کیلشیم کس طرح لوورائڈ کی وجہ سے گردے کے نقصان کا علاج کرتا ہے؟

رابطہ: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 ای میل:audrey.hu@wecistanche.com

مطلوبہ الفاظ: کیلشیم, گردہ, اپوپٹوسس

خلاصہ

فلورائیڈ (F) کا طویل مدتی ضرورت سے زیادہ استعمال osseous اور non-osseous نقصان کا سبب بن سکتا ہے۔ دیگردہجسم کا اہم فلورائڈ اخراج کا عضو ہے۔ اس مطالعے کا مقصد یہ دریافت کرنا ہے کہ آیا غذائیتکیلشیمضمیمہ کم کر سکتا ہےگردہفلوروسس کی وجہ سے ہونے والے نقصان اور اس کے اثرات کی مزید تحقیقات کے لیےکیلشیمکے تخفیف کے طریقہ کار پرگردہسیلapoptosisایف کی طرف سے متحرک۔ ہم نے ہسٹوپیتھولوجیکل ڈھانچے کا جائزہ لیا،گردہفنکشن کے اشارے، اور موت کے رسیپٹر کی ثالثی کے جین اور پروٹین کے اظہار کی سطحapoptosisSprague Dawley (SD) چوہوں کے راستے جن کا علاج سوڈیم فلورائیڈ (NaF) اور/یاکیلشیمکاربونیٹ (CaCO3) 120 دنوں کے لیے۔ نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ 100 mg/L NaF کی حوصلہ افزائی ہوئی۔گردہہسٹوپیتھولوجیکل چوٹ اورapoptosis، کریٹینائن (CRE)، یورک ایسڈ (UA)، خون میں یوریا نائٹروجن (BUN)، پوٹاشیم (K)، فاسفورس (P)، اور F (p < {{0}}.05="" کی="" تعداد="" میں="" اضافہ="" ہوا۔="" ،="" اور="" سیرم="" میگنیشیم="" (mg)="" (p=""><0.05) کی="" سطح="" کو="" کم="" کریں۔="" مزید="" یہ="" کہ،="" این="" اے="" ایف="" نے="" فاس="" سیل="" سرفیس="" ڈیتھ="" ریسیپٹر="" (ایف="" اے="" ایس)،="" ٹیومر="" نیکروسس="" فیکٹر="" (ٹی="" این="" ایف)،="" ٹی="" این="" ایف="" سے="" متعلق="" ایم="" آر="" این="" اے="" اور="" پروٹین="" ایکسپریشن="" لیول="" میں="" اضافہ="">apoptosisinducing ligand (TRAIL)، Caspase 8، Caspase 3، اور poly ADP-ribose polymerase (PARP) (p < 0.01)،="" جس="" نے="" آخر="" کار="" موت="" کے="" رسیپٹر="" کے="" راستے="" کو="" چالو="" کیا۔="">کیلشیمضمیمہ نے F کی طرف سے حوصلہ افزائی CRE، BUN، UA، F، اور P کی سطحوں میں کمی کو تبدیل کر دیا، ہسٹوپیتھولوجیکل نقصان کو کم کیا اورapoptosis، اور موت کے رسیپٹر پاتھ وے سے متعلق مارکر کے جین اور پروٹین کے اظہار کی سطح کو کم کیا۔ آخر میں، 1 فیصدکیلشیمایف حوصلہ افزائی کو کم کرتا ہے۔گردہapoptosisFAS/FASL، TNFR/TNF، DR5/TRAIL سگنلنگ پاتھ ویز کے ذریعے۔

دیگردہجسم کا اہم فلورائڈ اخراج کا عضو ہے،cistancheکی حفاظت کر سکتے ہیںگردہاور بہتر کریںگردہفنکشن

تعارف

فلورین مٹی، پانی اور خوراک میں بڑے پیمانے پر موجود ہے۔ تاہم، کچھ قدرتی عوامل (معدنیات اور چٹانوں کی ویدرنگ، کی تشکیلکیلشیماور میگنیشیم نمکیات، زمینی پانی کی دراندازی وغیرہ) اور انسانی سرگرمیاں (صنعتی گندے پانی، زرعی کیمیکلز، گھریلو مصنوعات وغیرہ) ماحول میں فلورین آلودگی کا سبب بنتی ہیں (Daiwile et al.، 2019)۔ فی الحال، فلورائیڈ (F) کی نمائش کا سب سے بڑا عنصر پینے کا پانی ہے، اور عالمی ادارہ صحت کی طرف سے پینے کے پانی میں F کی تجویز کردہ ارتکاز 1.5 mg/L سے کم ہے (پینے کے پانی کے معیار کے لیے رہنما خطوط، 2017)۔ وبائی امراض کے شواہد بتاتے ہیں کہ اس سے زیادہ ارتکاز دانتوں کے فلوروسس کا خطرہ بڑھاتا ہے، اور بڑھتی ہوئی ارتکاز کنکال فلوروسس کے خطرے کو بڑھا دے گی (پینے کے پانی کے معیار کے لیے رہنما خطوط، 2017؛ نیشنل ریسرچ کونسل، 2006)۔ فلورائیڈ کی زیادہ مقدار میں طویل مدتی نمائش سانس کے ذریعے جسم میں فلورین کے جذب کو بڑھا سکتی ہے۔

اور ہضم کے راستے. F کا زیادہ استعمال جسم کے ہڈیوں اور غیر ہڈیوں کے اعضاء کو نقصان پہنچا سکتا ہے۔ ہڈی کے باہر نرم بافتوں کو پہنچنے والے نقصان کو عام طور پر غیر بونی نقصان کہا جاتا ہے۔ فی الحال، یہ پتہ چلا ہے کہ F کی وجہ سے غیر ہڈیوں کے بافتوں کو پہنچنے والے نقصان میں ہاضمہ، جگر،گردہ، دماغ، وغیرہ۔ (جھا وغیرہ۔

دیگردہ، جسم کا اہم اخراج کرنے والا عضو، جسم میں زہریلے مادوں اور خارجی زہریلے مادوں کے تحول کے لیے ذمہ دار ہے۔ مطالعات میں بتایا گیا ہے کہ جسم کی طرف سے 50-80 فیصد فلورائیڈ کو فلٹر کیا جاتا ہے اور دوبارہ جذب کیا جاتا ہے۔گردے، اور باقی فلورین دوسرے ٹشوز اور اعضاء میں جمع ہو جاتی ہے (چن ایٹ ال۔، 2013؛ دھرمارتنے، 2019)۔ بہت سے قسم کے لٹریچر نے ثابت کیا ہے کہ 50 اور 100 mg/LF کی نمائش گردے کیپسول گہا کے بڑھنے کا باعث بن سکتی ہے۔گردہنلیاں، پیپلیری خلیوں کی بے ترتیب ترتیب، لیمن کا تنگ ہونا، جس کے نتیجے میںapoptosisکیگردہخلیات اور بائیو کیمیکل افعال کا بگاڑ جیسے کریٹینائن (CRE)، یورک ایسڈ (UA)،کیلشیم(Ca)، اور فاسفورس (P) (Song et al., 2014; HW Wang et al., 2020; Wei et al., 2018a)۔

اپوپٹوسس، ایک قسم کی سیل کی موت جو جینز کے ذریعے کنٹرول ہوتی ہے، جسے اینڈوجینس میں تقسیم کیا جاتا ہے۔apoptosisاور خارجیapoptosis. حالیہ رپورٹس نے اس بات کی نشاندہی کی ہے۔apoptosisہائی ایف کی وجہ سے بنیادی طور پر مائٹوکونڈریا ثالثی شامل ہے، اینڈوپلاسمک ریٹیکولم تناؤ میں ثالثی ہے، اور موت کے رسیپٹر کی ثالثی کے راستے (وی ایٹ ال۔، 2018a)۔ ہمارے گروپ میں پچھلے تجربات نے نشاندہی کی کہ NaF ہڈی اور جگر کو متاثر کرتا ہے۔apoptosisانٹرا سیلولر اینڈوپلاسمک ریٹیکولم (ER) پاتھ وے اور مائٹوکونڈریل پاتھ وے (Li et al., 2021; J. Wang et al., 2020; Wang et al., 2019) کے ذریعے۔ اس کے علاوہ، مطالعات نے یہ بھی دکھایا ہے کہ مائٹوکونڈریل راستہ NaF-حوصلہ افزائی میں شامل ہے۔apoptosisماؤس کاگردے(Wei et al.، 2018b)۔ تاہم، F-حوصلہ افزائی میں موت کے رسیپٹر کی ثالثی کے راستے پر کوئی منظم مطالعہ نہیں ہے۔گردہapoptosis. ڈیتھ ریسیپٹر کا راستہ خارجی کے ہر مرحلے پر حاوی ہے۔apoptosisبشمول فاس سیل سرفیس ڈیتھ ریسیپٹر (FAS) پاتھ وے، ٹیومر نیکروسس فیکٹر (TNF) پاتھ وے، اور TNF سے متعلقapoptosis-انڈیوسنگ لیگنڈ (TRAIL) پاتھ وے (Grunert et al., 2012; Lu et al., 2017; Wang and Su, 2018)۔ FAS پاتھ وے قدیم سگنل کی نقل و حمل کا نظام ہے جو ثالثی کرتا ہے۔apoptosis. FAS میں ایک جھلی ریسیپٹر کی خصوصیات ہیں اور FAS ligand (FAS-L) کے ساتھ پابند ہونے کے بعد ایک ٹرائیمر بناتا ہے۔ پھر ٹرمر کا مخصوص ڈومین متعلقہ کونیکسن مالیکیول FAS سے وابستہ ڈیتھ ڈومین پروٹین (FADD) کے ڈیتھ ڈومین (DD) کے ساتھ منسلک ہو کر ڈیتھ انڈسڈ سگنل کمپلیکس (DISC) (Wang and Su, 2018) تشکیل دیتا ہے۔ درج ذیل حیاتیاتی سگنل کی منتقلی کے عمل میں، FADD ایک ہی وقت میں Caspase 8 اور Caspase فیملی کو چالو کر سکتا ہے، اور آخر کارapoptosisCaspase 3 اور پولی ADP-ribose polymerase (PARP) اثر (Kischkel et al.، 2000; Meynier and Rieux-Laucat, 2019) کی شرکت کے ذریعے۔ حالیہ مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ FAS راستہ ثالثی کرتا ہے۔apoptosisٹی خلیوں میں اور اس کے دورانگردہسسپلٹین کی وجہ سے ناکامی (Djiadeu et al.، 2017؛ Linkermann et al.، 2011)۔ اس کے علاوہ، ایک مطالعہ نے یہ بھی اطلاع دی ہے کہ NaF حوصلہ افزائی کرتا ہےapoptosisFAS پاتھ وے کے ذریعے چوہوں میں (Sun et al.، 2017)۔ TRAIL TNF سپر فیملی میں ایک تسلیم شدہ سائٹوکائن ہے۔ یہ اپنے ہومولوگس ایگونسٹ ریسیپٹرز، یعنی ڈیتھ ریسیپٹرز (DR4 اور DR5) سے منسلک ہوتا ہے۔ اس کے سیلولر ریجن میں ڈی ڈی ہے۔ DD انکولی پروٹین FADD کی بھرتی کے لیے ضروری ہے۔ FADD بدلے میں Caspases کو cytoplasm میں چھوڑنے پر اکساتا ہے، Caspase 3 cleaves PARP کو ​​چالو کرتا ہے، اور اس کے DNA کی مرمت کی صلاحیت کو روکتا ہے، جس کے نتیجے میںapoptosis(Bodmer et al.، 2000؛ Micheau، 2018)۔ یہ ظاہر کیا گیا ہے کہ TRAIL/DR5 پاتھ وے NaF-حوصلہ افزائی میں شامل ہے۔apoptosisچوہوں میں (گانا وغیرہ، 2021)۔ Osteoprotegerin (OPG) ایک آزاد حل پذیر رسیپٹر ہے جس میں ٹرانس میبرین ڈومین کی کمی ہے۔ یہ TRAIL کی ثالثی کو روک سکتا ہے۔apoptosisTRAIL اور دیگر موت کے رسیپٹرز کی پابندی کو روک کر (Duiker et al., 2006; Kiraz et al., 2016; Micheau, 2018)۔ TNF اور TNF ریسیپٹر (TNF-R1) کی بائنڈنگ اس کے DD کے ذریعے TNFR سے وابستہ ڈیتھ ڈومین (TRADD) پروٹین کی بھرتی کو چالو کر سکتی ہے۔ اس کے بعد، TRADD FADD کے ساتھ تعامل کرتا ہے، جس کے نتیجے میں پرو کیسپیس 8 کی بھرتی ہوتی ہے، جو کہ پروٹولیٹک انزائمز کے ذریعے فعال کیسپیس 8 میں کلیئر ہوتا ہے۔ Caspase 8 پھر Caspase 3 کو چالو کرتا ہے، جو سیل کے لیے ذمہ دار ہے۔apoptosis(Kiraz et al.، 2016؛ Sedger and McDermott، 2014)۔ یہ اطلاع دی جاتی ہے کہ NaF ہیپاٹوسائٹ کو آمادہ کرتا ہے۔apoptosisTNF-R1 سگنل پاتھ وے کے ذریعے چوہوں میں (Lu et al.، 2017)

کیلشیمہڈیوں اور دانتوں کی ساخت میں مختلف کردار ادا کرتا ہے، اور یہ اعصابی ترسیل اور مواد کی رہائی کو بھی کنٹرول کر سکتا ہے (Cao et al.، 2016)، نظامی میں حصہ لیتا ہے۔کیلشیمہومیوسٹاسس (Carmeliet et al.، 2003؛ Yang et al.، 2016)، جھلی کی پارگمیتا میں تبدیلی (Lappe et al.، 2017)، مختلف قسم کے انزائمز اور ہارمونز کے اخراج کو چالو کرنا (Kim et al.، 2012)، وغیرہ۔ بہت سے پچھلے مطالعات سے پتہ چلا ہے کہ F اور Ca کا حیاتیات میں ایک مخالف اثر ہے (Dure-Smith et al., 1996; Nobrega et al., 2019)۔ جسم کی طرف سے F کے جذب ہونے کے بعد، یہ خون میں داخل ہو کر ناقابل حل CaF2 precipitates بنائے گا۔ اگر Ca کی غذائی سپلائی ناکافی ہے اور خون Ca مقررہ سطح تک نہیں پہنچتا ہے تو، وہاں پیتھولوجیکل تبدیلیاں ہوں گی جیسے ہائپوکالسیمیا اور آسٹیولیسس، اس لیے Ca کا غذائی ضمیمہ فلوروسس کو روکنے اور بہتر کرنے میں اہم کردار ادا کرتا ہے (Dure-Smith et ال۔، 1996؛ لی وغیرہ۔، 2021؛ یانگ وغیرہ۔، 2021)۔ ہمارے گروپ نے اس غذا کی تصدیق کی ہے۔کیلشیمکو کم کر سکتا ہے۔apoptosisPI3K-AKT سگنل پاتھ وے، ER پاتھ وے، اور مائٹوکونڈریل پاتھ وے (Li et al., 2021; J. Wang et al., 2020; Wang et al., 2019; Yang et al., 2021) کے ذریعے ہڈی اور جگر کا۔ مزید یہ ثابت کرنے کے لیے کہ آیاکیلشیمڈیتھ ریسیپٹر ثالثی کے ذریعے ایف کی نیفروٹوکسٹی کو کم کرتا ہے۔apoptosisپاتھ وے، ہم نے ہائی فلورائیڈ ڈائیٹ کا چوہا ماڈل قائم کیا۔کیلشیماور جائزہ لیاگردہچوٹ انڈیکس، کی ڈگریapoptosis، اور موت کے رسیپٹر کی ثالثی میں مارکر جین اور پروٹین کے اظہار کی تبدیلیاںapoptosisراستہ

مواد اور طریقے

کیمیکل اور آلات

آست پانی کو ہیل فورس واٹر پیوریفیکیشن سسٹم (شنگھائی، چین) نے تیار کیا تھا۔ ریڈیو امیونوپریسیپیٹیشن پرکھ (RIPA) lysis بفر اور سوڈیم فلورائڈ (NaF) سگما-الڈرچ (شنگھائی، چین) کے ذریعہ فراہم کیے گئے تھے۔ 10 فیصد فارملین، گلائسین، سوڈیم ڈوڈیسائل سلفیٹ (SDS)، TRIS، Phenylmethylsulfonyl fluoride (PMSF)، CaCO3، نائٹروسیلوز (NC) جھلی، Bicinchoninic Acid (BCA) Kit اور hematoxylin-eosin (H&E) سے حاصل کردہ ٹیکنالوجی .، لمیٹڈ (بیجنگ، چین)۔ ٹرائزول ریجنٹ تکارا بائیولوجیکل انجینئرنگ کمپنی (ڈیلین، چین) سے حاصل کیا گیا تھا۔ CRE، UA، بلڈ یوریا نائٹروجن (BUN)، میگنیشیم (Mg) P، اور پوٹاشیم (K) کٹس نانجنگ جیانچینگ بائیو انجینئرنگ انسٹی ٹیوٹ (نانجنگ، چین) سے خریدی گئیں۔ سوستانی میںapoptosisپتہ لگانے والی کٹ، FAS Rabbit Polyclonal antibody (BA0484)، اور FAS-L Rabbit Polyclonal antibody (PB0042) Boster Biotechnology (Wuhan, China) سے خریدی گئی تھیں۔ -ایکٹین ریبٹ پولی کلونل اینٹی باڈی (20536-1-AP)، FADD Rabbit Polyclonal antibody (14906-1-AP)، Caspase 8 Rabbit Polyclonal antibody (13423-1-AP)، Caspase 3 Rabbit Polyclonal antibody ({{9) }}AP)، اور HRPconjugated Affinipure Goat Anti-Rabbit IgG(H plus L) (SA00001–2) پروٹینٹیک گروپ (ووہان، چین) سے حاصل کیے گئے تھے۔ TRAL Rabbit Polyclonal Antibody (bs-1214R)، TNF الفا ریبٹ پولی کلونل اینٹی باڈی (bs2081R)، PARP Rabbit Polyclonal Antibody (bs-55164R) Bioss (بیجنگ، چین) سے خریدے گئے تھے۔ الیکٹرو کیمیکل لیومینیسینس (ECL) اور 3,3′-diaminobenzidine (DAB) KeyGen Biotech (Jiangsu, China) سے خریدے گئے تھے۔ PrimeScript® RT ماسٹر مکس اور SYBR® Premix Ex Taq™ II کٹ پرومیگا بائیوٹیکنالوجی (بیجنگ، چین) کے ذریعے فراہم کی گئی تھی۔

جانور اور علاج

چالیس صحت مند {{0}}ہفتہ پرانے نر Sprague-Dawley (SD) چوہے (120 ± 20 g) شانسی میڈیکل یونیورسٹی (شانسی، چین) کے تجرباتی جانوروں کے مرکز سے حاصل کیے گئے۔ چوہوں کو ایک ہفتے کے لیے ہم آہنگ کیا گیا، تصادفی طور پر چار گروپوں میں تقسیم کیا گیا (10 چوہے فی گروپ): کنٹرول گروپ (C)، NaF گروپ (F)، NaF پلس 0.5 فیصد CaCO3 گروپ (F پلس 0.5 فیصد Ca)، NaF پلس 1 فیصد CaCO3 گروپ (F جمع 1 فیصدکیلشیم) اور ٹیبل 1 کے طور پر علاج کیا گیا۔ تمام چوہوں کو پلاسٹک کے پنجروں میں 22–25 ◦C (55 ± 5 فیصد نمی، 12 گھنٹے روشنی/تاریک چکر) پر رکھا گیا تھا، خوراک اور پینے کا پانی آزادانہ طور پر قابل رسائی ہے۔

17 ہفتوں کی پرورش کے بعد، چوہوں نے 24 گھنٹے تک روزہ رکھا، اور پانی پینے کے لیے مفت تھا۔ اس کے بعد چوہوں کو سوڈیم پینٹو باربیٹل سے بے ہوشی کی گئی اور آنکھوں کی بالوں سے خون جمع کرنے کے بعد سروائیکل ڈس لوکیشن کے ذریعے قربانی دی گئی۔ BUN ٹیسٹ کے لیے اینٹی کوگولنٹ ہیپرین سوڈیم والی ٹیوبوں کے ذریعے کچھ خون جمع کیا گیا تھا۔ خون کے کچھ حصے کو عام ٹیسٹ ٹیوبوں میں ڈالا گیا، کمرے کے درجہ حرارت پر 2 گھنٹے کے لیے رکھا گیا، اور پھر الگ سیرم کے لیے 10 منٹ کے لیے 3000 rpm/منٹ پر سینٹرفیوج کیا گیا۔ سیرم کو CRE، UA، Mg، P، K، اور F ٹیسٹوں کے لیے الگ کیا گیا تھا۔ کے آٹھ نمونے۔گردےہر گروپ میں سے تصادفی طور پر منتخب کیا گیا اور مائع نائٹروجن میں جلدی سے منجمد کیا گیا، اور پھر qRT-PCR اور ویسٹرن بلوٹنگ تجربات کے لیے −80 ◦C پر ذخیرہ کیا گیا۔ کے دوسرے نمونےگردےہسٹوپیتھولوجیکل امتحان اور ٹرمینل ڈیوکسینیوکلیوٹائیڈل ٹرانسفراز میڈیٹڈ ڈی یو ٹی پی نک اینڈ لیبلنگ (TUNEL) تجربات کے لیے 10 فیصد فارملین میں طے کیے گئے تھے۔ جانوروں سے متعلق تمام تجرباتی آپریشنز کو اینیمل کیئر انسٹی ٹیوشن اور شانسی زرعی یونیورسٹی، شانسی، چین کی یوز کمیٹی کے ضوابط کے تحت سختی سے لاگو کیا گیا تھا۔

گردہعددی سر

پہلے چوہوں کا وزن کیا گیا۔ پھرگردہٹشو کو ہٹا دیا گیا اور وزن کیا گیا. دیگردہگتانک درج ذیل فارمولے سے حاصل کیا گیا تھا۔

گردہگتانک=[گردہگیلا وزن (g) / جسمانی وزن (g)] × 100 فیصد۔

ہسٹوپیتھولوجیکل معائنہ

گردہنمونے پیرافین میں شامل تھے۔ کا سیکشن (5 μm موٹائی)گردہH&E کے ذریعہ داغدار تھا۔ پھر، سلائیڈوں کو ہلکے خوردبین (اولمپس، ٹوکیو، جاپان) کا استعمال کرتے ہوئے دیکھا گیا۔ کی شدتگردہچوٹ کا اندازہ ہسٹوپیتھولوجیکل اسکور سے کیا گیا۔گردہنلی نما چوٹ کے طور پر بیان کیا جاتا ہےگردہcorpuscles atrophied اور بگڑے ہوئے، theگردہکیپسول گہا چوڑا،گردہایک کاسٹ بنانے والی نلیاں، اور اپکلا خلیات گرتے ہیں۔ 200 گنا اضافہ پر، جگر کی چوٹ کی ڈگری کا اندازہ کرنے کے لیے درج ذیل معیارات استعمال کیے گئے۔ 1: 0-25 فیصد نقصان؛ 2: 25-50 فیصد نقصان؛ 3: 50-75 فیصد نقصان؛ 4: 75–100 فیصد نقصان (بارانووا ایٹ ال۔، 2016)۔

کا تعینگردہ- متعلقہ اشارے

ایف کی سطح کو ایف آئن مخصوص الیکٹروڈ (Quadri et al.، 2018) کے ذریعے ماپا گیا تھا۔ تجارتی طور پر دستیاب کٹس کا استعمال کرکے CRE، UA، BUN، Mg، P، اور K کی سطحوں کی پیمائش کی گئی۔ تمام متعلقہ طریقہ کار کارخانہ دار کی ہدایات کے مطابق انجام دیا گیا تھا۔

کا پتہ لگاناapoptosisTUNEL کی طرف سے سطح

مقدار درست کرنے کے لیےapoptosisمیںگردہخلیات، تجرباتی تجزیہ سیٹو کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا تھا۔apoptosisپتہ لگانے کی کٹ. دیگردہحصوں کو ختم کیا گیا اور پھر Proteinase K کا استعمال کرتے ہوئے عمل انہضام کا نشانہ بنایا گیا۔ ٹرمینل Deoxynucleotidyl Transferase digoxin کے لیبل والے dUTP (DIG-dUTP) کو 3′-OH سرے پر نشان زد کر سکتا ہے، اور DIG-dUTP بائیو مارکر کے ساتھ رد عمل ظاہر کرنے کے بعد DNA بریک پوائنٹ سے منسلک ہوتا ہے۔ ڈی آئی جی بائیوٹن۔ ڈی اے بی کے ساتھ مل کر ڈسپلے میں شامل کیا گیا۔ تصور کے لیے

تمام نیوکللی، حصوں کو ہیماتوکسیلین کے ساتھ مقابلہ کیا گیا تھا۔ گہرے بھورے رنگ کے سگنل مثبت خلیات کی نشاندہی کرتے ہیں اور نیلے رنگ غیر ذمہ دار خلیوں کی نشاندہی کرتے ہیں۔ دیapoptosisانڈیکس کا حساب درج ذیل فارمولے کے مطابق کیا گیا تھا۔

اپوپٹوٹک سیلز کا تناسب=(فی نوڈ اپوپٹوٹک سیلز کی تعداد / فی نوڈ سیلز کی کل تعداد) ×100 فیصد۔

مقداری ریئل ٹائم PCR (qRT-PCR)

سے کل آر این اےگردہTrizol ری ایجنٹ کا استعمال کرتے ہوئے نکالا گیا تھا۔ RNA کے معیار اور مقدار کو جانچنے کے لیے ہم نے ND{{0}} سپیکٹرو فوٹومیٹر (نینو ڈراپ، USA) اور ایگرز جیل الیکٹروفورسس کا استعمال کیا۔ ریورس ٹرانسکرپشن (RT) کو PrimeScript® RT ماسٹر مکس کا استعمال کرتے ہوئے 500 ng کل RNA پر انجام دیا گیا۔ ایکٹین اور FAS، TRAIL، TNF، اور دیگر جینز کے لیے مخصوص پرائمر پرائمر پریمیئر 7.0 سافٹ ویئر (ٹیبل 2) کے ذریعے ڈیزائن کیے گئے تھے اور سنگون بائیوٹیک (شنگھائی، چین) کے ذریعے ترکیب کیے گئے تھے۔ Quantstudio 7 فلیکس ریئل ٹائم PCR سسٹم (تھرمو فشر، USA) اور SYBR® Premix Ex Taq™ II Kit RT-PCR کے لیے استعمال کیے گئے۔ پی سی آر کے رد عمل کا حجم 20 μL تھا، اور RT-PCR حالات یہ تھے: 95 ◦C 10

منٹ، 95 ◦C 15 s کے 40 چکر، 55 ◦C 30 s، 72 ◦C 30 s، اور آخر میں 95 ◦C 15 s، 60 ◦C 15 s، 95 ◦C 15 s، 95 ◦C 15 s۔ تمام رد عمل تین بار دہرائے گئے۔ متعلقہ 2-ΔΔCt طریقہ رشتہ دار mRNA اظہار کی سطحوں کا حساب لگانے کے لیے استعمال کیا گیا تھا، اور ایکٹین کو کیلیبریٹر کے طور پر استعمال کیا گیا تھا۔ اس عمل میں، کارکردگی کا فرق 5 فیصد سے کم ہے۔

کل پروٹین نکالنا اور مغربی بلوٹنگ تجزیہ

دیگردہٹشو کو PBS سے دھویا گیا، فلٹر پیپر سے خشک کیا گیا، اور RIPA lysis (PMSF پر مشتمل) میں، 12،000 rpm/min، 4 پر گل گیا^◦C 10 منٹ کے لیے۔ پروٹین کی ارتکاز کا تعین Bicinchonic Acid (BCA) Kit (Solarbio Science & Technology, Beijing, China) کے ذریعے کیا گیا۔ 35 این جی پروٹین کا نمونہ کامیابی سے نکالا گیا اور الیکٹروفورسس کے ذریعہ 8 فیصد SDS-polyacrylamide جیل پر الگ کیا گیا۔ ہدف پروٹین کو NC جھلی میں منتقل کیا گیا تھا، اور NC جھلی کو 5 فیصد غیر چکنائی والے دودھ کے ساتھ کمرے کے درجہ حرارت پر 2 گھنٹے کے لیے بلاک کر دیا گیا تھا۔ اس کے بعد، NC جھلی کو -ایکٹین (1:1000)، ٹریل (1:500)، FAS (1:500)، FAS-L (1:100)، TNF (1:500) کی بنیادی اینٹی باڈیز کے ساتھ انکیوبیٹ کیا گیا۔ FADD (1:500)، Caspase 8 (1:500)، Caspase 3 (1:500) اور PARP (1:1000) راتوں رات 4 ڈگری پر۔ PBST کے ساتھ 3 بار دھونے کے بعد، NC جھلی کو HRP-conjugated سیکنڈری گوٹ اینٹی خرگوش IgG اینٹی باڈیز (1:2000) کے ساتھ کمرے کے درجہ حرارت پر 2 گھنٹے تک سینک دیا گیا۔ ای سی ایل کا استعمال ہدف پروٹین بینڈ کو دیکھنے کے لیے کیا گیا تھا۔ آپٹیکل کثافت کا حساب الفا ویو سافٹ ویئر (ورژن: 3.2.2.0) کے ذریعے FluorChem Q سسٹم (Alpha Innotech, CA, USA) پر لگایا گیا۔

شماریاتی تجزیہ

GraphPadPrism{{0}} سافٹ ویئر تجرباتی ڈیٹا کو منظم اور تجزیہ کرنے کے لیے استعمال کیا گیا تھا، اور ہر ڈیٹا کو اوسط ± SEM سے ظاہر کیا گیا تھا۔ ذرائع کے درمیان فرق کی اہمیت کا تعین تغیر (ANOVA) کے تجزیے سے کیا گیا جس کے بعد Tukey کے ٹیسٹ کے ساتھ P <0.05 کو="" اہم="" سمجھا="">

نتائج

میں تبدیلیاںگردہگتانک اور بائیو کیمیکل فنکشن اشارے

دیگردہگتانک اور F, CRE, BUN, UA, Mg, P, K کی سطحیں تصویر 1 میں دکھائی گئیں۔ C گروپ کے مقابلے میں،گردہF گروپ (p < 0.05)="" میں="" گتانک="" میں="" نمایاں="" کمی="" واقع="" ہوئی="" تھی۔="" تاہم،="" f="" پلس="" 1="" فیصد="" میں="" گردے="" کا="">کیلشیمگروپ نے F گروپ (p < {{0}}="" کے="" مقابلے="" میں="" نمایاں="" اضافہ="" دکھایا۔{5}}5)۔="" f="" گروپ="" میں="" f="" کی="" سطح="" c="" گروپ="" (p=""><0.001) کے="" مقابلے="" میں="" نمایاں="" طور="" پر="" زیادہ="" تھی۔="" دلچسپ="" بات="" یہ="" ہے="" کہ="" ایف="" گروپ="" کے="" مقابلے="" میں،="" ایف="" پلس="" 1="" فیصد="" ca="" گروپ="" میں="" ایف="" کی="" سطح="" میں="" نمایاں="" کمی="" واقع="" ہوئی="" تھی="" (p=""><>

کی ڈگری کو ظاہر کرنے کے لیے CRE، BUN، اور UA کا جائزہ لیا گیا۔گردہنقصان اور فعال تبدیلی. C گروپ (p < 0.05)="" کے="" مقابلے="" f="" گروپ="" میں="" cre،="" bun،="" اور="" ua="" کی="" سطحوں="" میں="" واضح="" اضافہ="" کیا="" گیا="" تھا،="" تاہم،="" f="" گروپ="" کی="" نسبت،="" مندرجہ="" بالا="" تین="" اشارے="" نمایاں="" طور="" پر="" تھے۔="" ایف="" پلس="" 1="" فیصد="" میں="" کمی="">کیلشیمگروپ (p < 0.05)۔="" ایم="" جی،="" پی="" اور="" کے="" الیکٹرولائٹ="" اشارے="" تھے="" جن="" سے="" گہرا="" تعلق="">گردہفنکشن سی گروپ کے مقابلے میں، سیرم ایم جی کی سطح میں نمایاں کمی واقع ہوئی، ایف گروپ میں پی اور کے کی سطح ڈرامائی طور پر بڑھ گئی (p < 0.05)۔="" بہر="" حال،="" 1="" فیصد="" کا="">کیلشیمخوراک میں خاص طور پر سیرم ایم جی کی سطح میں 15.3 فیصد اضافہ ہوا (p < 0۔{6}}5)="" اور="" نمایاں="" طور="" پر="" سیرم="" p="" کی="" سطح="" کو="" 16.9="" فیصد="" (p=""><0.05) تک="" کم="" کیا۔="" سیرم="" k="" کے="" مواد="" نے="" 1="" فیصد="" ca="" علاج="" کے="" بعد="" کوئی="" اہمیت="" کے="" بغیر="" نیچے="" کی="" طرف="" رجحان="" دکھایا="">

میں تبدیلیوںگردہمورفولوجی

کی مورفولوجیکل تبدیلیاںگردہH&E (تصویر 2I-Ⅳ، ⅰ-ⅳ) کے ذریعے ٹشو کی جانچ کی گئی۔ سی گروپ میں،گردہنلی نما خلیات کو مضبوطی سے ترتیب دیا گیا تھا، مورفولوجی باقاعدہ تھی، اور گلوومیرولی کی مورفولوجی برقرار تھی۔ تاہم، خلیات کے درمیان حدود واضح نہیں تھے،گردہcorpuscles atrophied اور درست شکل میں تھےگردہکیپسول گہا چوڑا،گردہنلیوں نے ایک کاسٹ بنایا، اور اپکلا خلیات F گروپ میں الگ ہو گئے۔ F گروپ کے مقابلے میں، کے اضافے کے ساتھکیلشیمحراستی، ترتیبگردہخلیات آہستہ آہستہ زیادہ منظم ہو گئے، کی مورفولوجیگردہcorpuscles آہستہ آہستہ ٹھیک ہو گئے، اور چوٹ کی ڈگری آہستہ آہستہ کم ہو گئی. اس کے علاوہ، ہم نے استعمال کرکے نقصان کا اندازہ کیا۔گردہسکور (تصویر 2Ⅴ)۔ F گروپ کا سکور C گروپ کے مقابلے میں نمایاں طور پر زیادہ تھا (p < 0.01);="" اس="" کے="" باوجود،="" ایف="" پلس="" 1="" فیصد="" میں="">کیلشیمF گروپ (p < 0.05) کے مقابلے میں گروپ میں نمایاں کمی واقع ہوئی۔

TUNEL پتہ لگاتا ہے۔گردہسیلapoptosis

ہم نے TUNEL پرکھ کا پتہ لگانے اور تجزیہ کرنے کے لیے کیا کہ آیاگردہخلیات گزر چکے ہیںapoptosisاس مطالعہ میں (تصویر 3I-Ⅳ، ⅰ-ⅳ)۔گردہسی گروپ میں ٹشوز کو صاف ستھرا ترتیب دیا گیا تھا، کم اپوپٹوٹک خلیات (4.67 ± 1.15 فیصد)۔ F گروپ نے بڑی تعداد میں TUNEL- مثبت دکھایاگردہنلی نما اپکلا خلیات (48.17 ± 3.94 فیصد)۔ اس کے برعکس، ایف پلس 1 فیصدکیلشیمگروپ نے TUNEL-مثبت خلیوں کی تعداد میں ڈرامائی کمی ظاہر کی (28.83 ± 4.81 فیصد) (تصویر 3Ⅴ)۔

کے اثراتکیلشیمڈیتھ ریسیپٹر پاتھ وے سے متعلق جینز میں ایف-حوصلہ افزائی تبدیلیوں پر

ڈیتھ ریسیپٹر ثالثی سے متعلق اپ اسٹریم عوامل کی متعلقہ mRNA اظہار کی سطحapoptosisپاتھ وے (TRAIL, DR5, TNF, TNFR1, TNF-R2, FAS, FAS-L, OPG) تصویر 4a میں سامنے آئے تھے۔ C گروپ سے متعلق، TRAIL، DR5، TNF، TNF-R1، TNFR2، FAS، اور FAS-L کے mRNA اظہار کی سطح کو F- علاج شدہ چوہوں میں خاص طور پر بڑھایا گیا تھا (p < 0.01)۔="" اس="" کے="" برعکس،="" trail،="" tnf،="" tnf-r2،="" fas،="" اور="" fas-l="" کے="" متعلقہ="" mrna="" اظہار="" کو="" f="" پلس="" 1="" فیصد="" میں="" نمایاں="" طور="" پر="" کم="" کیا="" گیا="">کیلشیمگروپ F گروپ کے مقابلے میں (p < {{0}.05)۔="" سی="" گروپ="" کے="" مقابلے="" میں،="" ایف="" گروپ="" میں="" او="" پی="" جی="" کے="" ایم="" آر="" این="" اے="" اظہار="" کی="" سطح="" میں="" واضح="" کمی="" دیکھی="" گئی="" (پی=""><0.01)۔ تاہم،="" ایف="" گروپ="" کے="" نسبت،="" ایف="" پلس="" میں="" او="" پی="">کیلشیمگروپوں میں اضافہ ہوا. ڈاؤن اسٹریم عوامل FADD، TRADD، Caspase 8، Caspase 3، اور PARP رشتہ دار mRNA اظہار کی سطح کو تصویر 4b میں دکھایا گیا ہے۔ FADD، TRADD، Caspase 8، Caspase 3، اور PARP کے پروٹین ایکسپریشنز کو واضح طور پر F گروپ میں C گروپ (p < 0.01)="" کے="" مقابلے="" میں="" بڑھایا="" گیا="" تھا،="" لیکن="" واضح="" طور="" پر="" f="" پلس="" میں="" کم="" کیا="" گیا="">کیلشیمگروپس، جیسا کہ F گروپ کے مقابلے میں (p < 0.05)۔

کے اثراتکیلشیممیں F-حوصلہ افزائی تبدیلیوں پرapoptosis- متعلقہ پروٹین

TRAIL، FAS، FAS-L، TNF، FADD، Caspase 8، Caspase 3، اور PARP کے پروٹین ایکسپریشن کو ویسٹرن بلوٹنگ (تصویر 5a، b) سے پتہ چلا۔ C گروپ کے مقابلے میں، F گروپ میں TRAIL، FAS، FAS-L، TNF، FADD، Caspase 8، Caspase 3، اور PARP کے پروٹین ایکسپریشنز نمایاں طور پر بلند ہوئے (p < 0.01)۔="" مندرجہ="" بالا="" تمام="" عوامل="" کے="" پروٹین="" ایکسپریشنز="" f="" پلس="" 1="" فیصد="" میں="" نمایاں="" طور="" پر="" کم="">کیلشیمگروپ جب F گروپ (p < 0.05) سے موازنہ کریں۔

بحث

تازہ ترین شواہد نے ثابت کیا کہ F نرم بافتوں کو گھاووں کا سبب بن سکتا ہے، اور F کے نقصان کی ڈگری F کے ارتکاز، نمائش کے وقت، اور اعضاء کی قسم (Wei et al.، 2019) پر منحصر ہے۔ اس مطالعے میں، 100 ملی گرام/L NaF کو 17 ہفتوں تک پینے کے پانی کے ذیلی NaF نمائش والے جانوروں کا ماڈل قائم کرنے کے لیے استعمال کیا گیا۔ NaF کی خوراک کا انتخاب ماحول میں F کی آلودگی کی ڈگری اور مختلف انواع کے غیر یقینی عوامل کے مطابق کیا جاتا ہے۔ یہ دیکھتے ہوئے کہ مقامی زمینی پانی میں قدرتی F- ارتکاز کی پیمائش تقریباً 4.5 mg/L ہے، اس تحقیق میں استعمال ہونے والے 100 mg/L NaF کے ساتھ آست پانی (F- ارتکاز تقریباً 45 mg/L ہے) کا حساب غیر یقینی عنصر کے مطابق کیا گیا تھا۔ 10 پر جانوروں سے انسانوں کا اخراج (پینے کے پانی کے معیار کے لیے رہنما خطوط، 2017؛ مکھرجی اور سنگھ، 2021؛ وین وغیرہ، 2013؛ Zhang et al.، 2020)۔ ابتدائی مطالعات سے پتہ چلا ہے کہ غذائیتکیلشیمفلورین کے جذب کو متاثر کر سکتا ہے، جسم میں فلورین کے اخراج کو فروغ دے سکتا ہے، فلورین کے جذب کی شرح کو کم کر سکتا ہے، اور اس طرح F کی زہریلا کو کم کر سکتا ہے (Harrison et al., 1984; Larsen et al., 1981)۔ ہمارے حالیہ تجرباتی مطالعے سے پتہ چلتا ہے کہ Ca اندرونی راستے کو روک کر F سے متاثرہ ہڈی اور جگر کی چوٹ کو کم کرتا ہے۔apoptosis(Li et al., 2021; J. Wang et al., 2020; Wang et al., 2019)۔ تاہم، اب تک، ایف-حوصلہ افزائی نیفروٹوکسٹیٹی اور اس سے متعلقہ میکانزم پر Ca کے حفاظتی اثر پر تحقیق بے مثال ہے۔ یہاں، ہم رپورٹ کرتے ہیں کہ Ca F-حوصلہ افزائی کو کم کرتا ہے۔گردہنقصان اس کے علاوہ، ہم نے یہ بھی پایا کہ Ca ریورس F- حوصلہ افزائی کرتا ہے۔گردہسیلapoptosisموت کے رسیپٹر کی ثالثی کے ذریعےapoptosisپاتھ وے (FAS/FASL، TNFR/TNF، DR5/TRAIL کے راستے)۔ میں F کی طویل مدتی جمعگردہٹشو کی ساخت اور فعال نقصان کی قیادت کر سکتے ہیں. اس مطالعہ میں، ہم نے پایا کہ NaF کی نمائش کی وجہ سےگردہسیلapoptosisچوہوں میں، گلوومرولر ایٹروفی اور اخترتی کے ساتھ،گردہکیپسول گہا کو چوڑا کرنا،گردہنلیاں بنتی ہیں، اور اپکلا خلیات گرتے ہیں۔ البتہ،گردہ1 فیصد Ca کی تکمیل کے بعد نقصان کو نمایاں طور پر کم کیا گیا۔ یہ نتائج پچھلی رپورٹس میں حاصل کردہ نتائج سے ملتے جلتے تھے (Cao et al., 2015; HW Wang et al., 2020)۔

CRE پٹھوں کا میٹابولائٹ ہے، UA پیورین میٹابولزم کی حتمی پیداوار ہے، اور BUN جسم کے پروٹین میٹابولزم کی بنیادی پیداوار ہے، جو گلوومیرولر فلٹریشن کے ذریعے خارج ہوتی ہے اور اسے عام طور پر پتہ لگانے کے لیے استعمال کیا جاتا ہے۔گردہفنکشن (Myers et al.، 2006؛ HW Wang et al.، 2020)۔ ہائی ایف ریجن کے بائیو کیمیکل سروے سے پتہ چلتا ہے کہ گلومیرولر فلٹریشن کی شرحیں نمایاں طور پر کم ہو گئی ہیں، اور F، UA، اور BUN نمایاں طور پر تبدیل ہو گئے ہیں (Malin et al.، 2019)۔ جانوروں کے ٹیسٹ سے معلوم ہوا کہ سیرم CRE،کیلشیم، اور 100 mg/L NaF کے سامنے آنے والے چوہوں میں P کی تعداد میں نمایاں طور پر کمی واقع ہوئی ہے، یہ تجویز کرتا ہے کہ F پریشان ہواگردہفنکشن کے ساتھ ساتھ Ca اور P میٹابولزم (HW Wang et al.، 2020)۔ F-حوصلہ افزائی nephrotoxicity سے متعلق ہےگردہخرابی کبگردہفنکشن خراب ہو جاتا ہے، جسم میں F کا اخراج کم ہو جاتا ہے، جس کی وجہ سے جسم میں فلورین بہت زیادہ جمع ہو جاتی ہے۔گردہاور بڑھتی ہوئی F زہریلا (Kido et al.، 2017)۔ جبگردےشدید طور پر معذور ہیں

پیشاب میں F کا اخراج کم ہو جاتا ہے، اور سیرم F کا ارتکاز مزید بڑھ جاتا ہے (دھرمارتنے، 2019)۔ اس تحقیق میں، ہم نے مشاہدہ کیا کہ 100 mg/L NaF کے ساتھ علاج کیے جانے والے چوہوں میں BUN اور سیرم CRE, UA, P, K کی سطح میں نمایاں اضافہ ہوا، جس سے یہ تجویز کیا گیا کہ اعلی F کی نمائش میں تبدیلیوں کا سبب بنتا ہے۔گردہچوہوں میں بائیو کیمیکل اشارے اور اس کی وجہگردہکمی مزید برآں، ہم نے یہ بھی بتایا کہ مختلف اشارےگردہکے بعد عام ہو جاتے ہیںکیلشیمضمیمہ یہ ظاہر کرتا ہے کہ Ca (خاص طور پر 1 فیصدکیلشیم) کا ایف-حوصلہ افزائی پر ایک اہم تخفیف اثر ہے۔گردہچوہوں میں نقصان

Cistancheکے ساتھ مدد کر سکتے ہیںگردہنقصان

اپوپٹوسسایک خودمختار اور منظم سیل کی موت ہے جس کو جینز کے ذریعے کنٹرول کیا جاتا ہے، جس کی خصوصیت ڈی این اے کے انحطاط سے ہوتی ہے بغیر کسی واضح سیل لیسز کے۔ اس مطالعہ نے مشاہدہ کیا کہ فلوروسس کی وجہ سےگردہسیلapoptosisچوہوں میں FAS کی موجودگی میں ایک اہم کردار ادا کرتا ہےapoptosisاور مختلف امراض۔ حالیہ لٹریچر نے انکشاف کیا کہ FAS ثالثی کرتا ہے۔apoptosisمیںگردہاسکیمیا ریپرفیوژن اور انسانی لیوکوائٹس کی طرف سے حوصلہ افزائیapoptosisN-nitrosodimethylamine (Iwaniuk et al.، 2019؛ Xu) کے ذریعے حوصلہ افزائی

وغیرہ، 2019)۔ جب FAS اور FAS-L مل کر ایک ٹرمر بناتے ہیں، پرو اپوپٹوٹک سگنل کو متحرک کیا جاتا ہے۔ ایک حالیہ مطالعہ سے پتہ چلتا ہے کہ F سیل کو آمادہ کرتا ہے۔apoptosisFAS/FAS-L راستے کے ذریعے (Xu et al.، 2011)۔ اس مطالعے میں، F نے FAS اور FAS-L کے mRNA اور پروٹین کے اظہار میں نمایاں اضافہ کیا۔گردہ. FAS اور FAS-L کی سطحوں کے اپ ریگولیشن سے پتہ چلتا ہے کہ FAS/FAS-L سے متعلقہ اپوپٹوٹک راستے F-حوصلہ افزائی میں شامل ہو سکتے ہیں۔apoptosis. FADD کی FAS/FAS-L ٹرائیمر بھرتی پرو-کیسپیس 8 کی کلیویج کا باعث بنتی ہے تاکہ فعال کیسپیس 8 پیدا ہو، جو بدلے میں Caspase 3 کو چالو کرتی ہے اور پھرapoptosis(Li et al.، 2011؛ ​​Xu et al.، 2011)۔ اس مطالعہ نے تصدیق کی کہ 100 ملی گرام/L NaF کی حوصلہ افزائی ہوئی۔apoptosisچوہے میںگردےFAS/FAS-L راستے کے ذریعے۔ سب سے اہم نتیجہ یہ ہے کہ غذائی Ca ضمیمہ اس کو کم کرتا ہے۔apoptosis-ایف کا دلانے والا اثر، جس کی وجہ FAS/FAS-L ایکٹیویشن کے ڈاون ریگولیشن اور کیسپیسز کی سیکنڈری ایکٹیویشن ہے۔

TNF ایک pleiotropic cytokine ہے جو سیلولر ردعمل کی ایک وسیع رینج میں حصہ لیتا ہے، بشمول تفریق، پھیلاؤ، سوزش، اور سیل کی موت۔ TNF سگنل دونوں کو متحرک کرتا ہے۔apoptosisاور اینٹی اپوپٹوٹک راستے۔ بہت سے قسم کے لٹریچر نے اطلاع دی ہے کہ TNF لیپوپولیساکرائڈ سے متاثر ہے۔گردہنقصان اور cisplatin حوصلہ افزائی شدیدگردہچوٹ (لی ایٹ ال۔، 2016؛ لی ایٹ ال۔، 2018)۔ TNF TNF-R1 سے منسلک ہوتا ہے، اس کا DD TRADD کو بھرتی کرتا ہے، اور پھر TRADD FADD کے ساتھ تعامل کرتا ہے، جس سے DISC کی تشکیل ہوتی ہے (Kiraz et al., 2016; Sun et al., 2003)۔ مطالعے سے پتہ چلتا ہے کہ F جگر، نیوران، اورگردہleukocyteapoptosisTNF سگنلنگ پاتھ وے کے ذریعے (Lu et al., 2017; Singh et al., 2017; Yan et al., 2016)۔ ان رپورٹس کے نتائج کی طرح، اس تجربے میں F گروپ میں TNF، TNF-R1، TNF-R2، اور TRADD کے رشتہ دار تاثرات میں نمایاں اضافہ ہوا ہے۔ اس کے برعکس، ان جینوں کے اظہار میں 1 فیصد کے بعد نمایاں کمی واقع ہوئی۔کیلشیمکی مداخلت کی تجویز کرتے ہوئے، ضمیمہکیلشیمTNF راستے میں.

TRAIL کے ریگولیشن میں شامل ہے۔apoptosis، پھیلاؤ، مدافعتی اشتعال انگیز ردعمل، وغیرہ۔ فی الحال، یہ خیال کیا جاتا ہے کہ TRAIL کا اس کی موجودگی اور تشخیص سے گہرا تعلق ہے۔گردہبیماری (کینڈیڈو، 2014)۔ زیادہ سے زیادہ ادب نے اس بات کی تصدیق کی ہے کہ TRAIL کو ریگولیٹ کرتا ہے۔apoptosisکیگردہHBV سے وابستہ glomerulonephritis میں نلی نما اپکلا خلیات اورگردہapoptosisUromodulin سے وابستہ میںگردہبیماری (Johnson et al.، 2017؛ Yang et al.، 2018)۔ مزید، ایک تحقیق میں بتایا گیا ہے کہ TRAIL کے اظہار کو عام طور پر ہومیوسٹاسس کے دوران تبدیل کر دیا گیا تھا۔گردہچوٹیں (Devarapu et al.، 2017)۔ TRAIL ڈیتھ ریسیپٹر DR5 سے منسلک ہوتا ہے اور DD کے تعامل کے ذریعے FADD کو بھرتی کرتا ہے، اور پھر DISC بنانے کے لیے FADD میں موجود ڈیتھ ایفیکٹ ڈومین کے ذریعے Pro-Caspase 8 سے منسلک ہوتا ہے (Yuan et al., 2018)۔ اس مطالعے سے پتہ چلتا ہے کہ F گروپ میں TRAIL اور DR5 کے اظہار میں نمایاں اضافہ ہوا ہے۔ کے ساتھ ضمیمہ کرنے کے بعدکیلشیم، TRAIL اور DR5 کے اظہار کو روک دیا گیا تھا۔ تجویز ہے کہکیلشیمF-حوصلہ افزائی کو کم کرنے کے لیے TRAIL کے راستے کو روکتا ہے۔apoptosis.

نتیجہ

100 mg/L NaF کی نمائش نے موت کے رسیپٹر کی ثالثی کو چالو کیا۔apoptosisراستہ (FAS/FASL، TNFR/TNF، DR5/TRAIL راستے) اور پھر حوصلہ افزائیگردہسیلapoptosisچوہوں میں، جس کی وجہ سےگردہمیٹابولک عوارض اورگردہناکافی، جس کے نتیجے میںگردہcorpuscles atrophied اور درست شکل میں تھےگردہکیپسول گہا چوڑا،گردہtubules ایک کاسٹ تشکیل دیا. تاہم، 1 فیصد کا اضافہکیلشیمخوراک میں خون میں فلورائیڈ کی مقدار میں کمی آئی،گردہمیٹابولک خرابی اورگردہموت رسیپٹر ثالثی راستے کے ذریعے ناکافی، اور نمایاں طور پر کم کر دیاگردہچوٹ (جزو انجیر 6)۔

حوالہ جات

ذریعہ Haojie لی، کالج آف ویٹرنری میڈیسن، Shanxi زرعی یونیورسٹی، Taigu 030801، Shanxi، PR چائنا وغیرہ کا ہے۔