کیا سیستانچے کل گلیکوسائڈ کے گھن کی فیکٹری پر اثرات مرتب ہوتے ہیں؟

رابطہ:joanna.jia@wecistanche.com/ واٹس ایپ: 008618081934791

چوہے کے گھن گھر کے خلیات پر سیستانچے کل گلیکوسائیڈز کا اثر اور نیوروٹروفک عوامل کا ان کا رطوب

لی چوانگفینگ، گوو جینیو، ژانگ ژو، لیو یونان

ریڑھ کی ہڈی کی چوٹ (ایس سی آئی) مرکزی کی ایک سنگین چوٹ ہےعصبی نظام، کل صدمے کا 0.2٪—0.5٪ کا حساب ہے۔ ریڑھ کی ہڈی کے ٹوٹنے میں 16٪—40 فیصد ریڑھ کی ہڈی کی چوٹ کی وجہ سے پیچیدہ ہو جاتے ہیں، اکثر شدید معذوری چھوڑ دیتے ہیں، جس کی وجہ سے روزمرہ زندگی میں مشکلات کا سامنا کرنا پڑتا ہے جس سے مریضوں کا معیار زندگی متاثر ہوتا ہے، اور خاندان اور معاشرے پر بہت بوجھ پڑتا ہے۔گھن گھرخلیات (او ای سی) اعصابی گلو کی ایک خاص قسم ہیں۔ پلازما خلیات دماغ میں منتقل ہو سکتے ہیںگھناعصابی ایکسن اور این جی ایف، جی ڈی این ایف، بی ڈی این ایف، این ٹی-3، نیوروپیپٹائیڈ-وائی اور ایس-100 جیسے بہت سے نمو کے عوامل خارج کر سکتے ہیں۔ ان خصوصیات کی وجہ سےگھنخلیات کو مسحور کرنے والے خلیات، او ای سی کو ایس سی آئی کی مرمت کے لئے خلیات کی پیوند کاری کے لئے امید افزا بیج خلیوں میں سے ایک سمجھا جاتا ہے۔ اس وقت بحالی کی ادویات کے شعبے میں ایس سی آئی کا علاج بنیادی طور پر جامع بحالی پر مبنی ہے۔ زیادہ موثر طریقہ تلاش کرنے کے لیے مندرجہ ذیل تحقیق کی گئی ہے جس کے اثرات پرسستانچےکلچبوااو ای سی پر:

سیستانچے کل گلیکوسائڈ برائے اولفیکٹری اینشیتھنگ خلیات

1 مواد اور طریقے

1.1 تجرباتی مواد

وسٹار چوہا (اندرونی منگولیا یونیورسٹی کے جانوروں کے مرکز کی طرف سے فراہم کردہ)؛سستانچےکلچبوا، ڈی ایم ای ایم / ایف 12 میڈیم، فیٹل بچھڑے کا سیرم (ایف سی ایس)، پولی ڈی لائسین، آربینوسائڈ (آرا سی)، ٹرائیپسن، ڈی ہینکس حل، خرگوش اینٹی پی 75 این جی ایف آر (سانتا کروز)، ایلیسا کٹ (پرومیگا)، سیل انکیوبیٹر (تھرمو-ایچ ای پی اے کلاس 100)، الٹا مرحلہ-کنٹراسٹ مائیکرواسکوپ (اولمپس سی کے ایکس 41، جاپان)، الٹرا کلین ورک بینچ (سوژو انتائی ایئر ٹیکنالوجی کمپنی، لمیٹڈ) کمپنی، ایس ڈبلیو-سی جے-2 ایف ڈی)، انزائم لیبل اینالائزر (ویلزکین ایم کے ایچ)، فلو سائٹومیٹر وغیرہ۔

1.2 تحقیقی طریقے

1.2.1 او ای سی ثقافت، تطہیر اور شناخت: وسٹار چوہوں کو سر کاٹ کر قربان کیا گیا اور 5 منٹ تک شراب میں بھگو دیا گیا۔ پیشتر کھوپڑی کو بے نقاب کرنے کے لئے کھولا گیا تھاگھنبلب. دونوںگھنبلبوں کو ایک چیرنے والی خوردبین کے نیچے مکمل طور پر ہٹا دیا گیا تھا۔ ڈی ہینکس کے حل میں دھوئیں؛ کاٹناگھنمائیکرو سرجیکل قینچی کے ساتھ بلب، 0.25٪ پینکریٹن کے 2 ملی لیٹر شامل کریں اور 20 منٹ کے لئے 37° سی پر انکیوبیٹ کریں؛ ڈی ایم ای ایم / ایف 12 کلچر میڈیم شامل کریں جس میں 10 فیصد بچھڑے کا سیرم ایک 2 ملی لیٹر سنٹرفیوز ٹیوب ہاضمہ میں شامل کیا گیا تھا؛ بس پیپٹ نے 800 آر پی ایم پر نامکمل طور پر ہضم ہونے والے ٹشو کو اسپائریٹ کیا اور 5 منٹ کے لئے سنٹرفیوز کیا، سپرناٹنٹ کو مسترد کردیا؛ آخر میں کنڈیشنڈ میڈیم (20٪ ایف سی ایس + 20|آئی، استعمال کیا مول/ایل فورسکولین + 20|آئی جی/ایم ایل بی پی ای + ڈی ایم ای ایم /ایف 12) اسے ایل ایکس 107 ملی لیٹر سنگل سیل سسپنشن میں بنائیں، اسے پولی سین کوٹیڈ سیل کلچر فلاسک میں ٹیکہ لگائیں، اسے 37°سی، 5 فیصد سی او 2 انکیوبیٹر میں رکھیں اور پھر اس میں شامل کریں آرا سی پیوریفکیشن 36 گھنٹہ کی رفتار سے کی گئی۔ خرگوش اینٹی پی 75 ای اور ایف آئی ٹی سی لیبل والا بکری اینٹی خرگوش آئی جی سیکنڈری اینٹی باڈی استعمال کریں تاکہ ایمیونوہیسٹوکیمیکل سیل کی شناخت اور فلوریسینس مائیکرواسکوپ مشاہدہ کیا جاسکے۔

1.2.2 کے اثر کا تعین کرنے کے لئے ایم ٹی ٹی اور فلو سائٹومیٹری کا استعمال کریںسیستانچے کل گلیکوسائڈزپرگھنخلیات کو مسحور کرنا: مہذب اور پاکیزہ کو ٹیکہ لگاناگھن1ایکس 106 پر 96 کنویں کی پلیٹ میں خلیوں کو مسح ورکریں، اور شامل کریںسیستانچے کل گلیکوسائڈز(عمل ارتکاز آئیجیگ/ ملی لیٹر، 10 ملی گرام/ملی لیٹر، 100 ملی گرام/ملی لیٹر) ہیں، او ڈی ویلیو کی پیمائش کریں اور 24 گھنٹہ عمل کے بعد سیل فلو سائٹومیٹری کی پیمائش کریں۔ کنٹرول گروپ سیٹ اپ کریں اورسیستانچے کل گلیکوسائڈزمختلف ارتکاز گروپ: گروپ اے (کنٹرول گروپ): سیرم پر مشتمل کلچر میڈیم کو منفی کنٹرول کے طور پر استعمال کیا جاتا ہے؛ گروپ بی (سیستانچے کل گلیکوسائڈزکم ارتکاز گروپ: لیگ/ملی لیٹر)؛ گروپ سی (سیستانچے کل گلیکوسائڈز درمیانے ارتکاز گروپ: ایل 10جے ایکس جی/ایم کے)؛ گروپ ڈی (سیستانچے کل گلیکوسائڈزاعلی ارتکاز گروپ: 100|ایکس جی/میلو): ہر گروپ میں 15 چوہے۔

1.2.3 ایلیسا کی طرف سے سپرناٹنٹ میں نیوروٹروفیک عنصر مواد کا تعین: مہذب اور پاکیزہ کو ٹیکہ لگاناگھن1ایکس 106 پر 6 اچھی پلیٹ میں خلیات کو مسحور کریں، شامل کریںسیستانچے کل گلیکوسائڈز(اوپر کی طرح ہی ارتکاز) 24 گھنٹے کے بعد اور 24 گھنٹے کے لئے عمل کریں، اور سپرناٹنٹ کو الگ سے جمع کریں، -80 لانگ پر محفوظ کیا گیا۔ سیال میں اعصابی نشوونما کے عوامل کے مواد کا تعین ایلیسا طریقہ کار سے کیا گیا تھا۔

1.3 شماریاتی تجزیہ

اس مطالعے میں موجود اعداد و شمار کو پیمائش کے اعداد و شمار کے طور پر سمجھا جاتا ہے، اور حاصل کردہ اعداد و شمار کو معیاری انحراف ± مطلب کے طور پر ظاہر کیا جاتا ہے، اور ایس پی ایس ایس 11.0 شماریاتی سافٹ ویئر شماریاتی تجزیے کے لئے استعمال کیا جاتا ہے۔ حاصل کردہ اعداد و شمار کا تجزیہ تجزیے کے ذریعہ کیا جاتا ہے، اور پی<0.05 indicates="" that="" there="" is="" a="" significant="">

2 نتائج

2.1 کا اثرسستانچےکل گلیکوسائڈز پرگھنخلیات کو مسحور کرنا

2.1.1 میتھائل آکسازول ٹیٹرازول طریقہ (ایم ٹی) تعین کے نتائج: گروپ اے: 0.617±0.149؛ گروپ بی: 0.589±0.147؛ گروپ سی: 0.761±0.138؛ گروپ ڈی: 0.732±0.234. موازنہ کے درمیانسیستانچے کل گلیکوسائڈزگروپ (بی) اور کنٹرول گروپ (اے)، پی>0.05، فرق اہم نہیں تھا؛سیستانچے کل گلیکوسائڈزکنٹرول گروپ (اے) پی کے مقابلے میں 10 ملی گرام/ملی لیٹر، 100 ملی گرام/ملی لیٹر ارتکاز گروپ (سی، ڈی)<0.05, the="" difference="" is="">

2.1.2 فلو سائٹومیٹری عزم کا نتیجہ تصویر 1 میں دکھایا گیا ہے۔ کنٹرول گروپ کے مقابلے میں،سیستانچے کل گلیکوسائڈزگروپ کنٹرول گروپ سے زیادہ تھا اور اپوپٹوٹک خلیوں کا فیصد کنٹرول گروپ سے کم تھا۔

2.2 انزائم سے منسلک ایمیونوسوربینٹ پرکھ (ای ایل آئی ایس اے) کے نتائج

ٹیسٹ کے نتائج سے پتہ چلا کہ گلیل سیل لائن سے ماخوذ نیوروٹروفیک عنصر (جی ڈی این ایف) کا مواد: خوراک سے پہلے: 302.1±16.6 پی جی/ملی لیٹر، گروپ اے: 340.5±13.2 پی جی/ملی لیٹر؛ گروپ بی: 333.2±23.6پی جی/ملی لیٹر؛ گروپ سی: 355.2±17.6پی جی/ملی لیٹر؛ گروپ ڈی؛ 379.2±15.3پی جی/ملی لیٹر. پری ایڈمنسٹریشن کے مقابلے میں جی ڈی این ایف کے مواد میں نمایاں اضافہ کیا گیا؛ کنٹرول گروپ (اے) کے مقابلے میں، جی ڈی این ایف موادسیستانچے کل گلیکوسائڈز100 ملی گرام/ملی لیٹر ارتکاز گروپ (ڈی) میں نمایاں اضافہ کیا گیا۔

3 بحث

ریڑھ کی ہڈی کی چوٹ کے بعد صحت یاب ہونا مشکل ہونے کی ایک اہم وجہ ایکسن کی بحالی میں دشواری ہے۔ مرکزی نیورون ایکسن کی بحالی میں او ای سی کا کردار ہے جسے دیگر اقسام کے خلیات کو تبدیل کرنا مشکل ہے۔ حالیہ برسوں میں، کی تحقیقگھنخلیات کو گھیرنا ایک گرم جگہ بن گیا ہے۔گھن گھرخلیات ایک خاص قسم کے گلیئل خلیات ہیں جن میں شوان خلیات اور فلکیاتی خلیات کی خصوصیات ہوتی ہیں۔ وہ سے نکلتے ہیںگھنتہہ خانے کی جھلی اور وسیع پیمانے پر سطح کی سطح پر تقسیم کیا جاتا ہےگھنمکوسا،گھناعصاب، اورگھنبلب. یہ زندگی کے لئے تقسیم کرنے اور دوبارہ پیدا کرنے کی صلاحیت ہے اور اس کے ساتھ ہو سکتا ہےگھندماغ میں منتقل ہونے کے لئے اعصابی ایکسن۔ کی ایکسنگھناعصاب ہر 30-60 دن میں پیریفیرل اعصابی نظام اور مرکزی اعصابی نظام کے درمیان جنکشن سے گزر سکتا ہے، دوبارہ بڑھ کر اندر داخل ہو سکتا ہےگھنشیتھ اور سائناپٹک کنکشن قائم کریں4.گھن گھراین شیتھنگ خلیات این جی ایف، بی ڈی این ایف، جی ڈی این ایف، این ٹی-3، نیوروپیپٹائیڈ-وائی اور ایس-100 جیسے بہت سے نمو کے عوامل کو خارج کرسکتے ہیں۔ مطالعات سے پتہ چلا ہے کہ اعصابی نشوونما کا عنصر (این جی ایف) ریڑھ کی ہڈی کے سرخ نیوکلیس نیورونز کو خشکی سے روک سکتا ہے اور کورٹیکواسپائنل ٹریکٹ اسپروٹ کو مضبوط بنا سکتا ہے اور سرخ نیوکلیس ریڑھ کی ہڈی کے اعصابی راستے کی بحالی کو فروغ دے سکتا ہے؛ دماغ سے ماخوذ نیوروٹروفیک عنصر (بی ڈی این ایف) اور نیوروٹروفین-3 (این ٹی-3) دونوں بالغ چوہوں میں سرخ نیوکلیس ریڑھ کی ہڈی کے خلیہ اپوپٹوسس کو ایکسوٹومائزڈ چوٹ کے ساتھ روک سکتے ہیں اور مرنے والے نیورونز کو بچا سکتے ہیں اور ایکسونل ری جنریشن پی کو فروغ دے سکتے ہیں۔ اضافی طور پہگھنخلیات اپنے خلیات کی جھلیوں پر دیگر عوامل کا اظہار بھی کرتے ہیں، جیسے اعصابی خلیات کا ادھیڑنا عنصر (این-سی اے ایم) جو خلیات کی اذکار اور ایکسن کی نشوونما میں شامل ہوتے ہیں۔ ان خصوصیات کی وجہ سےگھنخلیات کو مسحور کرنے والے خلیات، او ای سی کو ایس سی آئی کی مرمت کے لئے خلیات کی پیوند کاری کے لئے امید افزا بیج خلیوں میں سے ایک سمجھا جاتا ہے۔

کے کیمیائی اجزاءسیستانچےبنیادی طور پر فینیلیتھانوئیڈ گلیکوسائیڈز، ایریڈائڈز، اتار چڑھاؤ والے اجزاء، لیگنان، پولی سیکرائڈز اور الکالائیڈز شامل ہیں۔ مطالعے سے پتہ چلا ہے کہسیستانچےاور اس کے کیمیائی اجزاء کے نیورو پروٹیکٹو اثرات ہوتے ہیں۔ ڈینگ ایٹ ال نے ٹیومر نیکروسس عنصر α (TNFα) کی وجہ سے ایس ایچ-ایس وائی 5 وائی نیورونز کے اپوپٹوسس پر ٹبولوسا بی کے اثرات کا مطالعہ کیا۔ نتائج سے پتہ چلا کہ 100μg/ ایس ایچ ایس وائی 5 وائی نیورونز کے بعد ایل کی طرف سے 36 گھنٹے کے TNFα علاج کے بعد مخصوص اپوپٹوسس خصوصیات ظاہر ہوئیں، جبکہ 2 گھنٹے تک ٹیوبلین بی کا علاج TNFα کی طرف سے پیدا ہونے والے اپوپوٹوسس کو نمایاں طور پر کم کرسکتا ہے۔ اس کے علاوہ، مطالعات سے یہ بھی پتہ چلا ہے کہ فینیلیتھانوئیڈ گلیکوسائڈز چوہے سیریبلر گرینول خلیوں کے اپوپٹوسس کو کیسپاس-3 اور کیسپیس-8 کو روک کر اور میتھائل فینیل ٹیٹراہائیڈروپائریڈین (ایم پی ٹی پی) کی وجہ سے سی 57 ماؤس بلیک کے خلاف روک سکتے ہیں۔ معیاری ڈوپامینرجیک نیورونز کے نقصان کا حفاظتی اثر ہوتا ہے۔ صرف یہی نہیں بلکہسیستانچےاعصابی نظام کے اسکیمیا ریپرفیوژن جیسے مختلف نقصانات کو بھی کم کر سکتا ہے۔ ماؤس برین اسکیمیا انجری کے تجربے سے پتہ چلتا ہے کہ دماغی اسکیمیا ریپرفیوژن گروپ میں اسکیمیا کے بعد 24 گھنٹہ اور 48 گھنٹہ کی انفارکٹ رینج 72.98 فیصد اور اوسطا 60.45 فیصد ہے۔ اس کے برعکس،سستانچےکل گلیکوسائڈز بڑے، درمیانے اور کم خوراک والے گروپ (250.0 ملی گرام· کلوگرام/ڈی؛ 125.0 ملی گرام·کلوگرام/ڈی؛ 62.5 ملی گرام·کلوگرام/ڈی) بالترتیب سیریبرل اسکیمیا ریپرفیوژن 24ایچ کے بعد چوہوں کا دماغ بنا سکتا ہے انفرکٹ سائز کم ہوکر 25.94 فیصد، 25.81 فیصد اور 31.13 فیصد اور دماغی انفارکشن سائز 48 گھنٹوں کے بعد کم ہوکر 22.14 فیصد، 20.06 فیصد اور 22.27 فیصد رہ گیا۔ دونوں کے درمیان ایک اہم فرق تھا، نیورونل اپوپوٹوسس پر ایک اہم انہیبیٹری اثر ظاہر کرتا ہے۔

اس مطالعے میں، مختلف ارتکازسیستانچے کل گلیکوسائڈزاو ای سی پر درخواست دی گئی تھی۔ ایم ٹی ٹی طریقہ کار اور بہاؤ سائٹومیٹری پیمائش نے تصدیق کی کہ 10 ملی گرام/ملی لیٹر 10 ملی گرام/ملی لیٹر/ملی لیٹرسیستانچے کل گلیکوسائڈزکے پھیلاؤ کو فروغ دے سکتے ہیںگھنخلیات کو مسحور کرنا۔ بہاؤ سائٹومیٹری کے نتائج سے پتہ چلا کہسیستانچے کل گلیکوسائڈزکے پھیلاؤ کو فروغ دے سکتے ہیںگھنخلیات کو گھیرنا یہ بنیادی طور پر جی ون سائیکل کے پھیلاؤ کو فروغ دیتا ہےگھننطفے کے خلیات اور اپوپٹوٹک خلیات کو نمایاں طور پر کم کرتے ہیں۔ اسی لئےسیستانچے کل گلیکوسائڈزنہ صرف پھیلاؤ کو فروغ دے سکتا ہےگھنخلیوں کو مسحور کرنا لیکن خلیات کی سرگرمی میں اضافہ کرنا اور ان کے اپوپٹوسس کو روکنا۔ انزائم سے منسلک ایمیونوسوربینٹ پرکھ سے ثابت ہوتا ہے کہسیستانچے کل گلیکوسائڈزجی ڈی این ایف کے رطوبات کو نمایاں طور پر فروغ دے سکتا ہےگھنخلیات کو مسحور کرنا۔ مندرجہ بالا نتائج کی طبی ایپلی کیشن کے لئے تجرباتی بنیاد فراہم کرتے ہیںسیستانچے کل گلیکوسائڈز.

حوالے

[1] کیو ویہونگ، ژو ہونگشیانگ، ژانگ بیشیانگ، ایٹ ال. بحالی کے دوران ریڑھ کی ہڈی کی چوٹ کے مریضوں کے معیار زندگی کو متاثر کرنے والے عوامل [جے]۔ چینی جرنل آف ری ہیبلی ٹیشن میڈیسن، 2009، 4(24): 313.

[2] ریکٹر میگاواٹ، فلیچر پی اے، لیو جے، ایٹ ال. لامینا پروپریا اورگھنبیل کے خلیات تفریقی انضمام اور نقل مکانی کا مظاہرہ کرتے ہیں اور زخموں والی ریڑھ کی ہڈی [جے] میں پھوٹنے والے مہلت بخش ایکسن کو فروغ دیتے ہیں۔ جے نیوروسکی،2005.25(46):10700 -10711.

[3] فیئرلیس آر، بامیٹ ایس سی گھونگھے کے خلیات: مرکزی اعصابی نظام کی مرمت میں ان کا کردار[J.Int جے بائیوکیم سیل بیول۔ 2005,37(4):693-699.

[4] چن ایکس، فانگ ایچ شوب جے ای. پاکیزگی کی کثیر نامردی۔ ٹرانسپلانٹ شدہ گلوکوز بیسل خلیات میںگھنایپیتھیلیم[جے]. جے کمپ نیورول،2004، 46914):457—474.

[5] لا پی، جونز ایل ایل۔ توزینسکی ایم ایچ. بی ڈی این ایف اظہار مرسٹرومل سیل؛ سائٹوں ڈی ریڑھ کی ہڈی کی چوٹ [جے] پر وسیع ایکسونل نشوونما کی حمایت. ایکسپ نیورول، 2005,191(2):344—360.

[6] ڈینگ ایم، ژاؤ جے وائی، جو ایکس ڈی، ایٹ ال. نیورونل خلیوں [جے] میں TNFα سے متاثرہ اپوپٹوسس پر ٹبولوسا بی کا حفاظتی اثر۔ ایکٹا فارماکول سین،2004,25(102 1276

[7] تیانشوئے-فی، پوژیاؤ-پنگ.فینیلیتھانوئیڈچبواسےسیستانچسالسا نیورونز [جے] میں 1-میتھائل-4-فینیلپیریڈنیم آئن کی طرف سے متاثر اپوپٹوسس کو روکتا ہے۔ جے ایتھنوفارماکول،2005,97 (1):59.

[8] گینگ ایکس، سونگ ایل پی یو ایکس، ایٹ ال. عصبی حفاظتی اثر