Cistanche Tubulosa Extract اور Sex Harmon Levels کے درمیان کیا تعلق ہے؟

Tian Wang1، Chen Chen2، Man Yang1,2، Taiwan Deng2، Gordon Michael Kirby3، اور Xiaoying Zhang1

خلاصہ

سیاق و سباق: جینس کے پودےCistancheہاف مین۔ ایٹ لنک (Orobanchaceae) کو عام طور پر مشرقی ایشیا میں نسلی طب کے طور پر استعمال کیا جاتا ہے۔ فارماکولوجی مطالعہ سے پتہ چلتا ہے کہCistancheاینڈروجن جیسا اثر رکھتا ہے۔ تاہم، درست طریقہ کار واضح نہیں ہے۔

مقصد: موجودہ مطالعہ ایتھنول کے نچوڑ کے اثر کا تعین کرتا ہے۔Cistanchetubulosa(Schenk) R. Wight stem (CTE) آنہارمونسطحاور چوہوں میں ورشن سٹیرائیڈوجینک انزائمز۔ مواد اور طریقے: CTE کے Phenylethanoid glycoside مواد کا پتہ UV spectrophotometry کے ذریعے کیا گیا۔ چوہوں کو 20 دن تک انٹرا گیسٹرک انتظامیہ کے ذریعہ CTE ({{0}}.2، 0.4، اور 0.8 g/kg) کی مختلف خوراکیں کھلائی گئیں۔ سپرم کے پیرامیٹرز کو داغ لگانے اور گنتی کے طریقہ کار سے ماپا گیا۔ سیرم میں پروجیسٹرون اور ٹیسٹوسٹیرون کی سطح کو ریڈیو امیونواسے کے ذریعہ مقدار میں طے کیا گیا تھا۔ مائیکروسم میں کولیسٹرول سائیڈ چین کلیویج انزائم (CYP11A1)، 17a-hydroxylase/17، 20-lyase (CYP17A1)، اور ایک جگر کے میٹابولک انزائم (CYP3A4) کے اظہار کی سطحوں کا اندازہ امیونو ہسٹن یا امیونو ہسٹن کے ذریعے کیا گیا تھا۔ دھبے کا تجزیہ.

نتائج: مطالعہ واضح کرتا ہے کہ CTE ({{0}}.4 اور 0.8 g/kg) کی انتظامیہ نے سپرم کی تعداد میں اضافہ کیا (2.3- اور 2۔{{ 7} فولڈز) اور سپرم کی حرکت پذیری (13- اور 14-فولڈز) اور غیر معمولی نطفہ میں کمی (0.76- اور 0۔{15} } فولڈز)۔ CTE انتظامیہ (p50.05) کے ذریعہ چوہوں میں پروجیسٹرون اور ٹیسٹوسٹیرون کے سیرم کی سطح میں بھی اضافہ کیا گیا تھا۔ امیونو ہسٹو کیمسٹری اور ویسٹرن بلاٹ تجزیہ کے نتائج نے تصدیق کی کہ CYP11A1، CYP17A1، اور CYP3A4 کے اظہار کو CTE (p50.05) نے بڑھایا ہے۔ یہ بھی پایا گیا کہ سی ٹی ای کی زیادہ خوراک ہلکے ہیپاٹک ورم ​​کا سبب بن سکتی ہے۔

نتیجہ: ہمارے نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ جنسی تعلقات میں اضافہہارمون سطحورشن سٹیرائڈوجینک انزائمز کی شمولیت سے ثالثی کی جا سکتی ہے۔

رابطہ:joanna.jia@wecistanche.com/ واٹس ایپ: 008618081934791

cistanche جنسی فعل کے لیے اچھا ہے، نمونے حاصل کرنے کے لیے یہاں کلک کریں۔

تعارف

Cistancheہاف مین۔ ایٹ لنک (Orobanchaceae) دواؤں کے پودے کی ایک نسل ہے جو چین اور دیگر مشرقی ایشیائی ممالک میں پندرہویں صدی سے بیماری کے حالات (روایتی چینی طب کے نظریہ میں) جیسے نامردی، سیمنل اخراج، بانجھ پن، عام کمزوری کے علاج کے لیے استعمال ہوتی رہی ہے۔ کمر اور گھٹنوں کی سستی اور دائمی قبض کے ساتھ (Wang et al.، 2012)۔ سی۔deserticolaYC Ma اورCistanchetubulosa(Schenk) R. Wight میں ایک جیسے کیمیائی اجزاء اور فارماسولوجیکل سرگرمیاں ہیں، اور انہیں چینی فارماکوپیا (چائنیز فارماکوپیا کی ادارتی کمیٹی، 2010) میں دستاویز کیا گیا ہے۔ سی کا اثرdeserticolaصحت مند چوہوں میں مردانہ تولیدی نظام کے بڑھتے ہوئے اعضاء کے اشاریے کا جائزہ لیا گیا (He et al., 1996a,b)۔ خصیہ اینڈروجن سراو کے لئے ذمہ دار اہم ٹشو ہے؛ کاسٹرڈ چوہوں کے تولیدی نظام کو C کے ذریعہ اچھی طرح سے بہتر کیا گیا تھا۔deserticolaانتظامیہ (He et al.، 1996a,b)۔ نر چوہوں میں انزائمز (CYP11A1 اور CYP17A1) اور میٹابولک انزائم (CYP3A4)۔

مذکورہ بالا نتائج سے ظاہر ہوتا ہے کہ C.deserticolaاینڈروجن نما یا جنسی ہارمون ریگولیشن اثر کے ذریعے مردانہ تولیدی نظام کی ترقی میں حصہ ڈال سکتا ہے (He et al., 1996a,b)۔ پچھلے مطالعات نے یہ بھی اشارہ کیا ہے کہ C.deserticolaآسٹیو بلوسٹس میں ہڈیوں کی تشکیل میں حصہ ڈال سکتا ہے (لی ایٹ ال۔، 2012)۔ اینڈروجن خواتین اور مردوں دونوں میں کنکال کی نشوونما اور دیکھ بھال پر اپنے فائدہ مند اثر و رسوخ کے لئے مشہور ہے (ہوفباؤر اور کھوسلا، 1999)۔Cistanchetubulosaسی کے متبادل کے طور پر غور کیا جا رہا ہے۔deserticolaچونکہ یہ کئی دہائیوں سے زیادہ استحصال کی وجہ سے معدوم ہونے کے دہانے پر ہے۔ لہذا، C کا اثر.tubulosaجنسی ہارمون کی سطح پر اور اس کی حفاظت کا اندازہ ناگزیر ہے۔ دو کلیدی سٹیرایڈوجینک انزائمز (CYP11A1 اور CYP17A1) اور میٹابولک انزائم (CYP3A4) کا جائزہ لیا گیا (ہانوکوگلو، 1992)۔

موجودہ مطالعہ سی کے براہ راست اثرات کی تحقیقات کرتا ہے۔tubulosaپروجیسٹرون اور ٹیسٹوسٹیرون کی سطح کے ساتھ ساتھ نر چوہوں میں دو سٹیرایڈوجینک انزائمز (CYP11A1 اور CYP17A1) اور میٹابولک انزائم (CYP3A4) کے اظہار پر (CTE) نکالیں۔

مواد اور طریقے

جانور

مطالعہ میں کل 60 نر اسپراگ – ڈولی چوہوں کا استعمال کیا گیا جس کا وزن 100-120 گرام ہے۔ جانوروں کو ایک مستقل درجہ حرارت (23 ± 1 ○C) پر رکھا گیا تھا جس میں پولی پروپیلین کے پنجروں میں 12 گھنٹہ لائٹ ڈارک سائیکلنگ تھی اور پانی اور خوراک تک مفت رسائی کی اجازت تھی۔ جانوروں کے تمام طریقہ کار لیبارٹری کے جانوروں کی دیکھ بھال اور استعمال کے لیے یونیورسٹی کے رہنما خطوط کے مطابق کیے گئے تھے۔

C. tubulosa اقتباس کی تیاری

کے تنوںC. tubulosaایسوسی ایٹ پروفیسر جیان جون ہو (تاریم یونیورسٹی، سنکیانگ، چین) کی طرف سے مہربانی سے فراہم کی گئی اور تصدیق کی گئی۔ دیC. tubulosaسنکیانگ خود مختار علاقے کے جنوب میں صحرائی علاقے سے فلوروسینس (مئی میں) کے دوران جمع کیا گیا تھا۔ سوکھے تنوں کو پاؤڈر میں کچل کر ایک 200-جالی کی چھلنی سے چھان لیا جاتا تھا۔ Cistanche tubulosa پاؤڈر (50 g) کو دو بار 250 mL 70 فیصد ایتھنول کے ذریعے نکالا گیا اور مرتکز کیا گیا، پھر 80 ○C پر منجمد کیا گیا اور خشک ہونے کے لیے لائفائلائز کیا گیا۔ پاؤڈر کو مزید استعمال تک 4 ○C پر ذخیرہ کیا گیا تھا۔

Phenylethanoid glycosides (PhGs) کے بڑے فعال مرکبات ہیں۔C. tubulosaاور مواد کا پتہ الٹرا وائلٹ اسپیکٹرو فوٹومیٹری کے ذریعے کیا گیا تھا (وانگ وغیرہ، 20{{20}}8)۔ Echinacoside (111670-200503, National Institutes for Food and Drug Control, China) کو پتہ لگانے میں PhGs کے معیاری مرکب کے طور پر استعمال کیا گیا تھا (ایڈیٹوریل کمیٹی آف چائنیز فارماکوپیا، 2010)۔ C. tubulosa (2 g) کے عرق کو 100 ملی لیٹر آست پانی میں تحلیل کیا گیا اور اسے D101 macroporous رال کا نشانہ بنایا گیا تاکہ ڈسٹل واٹر (200 mL)، 20 فیصد ایتھنول (200 mL) اور 70 فیصد ایتھنول (200 mL) حاصل ہو سکے۔ اس کے بعد 70 فیصد ایتھنول کا حصہ 50 ملی لیٹر پر مرکوز کیا گیا اور اسے 80 ○C پر منجمد کیا گیا اور 60 ○C پر پاؤڈر میں خشک کر دیا گیا۔ پاؤڈر کو مزید استعمال (مدر سلوشن) تک 50 ملی لیٹر میتھانول میں تحلیل کیا گیا تھا۔ 40- فولڈ ڈیلیشن میں حل کو سپیکٹرو فوٹومیٹر کے ساتھ 330 nm پر ناپا گیا۔ معیاری حل ایکناکوسائیڈ (0.04، 0.08، 0.16،0.32، اور 0.64 ملی گرام) کی معلوم مقداروں کو میتھانول کے 5 ملی لیٹر میں شامل کرکے تیار کیے گئے تھے۔

جانوروں کا علاج

چوہوں کو تصادفی طور پر چار گروپوں میں تقسیم کیا گیا تھا: (1) کنٹرول گروپ (عام نمکین کے ساتھ علاج کیا جاتا ہے)، (2) CTE کم-، (3) درمیانی-، اور (4) زیادہ خوراک والے گروپ (0 کے ساتھ علاج کیا جاتا ہے۔ .2، 0.4، اور 0.8 گرام/کلوگرام CTE، بالترتیب)۔ انٹرا گیسٹرک انتظامیہ کے ذریعہ چوہوں کو 20 دن تک مواد کھلایا گیا۔ آخری انتظامیہ کے اگلے دن، چوہوں کو پینٹوباربیٹل سے بے ہوشی کی گئی، اور کارڈیک پنکچر کے ذریعے خون جمع کیا گیا۔ اعضاء، ٹشوز، اور غدود، بشمول جگر، خصیے، ایپیڈیڈیمس، سیمینل ویسیکلز، پروسٹیٹ غدود، اور پریپیوٹیل غدود، کو ہٹایا گیا اور وزن کیا گیا۔ اعضاء کے اشاریے درج ذیل مساوات کا استعمال کرتے ہوئے شمار کیے گئے تھے۔

آرگن انڈیکس (فیصد) ¼ 100 × (اعضاء کا وزن/جسم کا وزن)

H&E اور امیونو ہسٹو کیمیکل سٹیننگ کے لیے Bouin کے fixative میں یکطرفہ خصیے طے کیے گئے تھے، اور دیگر خصیوں کو مائکروسوم کی تیاری کے لیے 80 ○C پر محفوظ کیا گیا تھا۔ جگر کو H&E سٹیننگ کے لیے فارملین میں طے کیا گیا تھا۔

خون کے نمونے اکٹھے کیے گئے اور کمرے کے درجہ حرارت پر 30 منٹ تک سیدھی پوزیشن میں جمنے کی اجازت دینے کے لیے انکیوبیٹ کیے گئے اور پھر 2000 rpm پر 15 منٹ کے لیے سینٹرفیوج کیا گیا۔ مزید استعمال تک سیرم کو —20 ○C پر ذخیرہ کیا گیا تھا۔

منی کے پیرامیٹرز کا پتہ لگانا

نطفہ کی معطلی حاصل کرنے کے لیے، چوہوں کے ایپیڈیڈیمس کو جمع کیا گیا اور عام نمکین میں کیما بنایا گیا، اور پھر 37 ○C پر 15 منٹ کے لیے کلچر کیا گیا۔ منی کے پیرامیٹرز کا پتہ لگانے کے لئے سپرم معطلی کو جمع کیا گیا تھا۔

سپرم کی گنتی کی جانچ کے لیے، کل 450 ملی لیٹر 10 فیصد فارملین فکسٹیو 50 ملی لیٹر سپرم سسپشن میں شامل کیا گیا۔ پھر خون کی گنتی کے چیمبر میں 10 ملی لیٹر محلول شامل کیا گیا، سپرم کے سروں کو شمار کیا گیا اور اسے ملین/ملی لٹر معطلی کے طور پر ظاہر کیا گیا۔

داغ لگانے کے طریقہ کار سے نطفہ کی قابل عملیت کا پتہ چلا، شیشے کی سلائیڈ پر 10 ملی لیٹر سپرم سسپنشن شامل کیا گیا۔ اس کے بعد، 10 ملی لیٹر داغدار محلول (eosin Y اور nigrosin) شامل کیا گیا اور 2 منٹ تک انکیوبیٹ کیا گیا۔ سلائیڈز کو آپٹیکل مائکروسکوپ (400 میگنیفیکیشن) کے ذریعے دیکھا گیا۔ ہر نمونے کے لیے، کل 200 سپرم کا اندازہ لگایا گیا اور قابل عمل فیصد کا حساب لگایا گیا۔

شیشے کی سلائیڈ پر کل 10 ملی لیٹر سپرم سسپنشن شامل کیا گیا، نطفہ کی حرکت کو آپٹیکل مائکروسکوپ (400 میگنیفیکیشن) کے ذریعے دیکھا گیا۔ ہر نمونے سے دس بصری فیلڈز کا انتخاب کیا گیا اور حرکت پذیری کے لیے 200 سپرم کا جائزہ لیا گیا۔ درجہ بندی کا معیار حسب ذیل تھا: (1) ترقی پسند حرکت (PR)، اچھی ایتھلیٹک صلاحیت، سیدھی لکیر یا منحنی حرکت، رفتار کو نظر انداز کیا جا سکتا ہے۔ (2) غیر ترقی پسند حرکت (NP)، خراب ایتھلیٹک صلاحیت، گھومنا یا جھولنا؛ (3) حرکت پذیری (IM)، کوئی حرکت نہیں۔

کل 50 ملی لیٹر سپرم سسپنشن کو شیشے کی سلائیڈ پر لگایا گیا تھا اور اسے 1 فیصد eosin محلول سے 10 منٹ تک داغ دیا گیا تھا۔ آپٹیکل مائکروسکوپ (400 میگنیفیکیشن) کے ذریعے سپرم مورفولوجی کا مشاہدہ کیا گیا۔ کل 200 سپرم کا جائزہ لیا گیا اور سپرم کی خرابی کی شرح کا حساب لگایا گیا۔

ریڈیو امیونواسے

مینوفیکچرر کے پروٹوکول کے مطابق ریڈیو امیونواسے (RIA) کٹس (بیجنگ چین-یو کے انسٹی ٹیوٹ آف بائیولوجیکل ٹیکنالوجی، بیجنگ، چین) کا استعمال کرتے ہوئے تیار شدہ سیرم سے پروجیسٹرون اور ٹیسٹوسٹیرون کی سطحوں کی مقدار براہ راست طے کی گئی۔

امیونو ہسٹو کیمیکل داغ

فکسڈ ٹشوز کو پیرافن سیکشنز (5 ملی میٹر) میں کاٹا گیا اور مینوفیکچرر کی ہدایات کے مطابق تجارتی کٹ (فوزو میکسین بائیوٹیکنالوجی کمپنی لمیٹڈ، فوزو، چین) کا استعمال کرتے ہوئے CYP11A1 اور CYP17A1 کے اظہار کا اندازہ کرنے کے لیے امیونو ہسٹو کیمسٹری کی گئی۔ سی وائی پی 11 اے 1 اور سی وائی پی 17 اے 1 کے خلاف اینٹی باڈیز کو پی بی ایس (1: 200) میں گھٹا دیا گیا تھا اور دوسرا اینٹی باڈی کٹ میں دستیاب تھی۔ ہر گروپ سے چار حصوں کا انتخاب کیا گیا، ہر سیکشن سے 10 بصری فیلڈز کا انتخاب کیا گیا اور ایک پیتھالوجسٹ کے ذریعہ مثبت خلیوں کی گنتی کی گئی۔

ورشن اور جگر کے مائکروسومل پروٹین کی تیاری

مائکروسومل تیاری بنیادی طور پر کی گئی تھی جیسا کہ جیانگ ایٹ ال نے بیان کیا ہے۔ (2012)۔ خصیوں یا جگر کے نمونوں کو آئس کولڈ TMS بفر (20 mM Tris–HCl، 5 mM MgCl2، اور 0.25 M sucrose، pH 7.5) کی چار جلدوں میں کیما بنایا گیا اور ہم آہنگ کیا گیا۔ ہوموجنیٹس کو 9000 گرام پر 20 منٹ کے لیے 4 ○C پر سینٹرفیوج کیا گیا۔ سپرنٹینٹس کو ہٹا دیا گیا اور 88 mM CaCl2 محلول (10:1, v/v) کے ساتھ ملایا گیا، 4 ○C پر 20 منٹ کے لیے 27 000 g پر سینٹری فیوج کیا گیا۔ خام جھلی کے حصوں پر مشتمل چھرروں کو 0.1 M Tris بفر میں 20 فیصد گلیسرول کے ساتھ معطل کیا گیا تھا۔ مائکروسومز کو مزید استعمال تک 80 ○C پر ذخیرہ کیا گیا تھا۔ پروٹین کے ارتکاز کا تعین Coomassie کے شاندار نیلے رنگ کے داغ کے ذریعے بوائین سیرم البومین کو بطور معیار استعمال کرتے ہوئے کیا گیا تھا۔

مغربی دھبے کا تجزیہ

CYP11A1، CYP17A1، اور CYP3A4 اظہار کا اندازہ مغربی بلاٹ تجزیہ کے ذریعے کیا گیا۔ ورشن یا جگر کے مائکروسومل پروٹین کو SDS-PAGE کے ذریعے 12 فیصد جیل پر الگ کیا گیا تھا اور پولی وینیلائیڈین فلورائیڈ (PVDF) جھلی میں منتقل کیا گیا تھا۔ جھلیوں کو 5 فیصد (w/v) پاؤڈر کم چکنائی والے سکم دودھ میں Tris-buffered saline کے ساتھ 0.05 فیصد Tween-20 (TBST) میں 2 گھنٹے کے لیے بلاک کیا گیا تھا، اور مزید خرگوش کے ساتھ انکیوبیٹ کیا گیا تھا۔ اینٹی چوہا CYP11A1 اور CYP17A1 (بوسٹر بائیولوجیکل ٹیکنالوجی، ووہان، چین) اور CYP3A4 (بیجنگ بایو سنتھیسس بائیو ٹیکنالوجی کمپنی، لمیٹڈ، بیجنگ، چین) پولی کلونل اینٹی باڈیز (1:200) TBST میں 4 ○C پر 8 گھنٹے کے لیے، اس کے بعد بکری مخالف خرگوش (1:3000) پیرو آکسیڈیز سیکنڈری اینٹی باڈی (Tianjin Sungene Biotech Co., Ltd., Tianjin, China) کو TBST میں 37 ○C پر 1 گھنٹے کے لیے پتلا کیا گیا۔ کیمیلومینسنٹ کا پتہ لگانے کا کام Bio-Rad ChemiDocTM MP امیجنگ سسٹم (Bio-Rad Laboratories، Hercules، CA) کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا۔ بینڈز کی گرے ویلیو کا تجزیہ امیج J2 سافٹ ویئر (نیشنل انسٹی ٹیوٹ آف ہیلتھ، بیتیسڈا، ایم اے) کے ذریعے کیا گیا۔

ہیپاٹوٹوکسٹی اسسیس

چوہوں میں سی ٹی ای کی ہیپاٹوٹوکسٹی کا پتہ لگانے کے لیے، لیور انڈیکس، ہیپاٹک ہسٹوپیتھولوجی، الانائن امینوٹرانسفریز (ALT) کی سطحوں کا جائزہ لیا گیا۔ پیرافین کے حصے ایک معیاری طریقہ کار کے تحت تیار کیے گئے تھے اور H&E داغ لگنے کے بعد ہلکی مائکروسکوپ کے ذریعے ہسٹولوجیکل خصوصیات کا مشاہدہ کیا گیا تھا۔ سیکشنز کا معائنہ ایک پیتھالوجسٹ نے کیا جو نمونوں کی شناخت کے لیے اندھا تھا۔ مینوفیکچرر کے پروٹوکول کے مطابق سیرم ALT کی سطح ALT/GPT کٹ (Biosino Biotechnology and Science Inc. بیجنگ، چین) کا استعمال کرتے ہوئے ماپا گیا۔

شماریاتی تجزیہ

تمام اعداد و شمار کا اظہار بطور مطلب ± SD کیا گیا تھا اور تغیرات (ANOVA) کے یک طرفہ بار بار اقدامات کے تجزیہ کے ساتھ تجزیہ کیا گیا تھا۔ تمام شماریاتی پیرامیٹرز کا حساب SPSS ورژن 19{2}} سافٹ ویئر (SPSS Inc., Chicago, IL) کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا۔ 0.05 سے کم p-value والے فرق کو شماریاتی لحاظ سے اہم سمجھا جاتا تھا۔

نتائج

C. tubulosa نچوڑ میں phenylethanoid glycosides کا مواد

معیاری منحنی خطوط میں جذب اور ایکناکوسائیڈ ارتکاز کے درمیان {{0}۔{6}}08 سے 0.128 mg/mL (Y 14.39 x جمع 0.08125, R2 0.9982 کے درمیان ایک اچھے لکیری تعلق کی نمائش ہوتی ہے۔ )

(شکل 2)۔ CTE میں PhGs کا مواد حساب سے 41.52 فیصد تھا۔

اعضاء کے اشاریے پر C. tubulosa اقتباس کا اثر

کنٹرول گروپ اور علاج کے تمام گروپوں کے درمیان مردانہ تولیدی اعضاء کے اشاریہ جات کے فرق نمایاں طور پر مختلف نہیں تھے (ٹیبل 1)۔ کنٹرول گروپ اور ہائی ڈوز (0.8 گرام/کلوگرام) CTE ٹریٹمنٹ گروپس کے درمیان جگر کے انڈیکس کا ایک اہم فرق (p50.05) دیکھا گیا۔

منی کے پیرامیٹرز پر C. tubulosa نچوڑ کا اثر

جیسا کہ جدول 2 میں دکھایا گیا ہے، 0.4 اور 0.8 g/kg CTE (p50.05) کے علاج کے ذریعے چوہوں کی نطفہ کی تعداد میں اضافہ کیا گیا، جبکہ سپرم کی عملداری میں ان کے درمیان کوئی خاص فرق نہیں دکھایا گیا۔ ہر گروپ. CTE کے ساتھ انتظامیہ نے بھی نمایاں کارکردگی دکھائی

C. tubulosa اقتباس کی Hepatotoxicity

کنٹرول گروپ (شکل 7) کے مقابلے میں ہائی ڈوز سی ٹی ای ٹریٹمنٹ گروپ کے لیور انڈیکس میں کمی آئی اور سیرم ALT میں اضافہ کیا گیا۔ زیادہ مقدار میں سی ٹی ای کی وجہ سے ہیپاٹک ورم ​​میں کمی آئی (شکل 8)۔ کنٹرول گروپ کے جگر کی ساخت نارمل تھی۔ ہیپاٹوسائٹس نے سیلولر مورفولوجی کو برقرار رکھا اور نظر آنے والی ہیپاٹک ڈوریوں میں ترتیب دیا گیا تھا (شکل 8a)۔ اس کے برعکس، زیادہ خوراک والے CTE گروپ (شکل 8b) میں ہیپاٹوسائٹس بکھرے ہوئے تھے اور 50 فیصد سے زیادہ ہیپاٹوسائٹس نے ورم کی مختلف ڈگریاں ظاہر کیں۔ چند ہیپاٹوسائٹس نے فیٹی انحطاط کا مظاہرہ کیا۔ کچھ ہیپاٹوسائٹس نے pyknotic نیوکللی کے ساتھ سیل کی موت اور سیل نیکروسس کے دیگر شواہد بشمول کیریولیسس اور پھیلا ہوا سیلولر ملبہ ظاہر کیا۔

Cistanche tubulosa ایک hypocholesterolemic اثر کا حامل ثابت ہوا تھا (Shimoda et al.، 2009؛ Xiong et al.، 2013)۔ CYP11A1 کے mRNA کی سطح کو CTE (400 mg/kg) (Shimoda et al.، 2009) کے ذریعے اپ ریگولیٹ کیا گیا تھا، پچھلی رپورٹس کے مطابق؛ تاہم، نقل کے ضابطے کا طریقہ کار واضح نہیں تھا۔ جیسا کہ دوسرے سٹیرائیڈوجینک P450s کے ساتھ، CYP11A1 اور CYP17A1 کا ضابطہ نسبتاً پیچیدہ ہے، اور ان کی شمولیت کو cAMP سگنلنگ پاتھ وے (Guo et al.، 2003; Kosˇir et al.، 2012) کی وجہ سے جانا جاتا ہے۔ CYP11A1 اور CYP17A1 کے فروغ دینے والے ایسے سلسلے پر مشتمل ہوتے ہیں جو سٹیرائیڈوجینک عنصر (SF-1) سے منسلک ہوتے ہیں جو بدلے میں سٹیرائڈوجینک جینز (Ortiz de Montellano, 2005). دیگر عوامل، بشمول CAMP رسپانس ایلیمینٹ بائنڈنگ (CREB)، ایکٹیویٹر پروٹین 1 (AP-1)، مخصوص پروٹین (SP-1، SP-3)، بھی CYP11A1 کو چالو کرنے میں شامل ہیں۔ اور CYP17A1 ٹرانسکرپشنز۔ پروٹین ڈی این اے کمپلیکس بنانے والے مختلف ٹرانسکرپشن عوامل کی اسمبلی CYP11A1 اور CYP17A1 ٹرانسکرپشن (اورٹیز ڈی مونٹیلاانو، 2005) میں ایک اہم قدم دکھائی دیتی ہے۔ CYP11A1 اور CYP17A1 اظہار کو متاثر کرنے کے لئے CTE کے ہدف پروٹین کی مزید تفتیش کی ضرورت ہے۔

اور کارسنجن. نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ مرکزی ہارمون میٹابولک انزائم (CYP3A4) بھی CTE کی طرف سے حوصلہ افزائی کی گئی تھی. صحت مند چوہوں میں، ہارمونز کا فیڈ بیک ریگولیشن ہوتا ہے۔ مصنفین نے یہ قیاس کیا کہ CYP3A4 اظہار کو اس مطالعے میں ضرورت سے زیادہ ہارمونز کو میٹابولائز کرنے کے لیے بڑھایا گیا تھا۔ یہی وجہ ہے کہ پروجیسٹرون اور ٹیسٹوسٹیرون کی سطح میں اضافہ اہم نہیں تھا۔ اگر سی ٹی ای کو کم جنسی ہارمون کی سطح والے چوہوں کو دیا گیا تو اس کا اثر زیادہ واضح ہو سکتا ہے۔

سی ٹی ای کی سیسٹیمیٹک زہریلا اور حفاظتی تشخیص کی پوری طرح سے تفتیش نہیں کی گئی ہے، اور ہمارے موجودہ مطالعے سے پتہ چلتا ہے کہ سی ٹی ای کی زیادہ مقدار جگر کے ورم کا باعث بنتی ہے۔ کم وغیرہ۔ (2012) نے پایا کہ Cistanche herba نے خصیوں کو نقصان پہنچایا جس میں سپرم کی تعداد اور ٹیسٹوسٹیرون کی سطح میں کمی، خصیے کی ہسٹولوجک ساخت کو نقصان پہنچا؛ تاہم، ہمارے کام میں، ہسٹولوجیکل امتحان میں خصیوں کی ساخت نارمل تھی (ڈیٹا نہیں دکھایا گیا)۔ اگرچہ اس مطالعے میں استعمال ہونے والی خوراکیں Kim et al کی رپورٹ سے ملتی جلتی تھیں۔ (2012)، جڑی بوٹیوں کے پودوں کی اقسام مختلف تھیں۔ ترقی کے حالات، فصل کا موسم، اور پروسیسنگ کا طریقہ واضح نہیں تھا جو مختلف معیار یا طبی فارماسولوجیکل اثرات کا باعث بن سکتا ہے (وانگ ایٹ ال۔، 2012)۔

نتیجہ

سی ٹی ای کے علاج نے نر چوہوں میں جنسی ہارمونز کی سطح میں نمایاں شمولیت ظاہر کی، جو شاید CYP11A1 اور CYP17A1 کے تاثرات کو متحرک کرنے کے ذریعے تعاون کیا گیا تھا۔ ایک روایتی چینی ادویات اور خوراک کے محرک کے طور پر، C. tubulosa کو مستقبل میں نئی ​​ادویات، فعال خوراک یا غذائی سپلیمنٹس میں مزید ترقی دی جا سکتی ہے، تاہم، C. tubulosa کی حفاظت کی منظم تحقیقات کا اندازہ لگایا جانا چاہیے اور ممکنہ حفاظتی خطرے کو مدنظر رکھا جانا چاہیے۔ غور.

1کالج آف ویٹرنری میڈیسن، نارتھ ویسٹ اے اینڈ ایف یونیورسٹی، یانگلنگ، چین، 2کالج آف بائیولوجیکل سائنس اینڈ انجینئرنگ، شانکسی یونیورسٹی آف ٹیکنالوجی، ہانزہونگ، چین، اور 3ڈیپارٹمنٹ آف بائیو میڈیکل سائنسز، یونیورسٹی آف گیلف، گیلف، اونٹاریو، کینیڈا

اعترافات

مصنفین پروفیسر جیان جون ہو کا شکریہ ادا کرتے ہیں کہ انہوں نے Cistanche tubulosa کے تنے کو جمع کرنے اور اس کی تصدیق کرنے میں مدد کی۔

دلچسپی کا اعلان

اس کام کو اوپن پروجیکٹ پروگرام آف اسٹیٹ کلیدی لیبارٹری آف نیچرل میڈیسن، چائنا فارماسیوٹیکل یونیورسٹی (نمبر SKLNMKF201221)، وزارت تعلیم اور غیر ملکی ماہرین کے امور کی ریاستی انتظامیہ ''اوورسیز ٹیچر'' پروجیکٹ (نمبر MS2011XBNL057)، چین کے ذریعے تعاون کیا گیا۔ ، اعلیٰ درجے کے غیر ملکی ماہرین کی بھرتی کا پروگرام (GDW20146100228)، چین اور S&T، شانسی صوبے (2015SD0018) میں بین الاقوامی تعاون بیس کے کلیدی تعمیراتی پروگرام کے ذریعے تعاون یافتہ ہے۔

حوالہ جات

Bosmann HB، Hales KH، Li X، et al. (1996)۔ اینڈوٹوکسین کے ذریعہ ٹیسٹوسٹیرون کی ویوو کی روک تھام لیڈیگ خلیوں میں سٹیرائڈوجینک ایکیوٹ ریگولیٹری (اسٹار) پروٹین کے نقصان کے متوازی ہے۔ اینڈو کرائنولوجی 137: 4522–5۔

چینی فارماکوپیا کی ادارتی کمیٹی۔ (2010)۔ عوامی جمہوریہ چین کا فارماکوپیا بیجنگ، چین: چائنا میڈیکل سائنس اینڈ ٹیکنالوجی پریس۔

جی آر ایس، ہارڈی ایم پی۔ (2007)۔ بلوغت کی نشوونما کے دوران لیڈیگ خلیوں کا ضابطہ۔ میں: پینے اے ایچ، ہارڈی ایم پی، ایڈز۔ صحت اور بیماری میں لیڈیگ سیل۔ ٹوٹوا: ہیومان پریس، 55-70۔

Guo IC، Hu MC، Chung BC. (2003)۔ CYP11A1 کا نقلی ضابطہ۔ J Biomed Sci 10:593–8۔

Hanukoglu L. (1992)۔ سٹیرایڈوجینک انزائمز: سٹیرایڈ ہارمون بائیو سنتھیسس کے ریگولیشن میں ساخت، فنکشن اور کردار۔ جے سٹیرایڈ بائیو کیم Mol Biol 43:779–804۔

ہی ڈبلیو، شو ایکس ایف، زونگ جی زیڈ، وغیرہ۔ (1996a)۔ تیاری سے پہلے اور بعد میں Cistanche deserticola YC Ma کے عمل کو سپورٹ کرنے والے گردے کو تقویت دینے اور یانگ پر مطالعہ۔ چن جے چن میٹر میڈ 21:534–7۔

ہی ڈبلیو، زونگ جی زیڈ، وو جی ایل، چن ایم ایچ۔ (1996ب)۔ Cistanche deserticola کے مردانہ ہارمون نما فعل پر ابتدائی مطالعہ۔ چن جے چن میٹر میڈ 21:5۔

Hofbauer LC، Khosla S. (1999)۔ ہڈی میٹابولزم پر اینڈروجن کے اثرات: حالیہ پیشرفت اور تنازعات۔ Eur J Endocrinol 140:271–86۔

جیانگ بی، کائی ایف، گاو ایس ایچ، وغیرہ۔ (2012)۔ شیکسیانگ باوکسین گولی اور اس کے اہم اجزاء کے ذریعے سائٹوکوم P450 3A کی شمولیت۔ Chem Biol Interact 195:105–13۔

کم ایس ڈبلیو، یو ایس ایچ، لی ایچ جے، وغیرہ۔ (2012)۔ Cistanches herba نر چوہوں میں testis cytotoxicity پیدا کرتا ہے۔ Bull Environ Contam Toxicol 88:112–17۔

Kosˇir R, Zmrzljak UP, Bele T, et al. (2012)۔ کا سرکیڈین اظہار

Cyp17a1 کے ایپی جینیٹک ریگولیشن میں cAMP-responsive عنصر ماڈیولیٹر کی ماؤس ایڈرینل غدود میں steroidogenic cytochromes P450 کی شمولیت۔ فروری J 279:1584-93۔

لی ٹی ایم، ہوانگ ایچ سی، ایس یو سی ایم، وغیرہ۔ (2012)۔ Cistanche deserticola extract osteoblasts میں ہڈیوں کی تشکیل کو بڑھاتا ہے۔ جے فارم فارماکول 64: 897–907۔

Ortiz de Montellano PRO. (2005)۔ سائٹوکوم P450 ڈھانچہ، طریقہ کار، اور حیاتیاتی کیمیا۔ نیویارک: کلور اکیڈمک/ پلینم پبلشرز۔

پینے اے ایچ، او شاگنیسی پی جے۔ (1996)۔ Leydig سیل میں steroidogenic enzymes کی ساخت، فنکشن اور ریگولیشن۔ میں: پینے اے ایچ، ہارڈی ایم پی، رسل ایل ڈی، ایڈز۔ لیڈیگ سیل۔ ویانا: کیشے ریور پریس، 259–86۔

شمودا ایچ، تاناکا جے، تاکاہارا وائی، وغیرہ۔ (2009)۔ چوہوں میں چینی روایتی خام دوا Cistanche tubulosa extract کے hypocholesterolemic اثرات۔ ایم جے چن میڈ 37:1125–38۔

وانگ ٹی، ژانگ XY، Xie WY. (2012)۔ Cistanche deserticola YC Ma، ''صحرا جنسینگ'': ایک جائزہ۔ ایم جے چن میڈ 40:1123–41۔

وانگ ایل این، چن جے، یانگ ایم ایچ، وغیرہ۔ (2008)۔ Cistanche desertiola میں کل phenylethanoid glycosides کا مقداری تعین۔ نارتھ ویسٹ فارم جے 23:67-9۔

Xiong WT، Gu L، Wang C، et al. (2013)۔ قسم 2 ذیابیطس کے ڈی بی / ڈی بی چوہوں میں سیستانچے ٹیوبولوسا کے اینٹی ہائپرگلیسیمک اور ہائپولیپیڈیمک اثرات۔ J Ethnopharmacol 150:935–45۔

یامازاکی ایچ، شیماڈا ٹی (1997)۔ پروجیسٹرون اور ٹیسٹوسٹیرون ہائیڈرو آکسیلیشن بذریعہ سائٹو کروم P450 2C19، 2C9، اور 3A4 انسانی جگر کے مائکروسومس میں۔ آرک بائیو کیم بائیو فیز 346:161–9۔