Cistanche: Echinacoside Mitogen-activated Protein Kinase پاتھ وے کے ذریعے اپوپٹوسس کو دلانے کے ذریعے لبلبے کے اڈینو کارسینوما سیل کی نشوونما کو روکتا ہے۔

رابطہ: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 ای میل:audrey.hu@wecistanche.com

وی وانگ، جنبن لو، ینگھوئی لیانگ اور زینفینگ لی

خلاصہ

روایتی چینی ادویات سے ماخوذ قدرتی مصنوعات کے طبی استعمال نے کینسر کیموتھراپیٹک میں توجہ حاصل کی ہے۔Echinacoside(ECH)، phenylethanoids میں سے ایک، کے تنوں سے الگ تھلگCistanche(ایک چینی جڑی بوٹیوں کی دوا) مرکزی اعصابی نظام پر ٹشو سے حفاظتی اور اینٹی اپوپٹوٹک اثرات رکھتی ہے۔ تاہم، یہ بڑی حد تک مضحکہ خیز ہے کہ آیا ECH میں ٹیومر کو دبانے والی سرگرمی ہے۔ موجودہ مطالعہ میں، یہ ظاہر کیا گیا تھا کہ ECH رد عمل آکسیجن پرجاتیوں کی پیداوار اور مائٹوکونڈریل جھلی کی صلاحیت کی خرابی اور اس طرح اپوپٹوس کو متحرک کرکے لبلبے کے اڈینو کارسینووما خلیوں کے پھیلاؤ کو نمایاں طور پر روک سکتا ہے۔ مزید برآں، یہ واضح کیا گیا کہ ECH(Echinacoside)MAPK کی سرگرمی کو ماڈیول کرنے کے ذریعے ٹیومر سیل کی نشوونما کو دباتا ہے۔ آخر میں، یہ مطالعہ ECH کے ایک نئے فنکشن کو ظاہر کرتا ہے۔Echinacoside) کینسر کی نشوونما کو روکنے میں، اور اس کا مطلب یہ ہے کہ ECH کا استعمال کینسر کے لیے ممکنہ کیموتھراپیٹک حکمت عملی ہو سکتا ہے۔

تعارف

ٹیومر دبانے والے کی شمولیت کے ذریعے p53 ٹیومر دبانے والا راستہ، ARF آنکوجینک E3-ligase ماؤس ڈبل منٹ (MDM)2-ثالثی p53 انحطاط (3) کو کم کرتا ہے۔ یہ ایک خود کار طریقے سے منظم، خود حفاظتی طریقہ کار ہے جو خلیات کو مہلک تبدیلی سے روکتا ہے۔ خاص طور پر، p53 نقلی طور پر ایکٹیویٹ کرکے Myc سرگرمی کو دبا سکتا ہے، مثال کے طور پر miR-145 جس کا ہدفمائکmRNA برائے ترجمہ خاموشی (4,5)، اس طرح ایک منفی آراء ریگولیٹری لوپ تشکیل دیتا ہے۔

کینسر کے علاج کی سب سے سیدھی اور موثر حکمت عملی کینسر کے خلیوں کو مارنا ہے۔ عام طور پر استعمال ہونے والی اینٹی کینسر ادویات، جیسے سسپلٹین (6)، ایکٹینومائسن ڈی (7)، اور ایڈریامائسن (8) کو apoptosis کو فروغ دے کر ٹیومر کی نشوونما کو روکتے ہوئے دکھایا گیا ہے۔ حال ہی میں، بڑھتے ہوئے شواہد نے یہ ثابت کیا ہے کہ پودوں سے حاصل ہونے والی متعدد قدرتی مصنوعات اور مشتقات، خاص طور پر روایتی چینی ادویات (TCM) میں استعمال ہونے والے دواؤں کے پودوں سے، کینسر کے خلیات کے اپوپٹوس کو آمادہ کر کے ٹیومر کو دبانے والے فعل کی نمائش کرتے ہیں اور ان میں طبی استعمال کی صلاحیت ہوتی ہے۔ کینسر کے علاج میں (9) مثال کے طور پر، قدرتی اینتھراکوئنون ایموڈن کینسر کے خلیات کی متعدد اقسام سے الگ تھلگ ہے (10,11)۔ کیمپٹوتھیسن، چینی 'ہیپی ٹری' سے ماخوذ،کیمپٹوتھیکا تیز ہونا، ایک قیمتی قدرتی مصنوعہ ہے جو ٹوپو I-ثالثی اسٹرینڈ بریک (12) کے بعد ڈی این اے کے بندھن کو روکتا ہے۔ چھاتی کے کینسر میں مبتلا کل 729 مریضوں کے ایک اور سابقہ ​​آبادی پر مبنی ہمہ گیر مطالعہ میں، یہ تجویز کیا گیا تھا کہ TCM تھراپی کینسر کے علاج میں حصہ ڈال سکتی ہے۔ اس گروہ میں سے 115 مریض TCM استعمال کرنے والے تھے جبکہ 614 مریضوں نے TCM استعمال نہیں کیا۔ ملٹی ویریٹیٹ تجزیہ نے یہ ظاہر کیا کہ، غیر استعمال کنندگان کے مقابلے میں، TCM کا استعمال ہر وجہ سے ہونے والی اموات (13) کے نمایاں طور پر کم ہونے والے خطرے سے وابستہ تھا۔ تمام متذکرہ بالا نتائج نے اشارہ کیا کہ TCM ایک اہم تکمیلی اور متبادل دوا ہے جسے کینسر کے علاج میں استعمال کیا جا سکتا ہے۔

پھیپھڑوں کی شدید چوٹ والے چوہے (16,17)۔ اس کے علاوہ، ECH(Echinacoside)عصبی بافتوں پر حفاظتی اثرات دکھائے گئے ہیں اور پارکنسنز کی بیماری (18) کے مورین ماڈلز میں طرز عمل کی خرابی کو بہتر بناتے ہیں۔ خاص طور پر، یہ پایا گیا ہے کہ ECH خلیوں کے پھیلاؤ کو فروغ دیتا ہے اور ماؤس آنتوں کے اپکلا MODE-K خلیوں میں اپوپٹوسس کو روکتا ہے (19)۔ تاہم، ابھی تک، کینسر کی روک تھام میں ECH کے ممکنہ کردار پر کم توجہ دی گئی ہے۔

اس تحقیق میں، یہ دریافت کیا گیا کہ آیا ECH علاج ٹیومر سیل کی نشوونما اور پھیلاؤ کو متاثر کرتا ہے اور آیا ECH(Echinacoside)اپوپٹوس کو اکساتا ہے، ری ایکٹو آکسیجن پرجاتیوں (ROS) کی پیداوار کو بڑھاتا ہے اور مائٹوکونڈریل میمبرین پوٹینشل (MMP) کو کم کرتا ہے، اور نتیجتاً ٹیومر سیل کی نشوونما کو دباتا ہے۔ مزید برآں، موجودہ مطالعہ کا مقصد ECH- ثالثی سیل کی نشوونما کی روک تھام کے لیے ذمہ دار مالیکیولر میکانزم کی نشاندہی کرنا ہے۔

مواد اور طریقے

سیل لائن ریجنٹ اور اینٹی باڈیزSW1990 لبلبے کے اڈینو کارسینوما خلیات (ATCC, Manassas, VA, USA) کو Dulbecco کے ترمیم شدہ Eagle میڈیم میں 10 فیصد فیٹل بوائین سیرم، 50 U/ml پینسلن اور 0.1 mg/ml streptomycin3C میں شامل کیا گیا تھا۔ 5 فیصد CO2 مرطوب ماحول۔ ای سی ایچ(Echinacoside)Jrdun Biotechnology Corp. (شنگھائی، چین) سے خریدا گیا تھا۔ AKT، P-AKT، ERK، P-ERK، JNK، p-JNK، P38، p-P38، اور GAPDH کے خلاف اینٹی باڈیز سیل سگنلنگ ٹیکنالوجی (ڈینورس، ایم اے، یو ایس اے) سے خریدی گئی تھیں۔ اینٹی بیکس اور اینٹی بی سی ایل-2 کو سانتا کروز بائیو ٹیکنالوجی انکارپوریشن (سانتا کروز، CA، USA) سے خریدا گیا تھا۔ اور اینٹی کیسپیس-3 کو ابکم (شنگھائی، چین) سے خریدا گیا تھا۔

سیل عملداریپرکھ ٹیومر سیل کی ترقی کی شرح کا اندازہ لگانے کے لیے، سیل کاؤنٹنگ کٹ{{0}} (CCK-8; Dojindo Molecular Technologies, Rockville, MD, USA) کو مینوفیکچرر کی ہدایات کے مطابق استعمال کیا گیا۔ سیل سسپنشنز کو 5,000 سیلز فی کنواں پر ECH ٹریٹمنٹ کے ساتھ 0, 12, 24, 48 یا 72 h کے لیے 96 - ویل کلچر پلیٹوں میں سیڈ کیا گیا تھا۔ سیل کی نشوونما کی روک تھام کا تعین CCK-8 کٹ سے WST-8 ری ایجنٹ کو ہر کنویں میں 10 فیصد کی حتمی حراستی میں شامل کرکے کیا گیا تھا، اور نمونوں کی جاذبیت کو مائکروپلیٹ ریڈر (ملٹیسکن MK3; Thermo Fisher Scientific, Inc., Waltham, MA, USA)۔

ہوچسٹ 33342 داغخلیات (60 فیصد سنگم) کا علاج Hoechst 33342 (Beotime Institute of Biotechnology، Haimen، China) کے ساتھ 1 کی آخری ارتکاز میں کیا گیا۔µg/ml، 37˚C انکیوبیٹر میں 15 منٹ تک انکیوبیٹر، فاسفیٹ بفر شدہ نمکین سے دو بار دھویا جاتا ہے، کمرے کے درجہ حرارت پر 30 منٹ کے لیے 4 فیصد پیرافارمیلڈہائیڈ میں فکس کیا جاتا ہے، اور سلائیڈوں پر چڑھایا جاتا ہے۔ سیل نیوکلی کی مورفولوجیکل تبدیلیوں کو فلوروسینس مائکروسکوپ (Olympus BX51, Melville, NY, USA) کے تحت دیکھا گیا۔ عام نیوکلی گول اور داغ دار ہلکے نیلے رنگ کے تھے، جبکہ اپوپٹوٹک نیوکلی سکڑ گئے اور چمکدار نیلے رنگ کے تھے۔

فلوروسینس فعال سیل چھانٹنا (FACS) تجزیہ کرتا ہےاپوپٹوسس کی تشخیص کے لیے، فلوروسین آئسوتھیوسائنیٹ (FITC) - Annexin V Apoptosis Detection kit (BD Biosciences, Shanghai, China) کارخانہ دار کی ہدایات کے مطابق استعمال کیا گیا تھا۔ مختصراً، 5x104 سیلز کو برف کے ٹھنڈے پی بی ایس سے دھویا گیا، 0.1 ملی لیٹر بائنڈنگ بفر (بیو ٹائم انسٹی ٹیوٹ آف بائیوٹیکنالوجی) میں دوبارہ معطل کیا گیا، اور 10 ملی لیٹر FITC- کنجوگیٹڈ Annexin V (10 mg/ml) اور 10 ملی لیٹر سے داغ دیا گیا۔ ملی لیٹر پروپیڈیم آئوڈائڈ (PI) (50 ملی گرام/ملی لیٹر)۔ اندھیرے میں کمرے کے درجہ حرارت پر 15 منٹ تک انکیوبیشن کے بعد اور 400 ملی لیٹر بائنڈنگ بفر کے اضافے کے بعد، خلیوں کا تجزیہ فلو سائٹو میٹر (C6؛ BD بایوسینسز، شنگھائی، چین) کے ذریعے کیا گیا۔

پیمائش کی رد عمل آکسیجن پرجاتیوں (آر او ایس)۔ROS کی پیداوار کا جائزہ لینے کے لیے، Reactive Oxygen Species Assay kit (Vigorous Biotechnology, Beijing, China) کو مینوفیکچرر کی ہدایات کے مطابق استعمال کیا گیا۔ مختصراً، خلیات (80 فیصد سنگم) کو ڈائی ہائیڈروتھیڈیم (DHE) محلول (بیو ٹائم انسٹی ٹیوٹ آف بائیوٹیکنالوجی) سے داغدار ہونے سے پہلے پی بی ایس سے کاٹا اور دھویا گیا۔ اس کے بعد خلیوں کا بہاؤ سائٹومیٹرک تجزیہ کے ذریعہ تجزیہ کیا گیا۔

پیمائش کی مائٹوکونڈریل جھلی ممکنہ، استعداد (ایم ایم پی)۔

ایم ایم پی میں ہونے والی تبدیلیوں کا پتہ لگانے کے لیے ٹیٹرا میتھائلروڈامین میتھائل ایسٹر (ٹی ایم آر ایم) آسے کٹ (امیونو کیمسٹری ٹیکنالوجیز، بلومنگٹن، ایم این، یو ایس اے) کا استعمال کیا گیا تھا۔ مختصراً، خلیات (80 فیصد سنگم) کی کٹائی کی گئی، پی بی ایس سے دھوئے گئے اور 37˚C انکیوبیٹر میں 15-20 منٹ تک TMRM سے داغے گئے۔ اس کے بعد خلیوں کو پی بی ایس کے ساتھ ایک بار دھویا گیا اور بہاؤ سائٹومیٹرک تجزیہ کا نشانہ بنایا گیا۔

امیونوبلوٹنگتجزیہ کرتا ہے خلیات (80 فیصد سنگم) کو RIPA بفر (Jrdun Biotechnology) میں کاٹا گیا اور lysed کیا گیا جس میں 50 mM Tris-HCl، pH 7.4؛ شامل ہیں۔ 150 mM NaCl، 1 mM EDTA، 1 فیصد NP-40، 1 فیصد سوڈیم ڈوکسائکولک ایسڈ اور 0.1 فیصد SDS اور تازہ شامل کردہ پروٹیزوم انحیبیٹرز۔ واضح سیل لیسیٹ کی مساوی مقدار امیونوبلوٹنگ تجزیہ کے لئے استعمال کی گئی تھی جیسا کہ پہلے بیان کیا گیا ہے (20)۔

شماریاتی تجزیہمقداری اعداد و شمار کو اوسط ± معیاری انحراف کے طور پر ظاہر کیا جاتا ہے۔ شماریاتی فرق کا اندازہ شماریاتی SPSS 150 سافٹ ویئر کا استعمال کرتے ہوئے غیر جوڑی والے طالب علم کے ٹی ٹیسٹ کے ذریعے کیا گیا۔ پی<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistically="" significant="">

نتائج

ای سی ایچ (Echinacoside)دباتا ہے ٹیومر سیلترقی اگرچہ یہ بتایا گیا ہے کہ ECH(Echinacoside)سومیٹک خلیات، جیسے نیورونل اور آنتوں کے اپکلا خلیات (16-19) میں اپوپٹوس اور سوزش کے سگنلز کو روک کر ایک حفاظتی کردار کی نمائش کرتا ہے، یہ معلوم نہیں ہے کہ آیا ECH کینسر کے خلیوں کی نشوونما اور پھیلاؤ کو کنٹرول کرتا ہے۔ اس کو جانچنے کے لیے، SW1990 خلیات کے علاج کے ذریعے سیل کی بقا کی جانچ کی گئی، جو کہ گریڈ II لبلبے کے اڈینو کارسینوما سے ماخوذ ہے، جس میں ECH کی ٹائٹریٹڈ خوراکیں ہیں جیسا کہ تصویر 1 میں دکھایا گیا ہے۔ خاص طور پر، یہ ظاہر کیا گیا کہ ECH ایک خوراک میں ٹیومر سیل کے پھیلاؤ کو نمایاں طور پر روکتا ہے۔ -ایک 5- دن کی ثقافتی مدت کے دوران منحصر انداز (تصویر 1)۔ای سی ایچ محرکاتapoptosis. چونکہ اپوپٹوس کا نقصان لبلبے کے کینسر کے خلیات کے بے قابو پھیلاؤ (21) کے بنیادی کارآمد میکانزم میں سے ایک ہے، موجودہ مطالعہ نے یہ تعین کرنے کے لیے تجربات کا ایک سیٹ انجام دیا کہ آیا ECH اپوپٹوسس کو متحرک کرتا ہے۔ سب سے پہلے، ہوچسٹ 33342 کے ساتھ ٹیومر خلیوں کے مرکزے پر داغ لگا کر، یہ ظاہر کیا گیا کہ ECH خوراک پر منحصر انداز میں اپوپٹوس کا نتیجہ ہے (تصویر 2A)۔ مزید برآں، FACS تجزیہ Annexin V/PI سٹیننگ کا استعمال کرتے ہوئے ty ECH (تصویر 2B) کے اپوپٹوٹک اثر کی مزید تصدیق کے لیے کیا گیا۔ عام ثقافتی حالات میں اپوپٹوٹک خلیوں کی اوسط فیصد 1.1 فیصد تھی، جب کہ خوراک پر منحصر طریقے سے ECH علاج کے جواب میں یہ فیصد نمایاں طور پر بڑھ کر 10.6، 21.4 اور 51.3 فیصد ہو گیا (تصویر 2C)۔ یہ نتائج، تصویر 1 میں دکھائے گئے سیل کے قابل عمل پرکھ کے ساتھ، یہ ظاہر کرتے ہیں کہ ECH کا علاج apoptosis کو متحرک کرکے ٹیومر خلیوں کے پھیلاؤ کو دباتا ہے۔

ڈی این اے کے ساتھ تعامل کرنے والا ایتھیڈیم پیدا کرتا ہے، اس مطالعہ میں ROS کی پیداوار کا اندازہ کرنے کے لیے استعمال کیا گیا تھا۔ یہ پایا گیا کہ، دیگر اینٹی کینسر دوائیوں کی طرح، ECH بھی خوراک پر منحصر انداز میں ROS کی پیداوار کو متحرک کرتا ہے جیسا کہ ECH علاج (تصویر 3) پر بلند فلوروسینس کی شدت سے ظاہر ہوتا ہے۔

ای سی ایچ (Echinacoside)کم کرتا ہے ایم ایم پیمائٹوکونڈریل dysfunction کو apoptosis کے شامل کرنے میں ملوث دکھایا گیا ہے۔ مائٹوکونڈریل پارگمیتا منتقلی تاکنا کے کھلنے کا مظاہرہ ٹرانس میبرن کی صلاحیت کے depolarization اور پرو اپوپٹوٹک عوامل (23) کی رہائی کو دلانے کے لئے کیا گیا ہے۔ لہذا، اس کا تجربہ کیا گیا کہ آیا ECH ٹی ایم آر ایم پرکھ کے ذریعے ٹیومر کے خلیوں میں ایم ایم پی کے نقصان کو دلا سکتا ہے، جو کہ ایک اچھی طرح سے قائم شدہ نقطہ نظر ہے، کیونکہ ٹی ایم آر ایم فلوروسینس کی شدت جھلی کی صلاحیت کے متناسب ہے۔ یہ ظاہر کیا گیا کہ ECH علاج خوراک پر منحصر انداز میں MMP کو نمایاں طور پر کم کرتا ہے (تصویر 4)۔ای سی ایچ کنٹرول کرتا ہے ٹیومر سیل ترقی ذریعے مائٹوجن ایکٹیویٹڈ پروٹینECH-ثالثی ٹیومر سیل کی موت کی سالماتی بنیاد، کئی اہم سگنلنگ راستوں کی سرگرمی، جیسے MAPK اور AKT (24,25)، جو سیل کی بقا اور موت کو کنٹرول کرتے ہیں۔ MAPKs ارتقائی طور پر محفوظ ہیں، پرولین ڈائریکٹڈ Ser/Thr پروٹین کناز، بشمول ایکسٹرا سیلولر سگنل ریگولیٹڈ کناز (ERKs)، c-Jun NH2-ٹرمینل کناز (JNKs) اور p38 فیملی ممبرز جو تین کے ذریعے فعال ہوتے ہیں۔ ٹائر کناز سگنلنگ جھرنوں (26,27)۔ اس مطالعے میں، MAPKs اور AKT کے اظہار کے ساتھ ساتھ ان کی فعال فاسفوریلیٹ شکلوں کا بھی جائزہ لیا گیا اور یہ انکشاف ہوا کہ ECH واضح طور پر JNK اور ERK1/2 کی سرگرمی کو دباتا ہے، لیکن p38 کی سرگرمی کو بڑھاتا ہے (تصویر 5)۔ خاص طور پر، یہ ظاہر کیا گیا تھا کہ AKT سرگرمی، جو سیل کے پھیلاؤ کے لیے بھی انتہائی اہم ہے، ECH علاج (تصویر 5) سے متاثر نہیں ہوتی ہے۔ اس کے علاوہ، یہ بھی دکھایا گیا کہ ECH کا علاج Bax اور Caspase-3 کے اظہار کو بلند کرتا ہے جبکہ Bcl-2 اظہار (تصویر 5) کو کم کرتا ہے، جو کہ تصویر 2 سے مطابقت رکھتا ہے۔ اس طرح، نتائج بتاتے ہیں کہ ECH MAPK پاتھ وے کے ذریعے ٹیومر سیل اپوپٹوسس کو متحرک کرتا ہے۔

بحث

ہمارے بہترین علم کے مطابق، یہ پہلا مطالعہ ہے جس سے ظاہر ہوتا ہے کہ ای سی ایچ اپوپٹوس (تصویر 2) کو متحرک کرکے، آر او ایس کی پیداوار کو فروغ دے کر (تصویر 3) اور مائٹوکونڈریل جھلی کی ممکنہ ڈیپولرائزیشن (تصویر 4) کو متحرک کرکے ٹیومر کو دبانے والا فعل رکھتا ہے۔ نتیجتاً ٹیومر سیل کی نشوونما کو روکتا ہے (تصویر 1)۔ مزید برآں، ECH- ثالثی ٹیومر سیل کی موت کی سالماتی بنیاد MAPK سگنلنگ پاتھ ویز (تصویر 5) کو ریگولیٹ کرتے ہوئے دکھایا گیا تھا۔ یہ نتائج ٹیومرجینیسیس کو روکنے میں ECH کے ایک نئے فنکشن کا مظاہرہ کرتے ہیں اور اس طرح یہ تجویز کرتے ہیں کہ یہ کینسر کے علاج کے لئے امیدوار ایجنٹ ہوسکتا ہے۔

کینسر مخالف ادویات کی اکثریت ٹیومر سیل اپوپٹوس، سنسنی اور/یا سیل سائیکل گرفتاری کو آمادہ کر سکتی ہے، جو ٹیومر سیل کی افزائش اور پھیلاؤ کو روکتی ہے۔ سیل سائیکل گرفتاری ہلکے تناؤ کے اشاروں کا ایک سیلولر ردعمل ہے جو خلیوں کو ڈی این اے کی ترکیب یا مائٹوسس شروع کرنے سے پہلے خراب شدہ ڈی این اے کی مرمت کرنے کی اجازت دیتا ہے، جب کہ اپوپٹوس اور سنسنی (مستقل سیل سائیکل گرفتاری) تناؤ کے اشاروں کے جواب میں ہوتا ہے جو ناقابل تلافی یا مہلک خلیوں کو ختم کرتے ہیں۔ 28،29)۔ لہذا، اس مطالعہ میں ٹیومر کے خلیوں پر ECH کے صرف اپوپٹوٹک اثر کا اندازہ لگایا گیا تھا، کیونکہ کینسر کے خلیات کو مارنا ایک اینٹینسر ایجنٹ کی طاقت کا اندازہ کرنے کا ایک بڑا معیار ہے۔ خاص طور پر، یہ ظاہر کیا گیا تھا کہ ECH اظہار کی حوصلہ افزائی کرتا ہے۔بکس(تصویر 5)، ایک پرو اپوپٹوٹک جین، جو ٹیومر کو دبانے والے p53 (30) کے ذریعے نقلی طور پر فعال ہوتا ہے۔ اس طرح، یہ جانچنا فائدہ مند ہے کہ آیا ECH p53 سگنلنگ پاتھ وے کو چالو کر سکتا ہے۔ اگر ایسا ہے تو، ECH p53- منحصر سیل سائیکل گرفتاری، سنسنی، apoptosis یا autophagy کو بھی نکال سکتا ہے۔ اس مطالعے میں، SW1990 لبلبے کی اڈینو کارسینوما سیل لائن میں ECH کے ٹیومر کو دبانے والے فنکشن کو واضح کیا گیا تھا۔ تاہم، مزید لبلبے کے کینسر کے سیل لائنوں کا مشاہدہ کرنے والے مزید مطالعات کی ضرورت ہے۔ یہ دکھایا گیا ہے کہ آنکوجینک پروٹین RAS اور ٹیومر دبانے والے p53 میں تغیرات لبلبے کے کینسر کی نشوونما سے وابستہ ہیں (31)؛ تاہم، IARC p53 ڈیٹا بیس (http://p53.iarc.fr/CellLines.aspx) کے مطابق، SW1990 سیل لائن کسی بھی p53 اتپریورتن کو برقرار نہیں رکھتی ہے۔ لہذا، یہ تحقیق کرنا ضروری ہے کہ آیا ECH مختلف p53 اتپریورتنوں کے ساتھ دیگر لبلبے کے کینسر سیل لائنوں کی نشوونما اور پھیلاؤ کو متاثر کرسکتا ہے۔ مزید برآں، یہ تعین کرنا دلچسپ ہوگا کہ آیا ECH apoptosis کو فروغ دینے اور دیگر قسم کے ٹیومر کی نشوونما کو روکنے کے قابل ہے۔

آر او ایس ایلیویشن اور ایم ایم پی میں کمی، جو ای سی ایچ کے علاج کی وجہ سے ہوئی تھی، کو اپوپٹوس انڈکشن (22) میں ضروری دکھایا گیا ہے۔ اس کے علاوہ، یہ بھی پایا گیا ہے کہ ROS سائٹوکوم کی رہائی میں حصہ ڈالنے والے مائٹوکونڈریل چھیدوں کے آکسیکرن کی حوصلہ افزائی کر سکتا ہے۔c، اپوپٹوسس میں ایک انٹرمیڈیٹ، ایم ایم پی (22) کی رکاوٹ کی وجہ سے۔ اس طرح، یہ طے کرنا باقی ہے کہ آیا ECH MMP کو بالواسطہ طور پر ROS کی شمولیت کے ذریعے روکتا ہے۔ مزید برآں، ROS سے حاصل شدہ آکسیڈیٹیو تناؤ کو بھی سیل کی نمو کو کنٹرول کرنے والے متعدد سگنلز کو ماڈیول کرنے میں ملوث دکھایا گیا ہے، بشمول p53، NF-κB، HIFs اور PI3K (32)۔ یہ طے کرنا باقی ہے کہ آیا اور، اگر ایسا ہے تو، ECH ان اہم سگنلنگ راستوں کو کیسے منظم کرتا ہے۔ خاص طور پر، زیادہ آکسیجن کی کھپت، کمزور اینٹی آکسیڈیٹیو نظام اور مرکزی اعصابی نظام کی ٹرمینل تفریق کی خصوصیات (33) کی وجہ سے آکسیڈیٹیو تناؤ مختلف نیوروڈیجنریٹیو بیماریوں کا سبب بنتا ہے۔ تاہم، کئی مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ ECH اعصابی بافتوں پر حفاظتی اور اینٹی اپوپٹوٹک اثرات رکھتا ہے۔ اس سلسلے میں، یہ قیاس کرنا مناسب ہے کہ ECH ٹرمینل سے مختلف عصبی خلیوں میں ROS کی پیداوار کو کم کر سکتا ہے۔ لہذا، یہ بھی طے کرنا باقی ہے کہ آیا ECH کے ذریعہ ROS کی پیداوار کا ضابطہ سیل کی تفریق کی حیثیت پر منحصر ہے۔ لہذا، دیگر مطالعات کے ساتھ موجودہ نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ ECH، وسیع پیمانے پر استعمال ہونے والا TCM، نہ صرف نیوروڈیجینریٹو بیماریوں کے علاج کے لیے بلکہ مہلک کارسنوماس کے لیے بھی ایک اہم کیموتھراپیٹک حکمت عملی ہو سکتا ہے۔

حال ہی میں، کینسر کے علاج میں TCM کے استعمال نے تیزی سے زیادہ توجہ حاصل کی ہے۔ TCM میں استعمال ہونے والے دواؤں کے پودوں سے قدرتی مصنوعات کی صلاحیت کو سائنسی برادری نے بھی مغربی دنیا میں تسلیم کیا ہے (9)۔ ان قدرتی مصنوعات کی کارروائی کے بنیادی میکانزم کو واضح کرنے کے لیے کوششوں کی ضرورت ہے، جو بالآخر کینسر کے علاج کے لیے موثر اور محفوظ ادویات کی ترقی کا باعث بن سکتے ہیں۔

آخر میں، موجودہ مطالعہ نے ECH کے ٹیومر روکنے والے فنکشن کا مظاہرہ کیا اور ECH- ثالثی ٹیومر دبانے کی سالماتی بنیاد کو بھی واضح کیا، اس طرح کینسر کے علاج میں ECH کے ممکنہ طبی اطلاق کی تجویز پیش کی گئی۔

اعترافات

اس مطالعہ کو ایف ایم یو کے سائنسی تحقیق کے کلیدی پروگرام (گرانٹ نمبر 09ZD014) کے ذریعے مالی اعانت فراہم کی گئی تھی۔ مصنفین مخطوطہ کی تدوین میں مدد کے لیے Biomedworld (شنگھائی، چین) کا شکریہ ادا کرنا چاہیں گے۔

حوالہ جات

1. ہاناہن ڈی اور وینبرگ RA: کینسر کے نشانات: اگلی نسل۔ سیل 144: 646-674، 2011۔

2. ایلڈرٹن جی کے: ٹرانسکرپشن: ایم وائی سی کے نقلی اثرات۔ نیٹ ریو کینسر 14: 513، 2014۔

3. Zindy F, Eischen CM, Randle DH, Kamijo T, Cleveland JL, Sherr CJ اور Roussel MF: ARF ٹیومر کو دبانے والے کے ذریعے مائک سگنلنگ p53- منحصر اپوپٹوسس اور امرتا کو منظم کرتا ہے۔ جینز دیو 12: 2424-2433، 1998۔

4. سچدیوا M, Zhu S, Wu F, Wu H, Walia V, Kumar S, Elble R, Watabe K اور Mo YY: p53 ٹیومر کو دبانے والے miR-145 کی شمولیت کے ذریعے c-Myc کو دباتا ہے۔ Proc Natl Acad Sci USA 106: 3207-3212، 2009۔

5. Liao JM، Cao B، Zhou X اور Lu H: p53 فنکشنز میں اس کے ٹارگٹ مائکرو آر این اے کے ذریعے نئی بصیرتیں۔ J Mol Cell Biol 6: 206-213، 2014۔

6. Zamble DB اور Lippard SJ: کینسر کیموتھراپی میں سسپلٹین اور ڈی این اے کی مرمت۔ ٹرینڈز بائیو کیم سائنس 20: 435-439، 1995۔

7. کلیف جے، کورن مین ایم، ساہنی ایچ اور کورک ایم: ایکٹینومائسن ڈی اپوپٹوسس کو اکساتا ہے اور لبلبے کے کینسر کے خلیوں کی نشوونما کو روکتا ہے۔ انٹ جے کینسر 86: 399-407، 2000۔

8. Tacar O، Sriamornsak P اور Dass CR: Doxorubicin: anticancer مالیکیولر ایکشن، toxicity اور نوول ڈرگ ڈیلیوری سسٹم پر اپ ڈیٹ۔ جے فارم فارماکول 65: 157-170، 2013۔

9. Efferth T, Li PC، Konkimalla VS اور Kaina B: روایتی چینی ادویات سے لے کر عقلی کینسر کے علاج تک۔ رجحانات مول میڈ 13: 353-361، 2007۔