینسر کی نشوونما اور حملے کا ایک نیا روکنے والا ہے۔ کینسر ریس 2008، 68، 9024–9032۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

13۔ تھسنی، کے اے۔ راکیش، ایس. روزینی، جی؛ رتیش کمار، ٹی۔ سرینواس، جی؛ پریا، ایس. ایسٹروجن پر منحصر سیل سگنلنگ اور بی آر سی اے میں اپوپٹوس1- نے پلمبگین اور دیگر کیموتھراپیٹک ایجنٹوں کے جواب میں بی جی 1 ڈمبگرنتی کینسر کے خلیات کو بلاک کردیا۔ این۔ اونکول۔ 2008، 19، 696–705۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

14. Gomathinayagam, R.; سومیا لکشمی، ایس. مردہ اللہ، ف. کمار، آر. اکبرشاہ، ایم اے؛ دامودرن، سی. پلمبگین کا اینٹی کینسر میکانزم، ایک قدرتی مرکب، غیر چھوٹے سیل پھیپھڑوں کے کینسر کے خلیوں پر۔ اینٹی کینسر ریس. 2008، 28، 785–792۔ [پب میڈ]

15. وانگ، سی سی؛ چیانگ، YM؛ سنگ، ایس سی؛ Hsu, YL; چانگ، جے کے؛ Kuo، PL Plumbagin انسانی میلانوما A375.S2 خلیات میں ری ایکٹو آکسیجن پرجاتیوں/c-Jun N-terminal kinase pathways کے ذریعے سیل سائیکل گرفتاری اور apoptosis کو اکساتا ہے۔ کینسر لیٹ. 2008، 259، 82-98۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

16. Shih, YW; لی، وائی سی؛ وو، پی ایف؛ لی، وائی بی؛ چیانگ، ٹی اے پلمبگین میٹرکس میٹالوپروٹینیز-2 اور یوروکینیز-پلاسمینوجن ایکٹیویٹر کی پیداوار کو کم کرکے جگر کے کینسر کے HepG2 خلیات کے حملے اور منتقلی کو روکتا ہے۔ ہیپاٹول۔ Res. 2009، 39، 998-1009۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

17. انوف، اے آر؛ رام چندرن، آر. کرشناسامی، آر. گاندھی، پی ایس؛ پیریاسمی، S. SK-MEL 28 میلانوما سیل لائنوں پر Plumbago rosea اور اس کے پیوریفائیڈ اجزاء پلمبگین کے انسداد افزائشی اثرات۔ فارماکگن۔ Res. 2014، 6، 312–319۔

18. گوڑا، آر. شرما، اے. رابرٹسن، میلانوما ٹیومر کی نشوونما پر celecoxib اور plumbagin کے GP Synergistic inhibitory اثرات۔ کینسر لیٹ. 2017، 385، 243–250۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

19. لی، جے؛ شین، Q. پینگ، آر. چن، آر. جیانگ، پی. لی، وائی۔ ژانگ، ایل. Lu, J. Plumbagin انسانی میلانوما A375 خلیوں میں ڈیتھ ریسیپٹر کے اپ-ریگولیشن کے ذریعے TRAIL-ثالثی اپوپٹوس کو بڑھاتا ہے۔ J. Huazhong Univ سائنس ٹیکنالوجی. میڈ. سائنس 2010، 30، 458–463۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

20. نیر، ایس. نائر، آر آر؛ سری نواس، پی. سرینواس، جی؛ پلائی، ایم آر گریوا کینسر کے خلیوں میں پلمبگین کے ریڈیو حساسیت کے اثرات اپوپٹوٹک پاتھ وے کی ماڈیولیشن کے ذریعے ہوتے ہیں۔ مول کارسنوگ۔ 2008، 47، 22–33۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

21. پرساد، VS؛ دیوی، پنجاب یونیورسٹی؛ راؤ، بی ایس؛ کامتھ، R. وٹرو میں اگنے والے ماؤس میلانوما خلیوں پر پلمبگین کا ریڈیو حساسیت کا اثر۔ بھارتی J. Exp. بائول 1996، 34، 857–858۔ [پب میڈ]

22. لی، وائی سی؛ وہ، ایس ایم؛ وہ، زیڈ ایکس؛ لی، ایم؛ یانگ، وائی؛ پینگ، جے ایکس؛ ژانگ، ایکس۔ چو، کے. چاؤ، Q. ڈوان، ڈبلیو. ET رحمہ اللہ تعالی. Plumbagin انسانی غیر چھوٹے سیل پھیپھڑوں کے کینسر کے خلیات میں PI3K/Akt/mTOR راستے کی روک تھام کے ذریعے apoptotic اور autophagic سیل کی موت کو اکساتا ہے۔ کینسر لیٹ. 2014، 344، 239–259۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

23. چیکر، آر. شرما، ڈی. سندور، ایس کے؛ خانم، ایس. پوڈوول، ٹی بی پلمبگین کے سوزش کے اثرات لیمفوسائٹس میں NF-κB ایکٹیویشن کی روک تھام کے ذریعے ثالثی کرتے ہیں۔ انٹر امیونو فارماکول۔ 2009، 9، 949–958۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

24. کم، بی. لی، ایس ایچ؛ چوئی، کے وائی؛ کم، HS N-Nicotinoyl tyramine، ایک ناول niacinamide derivative، MITF جین اظہار کو دبا کر میلانوجینیسیس کو روکتا ہے۔ یور جے فارماکول۔ 2015، 764، 1–8۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

25. لی، ایچ وائی؛ جنگ، ای جے؛ Bae, SY; جیون، جے ای؛ پارک، HJ؛ شن، جے؛ Lee, SK Gauguin D کی اینٹی میلانوجینک سرگرمی، سمندری سپنج فورباس ایس پی سے ایک انتہائی آکسیجنڈ ​​ڈائٹرپینائڈ، ٹائروسینیز اظہار اور انحطاط کو ماڈیول کرنے کے ذریعے۔ مارچ منشیات 2016، 14، 212۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

26. وانڈر، اے جے؛ ہیرس، H. ٹائروسینیز کی ٹائروسین ہائیڈروکسیلیس اور DOPA آکسیڈیز سرگرمیوں کے لیے نئے اسیسز۔ یور جے بائیو کیم۔ 1991، 198، 317–326۔ [کراس ریف] [پب میڈ]

مزید معلومات کے لیے: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501